基于简化基因组测序(Super-GBS)的子午岭黑山羊保种群遗传结构评估

旨在分析子午岭黑山羊的群体遗传多样性和亲缘关系以及家系结构,为子午岭黑山羊的保护和利用提供依据。本研究通过简化基因组测序(super-genotyping by sequencing,Super-GBS)技术对99只(10公/89母)成年子午岭黑山羊进行全基因组SNP检测。利用Plink软件计算观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、多态信息含量(PIC)、核苷酸多样性(Pi)、有效等位基因数(Ne)及次要等位基因频率(MAF)等6项遗传多样性指标;GCTA软件进行主成分分析及基因组亲缘关系G矩阵构建;Plink软件构建IBS遗传距离矩阵,R语言绘制热图;PHYLP构建系统发育树;detect RUNS工具检测ROH。结果表明,99只子午岭黑山羊个体共检测到996042个SNPs。子午岭黑山羊群体的PIC、Pi、Ne及MAF值分别是0.161、0.193、1.295、0.130,且Ho(0.167)低于He(0.192),说明子午岭黑山羊群体遗传多样性较低。G矩阵和IBS遗传距离结果均表明子午岭黑山羊群体间大部分个体间亲缘关系较远。主成分分析结果揭示子午岭黑山羊群体内部不存在明显分化,系统发育树结果说明子午岭黑山羊群体公羊可大致分为6个家系,所有家系公羊数量较少。子午岭黑山羊群体的近交系数FROH为0.0496,说明子午岭黑山羊群体内部近交程度相对较低。综上所述,子午岭黑山羊群体遗传多样性较低,大部分个体间亲缘关系较远,群体内近交程度较低,后期应注意后代的选育,避免血统流失。

酵母培养物及活性干酵母对瘤胃调控作用的研究进展

抗生素耐药性问题一直是畜牧行业重点关注的问题,因此抗生素替代品的研发一直受到广泛关注。众多的研究表明,酵母培养物和活性干酵母有维持胃肠道环境、刺激天然免疫和获得性免疫、吸附真菌毒素、增强抗氧化能力和改善生产性能等多种生物学功能,在反刍动物生产中得到广泛应用。目前,关于酵母制剂调控反刍动物瘤胃功能的研究结果并不一致,而且作用机理也不明晰。因此,文章系统性地阐述了酵母培养物和活性干酵母的作用机理及其对瘤胃发酵和微生物区系等方面的影响,重点分析了它们对瘤胃环境、微生物区系和瘤胃营养代谢的调控作用,旨在为酵母制剂在反刍动物瘤胃功能调控上的深入研究提供参考,同时为酵母产品在畜牧业上的绿色安全应用提供一定的理论支撑。

天华肉羊与甘肃高山细毛羊的屠宰性能和肉品质比较

为探讨天华肉羊与甘肃高山细毛羊两个品种的肉用性能差异,选择自然放牧条件下两个品种的6月龄育成母羊各6只进行屠宰,测定其屠宰性能、肉品质以及肌纤维特性。结果表明:①天华肉羊的宰前活重、肾脏重、眼肌面积均显著高于甘肃高山细毛羊(P<0.05)。②天华肉羊肉色指标中的亮度值(L*)、红度值(a*)、黄度值(b*)均显著高于甘肃高山细毛羊(P<0.05),脂肪含量显著低于甘肃高山细毛羊(P<0.05)。③天华肉羊的肌纤维直径和面积均显著低于甘肃高山细毛羊(P<0.05)。④两个品种羊均表现为宰前活重与眼肌面积、胴体重、肾脏重呈显著正相关(P<0.05);脾脏重与肝脏重、肾脏重呈显著正相关(P<0.05);pH45 min值与红度呈显著正相关(P<0.05);肌纤维直径与宰前活重呈显著负相关(P<0.05)。综上所述,与甘肃高山细毛羊相比,天华肉羊的肉用性能得到了很大提升,具有良好的推广价值。

