冠状静脉窦逆行灌注VEGF对心肌梗死兔心功能及心肌梗死面积的影响

目的:观察经冠状静脉窦逆行灌注血管内皮生长因子(VEGF)对兔心肌梗死模型心功能及心肌梗死面积的影响。方法:20只新西兰大白兔随机分为实验组(VEGF组)和对照组,两组动物常规全麻,气管插管,胸骨正中切开,暴露心脏,结扎左室支建立心肌梗死模型,冠状静脉窦插管,实验组逆行灌注VEGF蛋白,对照组以生理盐水对照,10min后重复灌注1次。分别于术前、结扎左室支后30min、灌注后30min、1h、2h测肌酸磷酸激酶(CK)、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(TnT)、血管内皮生长因子(VEGF)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)及心功能,全程记录心电及压力监测,实验结束后检测心肌梗死面积。结果:结扎左室支即刻所有动物出现ST段抬高并与T波融合,结扎左室支30min所有动物CK、CK-MB、TnT均显著升高,实验组于灌注VEGF后1h、2hCK、CK-MB、TnT、ET及左室舒张末压明显低于对照组(P<0.05),灌注VEGF后30min、1h、2hVEGF、NO、左室收缩压(LVSP)、左室内压上升速率及左室内压下降速率(+dp/dtmax,-dp/dtmax)均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);实验组心肌梗死面积明显小于对照组(P<0.05)。结论:经冠状静脉窦逆行灌注VEGF蛋白可通过改善内皮功能,减少心肌梗死面积,改善左室功能。

转VEGF基因对血管损伤后修复过程中基质金属蛋白酶表达的影响

目的 :观察局部转染血管内皮生长因子 (VEGF)基因对血管球囊拉伤后修复过程中基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子 (TIMPs)表达的影响。方法 :90只新西兰大白兔随机分为 3组 ,Ⅰ组单纯拉伤右髂动脉 ;Ⅱ组拉伤后局部转染真核表达质粒AdtrackCMV ;Ⅲ组拉伤后局部转染pAdtrackCMV -VEGF1 65 ;每组按实验终点随机分为 5个亚组 ,术前一周开始给予高脂饮食至实验终点。取拉伤段髂动脉用于总RNA提取、组织病理和免疫组化检测。结果 :3组动物血脂水平保持在正常的 5 - 1 0倍 ,组间血管损伤程度评分相似 (P >0 .0 5)。Ⅰ、Ⅱ组整个观察过程中均可检测到MMP2、TIMP1 ,2持续表达 ;而转VEGF基因组术后 3d时可检测到MMP1 ,2 ,9、TIMP1 ,2表达 ,1周时达到高峰 ,8周时无表达。结论 :血管损伤后修复过程中存在MMPs和TIMPs表达失衡 ,致使基质堆积 ,并发生病理性重塑 ,而局部转染VEGF基因选择性改变局部MMPs表达 。

风湿性心脏病心房颤动患者心房组织基质金属蛋白酶表达的研究

目的:检测风湿性心脏病心房颤动(房颤)患者心房组织中基质金属蛋白酶(MMP1,MMP9)及其组织抑制因子(TIMP1)表达的变化及血浆MMP1,MMP9、TIMP1水平的变化,并作相关分析。方法:56例风湿性心脏病二尖瓣病变患者分为3组,窦性心律组、阵发性房颤组和持续性房颤组,于心脏外科手术时取右心耳组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MMP1,MMP9及TIMP1mRNA的含量,同时取静脉血检测外周血MMP1,MMP9和TIMP1水平。结果:阵发性房颤组、持续性房颤组MMP9、TIMP1表达显著大于窦性心律组(P<0.05orP<0.01),TIMP1/MMP1比值明显升高(P<0.05orP<0.01),持续性房颤组TIMP1/MMP1比值明显高于阵发性房颤组(P<0.05);阵发性房颤组、持续性房颤组外周血MMP9、TIMP1水平及TIMP1/MMP1明显升高(P<0.05orP<0.01),与心肌组织表达水平相一致。相关分析显示,血浆MMP1,MMP9、TIMP1与心肌组织MMP1,MMP9、TIMP1显著正相关(r=0.71,P<0.01),MMP9、TIMP1与房颤时间正相关(r=0.68,P<0.01)。结论:风湿性心脏病患者心肌组织MMP9、TIMP1表达改变及TIMP1/MMP1比值改变可能是心房纤维化发生的分子机制之一,检测外周血MMP1,MMP9及TIMP1变化可了解其在心肌组织的表达情况。

