COX-2在人膀胱移行细胞癌中的表达

目的:检测在人膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinoma of bladder,BTCC)组织和正常膀胱组织中COX-2 mRNA和COX-2蛋白的表达,探讨COX-2在人BTCC中发生发展的作用。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术检测人BTCC和正常膀胱组织中COX-2 mRNA和COX-2蛋白的表达,并行统计分析。结果:RT-PCR检测13例新鲜BTCC组织COX-2mRNA均阳性表达,7例正常膀胱粘膜中无阳性表达,两者差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组织化学研究结果与RT-PCR相似,COX-2蛋白主要集中在肿瘤细胞胞浆内,阳性表达率为55.74%,正常膀胱粘膜中没有表达。结论:COX-2 mRNA和蛋白在人BTCC组织中表达增高,COX-2蛋白的表达强度与肿瘤的分级和分期有关,表达强度随肿瘤恶性程度的增加而增加,说明COX-2可能在BTCC的发生发展中起着重要作用。

经直肠实时超声在精囊镜手术中的应用

目的:总结实施精囊镜手术采用的3种不同进镜途径,探讨经直肠实时超声引导下精囊镜手术的可靠性和有效性。方法:回顾性分析自2013年8月至2015年12月实施的精囊镜手术共90例,进镜途径为直接经射精管口、直接经前列腺小囊及经直肠实时超声引导下经前列腺小囊3种方式,进镜后对精囊疾病进行治疗,分别随访其治疗效果,比较3种进镜方式的成功率及并发症。结果:90例患者手术时间为25~75 min,平均时间42.3 min,手术的总成功率为96.67%(87/90)。直接经射精管口(包括异位开口)途径进入精囊30例,60例在正常解剖位置未找到射精管开口,采用经前列腺小囊途径进入精囊37例,上述途径均失败后,采用经直肠实时超声引导下进入精囊20例,3例患者精囊镜手术失败。92.06%(58/63)无精子症患者术中精囊液查见精子,77.78%(49/63)术后1周精液常规见精子。15例血精及12例精囊炎患者术后随访均治愈。术后随访20例患者出现水样精液,睾丸附睾炎3例,无逆行射精、尿失禁及直肠损伤等并发症。结论:经射精管口途径和经前列腺小囊途径为实施精囊镜手术的常规手术方法;而经直肠实时超声引导下经前列腺小囊途径能显著提高精囊镜检查成功率,避免术中对前列腺和直肠的损伤。

不同剂量卡介苗膀胱灌注预防浅表性膀胱癌复发的效果

目的小剂量（40mg）卡介苗（BCG）膀胱灌注与常规剂量（120mg）膀胱灌注比较，评价其预防浅表性膀胱癌术后复发的疗效及其对并发症发生率的影响。方法随机将150例浅表性膀胱癌患者术后均分为三组。1组：常规剂量灌注组（BCG120mg）；2组：半剂量灌注组（BCG60mg）；3组：小剂量灌注组（BCG40mg）。术后1周开始BCG＋生理盐水50mL膀胱内灌注，每周1次，6次后每月1次，术后每3个月行尿细胞学检查、膀胱镜活检等随访监测，比较各组间膀胱癌的复发率及灌注后并发症的发生率。结果随访12—30个月，平均20个月，1、2、3组膀胱癌的术后复发率分别为15．2％、14．3％、18．0％，2,3组分别与1组比较，差异无统计学意义（X2vs1^2=0．02，P〉0．05；（X3m1^2=0．13，P〉0．05）。1,2、3组膀胱灌注卡介苗后的并发症发生率分别为22％、10％、6％，3组的发生率显著低于1组（X^2=4．07，P〈0．05）。结论小剂量卡介苗膀胱灌注预防浅表性膀胱癌术后复发的效果等同于常规剂量，而灌注后并发症发生率显著减少，有较高临床应用价值。

