基础医学形态学实验室数字化教学切片的应用与研究

研究我国高等医学院校形态学实验教学课程数字信息化教学平台建设。利用数字摄像机扫描高质量的组织切片(载玻片),通过自动图像扫描采集软件、数字切片浏览软件和计算机系统组成的扫描系统,其过程全自动、智能控制,快速、稳定地扫描,显微图像连续采集,图像融合、拼接、压缩形成数字切片。数字切片的使用不依赖于显微镜,通过网络进行切片观察、学习、交流等;整张切片全视野信息,分辨率高,切片清晰,色彩逼真;终端不需要安装任何软件可以观察,用鼠标操作可以选择切片任意位置,进行定倍及任意倍率的放大或缩小,模拟显微镜观察模式。应用数字化切片架构形态学实验教学数字化教学平台,促使教学方法和手段发生变革,促进了实验课程教学模式改革。

山羊胚胎移植受体同期发情优化程序研究

用国产炔诺酮阴道栓、促卵泡素(FSH)和氯前列烯醇(PG)组成3种诱导山羊同期发情的处理程序,分别对579、889和673只四川本地山羊进行同期发情处理。结果表明,设计的3种同期发情处理程序都有较好的同期发情效果,同期发情有效率分别为88 9%(515/579)、91 9%(817/889)和96 4%(649/673),处理羊同期发情后正常排卵并形成功能黄体的比率分别为67 6%(348/515)、66 1%(540/817)和70 9%(460/649)。处理程序结束后,从撤除炔诺酮阴道栓到母羊开始发情的间隔时间分别为47 3±16 4、47 0±18 7和42 7±16 4h,各组发情羊发情持续时间分别为43 9±16 5、41 5±17 9和44 1±16 4h。总的来看,使用PG-炔诺酮阴道栓-FSH-PG处理法,同期发情总有效率最好。

不同品种受体对波尔山羊胚胎移植效果的研究

将2127枚波尔山羊胚胎移植给1182只受体,移植单胚、双胚、3胚和4胚时的受体妊娠率分别为60 2%(171/284)、62 7%(540/862)、64 0%(16/25)和54 6%(6/11),胚胎成羔率分别为60 2%(171/284)、51 6%(890/1724)、41 3%(31/75)和36 4%(16/44)。各品种受体移植单胚时妊娠率和胚胎成羔率均无显著差异(P>0 05),移植双胚的奶山羊受体胚胎成羔率显著高于成都麻羊和简阳大耳羊(P<0 05),而南江黄羊低于奶山羊、高于成都麻羊和简阳大耳羊,但差异不显著(P<0 05)。受体羊卵巢上黄体数量对受体妊娠率和胚胎成羔率无明显影响,但随着黄体体积变小,胚胎成羔率逐渐下降。

体制改革与创造性能力培养关系之思考

把实验教学内容相关、方法近似的实验室进行重组合并,使基础教学实验室管理体制上完成了重大的变革。从此,改变了实验室为一门课程服务、分散管理的模式,建立起了以学科群为基础、集约型管理体制的实验室。体制上重大的变革,促进了基础医学实验教学模式改革。

复方红花对地鼠的抗早孕作用与子宫内膜上皮细胞凝集素受体表达的相关性研究

目的 :本研究应用亲和细胞化学技术观察复方红花抗早孕的作用机理。方法 :以刀豆凝集素 (Con A)、花生凝集素 (PNA)、荆豆凝集素 (UEA)为分子探针 ,检测怀孕地鼠灌服复方红花后子宫内膜上皮细胞表面相应的凝集素受体表达的变化。结果 :(1 )受孕鼠灌服复方红花 d4,子宫内膜上皮细胞 Con A受体合成增加 ,呈强阳性反应 ;(2 ) PNA受体合成缓慢 ,至灌胃 d 6时合成出现高峰期 ;(3) UEA受体合成始终未出现高峰期 ,至灌胃 d 8时呈弱阳性反应。结论 :中药复方红花在抗早孕作用中影响子宫内膜上皮细胞凝集素受体的表达 ,阻止胚胎正常发育。停药后 ,动物可恢复动情周期及正常妊娠。

