培养人视网膜色素上皮细胞中β-半乳糖苷酶活性研究

目的 观察培养人视网膜色素上皮 (RPE)细胞中复制衰老相关的 β 半乳糖苷酶活性。 方法 在培养的RPE细胞中 ,以传代次数 ( 5、10、2 0 )和取材供体的年龄 ( 2 6、44、5 7岁 )分组 ,进行标准化的 β 半乳糖苷酶活性和细胞增殖能力检测。结果 培养RPE细胞中 β 半乳糖苷酶活性阳性细胞数量随传代次数的增加而增加 ,在 2 0代的细胞中 ,阳性细胞的数量为 87%± 1 2 % ,明显高于第 5代和第 10代细胞 (P <0 0 5 )。而细胞的增殖能力明显下降 (P <0 0 5 )。结论 培养RPE细胞复制衰老的发生与细胞传代次数和取材年龄相关 。

巨噬细胞调理液对视网膜色素上皮细胞合成单核细胞趋化蛋白-1的作用

目的 评价巨噬细胞调理液 ( MCM)对视网膜色素上皮 ( RPE)细胞合成单核细胞趋化蛋白 - 1( MCP- 1)的作用 .方法 在培养的人 RPE细胞的培养液中加入 2 0 0 m L· L- 1培养人巨噬细胞调理液 ( MCM) ,培养 2 ,4 ,8,16,2 4和 4 8h后 ,对培养的细胞进行免疫组化和原位杂交 ,用 Western blot检测培养的上清液中 MCP- 1的含量 .同时在培养液中加入地塞米松 ( 10 - 8,10 - 7和 10 - 6 mol· L- 1 )和道诺霉素 ( 2 ,2 0和2 0 0 mg· L- 1 )重复上述实验 ,观察在此条件下 MCM对MCP- 1合成的作用 .结果 2 0 0 m L· L- 1 MCM培养条件下RPE细胞 2 h时已检测出分泌的 MCP- 1并在 16h达到较高水平 .同时原位杂交和免疫组化在细胞中检测到 MCP- 1的表达 .加入地塞米松 ( P<0 .0 1)和道诺霉素 ( P<0 .0 5 )后 ,MCP- 1的分泌水平明显降低 ,其中地塞米松对 MCP- 1合成的抑制作用大于道诺霉素 .结论 MCM刺激 RPE细胞产生MCP- 1,而 MCP- 1对巨噬细胞和淋巴细胞有较强的趋化作用 ,这种循环相互作用的过程对增生性玻璃体视网膜病变的发生可能有重要的作用 .在视网膜脱离后尽早使用地塞米松可能对抑制增殖性玻璃体视网膜病变有作用 .

半导体激光透巩膜睫状体光凝治疗新生血管性青光眼

目的 评价利用半导体激光透巩膜睫状体光凝治疗新生血管性青光眼的效果。方法 对 4 2例药物控制不良的新生血管性青光眼患眼进行 810nm半导体激光的透巩膜睫状体光凝 ,能量为 1.5 0～ 2 .2 5W ,时间为 2s,范围 180°～ 2 70° ,观察 6个月的治疗效果。结果 治疗前眼压为 ( 4 5 .3± 3.7)mmHg( 35～ 5 6mmHg ,1kPa =7.5mmHg) ,经过第 1次治疗后的眼压是 ( 18.2± 2 .1)mmHg( 12～ 33mmHg) ,随访最后统计的眼压是 ( 17.6± 1.6 )mmHg( 13～ 2 9mmHg) ,术后眼压明显低于术前 (P <0 .0 5 )。在随访结束时 ,33眼 ( 78.6 % )治疗取得成功。结论 透巩膜半导体激光睫状体光凝是治疗新生血管性青光眼的一种有效的方法 ,而且操作方便 。

巩膜外垫压联合半导体激光透巩膜光凝治疗孔源性视网膜脱离

目的 :探讨在孔源性视网膜脱离 (rhegmatogenousretinaldetachment,RRD)巩膜扣带术中将冷凝改为半导体激光透巩膜视网膜光凝封闭裂孔的治疗效果 ,讨论其手术的并发症和适应证范围 .方法 :回顾性分析在我院行巩膜扣带术中接受半导体激光透巩膜视网膜光凝治疗的RRD患者 34例36眼的临床资料 .结果 :术后随访 3～ 6mo ,36只眼中 ,视网膜一次手术完全复位 32只眼 (88.9% ) ,视力 >0 .1者 31只眼(86 .1% ) ,无明显并发症 .结论 :将巩膜扣带术中冷凝改为半导体激光透巩膜视网膜光凝 ,可简化手术 ,操作准确 ,减少视网膜和脉络膜血管的损伤及术后并发症 ,是治疗RRD的有效方法之一 .

