Ramos免疫组织化学新技术的特异性研究

Ｒａｍｏｓ免疫组织化学新技术的特异性研究马大烈郑青渝黄玲魏建丽作者单位：第二军医大学长海医院病理科，上海２００４３３建立一种快速简便、特异敏感的免疫组化技术，不仅能提高工作效率，利于快速病理诊断，而且对该技术的规范化和标准化具有重要意义。为此，本文利...

快速免疫组织化学标记技术——微波PAP法及其应用

随着微波学技术的广泛开展,其应用范围日趋广泛,现已逐步应用于医学和生物学。已有资料表明,微波技术对组织病理制片及染色都有重要意义,它不仅具有快速固定、脱水和染色等功能,而且可获得较佳的效果。本研究利用微波辐射加速抗原抗体相结合原理,

微波脱水组织的免疫组化研究

组织标本微波脱水、透明和浸蜡是近来发展起来的新技术。它具有快速、简便,保持良好的组织细胞形态结构等特点,对临床病理快速诊断具有重要意义。然而,在脱水过程中微波辐射对细胞内抗原的保存及免疫活性的影响尚缺乏详细的研究。本文选用20种单克隆及多克隆抗体对微波脱水的石蜡包埋组织进行了免疫组化研究,并与常规脱水法比较,以探讨微波辐射对组织细胞内抗原的影响,为该技术在免疫组化中的应用提供科学依据。

微波Envision免疫组织化学标记的特异性和敏感性研究

本文应用新建立的快速微波－Ｅｎｖｉｓｉｏｎ两步法免疫组织化学技术，分别对福尔马林固定和石蜡包埋切片的良恶性肿瘤进行免疫组织化学标记，观察该法的敏感性和特异性。所有２３种抗原均获得强阳性、低背景。整个程序在１８分钟内完成。结果表明：该法是一种特异性强、敏感性高、背景染色轻、快速和简便的新方法，可用于常规病理诊断。

微波在免疫组织化学技术中的应用

微波辐射在病理制片和免疫组化标记技术中的应用已日益受到人们的高度重视和青睐。它对组织细胞具有快速固定、脱水、浸蜡及染色功能,并可获得良好的制片效果。在免疫组化方面,微波能加速抗原抗体的结合,在一定条件下不破坏抗原抗体的免疫活性,对细胞无损害作用。

胃肠道间质瘤的病理诊断和预后

胃肠道间质瘤(GIST)是胃肠道最常见的间叶源性肿瘤,GIST中c-kit基因功能获得性突变的发现和基因靶向治疗药物格列卫(STI-571)的问世,使GIST的相关研究已成为热点．近年的研究认为GIST是发生于胃肠道的CD117阳性,或者存在c-kit/PDGFRA基因突变,由梭形或／和上皮样细胞构成的间叶源性肿瘤．其起源于比Cajal细胞更原始、向Cajal细胞分化的间叶干细胞．根据目前相关基因学研究可将GIST分为3大类:c-kit基因突变型、PDGFRA基因突变型和野生型GIST．肿瘤的生物学行为从良性到显著恶性不等,准确判断肿瘤预后仍有困难．多数研究显示,肿瘤的预后与其发生部位、大小、核分裂数密切相关,肿瘤的免疫表型、基因改变以及手术方式等因素对其预后判断也有一定的参考价值,但有待进一步细化研究．

微波组织脱水、透明和浸蜡的实验研究

传统的病理制片技术常因组织脱水不彻底和标本处理时间过长而影响制片质量和及时作出病理诊断。长期以来,人们一直寻求一种新方法以提高组织脱水质最和缩短脱水周期。作者将微波应用于常规组织脱水、透明和浸蜡过程,并对其组织切片光镜、组织化学和免疫组织化学作出评价,探讨这一技术任常规病理中的实用价值。 1 材料和方法 1.1 材料 所有组织系本科常规活检新鲜标本,包括正常组织:皮肤、阑尾、子宫壁、乳腺、甲状腺、脾脏和血管等;肿瘤标本:子宫平滑肌瘤。

