温经通络汤含药血清对小鼠软骨细胞损伤及IκB-ζ/HIF-1α/LDHA轴的影响研究

目的研究温经通络汤含药血清对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的小鼠原代软骨细胞损伤的影响及机制。方法采用IL-1β诱导小鼠原代软骨细胞损伤模型,检测细胞中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α,软骨降解相关蛋白酶基质金属蛋白酶(MMP)3、MMP9、MMP13、ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4(ADAMTS4)以及糖酵解相关酶乳酸脱氢酶A(LDHA)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)、还原型辅酶Ⅱ氧化酶2(NOX2)、还原型辅酶Ⅱ氧化酶4(NOX4)的mRNA表达;测定细胞内MMP3、MMP13、P65、IκB-ζ、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)以及LDHA蛋白表达水平;进一步检测细胞上清液中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和乳酸的浓度,测定细胞内辅酶Ⅰ(NAD)的还原态(NADH)和氧化态(NAD+)的比率,以及细胞内活性氧(ROS)水平。结果温经通络汤含药血清可显著抑制IL-1β软骨细胞内IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达(P<0.01),降低细胞上清液中NO浓度(P<0.05,P<0.01),下调IκB-ζ(P<0.05)和P65蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。温经通络汤含药血清可显著下调MMP3、MMP9、MMP13以及ADAMTS4 mRNA表达(P<0.01),抑制MMP13(P<0.05,P<0.01)和MMP3(P<0.05)的蛋白表达。氧化应激方面,它可显著抑制软骨细胞内ROS的产生,提高NADH/NAD+比率,降低上清液中MDA浓度,下调HIF-1α蛋白表达(P<0.01)。温经通络汤含药血清可显著降低乳酸浓度,下调LDHA、PKM2、NOX2、NOX4的表达,降低细胞内糖酵解水平(P<0.05,P<0.01)。结论温经通络汤含药血清可通过抑制炎症、软骨降解、氧化应激和糖酵解,缓解IL-1β诱导的小鼠原代软骨细胞损伤,其机制可能与调控IκB-ζ/HIF-1α/LDHA轴有关。

潜阳育阴颗粒早期介入延缓高血压认知障碍患者脑白质病变的临床研究

目的观察潜阳育阴颗粒治疗高血压认知障碍患者的临床疗效及对脑白质病变体积的影响。方法采用随机对照、多中心入组,将患者分成治疗组64例、对照组33例、多奈哌齐组34例。对照组予以西医常规基础治疗,治疗组在对照组治疗基础上加服潜阳育阴颗粒,多奈哌齐组在对照组治疗基础上加服多奈哌齐,疗程均为6个月,治疗前后比较3组患者血压、脑白质病变体积、简易精神状态检查表(MMSE)、血管性痴呆评估量表(VaDAS-cog)和中医证候积分变化情况。同时观察3组患者血常规、肝肾功能等安全性指标变化。结果治疗后,3组患者血压均明显下降(P<0.01),组间无明显差异(P>0.05);3组中医证候积分均有下降(P<0.01),治疗组优于对照组与多奈哌齐组(P<0.01);3组患者脑白质病变体积均显著增加(P<0.01),治疗组的脑白质病变体积增加少于对照组与多奈哌齐组(P<0.05);治疗组MMSE评分明显增加(P<0.01),优于对照组和多奈哌齐组(P<0.01);治疗组VaDAS-cog评分显著降低(P<0.01),优于对照组(P<0.01)。治疗期间3组患者均未出现明显不良反应。结论潜阳育阴颗粒能显著改善高血压患者认知功能,延缓脑白质病变进展,并具有安全性。