增生性玻璃体视网膜病变组织中的单核细胞趋化因子-1的意义

目的 增生性玻璃体视网膜病变 (PVR)是多种细胞和细胞因子参与的一种眼内创伤修复反应 .单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP- 1)对巨噬细胞和淋巴细胞有特异趋化作用 .本研究目的在于了解视网膜脱离后不同时期的组织中 MCP- 1的表达与巨噬细胞和淋巴细胞的关系 .方法 选用视网膜手术取材标本 ,包括孔源性视网膜脱离的视网膜下液中的细胞成份 ,B级 PVR玻璃体手术集取物以及 PVR C/ D的视网膜增殖膜 ,免疫组化法检测其中 MCP- 1,CD6 8和 CD3表达状态 .结果 视网膜下液中细胞成份 MCP- 1的表达均为阴性或弱阳性 ,B级 PVR手术集取物以及增殖膜中 ,MCP- 1表达阳性程度随 PVR等级的升高而逐渐增高 .CD6 8阳性细胞 (巨噬细胞 )与 CD3阳性细胞 (T-淋巴细胞 )的比例随 PVR病变程度的增加而降低 .结论 MCP-

过氟丙烷对兔眼视觉电生理和超微结构的影响

目的研究玻璃体腔中过氟丙烷气体对兔眼电生理和视网膜结构的影响。方法８只兔眼玻璃体内注入Ｃ３Ｆ８０．３ｍｌ，观察了术后ｄ３和ｄ７ＥＲＧ－ｂ波和视觉层诱发电位（ｖｉｓｕａｌｅｖｏｋｅｄｐｏｔｅｎｔｉａｌ，ＶＥＰ）的振幅以及视网膜结构的变化。结果在注气后ｄ３视网膜电流图（ｅｌｅｃｔｒｏｒｅｔｉｎｏｇｒａｍ，ＥＲＧ）－ｂ波明显降低（Ｐ＜０．０５），ｄ７恢复正常（Ｐ＞０．０５），ＶＥＰ振幅无明显变化（Ｐ＞０．０５），在ｄ４气体可达到最大膨胀体积，膨胀的气体形成一个占据８０％以上玻璃体腔的空腔，玻璃体被压缩成一薄层附于视网膜表面，２只眼晶体轻度混浊，视网膜无明显结构损害。结论玻璃体内注入Ｃ３Ｆ８可形成一个较大的空腔，为进行玻璃体内药物灌注和玻璃体大量积血等实验提供了良好的实验模型。

裂孔源性视网膜脱离术后黄斑区视网膜下液及其对预后视力影响

裂孔源性视网膜脱离复位手术成功后,在通过常规检查不能发现显著病变的情况下,部分患者的视力恢复不佳。通过光学断层扫描技术(OCT)的应用,可以发现检眼镜和荧光造影不能发现的黄斑区视网膜下液的存在。本文对视网膜脱离术后黄斑区结构变化与视力预后的结果进行文献回顾,并对这一现象可能发生的原因和对视力的影响进行讨论。

虚拟现实在现代眼科手术学继续教育中的应用

虚拟现实是用计算机建立的、模拟真实世界的一个虚拟环境空间,是能和人进行实时交互的视景仿真,可能在未来眼科继续教育中发挥其独特的作用.本文介绍了虚拟现实的系统构成,结合现有技术探讨了将现代计算机技术和虚拟现实技术运用于眼科继续教育的前景.