EnVision与特异性抗体的一步法免疫组织化学标记

探讨 En Vision与特异性抗体复合一步法免疫组织化学标记的可行性及其应用效果 ,筛选适合用于该法的特异性抗体。利用辣根过氧化物酶标记的第二抗体 (En Vision)分别与 72种单克隆和多克隆特异性抗体混合配制成即用型试剂 ,将两步标记法变为快速微波一步法 ,并对 2 10 0余例各种良性和恶性肿瘤的免疫组化标记结果进行观察和分析。结果显示绝大部分特异性抗体的特异性和敏感性与标准 En Vision法相似 ,其中 46种特异性抗体结果稳定 ,重复性佳 ;14种特异性抗体稳定性欠佳 ,但临用前新配制效果仍较理想 ;12种不理想 ,不主张用于此法。结果表明 En Vision与特异性抗体复合免疫组化一步法是一种有效、快速、简便的免疫组化染色技术 ,适用于临床病理快速免疫组化诊断 ,但对所用的特异性抗体应注意选择。

快速微波ABC法免疫组织化学技术的研究

随着免疫组织化学方法学的进展,其敏感性和特异性已得到显著提高。然而,目前常用的方法既费时又增加了非特异背景染色和脱片机会。近年来,有资料表明,微波辐社在免疫组化技术中的应用不仅克服了上述缺点,而且可获得令人满意的染色效果。作者将微波与ABC(Avidinbiotin complex)法相结合,应用多种单克隆及多克隆机体对不同类型的良恶性肿瘤进行了免疫组化标记,并与常规ABC法进行比较,以探讨该法的特异性、稳定性和实用价值。

EnV ision快速微波复合免疫组化标记技术

ＥＰＯＳ法是一种简便、特异的一步法免疫组织化学新技术［１，２］，但其价格昂贵尚不能广泛推广。为此，我们选用了２０余种特异性抗体与酶标记第二抗体（ＥｎＶｉｓｉｏｎ）复合物混合使用，变两步法为一步法，并将微波技术引入其中，建立一种快速简便，经济实用的一步...

Ram os免疫组织化学技术检测冰冻组织良恶性病变的诊断价值

目的： 探讨Ｒａｍ ｏｓ免疫组织化学技术在冰冻快速病理诊断中的应用价值。方法： 应用Ｒａｍ ｏｓ免疫组织化学技术对１００ 例冰冻活检组织进行免疫组化标记。结果：Ｒａｍ ｏｓ法在冰冻活检组织中有较好的抗原定位及较强的阳性信号，整个检测过程可在１０ ｍ ｉｎ 内完成。结论：Ｒａｍ ｏｓ免疫组织化学技术可应用于冰冻活检诊断，并可能成为其重要的辅助手段。

Ramos免疫组织化学技术的敏感性研究

观察快速微波一步法（Ｒａｍｏｓ法）免疫组织化学技术的敏感性。选用１５种辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的特异性抗体（ＥＰＯＳ），对５９例相应的恶性肿瘤组织进行快速微波免疫组织化学一步法标记。结果显示５８例为阳性（９８．３％），其中弱阳性４例，中度阳性和强阳性为５４例。结果表明，Ｒａｍｏｓ法具有敏感性高、特异性强、快速而简便等特点。

原发性网膜、肠系膜间质瘤的临床病理及免疫组织化学研究

为探讨网膜、肠系膜间质瘤临床病理、免疫组织化学特征 ,对 8例网膜、肠系膜间质瘤作了临床病理形态学观察和免疫组织化学分析 ,而且所有肿瘤均获得随访资料。结果表明 ,肿瘤为单发结节 ,体积大 ,组织学上主要由具有嗜酸性胞浆及核两端存在细胞浆空泡的梭形细胞构成 ,部分肿瘤可见上皮样细胞等平滑肌分化证据。免疫表型特征为 :8例 (10 0 % )肿瘤C kit均为阳性 ,7例 (87 5 % )CD34阳性 ,6例 (75 % )SMA呈局灶性或散在阳性。 2例恶性间质瘤P5 3、PCNA表达阳性 ,良性病例中 1例PCNA低水平表达。结果提示 ,网膜、肠系膜间质瘤有其独立临床病理特征 ,免疫组化C kit、CD34标记物对网膜、肠系膜间质瘤具有重要意义。