冠心病患者介入治疗前后血管内皮生长因子变化及其与远期心脏事件和再狭窄的关系

目的动态观察冠心病患者介入前后血浆血管内皮生长因子(VEGF)水平变化,探讨VEGF水平与远期心脏事件和再狭窄的关系。方法102例行冠脉介入治疗(PCI)的冠心病患者分别于术前、术后及随访期抽血检测血浆VEGF水平,术后3～12个月有缺血证据者复查冠脉造影,记录心脏事件发生情况。结果102例患者PCI术后主要心脏事件发生率为16.7%(17/102),再狭窄发生率为8.0%(7/80);17例发生心脏事件患者在心肌缺血复发时及随访期间VEGF水平明显高于无心脏事件患者[(317.2±45.8)ng/LVs(129.7±38.2)ng/L,P<0.01)],VEGF低、中、高三组随访期心脏事件的发生率分别为5.9%(1/17)、17.6%(3/17)、76.5%(13/17),PCI术后再狭窄发生率分别为4.1%、14.2%、78.5%(P<0.01),晚期管腔内径丢失在中、高组(>150.0pg/mL)也显著高于低组(<150.0pg/mL)(P<0.01);多变量预测分析显示,术后VEGF水平对心脏缺血事件表现更高的预测价值;多变量logistic回归分析显示术后VEGF水平是PCI术后再狭窄的独立预测因素(RR=4.231,CI=3.032～5.675,P=0.002),持续增高的VEGF水平与术后管腔丢失指数呈正相关(r=0.789,P<0.001)。结论血浆VEGF水平在预测介入治疗后远期心脏事件和再狭窄的发生中具有重要价值。

转VEGF基因对血管损伤后内皮修复及内皮功能的影响

目的 观察局部转染VEGF基因对血管球囊拉伤后内皮修复及内皮功能的影响.方法 90只新西兰大白兔随机分为3组,Ⅰ组单纯拉右髂动脉;Ⅱ组拉伤后局部转染真核表达质粒Adtrack CMV;Ⅲ组拉伤后局部转染pAdtrack CMV-VEGF 165;每组按实验终点随机分为5个亚组,术前1周开始予高脂饮食至实验终点.喂养至4周的动物处死前20min经耳缘静脉注射5%伊文氏蓝1 mg/kg,取拉伤段髂动脉用于进一步检测.结果 三组动物血脂水平保持在正常的5～10倍,组间血管损伤程度评分相似(P＞0.05).Ⅲ组损伤内皮修复面积明显大于Ⅰ组和Ⅱ组(分别为97.43±8.51 vs 56.89±6.74和61.23±4 95,P＜0.01),内皮依赖性舒张功能明显强于Ⅰ组和Ⅱ组,ec NOS mRNA表达水平明显高于Ⅰ组和Ⅱ组;扫描电镜显示Ⅲ组血管内皮细胞形状规则,接近正常形态,少见血细胞聚积和微血栓形成.结论 局部转染pAdtrack CMV-VEGF 165可有效促进血管损伤后内皮修复和增进内皮功能.

血脂康对急性冠脉综合征患者淋巴细胞亚群的影响

目的观察血脂康对急性冠脉综合征(ACS)患者淋巴细胞亚群及T淋巴细胞活化的影响。方法178例住院确诊为冠心病(CAD)患者,其中稳定型心绞痛(SAP)50例,不稳定型心绞痛(UAP)45例,急性ST段抬高型心肌梗死(STEAMI)43例,急性非ST段抬高型心肌梗死(NSTEAMI)40例,常规治疗基础上加用血脂康,于治疗前及治疗后4周采用流式细胞仪分析淋巴细胞亚群变化及T淋巴细胞活化情况。结果治疗前UAP组、STEAMI组和NSTEAMI组Th细胞百分比及Th/Ts细胞比值高于SAP组(P<0.05),Ts细胞百分比降低(P<0.05),Th细胞激活百分比显著升高(P<0.001);治疗4周后,UAP组、STEAMI组和NSTEAMI组Th/Ts细胞比值显著降低(P<0.01),Th细胞激活百分比降低(P<0.005),与SAP组比较无显著差异(P>0.05)。结论急性冠脉综合征患者存在细胞免疫功能异常,血脂康可能通过调节细胞免疫功能,稳定粥样硬化斑块。