不同单细胞全基因组扩增体系扩增牛微量血液DNA效果评价

旨在通过二代测序技术评估不同单细胞全基因组扩增(single cell whole genome amplification,scWGA)体系对牛微量血液基因组DNA的扩增效果,建立微量DNA全基因组扩增体系。本研究分别采用MDA(multiple displacement amplification)和MALBAC(multiple annealing and looping-based amplification cycles)两种scWGA体系对华西牛1 ng血液基因组DNA进行全基因组扩增,随后基于两种体系的扩增产物以及原始未稀释血液DNA构建测序文库,利用DNBSEQ-T7RS测序平台进行全基因组测序(whole genome sequencing,WGS),通过比较扩增产物片段大小、浓度、总质量评估扩增效率,通过分析GC含量、测序覆盖度、基因分型一致率、基因型检出率等评估两种体系的扩增效果。结果显示,MDA体系的扩增产物片段大于MALBAC体系(8 kb vs.0.2~2 kb),产物浓度和总质量显著高于MALBAC体系(P<0.05)。基于测序数据,1×和5×测序深度下,MDA体系的基因组覆盖度显著高于MALBAC体系(P<0.05),此外,MDA体系的分型一致率、检出率显著高于MALBAC体系,而等位基因缺失率、假阳性率显著低于MALBAC体系(P<0.05)。综上,本研究揭示了MDA和MALBAC两种扩增体系基于华西牛1 ng血液基因组DNA扩增的体系特点,为改进现有华西牛胚胎基因组选择中的关键扩增技术提供理论依据,促进华西牛遗传育种进展。

基于简化基因组测序评估陇南山羊群体遗传多样性和群体结构

该试验旨在利用简化基因组测序(specific-locus amplified fragment sequencing, SLAF-seq)分析陇南山羊群体遗传多样和群体结构,为陇南山羊后续保种计划的制订提供依据。该研究对50只陇南山羊(公、母各25只)进行全基因组SNP检测;计算观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、多态信息含量(PIC)、香浓维纳指数(SHI)、基因多样性指数(Nei)及次要等位基因频率(MAF)等6个指标进行遗传多样性评估。结果表明,50只陇南山羊共检测到655514个SNPs位点。陇南山羊的Ho、 He、 PIC、 SHI、 Nei及MAF指标值分别为0.193、0.286、 0.236、 0.449、 0.290、 0.200,说明该群体遗传多样性较低。陇南山羊群体LD值较低,衰退速度较快,说明该群体并未受到过强烈的人工选择压力。此外,PCA与系统发育树结果均表明陇南山羊群体内部出现分化,可分为2个大的亚群。陇南山羊群体平均IBS遗传距离为0.7391,结合亲缘关系G矩阵热图,表明陇南山羊群体大部分个体亲缘关系较远。50只陇南山羊个体共检测到47206个ROH,平均ROH长度37.86 Mb,基于ROH的近交系数FROH范围为0.0535~0.2574,平均FROH值为0.1472,说明陇南山羊群体存在近交风险。可见,陇南山羊内部存在分化,可分为2个大的亚群,陇南山羊群体遗传多样性较低,部分个体间存在较大的近交风险,可能需要采取保种措施保护陇南山羊遗传资源。

KCNK3基因在不同年龄段藏绵羊睾丸的表达与定位

本研究旨在探究KCNK3基因对不同年龄段藏绵羊睾丸可能的生物学作用。运用荧光定量PCR技术和免疫组织荧光分别检测KCNK3基因在不同发育阶段(3月龄、1岁和3岁)藏绵羊睾丸组织的表达与定位,并运用MiRWalk和TargetScan两个数据库预测与KCNK3基因具有潜在靶向调控关系的miRNAs。结果显示,KCNK3基因的表达随着藏绵羊年龄的增长呈下降趋势;免疫荧光检测结果表明,KCNK3阳性信号主要分布在各年龄段藏绵羊睾丸的精原细胞以及3月龄的生殖母细胞中;生物信息学分析结果显示,miR-296-3p和miR-331-3p与KCNK3基因的表达均呈相反趋势。综上,KCNK3基因可能通过参与精原细胞的生理活动,进而影响藏绵羊的睾丸发育和精子发生,并且KCNK3基因对藏绵羊睾丸的作用可能受miR-296-3p和miR-331-3p的调控。

