pcDNA3.1(+)/caveolin-1真核表达质粒的构建及其在MCF-7乳腺癌细胞株中的表达

目的明确正常组织和人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1的表达情况,构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1表达质粒,并鉴定其表达。方法 RT-PCR法检测9种正常人体组织及人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1基因的扩增情况;Western blotting法检测MCF-7细胞中caveolin-1蛋白的表达情况。设计克隆引物和表达引物,RT-PCR法扩增caveolin-1基因,用EcoRⅠ+XbaⅠ内切酶消化回收PCR产物和质粒pcDNA3.1(+),连接后构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒。挑选pcDNA3.1(+)/caveolin-1转染感受态细菌后的单菌落进行PCR鉴定,阳性菌落培养后提取质粒行酶切鉴定及测序鉴定。瞬时转染MCF-7细胞后Western blotting检测caveolin-1蛋白的表达情况。结果①9种正常组织中均有caveolin-1基因扩增,MCF-7细胞中无caveolin-1基因扩增且无蛋白表达;②pcD-NA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒转染MCF-7细胞后caveolin-1蛋白表达良好。结论成功构建了pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒,瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞后caveolin-1表达稳定。

乳腺区段切除术残端腺体改良缝合与传统术式对比研究

目的:对比研究乳腺区段切除术术中残端腺体改良缝合与传统手术术中全层腺体缝合的区别。方法:收集乳腺良性疾病手术患者共216例,将其随机分为两组。试验组118例乳腺区段切除术术中采用残端腺体改良部分缝合,对照组98例术中采用传统全腺体缝合。对比观察两组患者手术时间、术区甲级愈合率、出血并发症及患者术后6月局部瘢痕满意率。结果:试验组手术时间31.41min较对照组34.48min短,差异有统计学意义,术区甲级愈合率及出血并发症方面比较,差异无统计学意义;术后6月随访试验组术区局部瘢痕满意率94.06%明显高于对照组84.69%,差异具有统计学意义。结论:乳腺区段切除术中残端腺体采用改良部分腺体缝合与传统全腺体缝合相比手术时间短、安全性良好,远期局部瘢痕优于传统手术。

PBL联合MDT模式在乳腺癌临床教学中的应用研究

目的探讨乳腺癌临床教学中应用PBL联合MDT模式的教学效果。方法选取西安交通大学2008及2009级临床医学专业来我院进行乳腺癌临床实习学生共165名,随机按班级分为对照组(传统教学LBL组)和实验组(PBL联合MDT组),分别按照各组教学方式进行乳腺癌临床实习教学,比较二组教学效果及教学满意度的差别。结果 1PBL联合MDT组理论成绩与对照组差异无统计学意义(41.08±3.12 vs 40.58±2.97 P>0.05),但病例综合分析成绩实验组高于对照组,差异有统计学意义(42.32±3.52 vs 40.33±2.88 P<0.01);2调查分析显示PBL联合MDT组学生满意度高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 PBL联合MDT模式在乳腺癌临床教学中效果明显,安全性良好,符合现代乳腺癌诊治理念,值得推广。

乳腺癌患者血清中Six1的检测及临床意义

目的:检测乳腺癌患者及对照组患者血清中Six1的水平,分析临床意义。方法:收集乳腺癌75例、乳腺不典型增生35例、乳腺导管内乳头状瘤32例、乳腺纤维瘤28例及正常人30例,应用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测Six1的水平。结果:乳腺癌患者血清中Six1水平明显高于乳腺不典型增生组、乳腺导管内乳头状瘤组、乳腺纤维瘤组及正常人群组(F=23.57,P<0.01)。乳腺癌患者中Six1的表达水平与年龄无关(P>0.05),而与TNM分期、组织学分级、淋巴结状态及脉管浸润有关,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Six1与乳腺癌发生及侵袭转移相关,可为乳腺癌提供潜在的诊治靶点。

基质中Al_2O_3/SiO_2对高铝矾土-莫来石-碳化硅质浇注料性能的影响

研究了基质中Al2O3/SiO2对高铝矾土-莫来石-碳化硅质浇注料的组成和性能的影响。借助SEM、EDX和XRD分析了浇注料的显微结构及晶相组成。实验结果说明掺入适当比例的氧化铝微粉(α-Al2O3)、亚白刚玉细粉(<0.074mm)和氧化硅微粉,使细粉中Al2O3/SiO2比达到2.74左右,有利于系统中原位合成莫来石的反应生成,能较好的改善浇注料的性能,尤其是力学性能。