冠状静脉窦逆行灌注VEGF蛋白的实验研究

目的观察经冠状静脉窦逆行灌注血管内皮生长因子(VEGF)对其分布的影响。方法20只新西兰大白兔随机分为实验组(VEGF组)和对照组,2组动物常规全麻,气管插管,胸骨正中切开,暴露心脏,结扎左室支建立心肌梗死模型,冠状静脉窦插管,实验组逆行灌注VEGF蛋白,对照组以生理盐水对照。全程记录心电,逆行灌注后30min取梗死区(左室心尖部)及非梗死区(高侧壁)心肌检测VEGF蛋白分布情况。结果结扎左室支即刻所有动物出现ST段抬高并与T波融合,免疫组织化学显示实验组梗死区有大量的VEGF蛋白,Western blot分析显示实验组梗死区在22kd处有明显的阳性条带,而非梗死区及对照组则为阴性。结论冠状静脉窦逆行灌注技术能很好地将VEGF蛋白靶向导入梗死区。

冠心病患者介入治疗前后血管内皮生长因子的变化及其临床意义

目的检测冠心病患者介入治疗前后血管内皮生长因子的动态变化并探讨其临床意义。方法150例冠心病患者分别于介入治疗前、术后即刻、术后6小时、12小时、24小时、48小时检测血管内皮生长因子的动态变化,同时记录血流动力学指标及不良事件发生情况。结果CAD患者血VEGF水平明显升高(P<0.01),112例成功介入治疗患者术后6小时血VEGF水平降至正常,33例不完全血运重建介入治疗患者术后48小时VEGF水平仍高于正常(P<0.01),5例急性闭塞病例VEGF水平急剧升高,显著高于介入治疗前(P<0.01),32例再狭窄患者VEGF水平明显高于正常(P<0.01),再次成功介入治疗后VEGF水平迅速降至正常。结论动态监测冠脉介入治疗前后血VEGF的动态变化有助于解治疗效果,及早发现并发症。

人VEGF165基因的克隆、表达和活性鉴定

目的 克隆人VEGF165基因,构建其真核表达质粒,转染293细胞,并鉴定表达VEGF的生物学活性。方法 采用PCR法从人心脏cDNA文库钓取人VEGF165基因,插入pUC19载体测序后与真核表达质粒pAdTrackCMV连接,阳离子脂质体Lipofectamin介导VEGF基因转染293细胞,Northem blot和Western blot法分别检测VEGFmRNA和蛋白的表达,Miles试验进行活性鉴定。结果(1)琼脂糖凝胶电泳分析得到两个片段,分别为582bp的VEGF165cDNA和2.68kb的pUC19线性质粒,结果与理论值相符,VEGF165测序结果与GENE BANK中VEGF165序列完全一致。(2)转染293细胞后表达绿色荧光蛋白,转染后第3天(1 024pg／ml)和5天(986pg／ml)VEGF表达最高,明显高于转染前(102pg／ml)。(3)Miles试验结果显示,用转染AdTrackCMV-VEGF165细胞培养上清皮下注射后10分钟左右皮丘变为蓝色,成倍连续稀释后,出现蓝斑的时间延长,蓝斑范围也相应缩小。而注射未转染293细胞培养上清和生理盐水组则未见蓝斑出现。结论 成功克隆人VEGF165基因,并表达出具有生物学活性的VEGF蛋白。

冠状静脉窦逆行灌注血管内皮生长因子基因对心肌梗死兔心电稳定性的影响

目的观察经冠状静脉窦逆行灌注血管内皮生长因子基因(pAdtrackCMV-VEGF165)对心肌梗死兔心电稳定性的影响。方法20只新西兰大白兔随机分为实验组(基因治疗组)和对照组,两组动物常规全麻,暴露心脏,结扎左室支建立心肌梗死模型,冠状静脉窦插管,实验组逆行灌注pAdtrackCMV-VEGF165,对照组以生理盐水对照,2周后于右室心尖部及流出道行心内程序刺激,观察心律失常诱发情况,并检测左室前壁心肌血管密度。结果对照组恶性心律失常的诱发率显著高于实验组(77.78%vs30.00%,P<0.01);基因治疗组心肌血管密度明显高于对照组(P<0.01)。结论经冠状静脉窦逆行灌注pAdtrackCMV-VEGF165可增加缺血心肌内血管密度,提高缺血心肌的心电稳定性,减少严重心律失常的发生。

