南美白对虾工厂化养殖水体和肠道微生物群落研究

采用16S rDNA高通量测序和生物信息学方法,对江苏射阳某南美白对虾(Litopenaeus vannamei)工厂化养殖水体和对虾肠道微生物的群落结构进行了调查。结果表明,南美白对虾工厂化养殖水体和对虾肠道样品共获得有效序列71373~98113条,可聚类于5974个分类操作单元(OTUs),水体和对虾肠道样品OTUs个数分别为3783和2191个。物种注释和差异分析结果发现,养殖不同时期,水体环境以及对虾肠道中的优势菌有所不同,早期水体中的优势菌为拟杆菌属(Bacteroides)、北欧海盗菌属(Vicingus)和海生杆菌属(Marivita)等,中期转变为砂单胞菌属(Arenimonas),最后转变为褐指藻杆菌属(Phaeodactylibacter)、欧文威克斯菌属(Owenweeksia)和栖韩东海菌属(Donghicola)等。对虾肠道中早期优势属主要为肠球菌属(Enterococcus)和沙滩微菌属(Litorimicrobium)等,中期转变为Candidatus Bacilloplasma、去甲基甲基萘醌菌属(Demequina)、鲁杰氏菌属(Ruegeria)和溶杆菌属(Lysobacter)等,最后转变为罗尔斯通氏菌属(Ralstonia)、副球菌属(Paracoccus)、罗斯氏菌属(Rothia)和红细菌科(Rhodobacteraceae)等。水体和对虾肠道中均存在砂单胞菌属、脱硫单胞菌目(Desulfuromonadia)等参与无机循环的微生物和Phaeodactylibacter luteus、去甲基甲基萘醌菌属、红杆菌科(Rhodobacter)等益生菌,在促进对虾健康成长中发挥着重要作用。

罗氏沼虾RXR基因克隆及其对蜕皮相关基因的调控

为研究维甲酸类X受体(RXR)在甲壳动物蜕皮过程中的调控作用,实验采用RACE技术克隆获得罗氏沼虾Mr-RXR基因,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析了Mr-RXR及其他蜕皮相关基因(MIH、EcR、E75和CHIT)在罗氏沼虾不同组织、不同蜕皮阶段的表达情况,并采用RNA干扰(RNAi)探究Mr-RXR对罗氏沼虾蜕皮相关基因表达的调控作用。结果显示,Mr-RXR基因cDNA全长2241 bp(GenBank登录号MZ501612),包括36 bp的5'末端非翻译区(UTR)和719 bp的3'UTR,开放阅读框(ORF)为1386 bp,共编码461个氨基酸。罗氏沼虾RXR氨基酸序列与甲壳动物同源性较高,存在保守的DNA结合域(DBD)和配体结合域(LBD)。Mr-RXR在罗氏沼虾所有组织中均表达,精巢、眼柄、心脏等组织中表达量较高,其表达水平随蜕皮周期改变,眼柄和肌肉组织中均在蜕皮前期表达量最高,与EcR基因表达模式基本同步;E75和CHIT基因表达模式较为相似,眼柄和肌肉组织分别在蜕皮前期和蜕皮后期高表达;MIH基因仅在眼柄组织表达,且蜕皮间期表达量最高。采用3μg dsRNA/g虾的剂量进行为期12 d的RNAi实验诱导Mr-RXR沉默,罗氏沼虾出现大量死亡,qRT-PCR显示,眼柄和肌肉中Mr-RXR干扰效率分别为79%和55%。眼柄组织中Mr-RXR基因沉默后,MIH基因表达未受影响,EcR、E75和CHIT基因表达水平显著降低,肌肉组织中,Mr-RXR沉默仅造成CHIT基因表达水平的显著下降,推测Mr-RXR可能通过影响EcR、E75和CHIT基因表达调控罗氏沼虾蜕皮过程。本研究结果将为甲壳动物蜕皮调控机制研究提供基础资料。

中华绒螯蟹病原豚鼠气单胞菌的鉴定及其致病性分析

为明确江苏苏州某养殖场中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)死亡病因,本研究从病蟹肝胰腺组织中分离到优势生长菌,对分离菌进行致病性、形态与生理生化特征及gyrB基因同源性与系统发育分析。结果显示:分离菌为豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae),分离菌SHZ1对中华绒螯蟹半数致死量(LD_(50))为1.6×10^(6) CFU/mL,表明分离株可以引起中华绒螯蟹死亡,确定豚鼠气单胞菌是此次造成中华绒螯蟹出现大规模死亡的病原。为进一步明确分离菌SHZ1毒力携带基因情况,对分离菌进行热敏蛋白酶(eprCAI)、溶血素(hly)、弹性蛋白酶(ahpB)、外膜蛋白(ompA)、胆固醇酰基转移酶(gcaT)和鞭毛蛋白(flgN、flgM、flgA、flaH)共9种毒力基因进行检测,结果表明分离菌携带以上9种毒力基因。耐药性检测结果表明,分离菌对头孢唑啉、万古霉素、苯唑西林、青霉素G、哌啦西啉、氨苄西林等9种药物耐药。

