油橄榄叶提取物对HaCaT细胞氧化损伤的保护作用及抑菌活性

为研究油橄榄叶提取物对人永生化角质形成细胞(HaCaT)氧化损伤的保护作用及抑菌作用,采用肌红蛋白保护率评价油橄榄叶提取物对不同种类自由基的胞外抗氧化能力,建立HaCaT细胞的氧化损伤和炎症模型,评价油橄榄叶提取物对细胞氧化损伤的保护作用,并进一步考察油橄榄叶提取物对常见病原菌的抑制作用。结果表明油橄榄叶提取物对羟基自由基、次氯酸根和过氧自由基均具有抗氧化作用,其中对羟基自由基和过氧自由基的抗氧化效果较好。在细胞水平上,油橄榄叶提取物能够显著降低HaCaT的胞内自由基,可以有效改善HaCaT细胞的氧化应激状态。同时,0.156~0.625μg/mL的油橄榄叶提取物能够有效降低炎症细胞中的白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)因子水平,0.156~0.312μg/mL的提取物能够降低肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平。此外,油橄榄叶提取物能够有效抑制金黄色葡萄球菌,而对大肠杆菌和铜绿假单胞菌敏感度低。综上,油橄榄叶提取物对HaCaT细胞的氧化损伤具有一定的保护作用,且具有抗炎效果和抑菌活性。

河蚬汤纳米颗粒细胞毒性及对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

许多传统食品中存在大量的伴生性纳米颗粒,其纳米尺度的构造赋予它们特殊的活性与功能,然而这类纳米颗粒对人体细胞的影响尚未被充分揭示。以河蚬汤及其伴生纳米颗粒为例,采用狗肾上皮细胞(MDCK)、人结肠腺癌细胞(Caco-2)、人正常肝细胞(L-02)和大鼠原代腹腔巨噬细胞模型,研究以液相色谱方法分离制备的河蚬汤纳米颗粒的细胞毒性,以及其对大鼠原代腹腔巨噬细胞功能的影响。实验结果表明:15.63~500.00μg/mL河蚬汤伴生纳米颗粒对4种细胞均无明显毒性;这些纳米颗粒能被大鼠原代腹腔巨噬细胞吞噬,对正常巨噬细胞的膜电位和吞噬功能无明显影响,抑制AAPH诱导氧化应激引起的细胞膜超极化,拮抗线粒体的氧化应激与细胞吞噬功能损伤。抗氧化测试结果显示,河蚬汤伴生纳米颗粒具有FRAP、ABTS抗氧化活力,但不具有ORAC活性。研究旨在为后续深入开展河蚬汤及其伴生纳米颗粒的功效以及作用机制提供必要的基础数据和理论支持。

葛根蛋白分离鉴定及其自组装纳米颗粒性质研究

目的:纯化并表征一种葛根水溶性蛋白,将该蛋白通过热诱导的方式构建为蛋白纳米颗粒载体。方法:采用阴离子交换色谱High Q纯化获得葛根蛋白,通过SDS-PAGE和蛋白质N端测序方法鉴定蛋白的分子量和氨基酸序列。采用激光粒度分析仪对蛋白纳米颗粒的粒径、光散射强度和Zeta电位进行研究,采用高效液相色谱法测定纳米载体对药物的装载效率。结果:从葛根中抽提并分离纯化获得一种主要的水溶性蛋白,命名为PP。N-端氨基酸序列测得为DFVYDMCGNVLNGGTYYIL,通过NCBI数据库比对和蛋白酶活性测定确定PP为一种新的胰蛋白酶抑制剂,且PP在pH2~10的环境中及20~50℃的温度范围内均具有较好的稳定性。PP溶液(0.1 mg/mL,pH6.0)在100℃下加热60 min可以形成分布均匀的纳米颗粒PP-NPs,测定其平均粒径为172.78 nm,Zeta电位为-25.40 mV。PP-NPs能有效装载葛根素及小檗碱,测得的药物装载率分别为33.83%和24.61%。结论:从葛根中纯化获得的主要水溶性蛋白PP能通过热诱导构建蛋白纳米颗粒,该颗粒具有成为药物载体的潜力。

食品科学还必须研究什么?

