透明质酸钠滴眼剂的制备动物实验及初步应用

选用新鲜正常人脐带为原料,经蛋白酶酶解消化,氯代十六烷基吡啶和乙醇分次沉淀,获得透明质酸粗品,精制成钠盐成品。其核酸含量为2.67%,蛋白质含量为0.50%,锥板粘度为1.87mPa·s,毛细管粘度为1.79mPa·s,pH为6.9,紫外和红外吸收图谱与文献报道基本一致。理化分析结果及质量已达到眼科外用药要求。将成品配制成滴眼剂,经动物实验证实,无致炎及毒副作用。经临床试用,对干眼症的治疗,有较好的效果。

西京眼球固定液的应用观察

西京眼球固定液的应用观察第四军医大学西京医院眼科中心马吉献，张廷钺，于纯智，杨良产常用的固定液固定眼球后，组织切片时由于固定液的关系，使眼球发生不同程度的收缩，变形以及球内组织结构移位；特别是容易发生固定液性视网膜脱离，严重影响切片质量．几年来，我们...

角膜接触镜润滑液的实验研究

为保护角膜免受戴接触镜的损伤，研制了一种角膜接触镜润滑液。选用同济海昌生产的软性角膜接触镜进行实验。用润滑液浸泡接触镜，以人工泪液作为对照，扫描电镜和相位差显微镜观察；润滑液浸泡的镜片，其透氧孔清晰。动物戴镜试验，润滑液组戴镜８～７２小时后，对角膜进行１％荧光素染色，结果为阴性。组织学观察，角膜上皮完整。从而证明，润滑液具有保护角膜和维持镜片清洁、透氧及润滑作用，可减轻或消除镜片与角膜之间的刺激，增加了配戴隐形眼镜的舒适度，远优于人工泪液。

透明质酸钠滴眼液对角膜及隐形眼镜的保护和润滑作用

目的：观察透明质酸钠滴眼液对角膜及隐形眼镜的保护和润滑作用．方法：选用正常新鲜人脐带为原料，经蛋白水解酶酶解消化，氯代十六烷基吡啶和乙醇逐级沉淀，获得透明质酸粗品，精制成钠盐成品，理化分析及质量标准控制达到眼科外用要求，按照眼药配制标准，制成滴眼液．用家兔进行局部致炎反应及毒副作用实验；并对隐形眼镜进行离体药物浸泡试验及动物戴镜观察，将浸泡后的镜片用ＳＥＭ及相位差显微镜观察其透氧孔；组织学检查戴镜后的兔眼角膜．结果：经动物局部致炎及毒副作用实验证明，无致炎性及毒副作用．应用本滴眼液浸泡的隐形眼镜，ＳＥＭ及相位差显微镜观察，其镜片透氧孔清晰．动物戴镜７２ｈ后，兔眼角膜荧光素染色阴性；组织学检查，角膜上皮细胞完整．结论：透明质酸钠滴眼液作为眼科辅助剂可以用于临床，并对角膜及隐形眼镜具有保护和润滑作用．

隐形眼镜多功能保养液的作用

目的:验证多功能保养液对角膜及隐形眼镜的保护和润滑作用。方法:将隐形眼镜镜片浸泡于多功能保养液内1wk,扫描电镜(SEM)观察隐形眼镜镜片内外两面结构变化;同时进行动物戴镜实验,并设人工泪液为对照组。结果:镜片浸泡实验SEM观察,结构清晰,镜片内外两面可见少量附着物,洗涤后如同未浸泡镜片;对照组镜片内外两面可见大量、颗粒状附着物,洗之不掉;动物戴镜实验,实验组家兔角膜组织学观察,角膜上皮完整;对照组角膜上皮部分剥脱。结论:多功能保养液对隐形眼镜具有保养、保存和润滑作用,并对角膜上皮细胞有保护功能。

PCR在检测单纯疱疹性角膜炎中的诊断价值

目的应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测技术，对临床可疑为单纯疱疹性角膜炎（ＨＳＫ）进行早期、快速诊断。方法用棉签擦拭病变处角膜上皮细胞，经离心、沉淀、裂解后作模板；选用Ｐｒｏｍｅｇａ公司提供的ＰＣＲ检测人单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）－Ⅰ、Ⅱ试剂盒，设计３条引物，扩增片段分别为４６９ｂｐ和３９１ｂｐ，采用聚合酶链反应检测技术，检测其单纯疱疹病毒特异性ＤＮＡ片段。结果观察组共扩增３２例，３６眼，阳性率为９３．７５％，对照组扩增２８例２８眼，阳性率仅为２．８％。结论ＰＣＲ检测单纯疱疹病毒性角膜炎快速、简便。

B超和CT漏诊的脉络膜恶性黑色素瘤1例

Ｂ超和ＣＴ漏诊的脉络膜恶性黑色素瘤１例马吉献张廷钅戊于纯智（第四军医大学西京医院眼科西安７１００３８）关键词Ｂ超ＣＴ脉络膜黑色素瘤中图号Ｒ７７９．６５脉络膜黑色素瘤为葡萄膜中最常见的恶性肿瘤，多发于（４０６０）岁，估计每１００００只眼病中有２６例［１...