胚胎移植供受体山羊发情控制及配比问题的研究

用含１８甲基炔诺酮６０ ｍ ｇ 的阴道海绵栓预处理１１３ 只供体羊 １４～１５ ｄ后注射 Ｆ Ｓ Ｈ 进行超排，３６ ｈ 或４８ ｈ 后撤栓。１９９ 只受体羊用含炔诺酮５０ ｍ ｇ 的阴道栓处理，撤栓时注射或不注射 Ｆ Ｓ Ｈ 进行同期发情。结果表明，供、受体羊发情开始距撤栓的平均间隔时间分别为（３３．９±９９） ｈ 和（４４．３±１６．１） ｈ（ Ｐ＜ ０．０５），供、受体羊发情持续期长短相似（ Ｐ＞ ０．０５）。撤栓时注射 Ｆ Ｓ Ｈ ２５ Ｉ Ｕ 或 ３３ Ｉ Ｕ 的受体羊，卵巢上形成功能黄体的比率分别为６４．０％ 和 ６０．７％ ，显著高于不注射 Ｆ Ｓ Ｈ的受体羊（４２．２％ ， Ｐ＜ ０．０５）。结论认为，用本研究采用的超排及同期发情程序，受体撤栓时间应与供体相同或早于供体羊１２ ｈ；受体羊撤栓时应注射 Ｆ Ｓ Ｈ ２５ Ｉ Ｕ；根据供体羊回收可用胚胎数及同期发情后可用受体数量，供、受体羊的适宜比例为１∶６～１∶８。

生产条件下山羊胚胎移植的组织实施与质量控制

从我国国情出发,系统论述了生产条件下山羊胚胎移植的组织实施步骤及质量控制因素。提出了生产条件下山羊胚胎移植的主要质量控制指标:选择适宜的供、受体,并加强饲养管理;用FSH300～350IU以减量法进行供体超排;用孕激素阴道海绵栓配合促性腺激素进行受体同期发情;鲜胚移植采用从供体子宫角手术回收的桑椹胚～囊胚期胚胎,胚胎冷冻或胚胎分割采用囊胚期胚胎,并移植于受体羊子宫角;完整的记录体系。

小型农牧场及农户波尔山羊胚胎移植关键技术研究

从小型农牧场及农户特点出发,探讨在这些场(户)进行波尔山羊胚胎移植时,供体超数排卵、受体同期发情、供受体羊胚胎回收和移植操作等关键技术对胚胎移植效率的影响。结果表明,调整供、受体母羊的发情周期并采用优化超排程序和同期发情程序,可获得理想的超排和同期发情结果,有效手术供体回收卵数平均达到(17.31±6.93)枚,可用胚(14.96±6.28)枚;受体同期发情率达到94.28%(2125/2254),手术受体利用率为86.55%(1602/1851)。严格而熟练的手术操作可提高供体利用次数,获得理想的胚胎移植结果,将2648枚胚胎移植给1602只受体后,妊娠率达到66.85%(1071/1602),其中1044只受体妊娠足月,产羔1320只。

醋酸铅对小鼠精子发生毒性研究

采用腹腔注射染毒法,将体重(16±1)g的性成熟期公鼠随机分为高剂量(1/10LD50)、中剂量(1/50LD50)、低剂量(1/250LD50)染毒组和溶剂对照组,每组10只,高、中、低剂量染毒组于试验的第0,3,6,9和12天以0.01mL/g注射量,分别腹腔注射1.20,0.24,0.048g/L的醋酸铅[Pb(CH3COO)2·3H2O]溶液,对照组注射灭菌蒸馏水。30d后,处死小鼠,采集输精管精子,研究醋酸铅对小鼠精子的发生毒性。结果表明:(1)各试验组公鼠的睾丸、附睾湿重及其与体重的比值均无明显差异(P>0.05);(2)采用输精管精子进行精子发生毒性检验是可行的;(3)各试验组公鼠精子相对密度及精子活力无统计学差异(P>0.05);(4)各染毒组公鼠畸形精子比率显著高于对照组(P<0.01);(5)高剂量和中剂量试验公鼠输精管顶体异常精子比率与对照组之间差异显著(P<0.05)。说明本试验所用醋酸铅剂量未明显影响性成熟期公鼠的性腺发育及精子密度和活力,各剂量醋酸铅染毒显著影响了精子的形态发生和顶体形成。