晶状体超声乳化、折叠人工晶状体植入和小梁切除联合手术治疗闭角型青光眼

目的:报告1组闭角型青光眼( angle-closure glau-coma, ACG)患者在1次手术中完成晶状体超声乳化、折叠人工晶状体(intraocular lens, IOL)植入和小梁切除联合手术的视力和眼压控制效果。方法:对过去1a间为治疗ACG所施行晶状体超声乳化、折叠IOL植入和小梁切除联合手术患者的临床资料进行回顾性分析。本组共49例(56眼),其中52眼晶状体透明,27眼有明显的视野损害。患者随访10月～2a。结果:手术的并发症轻微,包括手术后的浅前房4眼、脉络膜脱离1眼、明显的纤维蛋白渗出2眼,经处理在短期恢复。手术后,各眼的视力保持或好于手术前最好矫正视力,其中41眼≥0.5,16眼≥1.0。手术后1周时眼压为10.1±3.7 (5～20) mmHg并在随访期内一直保持稳定,但有2眼在术后2周时眼压为22～23mmHg,常规点用2.5g/L噻吗洛尔,得到良好控制。所有的眼视野保持不变。结论:晶状体超声乳化、折叠IOL植入、小梁切除联合手术,对ACG,尤其中晚期病例,是一种安全、有效的控制眼压和保持视力的手术。术后浅前房、恶性青光眼等并发症少见。避免了2次手术。这种联合手术不仅促进房水外流,而且可矫正多数患者原有的远视,使其裸眼视力好于术前。

机械牵拉对培养人视网膜色素上皮细胞内钙离子的影响

目的:观察培养人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cells,RPEs)在受机械牵拉力时细胞内Ca^2+的变化。方法:将胶原包被的磁珠悬液加入培养人RPE细胞后孵育,附着磁珠的细胞放置在恒定磁场中,使用钙荧光指示剂fluo-3/AM和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察在机械牵拉作用的前后细胞内钙离子的变化情况。结果:RPE细胞荧光着色很强,遍布整个细胞,其中细胞核比细胞质更强。机械牵拉后荧光强度显著增强,加入氯化锰后迅速降低。EGTA预处理的细胞在受力后荧光强度增加不显著,加入氯化钙后明显增强。细胞松弛素D预处理的细胞在受力后荧光强度比正常组增高2倍以上。结论:机械牵拉能显著增加钙离子内流,并且增加细胞内的钙库释放。钙离子内流可能是RPE细胞损伤前的信号。

Caspase-3在柔红霉素诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡中作用

目的 探讨天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶(caspase)成员 caspase- 3在柔红霉素诱导的人视网膜色素上皮 (RPE)细胞凋亡中的变化 .方法 原代培养的人 RPE细胞经 2 0 0μg· L- 1 柔红霉素诱导 8,2 4和 36 h后 ,按照 caspase- 3荧光检测试剂盒说明处理细胞 ,再通过荧光比色法间接检测细胞碎片中 caspase- 3的活性 .结果 正常 caspase- 3的活性为(0 .0 94± 0 .0 0 5 ) nmol AFC,8h后增加为 (0 .44 6± 0 .0 2 9)nm ol AFC,2 4h后为 (0 .75 4± 0 .0 5 6 ) nmol AFC,36 h又下降到 (0 .486± 0 .0 33) nmol AFC,但都高于正常水平 (P<0 .0 1) .加入特异性四肽抑制物 DEVD- CHO1μL 后活性为 (0 .0 40±0 .0 0 3) nm ol AFC,显著低于正常 (P<0 .0 1) .结论 Caspase-3参与了柔红霉素诱导的人视网膜色素上皮细胞的凋亡 ,柔红霉素可使其活性增加 .

结缔组织生长因子在增生性玻璃体视网膜病变增生膜中的表达

目的观察结缔组织生长因子(CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源。方法采用SABC免疫组织化学方法对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜进行CTGF蛋白的检测,并采用免疫荧光双标记技术在阳性表达的增生膜和正常人眼球标本中判定CTGF阳性细胞来源。结果免疫组织化学显示PVR增生膜中阳性细胞形态多是一类胞体为长圆形或多角形,胞浆丰富的上皮样细胞。17例C2-C3级膜中12例阳性,26例D1-D3级膜中19例阳性,其染色反应为阴性"-"、弱阳性"+"、阳性"2+"和强阳性"3+"的分别有5、3、6、3例和7、5、8、6例,总阳性率分别为70.6%和73.1%。统计学分析CTGF阳性表达与膜分级问无相关性(P>0.1)。免疫荧光双标记法显示PVR增生膜中有RPE、巨噬细胞、神经胶质细胞,CTGF阳性细胞来源于RPE细胞;正常眼球RPE层不表达CTGF。结论正常眼球RPE层不表达CTGF,PVR形成过程中RPE细胞在TGF-β1等生长因子的刺激下,CTGF表达上调,表明CTGF参与了PVR增生膜的形成和发展。