不同营养水平全混合日粮对舍饲育肥羔羊生产性能、养分表观消化率和屠宰性能的影响

为了研究3种营养水平(A1-0.7×NRC、A2-0.8×NRC、A3-0.9×NRC)全混合日粮对舍饲羔羊生产性能、养分表观消化率和屠宰性状的影响,本试验选择48只南非肉用美利奴×甘肃高山细毛羊杂交一代羔羊,随机分为3个处理组,进行为期60d的育肥试验。结果显示,在全混合日粮饲喂技术下,饲喂A2、A3营养水平日粮组的羔羊全期平均日增重极显著高于A1营养水平组(P<0.01),A2和A3营养水平组差异不显著(P>0.05),公羔全期平均日增重极显著高于母羔(P<0.01);A因子对钙、总磷、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维消化率均有极显著影响(P<0.01),性别仅对钙、总磷消化率有极显著影响(P<0.01),但营养水平与性别没有显著交互作用(P>0.05);营养水平对育肥羔羊的屠宰性能没有显著影响(P>0.05),但杂种羔羊的屠宰率、熟肉率、眼肌面积等高于甘肃高山细毛羊。以上结果表明采用0.8×NRC营养水平全混合日粮育肥南非肉用美利奴×甘肃高山细毛羊杂交一代羔羊较为适宜,在同一营养水平下,公羔生长性能优于母羔。

饲粮中添加花椒籽对湖羊营养物质表观消化率、肠道发育、免疫功能和消化酶活性的影响

本试验旨在研究饲粮中添加花椒籽对湖羊营养物质表观消化率、肠道发育、免疫功能和消化酶活性的影响。选取3月龄体重[(25.66±3.03) kg]相近的健康湖羊公羔27只,随机分为3组,每组9只羊。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ和Ⅱ组分别用3%和6%的花椒籽等量替代基础饲粮中部分粗饲料。预试期7 d,正试期90 d。结果表明:1)试验Ⅱ组的粗蛋白质(CP)表观消化率显著低于对照组(P<0.05)。试验Ⅰ和Ⅱ组的粗脂肪(EE)和钙表观消化率显著高于对照组(P<0.05),且试验Ⅱ组的EE表观消化率显著高于试验Ⅰ组(P<0.05)。2)试验Ⅰ组的十二指肠绒毛高度/隐窝深度显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ和Ⅱ组的空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度显著高于对照组(P<0.05)。3)试验Ⅱ组的血清免疫球蛋白G(IgG)、补体3(C3)和补体4(C4)含量显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ和Ⅱ组的血清溶菌酶(LZM)活性显著高于对照组(P<0.05)。4)试验Ⅰ组的十二指肠和回肠Toll样受体2(TLR2)mRNA相对表达量显著高于对照组和试验Ⅱ组(P<0.05),试验Ⅰ组的空肠TLR2 mRNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。试验Ⅰ组的十二指肠、空肠和回肠TLR2蛋白相对表达量显著高于对照组和试验Ⅱ组(P<0.05)。5)试验Ⅰ和Ⅱ组的十二指肠淀粉酶活性显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ和Ⅱ组的回肠淀粉酶活性显著高于对照组(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加花椒籽可促进湖羊肠道发育,提高肠道免疫功能,且添加水平为3%时效果最优。

花椒籽对湖羊羔羊生产性能、内脏器官指数和瘤胃组织形态发育的影响

【目的】研究饲粮中添加花椒籽对湖羊羔羊生产性能、屠宰性能、内脏器官指数和瘤胃组织形态的影响。【方法】选取3月龄体质量(25.66±3.03)kg相近的健康湖羊公羔27只,随机分为3组,分别在基础饲粮中添加0%(对照组)、3%(试验Ⅰ组)、6%(试验Ⅱ组)的花椒籽,预试期10 d,正试期90 d。【结果】对照组料重比显著高于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组(P<0.05);各组之间屠宰性能差异不显著,但试验Ⅰ组和试验Ⅱ组背膘厚有显著高于对照组的趋势(P=0.073);试验Ⅰ组瘤胃重量显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ组瘤胃相对重量、瓣胃重量和瓣胃相对重量显著高于对照组和试验Ⅱ组(P<0.05),试验Ⅰ组皱胃重量显著高于试验Ⅱ组(P<0.05),试验Ⅰ组总胃重和总胃重相对重量显著高于对照组和试验Ⅱ组(P<0.05);试验Ⅱ组瘤胃乳头高度显著高于试验Ⅰ组和对照组(P<0.05),试验Ⅰ组瘤胃乳头高度显著高于对照组(P<0.05);对照组和试验Ⅰ组瘤胃乳头宽度显著高于试验Ⅱ组(P<0.05);试验Ⅰ组和试验Ⅱ组角化层厚度显著高于对照组(P<0.05)。【结论】饲粮中添加3%和6%的花椒籽可促进湖羊羔羊瘤胃组织发育,降低料重比,其中添加3%的花椒籽更有利于复胃的生长。