转VEGF基因对血管损伤后平滑肌细胞增殖和表型的影响

目的观察局部转染pAdTrack CMV-VEGF165对动脉粥样硬化兔血管损伤后平滑肌细胞增殖和表型转变的影响.方法90只新西兰大白兔分为3组,Ⅰ组(30只)单纯拉伤腹主动脉;Ⅱ组(30只)拉伤后局部转染真核表达质粒pAdTrack CMV;Ⅲ组(30只)拉伤后局部转染pAdTrackCMV-VEGF165;每组按实验终点(术后3 d、1周、2周、4周和8周)分为5个亚组,术前1周开始予高脂饮食至实验终点,取拉伤段血管用于3H-TdR掺入实验、病理学检测和电镜观察平滑肌细胞表型变化.结果3H-TdR掺人实验结果显示,Ⅰ组和Ⅱ组在血管拉伤后3d3H-TdR掺入量增加(P＜0.05),2周时达到高峰(P＜0.01),以后逐渐下降,8周时恢复至正常,而Ⅲ组血管组织术后3 d同样出现3H-TdR掺入增加(P＜0.05),术后1周时3H-TdR掺入值明显低于Ⅰ组和Ⅱ组(P＜0.01),术后4周时3H-TdR掺入量接近正常;透射电镜观察显示Ⅰ组和Ⅱ组从术后3d开始出现合成型VSMC,2周时达到高峰,80%以上为合成型,至4周时,仍以合成型平滑肌细胞为主(60%),而Ⅲ组血管组织术后3 d时可见少量合成型平滑肌细胞(10%),1周时合成型VSMC约占30%,术后2周时90%为收缩型平滑肌细胞,4周时已无合成型平滑肌细胞.结论局部转染VEGF165基因可抑制平滑肌细胞增殖和表型改变,缩短修复时程.

冠状静脉窦逆行灌注VEGF蛋白对兔心肌梗死模型心电图演变及心律失常的影响

目的观察经冠状静脉窦逆行灌注血管内皮生长因子(VEGF)对兔心肌梗死(MI)模型心电图演变及心律失常的影响。方法20只新西兰大白兔随机分为实验组(A组)和对照组(B组),两组动物常规全麻,暴露心脏,结扎前降支近段建立MI模型,冠状静脉窦插管,A组逆行灌注VEGF蛋白,B组以生理盐水对照,10min后重复灌注一次。全程监测心电,记录恶性心律失常[室性期前收缩(PVS)、室性心动过速(VT)、心室颤动(Vf)]发生情况,并于术前、结扎前降支即刻、灌注后10min、30min、1h记录心电图,分析ST段及R波变化。结果①心律失常:B组1只发生Vf,5只发生VT,8只发生PVS;A组无Vf发生,2只发生VT,4只发生PVS;②心电图演变:结扎前降支后30min所有动物胸导联ST段抬高与T波融合成单相曲线,R波振幅降低,术后1hA组ST段抬高幅度明显低于B组(0.18±0.11mV,Vs0.35±0.17mV,P<0.05),R波振幅明显高于B组(0.31±0.12mV,Vs0.15±0.08mV,P<0.05)。结论经冠状静脉窦逆行灌注VEGF能显著改善缺血心肌的血流灌注,增加心电稳定性,减少严重心律失常的发生。

冠状动脉内脐血干细胞移植对冠心病患者室性心律失常的影响

目的探讨冠状动脉内脐血干细胞移植对冠心病患者室性心律失常的影响。方法选择40例冠状动脉造影证实为多支血管弥漫病变的冠心病患者,随机分为药物治疗组(对照组)和干细胞移植组(实验组),实验组在常规内科药物治疗基础上行冠状动脉内脐血干细胞移植,于移植前及移植后1周、8周行动态心电图检查,并行心律失常评分。结果实验组移植后1周、8周心律失常评分明显低于移植前及对照组(P<0.05、0.01),移植后8周心律失常评分较1周时降低(P<0.05)。结论冠状动脉内脐血干细胞移植可降低心律失常评分,减少室性心律失常的发生。

心力衰竭患者免疫调节功能的改变及其与脂质过氧化的关系

目的 探讨心衰患者免疫功能变化和规律 ,研究其与脂质过氧化间的关系。方法 检测 45例心衰患者外周血T淋巴细胞亚群、可溶性白细胞介素Ⅱ受体 (sIL 2 )、免疫球蛋白和补体C3 以及丙二醛 (MDA)水平变化 ,并进行相关性分析。结果 与对照组比较 ,心衰时CD+4 、CD+4 /CD+8比值、淋巴细胞转化率明显降低 (P均 <0 .0 5 ) ;重度心衰者IgG、IgM、C3 水平升高 (P <0 .0 5 ) ;sIL 2R、MDA水平显著升高 (P <0 .0 5 ) ,并随着心功能分级和心衰病程增加其改变更明显。MDA与T淋巴细胞转化率呈负相关 (r =- 0 .6 4,P <0 .0 1)、与sIL 2R呈正相关 (r=0 .70 ,P <0 .0 0 1)。结论 心衰时存在机体免疫调节功能紊乱 ;氧自由基及其脂质过氧化参与了心衰的病理过程 。