起源于食品加工的现代食品科学和食品工业,提供了前所未有的丰富食物,是全人类的进步与发展不可或缺的基础。迄今,食品科学系统地研究和掌控了食品的保藏、营养及感官特性,但对食物与人体的作用尚乏独立了解,现有知识限于营养学和毒理学。食品工业彻底改变了食物的生产和消费方式,也改变了食物与人体的作用,而对后者研究的缺位,助长了公众对工业食品的安全与健康隐忧的疑惑。回顾历史、鉴析现状,我们试对未来"食物-人体作用"的研究提出3个方向:阐明食品组成分子的存在状态;破译人体对食物的反应信号;研究食品特性互补的利用方法。以全新的角度研究食品与人体的相互作用,是累积食品科学独有的方法与发现、充实学科提高地位的需要,也是回答并解决食品工业界面临的急迫问题的必须,将使食品学科能够以原创性发现构建出完整的食品的科学。

四种传统中国食品中SOD样活性物质的研究

本文报导了采用凝胶色谱方法对四种传统中国食品－酱油、鱼露、豆腐乳和皮蛋进行分离，并对各分离组分进行ＳＯＤ样活性的检测。结果表明：在酱油、鱼露和豆腐乳三种食品中存在有明显ＳＯＤ样活性的物质。其ＩＣ５０值分别为０．０ｌ８、０．０１６和０．２ｍｇ蛋白质／ｍ１。同时测定了各分离组分中的铜、锌和钙等金属的含量，并对ＳＯＤ样活性与金属离子含量之间的可能性关系进行了探讨。

蛹虫草的抗氧化性和热稳定性及归经作用研究

研究蛹虫草的抗氧化性、热稳定性和归经作用,测定蛹虫草的SOD活力和总抗氧化力。将20名志愿者分为两组,分别每日服用蛹虫草片(1 g)和SOD蛹虫草片(蛹虫草片1 g、SOD片1 g),连续服用14 d,记录左右两侧的肾经、肺经、脾经和肝经经络电压的变化。结果表明:蛹虫草的SOD活力和抗氧化能力很强,且耐高温,性质稳定。受试者服用蛹虫草片和SOD蛹虫草片主要表现在对肾经的影响,减少肾经的氧化应激水平,研究结果与已报道的蛹虫草的功效基本吻合。

桦褐孔菌水提粉的抗氧化性及对人体经络电压的作用初探

桦褐孔菌,常称为白桦茸,又叫作西伯利亚灵芝,是一种具有良好的抗氧化功效的保健食品。为了研究桦褐孔菌的抗氧化性和归经作用,测定桦褐孔菌水提粉的SOD活力、总抗氧化力和氧化还原电位值。召集30名志愿者并分为两组,分别服用桦褐孔菌水提粉制备的菌汤和添加SOD蛋白的菌汤,志愿者每日服用100 mL,连续服用24 d,记录左、右两侧的24条经络电压的变化。试验结果表明:桦褐孔菌水提粉有很强的抗氧化性,当志愿者服用桦褐孔菌粉和SOD桦褐孔菌粉24 d后,能够显著提高心经、心包经和肺经电压,而且添加SOD蛋白的桦褐孔菌粉能够显著提高脾经、膀胱经、肝经的电压。以上结果与已报道的桦褐孔菌的功效描述基本吻合。

酶促水解大豆分离蛋白动力学模型的研究

本文对AS1.398中性蛋白酶在pH6.9和温度49℃条件下水解大豆分离蛋白的动力学机制进行了研究．结果表明：酶水解速率随水解反呈指数递减．为了解释实验结果，我们提出了如下假设：对底物而言水解反应终为零级反应，水解过程中由于游离酶攻击酶-底物中间络合物而造成的不可逆酶变性是一个二级动力学过程．在此基础上，由实验数据推导得到了描述AS1.398中性蛋白酶催化水解大豆分离蛋白的动力学方程，该方程可用于指导和优化酶解反应实验．

色氨酸在TOYOPEARL HW-40S 凝胶填料上非理想排阻行为的研究

在发现１８种氨基酸特别是色氨酸在ＴＯＹＯＰＥＡＲＬＨＷ－４０Ｓ树脂所填色谱柱上表现出非理想排阻行为的基础上，以色氨酸在ＨＷ柱上的保留时间为指标，探讨不同的流动相改良剂对ＨＷ凝胶与色氨酸之间相互作用的影响，从而阐明这种反常行为是疏水、离子交换以及氢键三者综合作用的结果，而疏水作用是最主要的影响因素。实验结果说明流动相组成对ＨＷ凝胶色谱行为有明显的影响作用，这不但有助于确立ＨＷ凝胶理想的排阻色谱条件，而且为利用其所具有的吸附性能分离分析肽类和氨基酸等小分子物质奠定了基础。

主持人语:非学不训无以成食

食物、食品对于人类,是非常熟悉而又陌生的存在。每天三顿,毫无疑问,与人体的作用频度极高,也许就仅次于须臾不可缺的空气了,当然该足够的熟悉。不仅如此,作为外来物质,食物与人体的作用,无论就量而言,还是就其密切度和深度而论,都超过世间的一切。但是说陌生,也是肯定的。时到今日,吃了一顿饭,多数人能发表的看法,基本上还是停留于好吃与不好吃而已。