醋酸铅对妊娠小鼠雌性后代受精和胚胎发育毒性研究

将妊娠小鼠随机分为高剂量 (1 / 1 0LD50 )、中剂量 (1 / 50LD50 )、低剂量 (1 / 2 50LD50 )和溶剂对照组。高、中、低剂量染毒组和对照组小鼠分别于妊娠的 9,1 1 ,1 3,1 5d和 1 7d腹腔注射 1 .2 g/mL ,0 .2 4g/mL和 0 .0 48g/mL的醋酸铅 [Pb(CH3COO) 2 ·3H2 O]溶液和灭菌蒸馏水 ,注射量 0 .0 1mL/ g。研究醋酸铅对染毒妊娠小鼠雌性后代生长发育和卵母细胞受精、受精卵卵裂及早期胚胎发育的影响。试验结果表明 :①各组后代母鼠断奶后体重变化规律类似 ,试验结束时各组小鼠平均体重无统计学差异(P >0 .0 5) ;②各染毒组后代母鼠受精卵比率极显著低于对照组 (P <0 .0 1 ) ;③染毒组后代母鼠早期胚胎发育受到显著影响 ,主要表现为回收胚胎中正常发育为囊胚的比例显著降低(P <0 .0 1 ) ,同时发育延迟胚及退化变性胚的综合比例显著升高 (P <0 .0 1 )。

腹腔镜检查山羊超排反应准确性的手术评价

用手术法评价了 1 92例超排山羊卵巢反应的腹腔镜检查结果。结果表明 :用腹腔镜检查计数超排羊的黄体数时 ,其准确性随黄体数和未排卵大卵泡数 (直径 >5mm)的增多而降低 ;计数大卵泡时 ,其准确性随大卵泡数的增多而降低 ,但黄体的多少对大卵泡计数准确性无影响 ;超排羊卵巢体积较大时黄体及大卵泡计数的准确性降低 ;被检羊膘情较好且检查前饥饿不足时 ,对黄体及大卵泡计数的准确性有不利影响。

醋酸铅对妊娠小鼠雄性后代生殖毒性的研究

将妊娠母鼠随机分为高剂量(1／10LD50)、中剂量(1／50 LD50)、低剂量(1／250LD50)和溶剂对照组。高、中、低剂量染毒组和对照组母鼠分别于妊娠的9,11,13,15 d和17 d腹腔注射1.2,0.24,0.048 g／L的醋酸铅[Pb(CH3COO)2·3H20]溶液和灭茼蒸馏水0.01 mL／g。研究醋酸铅对妊娠小鼠雄性后代的生长发育和生殖能力的影响。试验结果表明:①高剂量染毒母鼠带仔行为受到醋酸铅的显著影响;②各试验组后代公鼠体重增长变化无统计学差异(P>0.05);③各试验组公鼠的睾丸、附睾湿重及其与体重的比值均无明显差异(P>0.05);④各染毒组后代公鼠精子相对密度显著低于对照组(P<0.01);⑤各染毒组后代公鼠精子活力与对照组之间无统计学差异(P>0.05);⑥高剂量和中剂量组后代公鼠精子畸形比率显著高于对照组(P<0.05),低剂量组则与对照组无统计学差异(P>0.05);⑦备染毒组后代公鼠精子顶体形态异常率与对照组之间无统计学差异(P>0.05)。

生产条件下安哥拉山羊胚胎徒手分割研究

生产条件下，徒手二分割安哥拉山羊桑椹胚和囊胚，并将裸半胚手术移植于受体羊子宫角。１９９３年用０．５％链霉蛋白酶处理胚胎１～６ｍｉｎ软化透明带后，在玻璃培养皿中的含１２．５％蔗糖和５％新生犊牛血清（ＮＣＳ）的ＰＢＳ液内分割，将３３枚半胚移植到２１只受体，有２只受体妊娠。１９９４年用０．２５％链霉蛋白酶处理胚胎０．５～１ｍｉｎ软化透明带后或不经处理而直接在磨砂玻璃皿中的含２０％血清的ＰＢＳ液内分割，移植受体３４只，有１０只受体产羔（２９．４％），共产羔１１只，其中１对为同卵双生，半胚成羔率为２０．０％（１１／５５）。１９９５年，囊胚不经处理直接在磨砂玻璃皿中的含２０％ＮＣＳ的ＰＢＳ液内分割，半胚成对移植于受体羊黄体侧子宫角，产羔受体率为５０．０％（１３／２６），共产羔１６只，其中３对为同卵双生，半胚成羔率为３０．８％（１６／５２），胚胎成羔率为６１．５％（１６／２６）。

Aroclor 1254对小鼠精子受精能力与受精卵发育的毒性研究

采用腹腔注射染毒法研究了Aroclor1254对公鼠精子受精能力及受精卵发育的毒性。将体重(18±3)g的性成熟期公鼠随机分为1/10LD50,1/50LD50,1/250LD50和1/1250LD504个染毒组及稀释剂对照组,染毒组公鼠于试验的第0,3,6天,按照0.01mL/g的注射量,分别注射用灭菌花生油稀释的20,4,0.8,0.16mg/mLAroclor1254溶液,稀释剂对照组注射灭菌花生油。试验开始40d后,用各组公鼠对未染毒的超排母鼠配种。结果表明,用高剂量Aroclor1254染毒公鼠对超排的正常母鼠进行配种时,会显著降低受精卵比例(P<0.01)和受精卵的卵裂率(P<0.05),并出现受精卵首次卵裂延迟。在受精卵的进一步发育中,随着公鼠染毒剂量的增加,发育到桑椹胚和囊胚的比例显著降低,发育延迟胚及发育中退化变性胚比率显著升高。据此认为,Aroclor1254能明显影响小鼠精子受精能力,并影响受精卵的进一步发育。