苏拉明对体外培养视网膜色素上皮细胞增殖的影响

目的 研究苏拉明 (suramin)对培养人视网膜色素上皮细胞 (retinal pigm ent epithelium,RPE)增殖的影响 .方法 将不同质量浓度的苏拉明 (1.5 ,15和 15 0 mg· L- 1 )加入RPE细胞培养液 ,采用四甲基偶氮唑盐 (tetrazolium,MTT)比色法 ,细胞分裂指数计数和核仁组成区嗜银染色(Ag NORs)检测苏拉明对 RPE增殖活力的影响 .结果 含有10 0 m L· L- 1小牛血清的培养液可以显著刺激 RPE的增殖(P<0 .0 1) ,无血清组 A值为 0 .19± 0 .0 1、含血清组 A值为0 .30± 0 .0 1;苏拉明抑制了 10 0 m L· L- 1血清条件下 RPE的增殖 ,呈剂量依赖性 ,最大抑制率达 5 1% ,3种浓度组 A值分别为 0 .2 9± 0 .0 1,0 .2 4± 0 .0 1和 0 .14± 0 .0 1,对细胞的形态无明显影响 .结论 苏拉明对血清刺激

PDR患者玻璃体视网膜术后高眼压的危险因素及疗效分析

目的探讨增生性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)玻璃体视网膜手术(vitreoretinal surgery,VRS)后高眼压发生的危险因素及治疗效果。方法回顾性分析136例(161眼)行VRS的PDR患者的临床资料,观察治疗前后及随访结束时患者的眼压、视网膜解剖复位情况及最佳矫正视力,术后随访12～56个月,平均23个月。对手术后发生高眼压的危险因素进行多因素Logistic回归分析。结果 VRS术后43例(43眼)患者发生高眼压,发生于术后1d～15个月,发生率为26.7%(43/161);其中48.8%的患者(21眼)为术后暂时性高眼压,51.2%的患者(22眼)需手术控制眼压。患者治疗前平均眼压(34.26±8.76)mmHg(1kPa=7.5mmHg);治疗后6～8周时平均眼压为(17.44±3.79)mmHg;随访结束时平均眼压为(15.58±3.80)mmHg,三者之间两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,术后高眼压发生的独立危险因素为:患者血糖水平及前房炎性反应(OR=2.866、3.027;P=0.013、0.028)。与患者年龄、术中填充物的类型、是否一期行白内障手术、术后再次玻璃体出血及是否联合扣带术等无关。本组患者视网膜一次解剖复位成功率90.70%。发生高眼压前最佳矫正视力为无光感～0.08,随访结束时最佳矫正视力为无光感～0.7。结论 PDR患者血糖水平及前房炎性反应为VRS术后高眼压发生的独立危险因素。早期发现、个体化治疗可以最大程度地挽救患者的视力。

内界膜翻瓣术治疗黄斑裂孔的配对研究

目的用配对研究的方法评价内界膜翻瓣术治疗黄斑裂孔(macular hole,MH)的临床疗效。方法收集2014年10月至2015年6月在天津市眼科医院行玻璃体切割手术的MH患者34例(34眼),将情况相近的患者进行配对,分为两组,A组术中行内界膜翻瓣术、B组术中行内界膜剥除术。术后随访6个月,观察记录术后最佳矫正视力(best-corrected visual acuity,BCVA)、裂孔闭合率、MH闭合形态及椭圆体区闭合率等指标。结果A组术后BCVA为(0.50±0.07)log MAR,明显好于B组(0.91±0.12)log MAR,差异有统计学意义(t=-3.786,P=0.002);A组裂孔闭合率为94.1%(16/17),B组闭合率为70.6%(12/17),差异无统计学意义(P=0.175);A组U型闭合8例,V型闭合7例,W型闭合1例;B组U型闭合4例,V型闭合8例,W型闭合0例;A组椭圆体区闭合率为29.4%,B组椭圆体区闭合率为0,差异有统计学意义(P=0.044)。结论玻璃体切割联合内界膜翻瓣术可提高MH患者术后BCVA和裂孔闭合率,使U型闭合增加,提高椭圆体区术后闭合率,是治疗MH的一种安全、有效的方法。

磁珠包裹的人视网膜色素上皮细胞受磁场牵拉后ET-1的表达

目的:探讨在体外RPE细胞受牵拉后内皮素(endothe-lin-1,ET-1)的表达。方法:用磁珠与RPE细胞粘和后,受磁场受力牵拉细胞的原理,用原位杂交、免疫组化和放射免疫测定法,检测牵拉对ET-1表达的影响。结果:在磁场中受力牵拉后,随着RPE受牵拉时间的延长,RPE形态发生改变,RPE细胞在各作用时间段后的24hET-1表达明显,在细胞上清液中,ET-1含量也明显上升,作用10,30min和2h培养24h和48h的细胞调理液的ET-1含量与对照组均有统计学显著性差异(P<0.05)。结论:RPE细胞受牵拉后,ET-1表达和分泌增强,提示视网膜脱离发生过程中,会刺激表达ET-1增强。