通脑益智颗粒联合粪菌移植对血管性认知障碍大鼠学习记忆能力和肠道菌群的影响

目的从肠道菌群角度探讨通脑益智颗粒联合粪菌移植对血管性认知障碍大鼠学习记忆能力的影响。方法选取雄性SD大鼠70只,随机取10只作为假手术组,其余大鼠采用双侧颈动脉结扎的方式制作血管性认知障碍模型。采用Morris水迷宫实验筛选出造模成功大鼠,按照体重分层随机的方法将大鼠分为模型组、多奈哌齐组、通脑益智组、粪菌移植组、通脑益智联合粪菌移植组,每组10只。假手术组和模型组均给予生理盐水灌胃,多奈哌齐组给予多奈哌齐1 mg/(kg·d)灌胃,通脑益智组给予通脑益智颗粒方提取液9 g/(kg·d)灌胃,粪菌移植组给予粪菌胶囊2粒/d灌胃,通脑益智联合粪菌移植组给予通脑益智颗粒方提取液及粪菌胶囊灌胃,均1次/d,连续灌胃28 d。灌胃结束,通过Morris水迷宫实验评价各组大鼠的空间学习记忆能力,采用16S rDNA生物信息技术分析肠道菌群结构。结果与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05),穿越平台次数明显减少(P<0.05),平台目标区域停留时间和平台所在象限停留时间均明显缩短(P均<0.05);与模型组比较,多奈哌齐组、通脑益智组、粪菌移植组和通脑益智联合粪菌移植组大鼠逃避潜伏期均明显缩短(P均<0.05),穿越平台次数明显增加(P均<0.05);与多奈哌齐组比较,通脑益智联合粪菌移植组大鼠穿越平台次数明显增加(P<0.05),平台目标区域停留时间和平台所在象限停留时间均明显延长(P均<0.05)。模型组、多奈哌齐组、通脑益智组大鼠的OTU指数、Chaol指数和模型组Simpson指数均明显低于假手术组(P均<0.05),通脑益智联合粪菌移植组大鼠的OTU指数、Simpson指数、Chaol指数均明显高于模型组(P均<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠肠道菌群中厚壁菌门相对丰度和蓝藻菌门相对丰度明显升高(P均<0.05),拟杆菌门相对丰度、拟杆菌门/厚壁菌门比值和放线菌门相对丰度均明显下降(P均<0.05);与模型组比较,通脑益智联合粪菌移植组大鼠肠道菌群中厚壁菌门相对丰度和蓝藻菌门相对丰度均明显下降(P均<0.05),拟杆菌门相对丰度、拟杆菌门/厚壁菌门比值和放线菌门相对丰度均明显升高(P均<0.05)。肠道菌群属水平丰度聚类和微生物菌落构成分析显示通脑益智颗粒、粪菌移植及二者联合应用可调节肠道菌群结构。结论通脑益智颗粒联合粪菌移植能够提高血管性认知功能障碍大鼠的空间学习记忆能力,机制可能与调节肠道菌群结构,使其逐渐趋向于健康大鼠肠道菌群有关。

中医药干预肠道菌群防治高血压合并认知障碍的探讨

肠道菌群失调存在于高血压及认知障碍患者中,肠道菌群影响人体血压水平、大脑功能和宿主行为,从而与高血压合并认知障碍相关。补益肝肾、平肝潜阳、活血化瘀类中药调整肠道菌群对防治高血压合并认知障碍的治疗具有一定优势。从肠道菌群与高血压以及认知障碍的关系、中医药调节肠道菌群改善高血压合并认知障碍的研究现状等角度进行综述,旨在探究高血压合并认知障碍防治的新靶点、新思路。

天麻饼穴位敷贴治疗肝阳上亢型高血压头痛的临床研究

目的 探讨中药制剂“天麻饼”穴位敷贴治疗肝阳上亢型高血压头痛的临床疗效及安全性。方法 采用随机、对照、平行研究,选取符合纳入标准的肝阳上亢型高血压头痛患者41例,对照组20例,治疗组21例。对照组予西医标准治疗4周,治疗组在对照组治疗基础上加用“天麻饼”穴位敷贴治疗2周,干预2、4周后,分别比较2组患者血压值、中医证候积分、头痛评分、头痛持续时间、头痛发作频率的变化。结果 干预2、4周后,2组患者血压均显著降低(P<0.01),组间差异均无统计学意义(P>0.05);干预2、4周后,2组患者头痛评分均显著降低(P<0.01),且干预2周后治疗组优于对照组(P<0.01);干预2、4周后,2组中医证候积分均降低(P<0.05,P<0.01),且治疗组在改善头痛症状方面均优于对照组(P<0.01),其中干预4周后治疗组在改善总积分方面优于对照组(P<0.05);干预2、4周后,2组患者头痛频次均显著降低(P<0.01)、治疗组均优于对照组(P<0.01,P<0.05);干预2、4周后,对照组头痛持续时间均较干预前差异无统计学意义,治疗组头痛持续时间均显著降低(P<0.05),其中治疗2周后治疗组优于对照组(P<0.01);干预2周后对照组总有效率70%,治疗组总有效率95%,治疗组头痛疗效优于对照组(P<0.01),干预4周后对照组总有效率70%,治疗组总有效率90%,治疗组头痛疗效优于对照组(P<0.01);治疗期间2组均未出现不良反应。结论 “天麻饼”穴位敷贴能改善肝阳上亢型高血压的头痛评分、头痛频率、头痛持续时间,疗效显著,且独立于降压作用、作用持久,同时具有良好的用药安全性,值得临床推广。