利用DSP和CPLD增加数据采集的可扩展性

通过一个具体的例子阐明了利用CPLD实现接口,使得DSP可以通过这个接口将多个外部模拟通道映射到其I/O设备空间进行访问,大大增强了DSP访问外设的能力,提高了整个系统数据采集的速率,同时为外围设备的扩展提供了有效的新途径。

乳腺癌组织中Ezrin和CD44v6的表达及其意义

目的探讨Ezrin及CD44v6与乳腺癌发生发展及浸润转移的关系,研究其在乳腺癌中表达的意义及二者的相关性。方法应用免疫组化SP法测定Ezrin及CD44v6的表达。结果①Ezrin及CD44v6在浸润性导管癌组表达(70.3%和82.8%)均高于导管内癌组(44.4%和50.0%),乳腺癌组表达(64.4%和75.6%)均高乳腺增生组(23.1%和26.9%),差异有统计学意义(P<0.05),而普通导管增生组与不典型增生组比较表达差异无统计学意义(P>0.05);②在浸润性导管癌中,Ezrin及CD44v6表达均与患者年龄无关,与原发肿瘤大小、组织学分级、临床TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05),但Ezrin表达与淋巴结转移数目有关(0.01<P<0.05),CD44v6与淋巴结转移数目无关(P>0.05);③在浸润性导管癌及在腋淋巴结转移阳性组,二者表达呈显著正相关,在导管内癌及腋淋巴结转移阴性组无相关性。结论Ezrin与CD44v6高表达均与乳腺癌发生发展有关,与乳腺癌浸润及腋淋巴结转移关系密切,二者表达呈正相关,联合检测Ezrin与CD44v6有助于综合判断乳腺癌的恶性程度和浸润转移潜能。

乳腺癌中HER-2基因及蛋白的检测和临床应用

目的:在蛋白及基因水平检测乳腺癌中HER-2的表达,比较免疫组化(IHC)及荧光原位杂交(FISH)法检测结果,分析其临床应用。方法:应用免疫组化及荧光原位杂交法测定HER-2蛋白表达及基因扩增。结果:IHC检测HER-2蛋白,77例乳腺浸润性导管癌中,[(-)-(+)]占35.06%,(++)占37.66%,(+++)占27.27%;FISH检测HER-2基因,扩增阳性率为51.95%。IHC强阳性组(+++),FISH阳性率为90.48%,IHC弱阳性组(++),FISH阳性率为68.97%,IHC阴性组[(-)-(+)],FISH阳性率为3.07%,P<0.01,具有显著统计学意义。以HER-2基因扩增为阳性标准,IHC结果(+++)阳性预测值为90.48%,灵敏度为95.00%,特异度为92.86%;(++)阳性预测值为68.97%,灵敏度为95.24%,特异度为74.29%;[(-)-(+)]阴性预测值为96.30%。结论:HER-2蛋白过表达主要是基因扩增所致,IHC强阳性(+++)及IHC阴性[(-)-(+)]可直接指导临床用药,IHC弱阳性(++)需行FISH确定有无基因扩增。

Ezrin在乳腺癌发生发展中的表达及意义

目的:探讨Ezrin在乳腺癌发生、发展中的作用,研究其在乳腺癌中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化SP法测定Ezrin的表达,所有实验数据录入计算机,用SPSS13.0进行统计学分析。结果:Ezrin异常阳性表达率在乳腺普通导管增生、不典型导管增生、导管内癌、浸润性导管癌中分别为21.4%、25.0%、44.4%、70.3%,差异有显著统计学意义(P<0.01)。比较普通导管增生组(21.4%)与不典型增生组(25.0%),差异无统计学意义(P>0.05)。而导管内癌组(44.4%)与浸润性导管癌组(70.3%)间差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺增生组(23.1%)与乳腺癌组(64.6%)比较,差异有显著统计学意义(P<0.01)。在浸润性导管癌中,Ezrin高表达与患者年龄无关(P>0.05),与原发肿瘤大小、组织学分级、临床TNM分期、腋淋巴结转移均有关(P<0.05),同时随着淋巴结转移数目增多,Ezrin异常阳性表达率增高(P<0.05)。结论:Ezrin高表达参与乳腺癌的发生、发展,与原发肿瘤大小、组织学分级、临床TNM分期、腋淋巴结转移等预后指标有关,提示检测Ezrin可作为判定乳腺癌发生、发展及预后的可靠指标。