胃肠道间质瘤组织中PDGFRα和C-kit基因突变和蛋白表达的关系

目的:检测胃肠道间质瘤(GIST)中PDGFRα和C-kit基因突变及其蛋白表达的关系及在肿瘤形成中的作用.方法:采用单链象多态性聚合酶链式反应(PCR-SSCP),免疫组化和蛋白印迹(Western blot)方法,检测GIST 52例中PDGFRα和C-kit基因突变及蛋白表达情况.结果:GIST 52例中PDGFRα基因突变5例(9.6%),多见于梭形细胞型的胃源性GIST,C-kit基因突变28例(53.8%),多发生于小肠,并且这两种基因突变互相独立;PDGFRα蛋白表达率100%,C-kit蛋白的表达率为94.2%,突变的5例GIST PDGFRα强于C-kit突变的GIST,正常胃肠道组织和神经鞘瘤:突变与C-kit蛋白表达之间没有显著相关性(P=0.5332),而突变与PDGFRα蛋白表达之间呈显著相关性(P<0.0001).结论:GIST中PDGFRα和C-kit突变在部分GIST肿瘤发生过程中发挥了重要作用;突变位点与起源部位和组织学类型有关;大多GIST中蛋白表达与其基因突变关系密切.

原始神经外胚层肿瘤(PNET)1例光镜、免疫组化和电镜观察及文献复习

目的：研究原始性神经外胚层肿瘤（ＰＮＥＴ）的特征。方法：采用光镜、电镜和免疫组化对１例颈部原始性神经外胚层肿瘤（ＰＮＥＴ）进行观察。结果：肿瘤组织由小圆形细胞构成，肿瘤细胞胞膜示ＭＩＣ２强阳性，肿瘤细胞胞浆内含有微管及神经内分泌颗粒。结论：ＰＮＥＴ是一种极度恶性的软组织小圆形细胞肿瘤，它的诊断必须依靠免疫组化及电镜。

十二指肠间质瘤的临床病理及免疫组织化学研究

目的 :研究十二指肠间质瘤临床病理学特点和免疫组织化学表达特征。方法 :对 18例十二指肠间质瘤作了临床病理形态学观察和免疫组织化学分析。结果 :18例肿瘤良性 3例 ,恶性 15例 ,基本细胞类型为梭形细胞 ,1例肿瘤细胞外基质内可见丝团样纤维。免疫表型特征为 :C kit 18例 (10 0 % )胞质强阳性表达 ;CD347例 (38 9% )阳性 ;S 10 0蛋白 9例 (5 0 % )呈局灶性或散在阳性 ,其中包括 2例良性 ,7例恶性 ;SMA仅 1例阳性。结论 :十二指肠间质瘤恶性发生率较高 ,细胞类型以梭形细胞为主。C kit因其敏感性高、特异性强成为十二指肠间质瘤的可靠标记物 ,但不能作为良恶性判断指标 ,CD34阳性表达率低 ;神经化生率较高 ,平滑肌方向分化率低。

TTF-1和p63在NSCLC组织中的表达及临床意义

背景与目的TTF-1和p63近年被发现在肺癌中有高表达,并可能与肺癌的发生、发展相关。本文旨在研究TTF-1和p63在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,并探讨其临床意义。方法收集长海医院2008年原发性NSCLC组织标本404例和良性肺疾患(benign pulmonary disease,BPD)组织标本28例,采集病例相关的临床病理资料。采用免疫组化EnVision两步法分别检测TTF-1和p63蛋白在NSCLC中的表达并对其结果进行分析。结果TTF-1和p63蛋白在NSCLC中阳性表达率分别为51.7%(209/404)和37.9%(153/404),而在BPD对照组病灶均为阴性表达。TTF-1蛋白在女性、不吸烟及无症状者升高明显(P<0.05),主要表达于肺腺癌(191/227),其诊断敏感性和特异性分别达84.1%和89.8%,阳性表达率随着腺癌分化程度的增加而增加(P<0.001)。p63蛋白阳性表达多见于男性、吸烟人群(P<0.001),对肺鳞癌的诊断敏感性高达95.5%,特异性为98.8%。p63阳性表达与鳞癌的分化程度正相关(P=0.008),与临床分期呈负相关(P=0.002),但与其他因素无关。Logistic多因素分析显示,病人吸烟史及肿瘤病理类型为影响TTF-1、p63表达的因素。两者联合检测,TTF-1(+)/p63(-)表型腺癌占93.1%,TTF-1(-)/p63(+)表型鳞癌占98.6%,TTF-1与p63的阳性表达呈负相关(r=-0.757,P<0.001)。结论NSCLC中TTF-1、p63的表达与病人吸烟史及肿瘤病理类型密切相关,二者分别是肺腺癌、鳞癌有效的生物学标志物,其联合应用有利于NSCLC的诊断及鉴别。