CXCR2在膀胱癌干细胞增殖、凋亡及侵袭转移中的作用及机制

目的探讨趋化因子受体2(CXCR2)在膀胱癌干细胞增殖、凋亡及侵袭转移中的作用及机制。方法取膀胱癌肿瘤组织,培养成悬浮肿瘤细胞球,用流式细胞仪筛选出CD44+膀胱癌干细胞。采用Western blotting法检测干细胞标志基因Oct4、Sox2蛋白表达,并检测CXCR2蛋白表达。培养膀胱癌干细胞,将其分为sh-CXCR2组和转染对照组,sh-CXCR2组加入慢病毒转染试剂polybrene与CXCR2敲减慢病毒,转染对照组加入慢病毒转染试剂polybrene与对照scramble。转染72 h后,采用MTS法检测两组细胞增殖率,软琼脂克隆实验观察细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Transwell小室转移实验和Boyden侵袭实验观察细胞转移和侵袭能力,Western blotting法检测两组细胞中凋亡相关蛋白FOXO1A、Bcl-2以及侵袭转移相关蛋白MMP-2、MMP-9的相对表达量。结果流式细胞仪分选出CD44+细胞占全部细胞的2.37%,CD44+细胞中Oct4、Sox2、CXCR2蛋白表达水平高于CD44-细胞(P均<0.05)。与转染对照组比较,sh-CXCR2组细胞增殖率降低,克隆球形成数量减少,细胞凋亡率升高,侵袭和转移实验的穿膜细胞数量减少,细胞中FOXO1A、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白表达降低(P均<0.05)。结论CXCR2在膀胱癌干细胞中高表达,抑制其表达可以降低膀胱癌干细胞的增殖、侵袭、转移能力,促进细胞凋亡;其机制可能是通过作用于凋亡相关蛋白FOXO1A、Bcl-2和侵袭转移相关蛋白MMP-2、MMP-9实现的。

不同保留肾单位术式治疗局限性肾癌临床效果的对比研究

目的:对比经腹腹腔镜、腹膜后腹腔镜和开放手术3种保留肾单位手术方式治疗局限性肾癌的临床效果。方法:回顾分析67例局限性肾癌患者的临床资料。根据术式分为3组,A组为经腹腹腔镜保留肾单位肿瘤切除组(22例);B组为腹膜后腹腔镜手术组(21例);C组为开放手术组(24例)。对比3组患者手术时间、肾脏热缺血时间、术中出血量、住院时间、术后复发、转移情况,并进行统计学分析。结果:所有手术均获成功,病理检查示透明细胞癌63例,颗粒细胞癌4例,均位于肾包膜内,切缘均阴性。3组手术时间分别为(118.7±27.9)min、(110.8±26.5)min、(106.4±25.5)min,差异无统计学意义(P>0.05)。肾脏热缺血时间分别为(24.2±13.1)min、(23.6±12.9)min、(14.2±4.5)min;术中出血量分别为(125.4±42.0)ml、(116.5±37.3)ml、(254.6±128.5)ml;住院时间分别为(11.2±3.0)d、(10.1±1.8)d、(16.2±3.2)d。以上3项C组与A、B组相比,差异有统计学意义(P<0.05),A、B两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。术后随访8～60个月,B组局部复发1例,C组单发肺转移1例,均再次手术治愈;3组相比差异无统计学意义(P>0.0167)。结论:经腹腔及腹膜后径路行腹腔镜保留肾单位手术治疗局限性肾癌患者创伤小、康复快,临床效果与开放手术相当,可替代开放手术。

PKRP围手术期血糖、钠、氯、钾和红细胞比容的变化

目的探讨经尿道等离子体双极前列腺电切术(PKRP)围手术期血糖、钠(Na+)、氯(Cl-)、钾(K+)和红细胞比容(HCT)的变化。方法选取177例良性前列腺增生(BPH)患者,90例行PKRP,87例行经尿道前列腺电切术(TURP)作为对照,分别在术前1 d(T1)、手术开始20 min(T2)、手术完毕即刻(T3)、术后4 h(T4)抽静脉血进行血糖、Na+、Cl-、K+和HCT检测。结果在PKRP围手术期中,患者血糖升高,血HCT降低(P<0.01),而血Na+、Cl-、K+无明显变化。与PKRP组相比,TURP组患者血糖升高,Na+、Cl-降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论PKRP术对BPH患者围手术期血糖、Na+、Cl-、K+和HCT指标干扰小,能减少心血管事件的发生和预防经尿道前列腺电切综合症(TURS)的发生,为治疗BPH安全的手术方法。