复方苦参注射液对胃癌SGC-7901细胞侵袭转移能力的影响

目的:研究复方苦参注射液对胃癌SGC-7901细胞侵袭转移能力的影响。方法:体外培养胃癌细胞系SGC-7901,MTT法测定药物对细胞增殖的抑制作用,应用粘附试验、Transwell趋化运动和Matrigel侵袭实验,研究复方苦参注射液及其不同浓度下对SGC-7901细胞的粘附、运动以及侵袭能力的影响。结果:复方苦参注射液浓度在0.25、0.5、1.0、1.5 mg/ml时均有一定的抑制胃癌SGC-7901细胞增殖的作用,且呈明显的量效和时效关系。复方苦参注射液不同浓度处理SGC-7901细胞后,体外粘附、侵袭和运动能力呈剂量依赖性下降。经复方苦参注射液(1.5 mg/ml)作用后SGC-7901细胞CD44V6蛋白表达减弱,胞浆棕黄色颗粒减少。结论:复方苦参注射液可以抑制胃癌细胞生长,降低细胞粘附、侵袭和运动能力,其机制可能与抑制CD44V6蛋白表达有关。

半枝莲含药血清对小鼠肝癌细胞生长的抑制和诱导凋亡作用

目的:探讨中药半枝莲提取物(ESB)对小鼠肝癌细胞生长的抑制和诱导凋亡作用。方法:体外培养小鼠H22肝癌细胞,以ESB高、中、低剂量含药血清培养液作用于H22细胞,并设立空白血清及5-氟尿嘧啶组。应用MTT法检测药物对细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258染色,荧光显微镜下观察细胞凋亡;流式细胞术检测肿瘤细胞周期及细胞凋亡情况。结果:ESB高、中剂量含药血清组有一定的抑制H22肝癌细胞增殖的作用,且呈明显的时效关系。荧光显微镜下可见部分细胞呈典型凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示:细胞周期各时相中,ESB高、中、剂量含药血清组S期细胞所占的比例明显减少,G1期细胞增多,有明显的诱导凋亡作用。其中空白对照、ESB低、中、高剂量组、5-氟尿嘧啶组H22细胞凋亡率分别为0.51%、1.07%、3.15%、7.83%、11.26%。结论:ESB含药血清不仅可直接抑制小鼠H22肝癌细胞生长,而且可有效诱导细胞凋亡。

半枝莲提取物对H22肝癌荷瘤小鼠化疗的增效减毒作用

目的:探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbata extract,ESB)在荷瘤小鼠化疗中的增效减毒作用。方法:将接种H22肝癌细胞的实体瘤和腹水瘤小鼠各分为模型组、ESB高剂量组、ESB低剂量组、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组、5-FU+ESB高剂量组、5-FU+ESB低剂量组,另设正常对照组,连续给药10d。观察荷瘤小鼠抑瘤率、生命延长率和毒性反应,测小鼠瘤质量、体质量、胸腺指数和脾指数;各组小鼠采血计白细胞数,检测其腹腔巨噬细胞吞噬功能。结果:5-FU+ESB组体质量增加量明显高于5-FU单药组,而且厌食、腹胀及消瘦等毒性反应明显减轻。与模型组相比,5-FU+ESB高剂量与5-FU+ESB低剂量组生存时间明显延长,生命延长率分别为61.46%和23.59%。高剂量ESB、5-FU、5-FU+低剂量ESB和5-FU+高剂量ESB均可明显抑制荷瘤小鼠移植瘤的生长,其抑瘤率分别为36.98%、42.26%、52.45%和65.28%,高剂量ESB与5-FU合用可显著增加荷瘤小鼠移植瘤抑瘤率(P<0.05)。高剂量ESB能明显增加小鼠胸腺指数和脾指数,且5-FU+高剂量ESB与5-FU+低剂量ESB均可改善化疗导致的免疫器官萎缩。5-FU组白细胞数明显下降,5-FU+ESB组白细胞数有回升趋势。高、低剂量ESB与5-FU配伍均可明显改善5-FU所致小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能降低,与单用5-FU组相比较,吞噬率分别提高78.55%和43.97%,吞噬指数分别提高81.63%和44.90%。结论:ESB能显著增强5-FU对小鼠H22移植瘤的抑制作用,减轻毒性反应,延长生存时间,改善荷瘤小鼠的免疫功能,具有一定的增效减毒作用。