舍饲绵羊产后30天产奶量及乳成分变化规律

选取舍饲甘肃肉用绵羊新品种核心群母羊14只,对其产后1~30d产奶量及乳成分指标的变化规律进行了研究。结果表明,舍饲甘肃肉用绵羊新品种核心群母羊产后30d内具有较高的泌乳性能,30d总泌乳量为(32.82±0.19)kg,日均泌乳量为(1.09±0.08)kg,1~30d泌乳曲线方程为Y=530.60t0.368e-0.015t,日增重可达(0.234±0.033)kg。母羊产后30d内各种常规成分及物理性质均以第1天变化最为显著,到第3天趋于平稳;初乳中各种成分的含量均与常乳不同并呈现一定规律性变化,产后1~7d常规成分中可溶性固形物、非脂固形物、蛋白质和脂肪含量呈下降趋势;乳蛋白、非脂固形物、密度和酸度在产后1~21d呈下降趋势,随后呈上升趋势;乳脂、可溶性固形物和酸度在产后30d内一直呈下降趋势;乳糖含量在1~14d呈上升趋势,随后其含量趋于平稳;冰点在1~5d呈上升趋势,随后呈缓慢下降,而乳密度在产后30d内变化不显著(P>0.05)。以上结果为甘肃肉用绵羊新品种群种质特性和早期断奶羔羊的补饲提供了基础数据。

中草药制剂对湖羊血清生化和免疫指标、肠道组织形态及消化酶活性的影响

试验旨在探究中草药制剂对湖羊血清生化和免疫指标、肠道组织形态以及消化酶活性的影响。选择平均体重为(19.60±1.63)kg的3月龄健康湖羊公羔18只,随机分为3组(对照组、A组、B组),每组6只羊。对照组饲喂基础日粮,A组和B组在精料补充料中添加0.5%和1.0%的中草药制剂,试验期90 d。结果表明:①A组总蛋白(TP)含量显著高于对照组(P<0.05),对照组的白蛋白(ALB)含量显著低于A组和B组(P<0.05)。②免疫球蛋白A(IgA)含量B组极显著高于对照组和A组(P<0.01),免疫球蛋白M(IgM)含量对照组极显著低于A组和B组(P<0.01),溶菌酶活性对照组极显著低于A组和B组(P<0.01)。③回肠绒毛高度B组极显著高于A组和对照组(P<0.01),肌层厚度对照组极显著低于A组和B组(P<0.01);十二指肠肌层厚度B组显著高于A组(P<0.05),绒隐比B组显著高于对照组(P<0.05);对照组空肠绒毛高度、绒隐比极显著低于A组和B组(P<0.01)。说明中草药制剂可显著提高湖羊机体免疫力和肠道吸收利用能力,1%的添加量效果较好。

STAR基因在不同发育期绵羊睾丸和附睾中的表达与组织分布

为探讨STAR基因在发育的绵羊睾丸和附睾中的表达模式及潜在功能,该研究采集3月龄、 1周岁和3周岁藏绵羊睾丸和附睾(头、体和尾)组织样本,利用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹和免疫组织荧光染色法检测STAR基因的表达及其编码蛋白的细胞定位。结果发现,随着年龄的增加,在藏绵羊睾丸和附睾(附睾头除外)中STAR基因在转录水平的表达总体呈下降趋势,而在蛋白质水平的表达呈上调趋势。STAR蛋白主要存在于藏绵羊睾丸间质细胞和附睾假复层纤毛上皮主细胞。鉴于间质细胞和主细胞的主要生物学功能是分泌睾酮和分泌促进精子成熟所需的蛋白质,由此推测,STAR基因可能主要在睾丸间质细胞和附睾主细胞的发育和功能维持中发挥作用,进而促进雄激素的合成和精子的成熟。

褪黑素对体外培养绵羊垂体细胞分泌FSH和LH的影响

本文采用体外细胞培养和放射免疫测定法(RIA)的方法,研究了褪黑素(MLT)对季节性繁殖的蒙古母羊垂体细胞分泌促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的作用。结果表明:当单独用递增的MLT(10、100、1000、2000pg/mL)处理原代垂体细胞时,随时间的延长FSH的分泌量极显著下降(P<0.01),但对LH的基础分泌没有影响;无论用10IU/mLhCG单独刺激,还是用不同剂量MLT与10IU/mLhCG共同刺激垂体细胞,FSH和LH的分泌都极显著高于对照组(P<0.01),但与MLT的剂量没有关系。