GM-CSF增强HPV16DNA疫苗免疫效果的研究

目的 :探讨GM CSF增强HPV16E6cDNA疫苗免疫效应的作用。方法 :①将C5 7BL 6小鼠 18只分为 1、2、33个组。DNA免疫前 ,每只小鼠胫骨前肌注射 0 .2 5 %的布比卡因 10 0 μl,2 4h后 ,1组注射pcDNA3.1为对照组 ;2组注射pcDNA3.1E6c ;3组注射pcDNA3.1E6c +GM CSF ,2周后加强免疫 1次 ;②加强免疫 2周后 ,取小鼠脾脏及血清进行免疫功能测定。结果 :①T细胞增殖实验结果 :3 H TdR掺入率 :1组为6 736 ,2组为 15 732 ,3组为 2 6 95 9,2组比 1组提高了 133.5 % ,3组比 1组提高了 2 78.7%、比 2组提高了71.4 % ,经t检验表明 ,3组间的两两比较差异均有统计学意义 ,P <0 .0 1;②E6CTL表位合成肽特异性刺激后IFN γ的产量 :1组无IFN γ产生 ,2组为 6 2 4 .8,3组为 832 .9,3组比 2组提高了 33.3% ,经t检验表明 ,两组间差异有统计学意义 ,P <0 .0 1;③特异性抗体的产生 :1组为 0 .0 4 2 33,2组为 0 .4 5 75 ,3组为 0 .812 5 ,2组是1组的 9.8倍 ,3组是 1组的 18.2倍 ,3组比 2组提高了 77.6 %。经t检验表明 ,3组间的两两比较差异均有统计学意义 ,P <0 .0 1。结论 :GM CSF可有效的提高HPV16E6cDNA疫苗的细胞和体液免疫效应。

螺旋CT诊断泌尿外科疾病的价值

目的:探讨螺旋CT技术诊断泌尿外科疾病的应用价值。方法:选择各种典型患者19例,其中输尿管上端狭窄4例,输尿管下端狭窄3例,输尿管畸形3例,输尿管肿瘤2例,肾结核3例,膀胱肿瘤2例,肾癌2例,比较螺旋CT与静脉肾盂造影(IVU)、B超等诊断技术诊断各种泌尿系疾病的优缺点。结果:螺旋CT可获得不同层面、不同角度的三维或二维图像,能提供更为直观全面的影像资料,明确病变的大小、部位及其与周围组织的关系。结论:螺旋CT扫描时间短,图像质量好,与IVU、B超相比对泌尿系疾病诊断和治疗方案的设计更具有指导价值。

输尿管硬镜气压弹道碎石术治疗无肾积水或轻度肾积水肾结石

目的:探讨输尿管镜气压弹道碎石术治疗无肾积水或轻度肾积水肾结石的疗效及适应证。方法:采用输尿管硬镜气压弹道碎石术治疗肾结石14例。其中肾盂结石9例,上盏结石4例,中盏结石1例,并与同期21例经体外震波碎石(ESWL)和5例微创经皮肾穿刺气压弹道碎石术(MPCNL)治疗的病例进行比较。结果:经输尿管镜气压弹道碎石治疗一次性碎石率86%(12/14),术后1个月结石清除率100%(14/14),手术时间30￣82min,平均50min;术后住院2￣4d,平均2.8d。无输尿管穿孔、脓肾等并发症。同期采用ESWL治疗21例,平均治疗2￣6次,一次性碎石率19%(4/21),术后1个月结石清除率38%(8/21)。5例采用MPCNL碎石术,碎石成功率40%(2/5)。结论:输尿管硬镜治疗无积水、轻度积水的肾结石安全有效,与ESWL和MPCNL相比,碎石确切,治疗时间短,对肾功能无损伤,并发症少,但须掌握其适应证。

开放手术联合内分泌疗法治疗子宫内膜膀胱异位症

目的:探讨子宫内膜膀胱异位症的临床诊断及治疗。方法:回顾分析3例患者的临床资料,结合文献复习讨论。结果:3例患者均有剖宫产史,1例无任何症状,系在查体中发现。2例出现与月经有关的周期性腹痛及膀胱刺激征(1例表现为尿痛及血尿,1例表现为尿急、尿频)。3例患者行膀胱镜检查均见位于膀胱黏膜下有增大隆起的肿块。2例患者行膀胱部分切除术,1例行膀胱及子宫部分切除术。结论:子宫内膜膀胱异位症起病隐匿,临床症状不典型,不易确诊,应引起泌尿科医师的高度重视。膀胱镜检查对诊断此病最有价值。正确的手术治疗配合术前、术后的药物治疗能治愈此病。提高对本病的认识是诊断和治疗的关键。

经尿道前列腺电切术

经尿道前列腺电切术(TURP)一直被公认为治疗前列腺增生症(BPH)的金标准,虽然近年来经尿道前列腺切除的新技术不断问世,TURP仍不失为一种比较彻底的治疗方法,各种新法尚不能完全替代之.