关于医学院形态学数字化实验教学切片的研究与思考

几十年来,我国高等医学院校形态学实验教学包括组织胚胎学、病理解剖学和医学寄生虫学等课程一直沿用经典的显微镜观察玻璃切片标本的教学手段。2010年春季,山东大学医学院应用数字化切片教学,实现了教学切片数字化与校园互联网结合,架构了形态学实验教学数字化教学平台。教学方法和手段的变革,促进了实验课程教学模式改革。借此与全国高校形态学教学实验室同仁讨论、争鸣和参考。

高校实验室主任管理基本素质的一点研究体会

本文论述了实验室体制改革后,实验室主任的管理基本素质;分析了实验室主任的作用和地位;认识到了实验室主任工作的艰巨性、复杂性和重要性.对当前高校实验室管理有一定现实意义.

复方中药抗早孕的形态学研究

为研究中药抗旱孕的作用机理,采用雌性金黄地鼠于受精后第4天灌服中药,每天2次,连续3天。结果:①抗早孕效果明显,孕鼠子宫串珠样隆起萎缩,消失;②石蜡切片观察子宫内膜上皮细胞排列紊乱,固有层出血;③超薄切片电镜观察上皮细胞纤毛消失,线粒体和核糖体增多;④亲和细胞化学技术观察,ConA、PNA、UEA等凝集素受体增多。结论:灌服中药使子宫内膜发生形态学改变,影响了胚胎生存发育的环境,出现明显的抗早孕作用。有意义的是在停药后第10天左右,实验动物全部恢复动情周期交配生仔,表明中药抗早孕作用是可逆的。

18-甲基炔诺酮阴道栓诱导关中奶山羊发情试验

1 前言早在60年代初期,国外就对孕激素海绵栓诱导母畜同期发情进行了大量试验,并广泛应用于牛、羊、猪的繁殖控制。国内利用孕激素阴道海绵栓或配合促性腺激素进行家畜诱导发情的试验起步较晚,报道也较少,尤其未见到在山羊上试验的正式报道。

实用型炔诺酮阴道栓诱导陕南白山羊同期发情

在 5 ,8 ,1 0三个不同月份 ,用含 1 8-甲基 -炔诺酮 5 0 mg的实用型阴道海绵栓处理 6 31只陕南白山羊进行同期发情 ,撤栓时注射 FSH,阴道栓处理时间分为短期处理(9,1 0 ,1 1 ,1 2 d)和长期处理 (1 5 ,1 6 ,1 7d)。结果表明 ,短期和长期处理之间 ,以及不同月份之间 ,受试羊发情开始距撤栓的平均间隔时间和同期发情有效率差异不显著 (P>0 .0 5 )。结论认为 ,用实用型炔诺酮阴道栓进行陕南白山羊同期发情处理时 ,可选用短期处理法 ;只要避开高热及严寒 ,其它季节均可进行同期发情处理。

醋酸铅对小鼠受精能力及受精卵发育毒性研究

目的研究醋酸铅对公鼠精子受精能力及受精卵发育的毒性，为进一步研究提供依据。方法采用腹腔注射染毒法将体重为（18±2）g的性成熟期公鼠随机分为高剂量（1／10 LD50）、中剂量（1／50 LD50）、低剂量（1／250 LD50）染毒组和对照组。染毒组公鼠于试验的0，3，6，9d和12d分别腹腔注射1．2，0．24，0．048mg／mL的Pb（CH3COO）2·3H2O溶液，注射量0．01mL／g，对照组注射相应体积的灭菌蒸馏水。染毒30d后用各组公鼠与未染毒超排母鼠配种。结果回收胚胎中受精并卵裂的胚胎比例随染毒剂量的增加而显著下降，未受精卵比例相应上升。在受精卵地进一步发育中，随着染毒剂量的增加，退化胚比例显著上升，发育到囊胚-孵化胚的比率则显著降低。结论醋酸铅能明显影响小鼠精子的受精能力，并影响受精卵的进一步发育。