通脑益智方对非痴呆型血管性认知障碍脾肾亏虚、痰瘀阻络证患者认知功能及肠道菌群的影响

目的探讨通脑益智方治疗非痴呆型血管性认知障碍(VCIND)脾肾亏虚、痰瘀阻络证患者的作用机制。方法92例VCIND脾肾亏虚、痰瘀阻络证患者随机分为治疗组50例和对照组42例。两组均予常规基础治疗,对照组联合口服多奈哌齐片,每次5 mg,每晚1次;治疗组联合通脑益智方,每日1剂,水煎分早晚两次口服。两组均连续治疗3个月。治疗前后比较两组患者简易精神状态检查量表(MMSE)评分、血管性痴呆评估量表(VaDAS-Cog)评分、日常生活能力量表(ADL)评分、中医证候评分(主症包括思维呆滞、善忘无记、性情改变、语言错乱,次症包括腰膝酸软、头晕头痛、耳鸣时作、神疲乏力、肢体困重、失眠烦躁、纳呆脘胀、面部发麻)。比较两组患者肠道菌群多样性和菌群丰度结构的变化及粪便中短链脂肪酸(SCFAs)水平(包括乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、异戊酸、戊酸、己酸)。并纳入同期20例健康受试者粪便相关数据作为参照。研究过程中进行安全性观察。结果与本组治疗前比较,两组患者治疗后MMSE评分升高,VaDAS-cog评分降低(P<0.05或P<0.01),治疗组ADL评分较治疗前升高(P<0.05)。两组患者治疗后思维呆滞、善忘无记、性情改变、语言错乱、肢体困重、失眠烦躁、纳呆脘胀、面部发麻评分及中医证候总积分均较治疗前明显降低(P<0.05或P<0.01);治疗后组间比较,治疗组腰膝酸软、耳鸣时作、神疲乏力、肢体困重、失眠烦躁、纳呆脘胀评分较对照组明显下降(P<0.05或P<0.01)。肠道菌群多样性结果显示,治疗组Shannon指数较治疗前升高(P<0.05)。治疗后各样本在主坐标分析图上经Anosim分析比较差异有统计学意义(P<0.01),提示两组间物种发生改变。治疗后,治疗组拟杆菌门和梭杆菌门相对丰度上升,放线菌门、疣微菌门和蓝藻菌门等相对丰度下降(P<0.05),普拉梭菌属、双歧杆菌属、乳酸杆菌属、瘤胃球菌属相对丰度明显升高(P<0.05)。两组患者治疗后与健康人群肠道菌群物种多样性比较,治疗组人群的肠道菌群结构向健康受试者靠近,而对照组无此趋势。治疗组治疗后乙酸、丙酸、丁酸均较治疗前升高(P<0.05或P<0.01)。结论通脑益智方可改善VCIND脾肾亏虚、痰瘀阻络证患者的认知能力和生活质量,调节肠道微生态可能是其作用机制之一。

m6A甲基化修饰对血管性认知障碍影响的研究进展

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)是RNA中最普遍的表观遗传修饰,参与RNA剪接、运输、翻译和降解等生物过程。m6A甲基化修饰在中枢神经系统中含量丰富,目前已被证实m6A甲基化修饰对大脑发育、记忆学习能力、应激状态及轴突和突触的功能结构有调控作用。血管性认知障碍是脑血管病导致的认知功能减退,是第二大常见的痴呆病因,对其发病机制的研究对本病的诊治具有重要的理论意义和应用价值。