毛细管电泳法检测蜂蜜中残留的抗生素

用毛细管电泳法对 5种常用的抗生素四环素 (TC) ,土霉素 (OTC) ,多西环素 (DOC) ,金霉素 (CTC)和氯霉素 (CP)进行了分离。研究了电泳缓冲液的 pH、不同有机试剂添加剂、温度等因素对抗生素分离的影响。实验结果表明 ,体积分数为 4%的N 甲基吗啡啉的加入可大大改善分离效果。在各自相应的浓度范围内 ,峰面积和样品浓度之间呈现良好的线性关系 ,重现性好。氯霉素的检测极限为 10 μg/L ,四环素、土霉素、多西环素为 2 0 μg/L ,金霉素为 40 μg/L(信噪比 >5 )。该方法成功地应用于蜂蜜中残留抗生素的测定 ,具有操作简单、快速方便、灵敏度及自动化程度高、重现性好等优点 ,是对含抗生素类物质进行痕量分析的好方法。

测定鸡蛋胆固醇的高效液相色谱新方法

报道了测定鸡蛋蛋黄胆固醇含量的一种改进方法。蛋黄以水稀释后直接以乙醚和石油醚萃取，采用ＺｏｒｂａｘＯＤＳ反相色谱柱（０．４６ｃｍ×１５ｃｍ，５～６μｍ），以乙腈－异丙醇（４∶１，Ｖ／Ｖ）为流动相，流速０．６ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长２０８ｎｍ。在此色谱条件下，胆固醇含量与色谱峰高呈良好的线性关系，线性范围在０．０５～０．４０ｇ／Ｌ（ｒ＝０．９９９３）之间，最小检测量为０．０２ｇ／Ｌ。用于蛋黄胆固醇分析，样品无须皂化便可直接定量，简便、快速、重现性好。

毛细管电泳法研究板蓝根水提物抗流感病毒的作用机制

目的:探讨板蓝根水提物抑制H1N1型流感病毒细胞结合活力的机制。方法:显微镜检判定板蓝根不同处理方式下的红细胞经流感病毒侵染后的形态学差异,通过毛细管电泳结合显微镜镜检、血凝滴度指标进一步阐述板蓝根抗流感病毒的生化机制。结果:经过板蓝根保护过的细胞,能阻止病毒对细胞的吸附,推测其可能是通过与细胞膜的作用来保护细胞。结论:板蓝根通过结合到细胞膜上而起到保护细胞的作用,有效抑制了流感病毒对细胞的结合,从而达到抗病毒的目的。

红曲黄酒传统酿造用曲的特征挥发性风味成分分析

红曲黄酒为中国黄酒中特色鲜明的一类黄酒,它以糯米为主要原料,添加红曲和药白曲作为糖化发酵剂,经多种微生物酿造而成。传统酿造用曲(红曲和药白曲)对红曲黄酒的风味特征和风味品质至关重要。本文采用顶空固相微萃取(HS-SPME)技术提取福建红曲黄酒传统酿造常用的4种不同地区的酒曲(古田红曲、乌衣红曲、龙岩药曲、南平白曲)中的挥发性风味组分,然后用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术测定,结合谱库检索技术对其中主要化合物进行鉴定。研究发现:50/30μm DVB/CAR/PDMS萃取头最适合于萃取红曲黄酒酿造用酒曲中的挥发性风味组分,从这4种酒曲中共鉴定出62种匹配度≥80的挥发性风味成分,包括醇类17种、醛酮类9种、酚类4种、酯类8种、酸类11种、吡嗪类5种和其它化合物8种。对不同酒曲中挥发性组分进行主成分分析(PCA)和风味特征贡献度分析,找出不同酿造用曲的特征挥发性风味成分,结果发现古田红曲和乌衣红曲香气组成差异显著,而龙岩药曲和南平白曲香气组成较为接近。本研究结果对于了解红曲黄酒传统酿造机理,提升红曲黄酒风味品质和改良红曲黄酒传统酿造工艺具有重要的意义。

反相高效液相色谱法同时快速测定黄酒和葡萄酒中有机酸的含量

建立了利用反相高效液相色谱法同时快速测定黄酒和葡萄酒中酒石酸、甲酸、苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸等7种有机酸的方法。采用的色谱柱为XB-C18(5μm,150mm×4.6mm),检测器为紫外检测器,波长210nm;确定的最优色谱条件是:0.02mol/LKH2PO4-乙腈(98∶2),pH2.3,流速1.0mL/min,柱温30℃,进样量10.0μL,冲洗方式为等度洗脱。利用此方法分析测定有机酸的工作曲线线性关系良好,回收率在83.17%～117.3%,变异系数在3.1%～5.8%。利用研究所构建的反相高效液相色谱法能够快速地对黄酒和葡萄酒中的有机酸进行测定,满足企业对产品质量进行实时监控。