一株溶藻弧菌噬菌体HH109的生物学特征

为了深入研究溶藻弧菌噬菌体HH109的生物学特性,本研究以溶藻弧菌E333为宿主菌,应用双层平板法开展了溶藻弧菌裂解性噬菌体HH109裂解效价、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线以及渗透压和pH值稳定性等相关生长特性分析。试验结果表明:该噬菌体的效价可达3.8×10^(9)PFU/mL,其最佳感染复数为0.01;一步生长曲线表明该噬菌体的潜伏期约40 min,裂解期为1 h,裂解量为57.12 PFU/细胞。稳定性测试结果表明,噬菌体HH109在温度30~60℃、盐度1%~4%和pH值4~9的环境中稳定复制增殖。研究结果显示,噬菌体HH109对宿主菌裂解量较大,能够耐受一定温度、盐度以及酸碱度,有望进一步开发为水产养殖中防治溶藻弧菌的噬菌体制剂。

中国古典园林置石手法在南京市钟山风景区中的实际研究与应用

置石作为古典园林中极富特点的造园要素,其布置手法、应用艺术传承至今,在现代城市绿地中仍能得到充分体现。本文通过概述我国古典园林置石理论中的孤置、对置、散置和群置的布置方法,以南京市钟山风景区为具体案例,剖析景观石在小型花境、路口转角、园路两侧、入口景观等处的配置形式,总结置石在城市绿地中的应用特点。

CO_(2) 浓度升高对植物生理生化影响的研究进展

随着现代工业化的发展,CO_(2) 浓度呈上升趋势,对生态环境及植物生长产生不可逆转的影响。本文从植物叶片对CO_(2) 的吸收和固定等生理响应的机理研究方面,综述了CO_(2) 浓度升高对不同类型植物关键生理生化指标的影响,主要从光合作用、呼吸作用、叶片气孔导度、抗氧化酶活性和膜脂过氧化能力等方面总结了近年来CO_(2) 浓度升高对植物生长及生理活动的影响,以期为环境因子变化对植物生长影响研究提供参考。

打造'阳光、便捷、智慧'城居保树立便民惠民服务新形象

近年来,江苏省阜宁县围绕'阳光城居保、便捷城居保、智慧城居保'建设,多措并举抓扩面,多方合作建平台,多点完善强内控,扎实推进城乡居民基本养老保险和征地保障工作,取得较好成绩.

江苏省阜宁县:创建富有成效的创业扶持模式

2010年。阜宁县依托“惠普农村富余劳动力创业援助项目”、“惠普创业家启动项目”和SYB项目，围绕打造七大创业服务平台，创新培训模式、优化扶持措施、完善服务体系，取得了较好的成绩，全年累计开展创业培训27期，培训学员2028人。阜宁的创业培训模式被中国就业促进会在全国各个惠普项目实施点中予以推广。

扶老跨越数字鸿沟——青年志愿者线上助老服务策略研究

当今社会高速发展,而数字化的高速发展的同时人口老龄化加剧的问题也日益突显。本文将探究老年人在飞速发展的数字化时代如何跟上步伐,以及青年志愿者在其间担任怎样的角色,探讨扶老跨越数字鸿沟的可行策略。研究主要通过问卷调查法、深度访谈法来进行量化研究,总结出目前面临的问题和困境,得出能适应老年人需求的科学对策,最后总结研究过程中的不足,尝试提出未来老年群体采纳和使用新媒体的新方向。

虾肝肠胞虫全基因组SSR位点分布及比较分析

为开发虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)及其近缘种的分子标记,本研究采用生物信息学方法,对虾肝肠胞虫全基因组中SSR(simple sequence repeat,简单重复序列)位点的数量、分布及频率等信息进行统计分析,并与其他5种微孢子虫真菌物种基因组进行了比较。在虾肝肠胞虫基因组中共搜索到794个SSR,总长度为21773 bp,占基因组的0.72%,SSR的平均长度为27.43 bp,相对丰度为262 loci/Mb,相对密度为7184.43 bp/Mb。6种SSR类型中,四核苷酸SSR数量最多,有570个,总长度为12152 bp,占SSR总数的71.79%,平均长度为21.32 bp,相对丰度为188.08 loci/Mb,相对密度为4009.79 bp/Mb;二核苷酸SSR数量最少,仅有20个,总长度为280 bp,占SSR总数的2.52%,平均长度为14 bp,相对丰度为6.6 loci/Mb,相对密度为92.39 bp/Mb。基因组高频率(≥10)出现的SSR重复类型为:AACT,TTAG,TAGT,ACTA,AGTT,CTAA,AACTA,GTTA,TTAGT,TAAC,AT。选择序列长度不小于20 bp的多核苷酸SSR共计30个,进行引物设计用于物种鉴定。利用GO数据库对含SSR基因进行功能注释,共有28个基因(3.53%)注释到分子功能、生物进程及细胞组分3类中。将虾肝肠胞虫与其他微孢子虫真菌相比,虾肝肠胞虫中SSR的数量及相对丰度适中,由此可知基因组大小与SSR数量无关。本研究为虾肝肠胞虫的种群遗传及进化相关研究奠定了基础。