Caspase-3在柔红霉素诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡中作用

目的 探讨天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶(caspase)成员 caspase- 3在柔红霉素诱导的人视网膜色素上皮 (RPE)细胞凋亡中的变化 .方法 原代培养的人 RPE细胞经 2 0 0μg· L- 1 柔红霉素诱导 8,2 4和 36 h后 ,按照 caspase- 3荧光检测试剂盒说明处理细胞 ,再通过荧光比色法间接检测细胞碎片中 caspase- 3的活性 .结果 正常 caspase- 3的活性为(0 .0 94± 0 .0 0 5 ) nmol AFC,8h后增加为 (0 .44 6± 0 .0 2 9)nm ol AFC,2 4h后为 (0 .75 4± 0 .0 5 6 ) nmol AFC,36 h又下降到 (0 .486± 0 .0 33) nmol AFC,但都高于正常水平 (P<0 .0 1) .加入特异性四肽抑制物 DEVD- CHO1μL 后活性为 (0 .0 40±0 .0 0 3) nm ol AFC,显著低于正常 (P<0 .0 1) .结论 Caspase-3参与了柔红霉素诱导的人视网膜色素上皮细胞的凋亡 ,柔红霉素可使其活性增加 .

结缔组织生长因子在增生性玻璃体视网膜病变增生膜中的表达

目的观察结缔组织生长因子(CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源。方法采用SABC免疫组织化学方法对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜进行CTGF蛋白的检测,并采用免疫荧光双标记技术在阳性表达的增生膜和正常人眼球标本中判定CTGF阳性细胞来源。结果免疫组织化学显示PVR增生膜中阳性细胞形态多是一类胞体为长圆形或多角形,胞浆丰富的上皮样细胞。17例C2-C3级膜中12例阳性,26例D1-D3级膜中19例阳性,其染色反应为阴性"-"、弱阳性"+"、阳性"2+"和强阳性"3+"的分别有5、3、6、3例和7、5、8、6例,总阳性率分别为70.6%和73.1%。统计学分析CTGF阳性表达与膜分级问无相关性(P>0.1)。免疫荧光双标记法显示PVR增生膜中有RPE、巨噬细胞、神经胶质细胞,CTGF阳性细胞来源于RPE细胞;正常眼球RPE层不表达CTGF。结论正常眼球RPE层不表达CTGF,PVR形成过程中RPE细胞在TGF-β1等生长因子的刺激下,CTGF表达上调,表明CTGF参与了PVR增生膜的形成和发展。

缺氧对人视网膜色素上皮细胞增生和VEGF表达的影响

目的 观察缺氧对培养的人视网膜色素上皮 (retinalpigmentepithelial,RPE)细胞增生和血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响。 方法将培养的人RPE细胞接种于 2 4孔板 ,分别放入正常和缺氧环境中培养 ,于 1、2、3、4、5d后用四甲基偶氮唑蓝 [3 ( 4 ,5 dimethylthiazole 2yl) 2 ,5 diphenyltetrazoliumbromide ,MTT]比色法检测RPE细胞的增生 ,于 6、12、2 4h后用免疫组织化学法检测RPE细胞对VEGF的表达 ,经计算机图像处理 ,定量分析。结果 缺氧组的MTT实验吸光度 (A值 )均高于正常组 (P <0 .0 1) ;抗VEGF抗体染色 ,缺氧组明显强于正常组 (P <0 .0 5 )。结论缺氧可促进RPE细胞的增生及其对VEGF的表达 。

内皮素-1在裂孔性视网膜脱离玻璃体液中的含量测定

目的 检测内皮素 1(ET 1)在裂孔性视网膜脱离 (RRD)不同病期玻璃体液中的水平。方法 2 0例RRD患者采取血液和玻璃体液 ,玻璃体液分为视网膜下液 (PVRA/B级 ) ,玻璃体液 (PVRC/D级 )各 10例 ;10例尸眼取玻璃体液 ,10例正常人取血液 ,10例玻璃体积血 (VH)患者取血液和玻璃体液 ;用放射免疫测定的方法检测其质量浓度。用单因素方差分析统计其意义。结果 玻璃体标本中除正常对照 10例、VH的 3例和PVR C/D级的 3例外均检测出ET 1质量浓度。血浆各组间除正常对照组与PVRC/D组、PVRA/B和PVR C/D组外均有显著性差异 (P <0 0 1)。玻璃体各组间除正常对照组与VH组、VH与PVRC/D组外均有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 ET 1在视网膜脱离早期玻璃体内质量浓度较高 ,而在眼内增殖的晚期则下降 。