猪Ⅱ型圆环病毒Cap基因重组腺病毒表达载体的构建

通过细菌内同源重组的方法成功构建了含有猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)衣壳蛋白Cap基因的重组腺病毒表达载体。首先将Cap基因亚克隆连接到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV上,再将重组质粒pAdTrack-CMV／Cap用Pme Ⅰ线性化后电转化携带有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAdEasy-Cap。为进一步研究PCV2腺病毒活载体疫苗奠定了基础。

甘肃肉用绵羊新品种选育群羊生长发育模型分析

试验采用Gompertz模型和Logistic模型拟合了甘肃肉用绵羊新品种选育群的早期生长发育过程。结果表明,2种模型拟合度均在0.91以上,拟合效果好,其中Gompertz模型在拟合度和预测体重效果方面较Logistic模型好。因此,采用Gompertz模型参数估算出甘肃肉用绵羊新品种选育群公、母羊的拐点体重分别是24.06和16.16 kg,拐点月龄是2.73和1.80个月,最大月增重是7.92和7.64 kg,瞬时生长率是7.27和5.18,相对生长率是0.21和0.17。由此证明Gompertz模型可以用于指导甘肃肉用绵羊新品种的选育。

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因重组腺病毒的构建及特性研究

将克隆到的猪繁殖与呼吸综合征病毒全长GP5基因插入到pAdTrack-CMV穿梭质粒中,再将重组质粒pAdTrack-CMV/GP5用PmeⅠ线性化后电转化携带有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAdEasy-GP5,经酶切充分暴露反向末端重复序列,再与脂质体混合转染AD-293细胞,成功获得了AD-GP5复制缺陷型腺病毒,经检测证实AD-GP5稳定性好,安全性高.转录水平检测证实,GP5蛋白基因得到了转录;荧光检测发现,外源蛋白已得到表达.

甘肃省羊产业发展概况、存在问题与应用对策

大力发展羊产业是加快甘肃省农业结构战略性调整,发展现代畜牧业的客观要求,也是全面实现建设小康社会的必然选择。改革开放以来,随着甘肃省畜牧业结构的不断调整,养羊业发展迅速,产业化程度不断提高,发展养羊业已成为农民脱贫致富奔小康和解决"三农"问题的重要途径之一。特别是近几年来,通过加快良种繁育体系建设,加大舍饲养殖技术的示范推广力度及大规模草畜产业开发建设,甘肃省羊只饲养规模逐步扩大,肉羊产业取得了长足进步。

褪黑素对动物生殖调控机理的研究进展

褪黑素是由松果体分泌的一种吲哚类神经内分泌激素。近年来伴随着放射免疫分析法、受体分析及分子生物学等研究方法的应用,从而使MLT的生物合成、生理功能及其对动物生殖调控机理等方面的研究越来越被人们重视,文章简要论述了MLT对动物生殖调控机理的研究进展。

三株猪2型圆环病毒甘肃分离株的全基因组序列分析

根据GenBank中发表的猪2型圆环病毒（PCV2）全基因组序列,设计合成了2对引物,采用PCR方法对来自甘肃不同猪场的3份病料中的PCV2进行基因的扩增、克隆和测序,得到全基因组长度为1 768 bp的PCV2Ww株（登录号DQ322701）以及全基因组长度为1 767 bp的PCV2 LZ株和TS株（登录号DQ363860和DQ355153）.应用DNAstar软件序列分析可得,3个分离株全基因组与国内外参考毒株核苷酸序列同源性在94.8%~99.4%,3个分离株之间的核苷酸序列同源性为96.4%~99.4%;PCV2分离株与PCV1分离株核苷酸序列同源性为69.0%~70.0%;ORF1和ORF2所编码的氨基酸序列与国内外PCV2毒株比较,同源性也很高,分别为99.0%~99.4%和92.7%~98.7%.进化树分析表明,PCV2分离毒株在进化上存在地域上的相关性.

褪黑素对体外培养绵羊卵泡颗粒细胞分泌雌二醇和孕酮的影响

采集绵羊卵泡颗粒细胞进行体外培养,根据试验设计加入褪黑素(MLT)和HCG,分别于不同培养时间收集细胞培养液,用放射免疫测定法(RIA)测定细胞培养液中雌二醇(17β-E2)和孕酮(P4)含量。结果表明:卵泡颗粒细胞在无血清培养体系中可体外培养,并能够分泌相应17β-E2;用MLT或MLT与HCG共同处理卵泡颗粒细胞,能促进细胞分泌17β-E2,并呈时间和剂量的依赖性,但对P4的分泌没有影响。