前列腺癌PC-3多西紫杉醇耐药细胞株的蛋白组学分析

目的:比较前列腺癌PC-3细胞株对多西紫杉醇(docetaxel)耐药前后的蛋白质差异性表达,了解前列腺癌PC-3细胞株耐药性产生机制。方法:利用逐渐加量的方式培养前列腺癌PC-3多西紫杉醇耐药细胞株,利用双向荧光差异凝胶电泳(DIGE)定量筛选PC-3细胞敏感株与耐药株的差异蛋白,并用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF/TOF-MS)对差异位点蛋白进行成分鉴定。结果:利用DIGE结合MALDI-TOF/TOF-MS质谱技术分析,PC-3细胞耐药株较敏感株成功分离出49种差异表达蛋白质,29种表达上调,20种表达下调。其中ATP synthase、Galectin-1等参与肿瘤血管的生成,Calreticulin、CathepsinD、Coflin-1蛋白参与肿瘤的转移;78 kDa glucose-regulated protein(GRP78)、Microtubule-associated protein-6等参与肿瘤的耐药性调节。结论:人前列腺癌PC-3细胞株多西紫杉醇耐药前后存在蛋白质的差异性表达,为进一步发现前列腺癌转移及耐药性的分子机制以及晚期激素非依赖性前列腺癌的靶向药物治疗提供实验依据。

NBI辅助钬激光与TURBt治疗非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌的前瞻性随机对照研究

目的 比较窄谱光成像（NBI）辅助钬激光与经尿道膀胱肿瘤切除术（TURBt）治疗非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌（NMIBC）的1年复发风险,评价NBI辅助钬激光治疗NMIBC的临床应用价值.方法 自2013年2月至2014年2月,将山东大学第二医院泌尿外科初步诊断为原发或复发膀胱肿瘤的209例患者按照简单随机化对照研究方法,分为NBI辅助钬激光组（NBI-HoLRBt）和经尿道膀胱肿瘤切除组（WLI-TURBt）.NBI-HoLRBt组分别行普通白光（WLI）和NBI膀胱镜检查,然后在WLI下完成所有肿瘤及可疑病变的钬激光切除和活体组织检查,NBI下钬激光切除仅限于只在NBI下发现的病变.切除完成后,再用NBI膀胱镜检查所有切除区域,最终确定是否有肿瘤残留.WLI-TURBt组只用WLI膀胱镜检查,然后在WLI下完成TURBt和活检.术后均行常规灌注治疗.病理学诊断NMIBC患者178例纳入随访,其中NBI-HoLRBt组86例,WLI-TURBt组92例.比较两组在3个月及1年复发率的不同.结果 NBI-HoLRBt组在3个月及1年肿瘤复发率上要明显优于WLI-TURBt组[5.81％ （5/86）比18.48％（17/92）,18.60％ （16/86）比38.04％（35/92）,均P＜0.05].NBI-HoLRBt组在原位复发方面要明显优于WLI-TURBt组[2.33％ （2/86）比14.13％ （13/92）,P＜0.05].结论 NBI辅助钬激光治疗非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌能降低NMIBC 3个月及1年的肿瘤复发率,是治疗NMIBC的一种理想手术方法.