实验性视网膜脱离的病理改变及细胞增生

目的:探讨实验性视网膜脱离的病理变化和细胞增生。方法:成年白化病兔32眼在间接检眼镜直视下,先抽取玻璃体液0.5mL软化眼球,用50nm玻璃微管在下方6:00赤道部部位刺入视网膜造成裂孔并注射生理盐水0.5mL于视网膜下间隙。术后0.5,1,3,6,24h;3,7d和14d摘除眼球作组织学观察并以免疫组织化学的方法检测视网膜下细胞增生。结果:32只兔眼术后均发生视网膜脱离,视网膜脱离范围3:00～9:00(髓腺下方视网膜均脱离)。自发性复位的时间在3～14d,组织学切片显示,3d可见视网膜色素上皮细胞积聚团,7dRPE细胞增生肥大呈巨噬细胞样改变,14dRPE多层化改变,并见巨噬细胞样RPE来源于单层的RPE,游离RPE层后,吸附于脱离的光感受器细胞外节;3d增生细胞核抗原即表达阳性,增生细胞表达角蛋白阳性。结论:在此模型中,RPE细胞表现出细胞增生,巨噬细胞样细胞也来源于RPE。

兔眼出血性视网膜脱离后的视网膜组织病理学观察

目的:研究出血性视网膜脱离(hemorrhagicretinaldetachment,HRD)后的视网膜组织病理学改变。方法:健康青紫蓝兔18只,从16只动物的32眼中随机选出16眼作为实验组,另16眼作为对照组,另2只动物4眼作为正常对照组。采用视网膜下注入自体抗凝血0.2mL(肝素钠浓度2.5kU/L)或含肝素钠(2.5kU/L)的生理盐水0.2mL的方法建立模型。手术后1h,1,3,7,10,14,28d取眼球,进行组织病理学观察。结果:RD组早期出现光感受器内外节脱落、变短,外核层水肿,3d时基本均已自行复位,14d时光感受器层仍有结构轻度紊乱,部分内外核层区略薄,部分细胞水肿,28d时与正常对照组光镜下未见明显区别。HRD组术后早期以光感受器内外节断裂缺失为主,继而出现外核层及内核层细胞水肿、细胞间隙变大、空泡样变性、并可见核固缩、核碎裂,至14d时光感受器大部分消失,结构紊乱,内外核层及网状层不规则,结构紊乱,空泡样变性,可见大量核固缩、核碎裂,28d时视网膜仍未自行复位。结论:组织病理学观察发现由于血液成分的机械损伤、可能的毒性作用,HRD对视网膜的损伤是涉及视网膜全层的严重的不可逆损害。

内皮素与平滑肌肌动蛋白在视网膜增殖膜中的表达

AIM To discuss the expression of endotheline and alpha smooth muscle actin in periretinal membrane of proliferative vitreoretinopathy (PVR). METHODS 14 periretinal membranes (PCM) obtained from 14 cases of PVR withretinal detachment (RD) undergoing vitretomy were used to examine the expression of endotheline 1 (ET 1) and α SMA by immunohistochemical detection. RESULTS The reactions of ET 1 were observed in the cells and extracellular matrix (ECM) in the various grades of the PRMs and darken at the rim of the PCM, in which some of cytonucleus became the shape of fusiform and/or slimer and longer. While α SMA was expressed in the centre and verge of various grades the PCM, and the positive cells were parallel to the contractive orientation of the PCM. CONCLUSION Both ET 1 and α SMA could be expressed in the PCM, the cells in the PRMs may express ET and secret it to ECM and deliver effects on the contractive cells that express α SMA.

肾上腺素致兔浆液性脉络膜视网膜病变的实验研究

目的:通过对兔脉络膜上腔注射肾上腺素诱发浆液性视网膜脱离,探讨交感-肾上腺髓质系统在中心性浆液性脉络膜视网膜病变(centralserouschori-oretinopathy,CSC)发病中的作用。方法:将肾上腺素溶液从有色兔1眼的脉络膜上腔注入,于注射后1h及1,2,3,6,10d对其双眼行眼底彩色照相、荧光素眼底血管造影(fundusfluoresceinangiography,FFA)、吲哚青绿血管造影(indocyaninegreenangiography,ICGA)及组织病理学检查。结果:注射后1h,ICGA见区域性脉络膜缺血及其周围扩张的脉络膜血管,FFA可见视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium,RPE)剧烈荧光渗漏。光学显微镜镜下可见神经感觉层与RPE间有浆液积聚,光感受器外节排列紊乱。注射后2～10d,神经感觉层下积液逐渐减少至消失,RPE渗漏减少,脉络膜缺血区域减小至消失,RPE脱色素,光感受器外节仍然轻度紊乱。结论:肾上腺素可导致脉络膜静脉及毛细血管淤血并继发视网膜神经感觉层浆液性脱离,说明因应激所致的交感-肾上腺髓质系统活动增加可能是CSC发生的根本原因。