高效液相色谱法测定龙眼果中水溶性单糖和寡糖

用高效液相色谱-蒸发光散射测定龙眼果中水溶性单糖和寡糖组分的种类和含量，考察这些糖组分在龙眼晒干前后的变化。采用Hypersil NH2柱为固定相，V（乙腈）：V（水）=80：20为流动相，体积流量1mL／min，蒸发光散射法检测。绘制7种标准糖的线性回归方程并计算其检测限，进而分别分离测定新鲜龙眼果和龙眼干中水溶性糖的种类和含量。研究发现：龙眼鲜果和干果中的单糖和寡糖主要为果糖、葡萄糖、蔗糖。3种糖在25～1000μg／mL范围内与其色谱峰面积之间有良好的线性关系，标准品回收率在97％～106％之间，相对标准偏差（RSD）小于0．40％。3种糖中以蔗糖的质量分数为最高，达517．28mg／g。3种糖的总质量分数在鲜果中为830．36mg／g，而在干果中下降了14．8％，其中又以蔗糖的下降最为显著，达20．6％，质量分数降低的原因可能是晒干过程发生了美拉德反应和寡糖的水解。

驴真皮中主要蛋白的组成及其相互作用的研究

目的:分析阿胶主要原料驴真皮中的主要构成蛋白,研究其相互作用,揭示其分子构成,为阐明阿胶作用机制的研究提供实验依据。方法:分别使用TriPure试剂和通过1%聚丙烯酰胺(SDS)煮沸驴的真皮,提取驴皮中总蛋白质,再使用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质,割胶提取蛋白质,使用毛细管色谱进一步分析蛋白组分。结果:发现驴真皮中主要蛋白质不仅含有胶原蛋白α1(Ⅰ)型、α2(Ⅰ)型,而且还含有血清白蛋白,其中,用TriPure试剂提取蛋白质的总蛋白中,血清白蛋白的含量超过25%;用1%SDS煮沸的总蛋白中,血清白蛋白的含量约20%,并且发现在凝胶电泳带中有2条明显的分子质量为20万左右的蛋白质,割胶提取该蛋白质经过毛细管色谱分析,发现是胶原蛋白与血清白蛋白结合的产物。结论:血清白蛋白是驴真皮中的主要蛋白组分,驴血清白蛋白有可能对于阿胶补血的功能起到比普遍认为胶原蛋白更为重要的作用。

鹿茸粗提液对大鼠成骨肉瘤细胞增殖的调节作用

目的 :观察鹿茸粗提液 (PAE)对大鼠成骨肉瘤细胞系UMR 10 6增殖的影响 ,从而为研究鹿茸强筋健骨的分子机理以及筛选鹿茸防治骨质疏松的生物活性成分提供实验依据。方法 :通过SephacrylS 2 0 0HR凝胶过滤色谱对PAE进行初级分离 ,用MTT法检测不同分离组分对UMR 10 6细胞增殖的影响。结果 :发现SephacrylS 2 0 0HR凝胶过滤色谱第 2峰P2次组分 ,当其蛋白质浓度高于 0 .972mg·L - 1并低于 97.2mg·L - 1时 ,对UMR 10 6细胞增殖活性的影响表现为抑制 ;若浓度达到 97.2mg·L- 1后则会促进细胞的增殖 ,且增殖效应随蛋白质浓度的增加而明显上升。当样品蛋白质浓度达到 9.72g·L- 1时 ,相应的细胞增殖率为 477.92 % ,接近PAE的增殖水平 (499.62 % )。经SDS PAGE电泳分析第 2峰分子量集中于 59kDa左右。此外 ,发现第 3、第 4和第 5峰对UMR 10 6细胞增殖有显著的抑制作用。结论 :鹿茸蛋白中含有多种双向调控UMR 10 6细胞增殖的生物活性因子 ,既有剂量双向效应 ,也有与分子量相关的不同调控蛋白 。

毛霉红腐乳蛋白质的研究

毛霉红腐乳蛋白质的研究ＡＳｔｕｄｙｏｆＰｒｏｔｅｉｎｉｎＭｕｃｏｒ－ＲｅｄＴｏｆｕｒｕ，ＣｈｉｎｅｓｅＦｅｒｍｅｎｔｅｄＳｏｙｂｅａｎＣｕｒｄ陈躬瑞＊陈儒明赵晴△郑玉锖倪莉饶平凡（福州大学生物工程研究所，福州３５０００２）ＣｈｅｎＧｏｎｇｒｕｉ，Ｃｈ...