NBI辅助钬激光治疗非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌的肿瘤残留率分析

目的 评价窄谱光成像（NBI）辅助钬激光治疗非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌（NMIBC）的可行性及其对术后肿瘤残留率的影响.方法 2013年5月至2014年12月山东大学第二医院泌尿外科初步诊断为原发性膀胱肿瘤的150例患者按照简单随机化对照研究方法,分为NBI辅助钬激光膀胱肿瘤切除组（NBI-HoLRBt组）和传统的经尿道膀胱肿瘤切除组[普通白光成像（WLI）-TURBt组].NBI-HoLRBt组分别行WLI膀胱镜和NBI膀胱镜检查,然后在WLI下完成所有肿瘤及可疑病变的钬激光切除,NBI下钬激光切除仅限于在NBI下发现的病变;切除完成后,再用NBI膀胱镜检查所有切除区域,最终确定是否有肿瘤残留.WLI-TURBt组只用WLI膀胱镜检查,然后在WLI下完成TURBt.术后均行常规灌注治疗.两组病理证实为NMIBC的124例患者纳入随访,其中NBI-HoLRBt组60例,WLI-TURBt组64例.比较NBI与WLI膀胱镜在肿瘤检出率,尤其是原位癌上的差异.将3个月首次随访或部分高危患者二次切除的复查情况作为首次随访结果,比较两组首次随访的肿瘤残留率,评价NBI-HoLRBt治疗NMIBC的可行性.结果 NBI膀胱镜在肿瘤检出率和原位癌检出率方面,明显高于WLI膀胱镜[94.5％（137/145）比75.8％（110/145）,16/17比10/17,均P＜0.05].首次随访肿瘤残留率在NBI-HoLRBt组为3.3％（2/60）,而WLI-TURBt为17.2％（11/64）（P＜0.05）.结论 NBI-HoLRBt治疗NMIBC操作简单,疗效确切,能显著降低NMIBC的肿瘤残留率,是治疗NMIBC的一种理想的手术方式。

CIP2A在膀胱癌患者肿瘤组织及血清中的表达及其临床意义

目的 探讨蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子（CIP2A）在膀胱癌患者肿瘤组织和血清中的表达及其在膀胱癌发生发展中的作用.方法 对2010年5月至2012年12月山东大学第二医院泌尿外科收治的膀胱癌患者,采用反转录PCR （RT-PCR）检测38例患者的肿瘤组织和12例患者癌旁组织CIP2A mRNA的表达;免疫组化染色法检测99例患者肿瘤组织和12例患者癌旁组织中CIP2A蛋白表达;以ELISA法检测38例膀胱癌患者及40名健康对照者外周血中CIP2A蛋白的含量.结果 RT-PCR显示38例膀胱癌患者中29例（76.32％）检测到CIP2A mRNA的表达,癌旁组织中未有表达（P＜0.05）.免疫组化染色结果显示99例膀胱癌患者中有63例（63.64％）表达了CIP2A蛋白,而癌旁组织中未有表达（P＜0.05）.ELISA检测结果显示,CIP2A在膀胱癌患者外周血中的含量明显高于健康人群（中位数：0.015 2比0.001 8 ng/L,P＜0.05）.结论 CIP2A在膀胱癌患者的组织及血清中高表达,CIP2A可以作为反映膀胱癌生物学行为的有效指标.

CIP2A和OPN在膀胱癌中的表达及其意义

目的 探讨蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子（CIP2A）、骨桥蛋白（OPN）在膀胱癌中的表达及其在膀胱癌发生发展中的作用.方法 对2010年5月至2012年12月山东大学第二医院泌尿外科收治的膀胱癌患者,采用反转录PCR （RT-PCR）检测38例患者肿瘤组织和12例患者癌旁正常膀胱组织中CIP2A mRNA、OPN mRNA的表达;免疫组化染色法检测99例患者肿瘤组织和12例患者癌旁正常膀胱组织中CIP2A、OPN蛋白的表达.结果 RT-PCR显示38例膀胱癌患者中29例（76.32％）检测到CIP2A mRNA的表达,35例（92.11％）检测到OPN mRNA的表达,正常膀胱组织中二者均未有表达（均P＜0.05）.免疫组化结果显示99例膀胱癌患者中有63例（63.64％） CIP2A蛋白阳性,84例（84.85％）OPN蛋白阳性;而正常膀胱组织中未检测到CIP2A蛋白,2例OPN蛋白阳性（均P＜0.05）.99例膀胱癌患者中,CIP2A蛋白与OPN蛋白表达两者均阳性的58例（58.59％）,两者均阴性的13例,CIP2A阳性而OPN阴性8例,CIP2A阴性而OPN阳性20例（r=0.300,P＜0.05）.结论 CIP2A、OPN在膀胱癌组织中高表达,CIP2A、OPN可以作为反映膀胱癌生物学行为的有效指标,提示了两者作为诊断标志物联合应用的潜在价值.