柔红霉素和Bax过表达对培养人视网膜色素上皮细胞凋亡的影响

目的 观察柔红霉素 (DNR)和外源 bax基因转染对培养人视网膜色素上皮 (RPE)细胞凋亡的影响 .方法 通过脂质体法将外源 bax基因转入 RPE细胞 .采用 TUNEL荧光染色方法 ,观察 2 0 0 μg·L- 1 DNR作用 12 h对正常和转基因后 RPE细胞凋亡的影响 ;同时采用专用试剂盒 ,通过荧光比色法检测细胞碎片中半胱氨酸蛋白酶 - 3(Caspase- 3)的活性 .结果 正常 RPE细胞可见 TU NEL 阳性着色 ,经 bax基因转染和 DNR作用后阳性细胞比例增加 ,而且染色加深 .经DNR作用不同时间后 ,转基因 RPE细胞的 Caspase- 3活性升高比例均大于正常细胞 Caspase- 3活性升高的比例 (P<0 .0 1) .结论 DNR可以诱导 RPE细胞的凋亡 . bax基因转染可以促进细胞的凋亡 ,并增加

2009至2013年天津早产儿视网膜病变筛查分析（英文）

目的:分析天津地区早产儿视网膜病变(ROP)筛查的结果,研究肺表面活性剂及经鼻连续正压通气(NCPAP)对于ROP的影响。方法:多中心回顾性研究。2894例早产儿(1592男婴,1 302女婴)主要来自于天津市几家大型医院,筛查时间从2009-01/2013-12,对人口统计学信息,眼科检查结果和可能的全身危险因素均进行记录。孕周、出生体质量、吸氧、肺表面活性剂和NCPAP对ROP的影响进行了评估。结果:224例448眼患有ROP(7.7%)。其中,49例98眼为严重ROP。在对照组与ROP组之间呼吸窘迫综合征(RDS)、NCPAP、肺表面活性剂的应用差异有统计学意义(P<0.01)。Logistic回归分析结果表明小孕龄、低出生体质量、吸氧是导致ROP发生的危险因素。随着肺表面活性剂与NCPAP的使用率增加,吸氧率逐渐下降,ROP的发生率也在下降。结论:低出生体质量、低孕龄、吸氧史与ROP的发生密切相关,肺表面活性剂与NCPAP的使用可能是降低ROP发生的因素。

年龄相关性黄斑变性黄斑部循环改变与脉络膜新生血管形成

目的探讨年龄相关性黄斑变性(age-relatedmaculardegeneration,AMD)黄斑部循环改变与脉络膜新生血管(choroidalneovascularization,CNV)形成的关系。方法对12例(24眼)首诊为萎缩型AMD,在随访中转变为渗出型AMD(16眼)的眼底荧光素血管造影(fundusfluorescenceangiography,FFA)及吲哚青绿血管造影(indocyaninegreenangiography,ICGA)图像进行回顾性分析,对比观察脉络膜循环变化。结果24只萎缩型AMD黄斑区脉络膜毛细血管层均有局限性灌注不良,16眼(67%)CNV在原脉络膜毛细血管灌注不良区域内生成。结论脉络膜灌注不良是CNV形成的主要原因。

晶状体上皮细胞凋亡与白内障发生的分子生物学机制

目的:观察白介素转化酶3(Caspase-3)在白内障晶状体上皮细胞中的表达及与凋亡的关系。方法:经手术收集25只白内障晶状体前囊膜以及胚胎晶状体(6只)和成人透明晶状体(4只)的前囊膜,采用免疫组织化学染色的方法观察Caspase-3的表达及染色强度。并对Caspase-3在年龄相关性白内障与并发性白内障中的表达进行比较。结果:Caspase-3在白内障组有很好的表达,在年龄相关性白内障组16只中14只呈阳性表达,在并发性白内障组9只中8只呈阳性表达,在透明晶状体没有表达;在年龄相关性白内障与并发性白内障之间没有显著性差异(P>0.05)。结论:凋亡在白内障的发生中存在。