冠状静脉窦逆行灌注血管内皮生长因子基因的实验研究

目的观察经冠状静脉窦逆行灌注血管内皮生长因子基因(pAdtrackCMV-VEGF165)对其表达分布的影响。方法20只新西兰大白兔随机分为实验组(VEGF基因治疗组)和对照组,2组动物常规全麻,气管插管,胸骨正中切开,暴露心脏,结扎左室支建立心肌梗死模型,冠状静脉窦插管,实验组逆行灌注pAdtrackCMV-VEGF165,对照组以生理盐水对照。全程记录心电,1周后取梗死区(左室心尖部)及非梗死区(高侧壁)心肌,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测基因表达情况。结果对照组1只动物死亡,实验组所有动物全部存活;结扎左室支即刻所有动物出现ST段抬高并与T波融合;RT-PCR显示实验组梗死区检测到转染基因表达,而非梗死区及对照组则未检测到转染基因表达。结论冠状静脉窦逆行灌注技术能很好地将VEGF基因靶向转移至梗死区。

缺血预适应对先天性心脏病者体外循环的心电图影响

目的 观察单用冷停搏液与缺血预适应 (IPC)加冷停搏液联合应用对先天性心脏病 (CHD)心内直视手术者心电图的影响。方法 CHD者 2 0例 ,随机分为缺血预适应组 (IPC组 )和对照组。IPC组阻断升主动脉前实施 3min缺血～ 5min再灌注的IPC ,然后阻断升主动脉 ,灌注冷 (4C)StThomas停搏液 ,心脏完全停跳后开始心内手术。对照组不进行IPC方案。 2组于并行循环前、开放升主动脉复跳后及IPC期间观察心电图变化 ,同时记录血流动力学指标。结果 IPC组阻断升主动脉期间ST段降低 (阻断 30s时发生 ) ,开放升主动脉后ST段在 15s内完全恢复。IPC期间 ,4例出现窦性心动过缓 ,开放升主动脉后 4例自动复跳 ,3例除颤后复跳者出现一过性室性早搏 ,心脏复跳后 6 0min未发现ST -T改变。对照组 2例自动复跳 ,6例除颤后复跳者出现频发室性早搏 (药物干预后终止 ) ,5例患者心脏复跳后出现T波倒置或双向 ,3例伴ST段水平或下斜型降低 ,复跳后 6 0min仍有 2例ST -T改变未恢复。 2组血流动力学维持平稳 ,对照组有 3例转后单次应用多巴胺 ,心脏复跳后 6 0min时IPC组心率明显低于对照组 ,而平均动脉压则高于对照组 (P <0 0 5 )。结论 IPC可显著改善心肌对缺血耐受能力 。

银杏叶提取物金纳多对心内直视手术期间心肌损伤标志物的影响

目的探讨银杏叶提取物金纳多对心内直视手术期间心肌损伤标志物的影响。方法40例先天性心脏病单纯房间隔缺损或室间隔缺损修补术患者,按随机数字表法随机分为银杏组和对照组,每组20例。两组均采用4℃StThomas’停搏液主动脉根部灌注,银杏组在此基础上加入银杏叶提取物金纳多(0.5mg/kg);两组均于心脏完全停跳后开始心内手术。手术前、术后即刻、术后6、12、24、48h取中心静脉血,采用免疫比浊法测定血清C反应蛋白(CRP),采用ELISA法检测肌酸激酶同功酶(CKMB)、肌钙蛋白T(cTnT)和肌钙蛋白I(cTnI)浓度的变化。结果术前两组间CRP、CKMB、cTnT、cTnI浓度比较,差异无显著性(P>0.05),两组患者血清CRP、CKMB、cTnT、cTnI浓度在术后即刻显著升高(P<0.05),对照组于术后12h达峰值,术后48h降至术前水平,同一时点比较,银杏组明显低于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论银杏叶提取物金纳多应用于心内直视手术中可显著降低心肌损伤标志物升高程度,促进术后心功能恢复,具有良好的心肌保护效果。