半枝莲含药血清对肝癌H22细胞凋亡及线粒体膜电位的影响

目的:探讨中药半枝莲提取物(Scutellaria Barbata extract,ESB)含药血清对肝癌H22细胞凋亡率及线粒体膜电位的影响。方法:体外培养小鼠H22肝癌细胞,以ESB高、中、低剂量含药血清培养液作用于H22细胞,并设立空白血清及5-氟尿嘧啶(fluorouracil,5-Fu)组(阳性对照组)。应用四甲基偶氮唑盐法检测药物对细胞增殖的抑制作用;透射电镜下观察肿瘤细胞的超微结构变化;碘化丙啶标记,流式细胞术检测肿瘤细胞周期及细胞凋亡情况;采用荧光探针罗丹明123负载,激光扫描共聚焦显微镜下观察H22细胞的荧光强度,分析H22细胞线粒体膜电位的大小。结果:ESB含药血清有一定的抑制H22细胞增殖的作用,高、中剂量组96 h抑制率分别为(47.5±6.4)%和(36.3±4.5)%。透射电镜下可见部分细胞呈典型凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示,ESB中、高剂量组有明显的诱导凋亡作用,其凋亡率分别为(3.15±1.12)%和(7.83±2.25)%,与空白组相比差异有统计学意义(P<0.01)。空白对照组、5-Fu组和ESB低、中、高剂量,H22细胞线粒体膜电位分别为(245.45±67.37)、(127.42±41.35)和(213.68±65.52)、(186.34±56.37)、(142.65±39.44),各组线粒体膜电位与细胞凋亡率呈负相关(r=-0.826,P<0.01)。结论:ESB含药血清可有效诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与降低肿瘤细胞线粒体膜电位有关。

超声引导下真空辅助微创旋切系统乳腺肿块切除的临床研究

目的:探讨超声引导下采用真空辅助微创旋切系统(麦默通,Mammotome BiopsySystem)微创切除乳腺肿块的可行性。方法:回顾性分析麦默通微创旋切治疗的206例患者的临床资料,并密切随访术后情况。结果:手术成功率100%,无1例转为开放手术。206例患者总计成功切除295个乳腺肿块,其中良性肿瘤98.98%(292/295),恶性肿瘤1.02%(3/295)。术后7.12%(21/295)出现近期并发症,主要为局部血肿和皮肤瘀斑;随访3～60月,良性肿瘤复发率为0%(0/292),1.36%(4/295)出现轻度皮肤凹陷。结论:超声引导下真空辅助微创旋切系统微创切除乳腺良性肿瘤安全有效,美容效果良好。

Celecoxib对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨选择性环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂Celecoxib对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法用不同浓度(10、20、40μmol/L)的Celecoxib处理MCF-7细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Celecoxib对MCF-7细胞增殖的影响;流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡;RT-PCR法检测COX-2基因表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测前列腺素E2(PGE2)释放水平。结果Celecoxib对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性;Celecoxib可下调MCF-7细胞COX-2 mRNA表达。流式细胞仪结果显示:细胞周期各时相中,Celecoxib各浓度组G0/G1期阻滞,S期细胞所占的比例明显减少,有明显的诱导凋亡作用。Celecoxib可明显抑制MCF-7细胞PGE2释放水平。结论Celecoxib可有效抑制乳腺癌细胞增殖,并诱导凋亡。其机制可能与COX-2表达下调、PGE2水平下降有关。

感染性休克患者早期容量复苏达标后应用不同液体管理策略对左心室舒张功能的影响

目的 观察并探讨感染性休克患者早期容量复苏后应用不同液体管理策略对左心室舒张功能的影响。方法 采用前瞻性研究方法，选择2014-06～2016-06本院重症医学科（ICU）收治的感染性休克患者56例，对入选对象均实施早期液体复苏，复苏目标实现后随机分为治疗组和对照组各28例，治疗组实施限制性液体管理策略，对照组给予开放性液体管理。观察两组患者各时间段液体累积净平衡量。应用床旁超声监测患者入ICU 6 h、第3天及第7天二尖瓣舒张早期峰流速与二尖瓣环舒张早期运动速度比值（E/e＇）等左心室舒张功能指标，同时观察肌钙蛋白I（cTnI）及N末端脑钠肽前体（NT-proBNP）等心肌损伤标记物变化。结果 两组患者于转入ICU 0～6 h内均为液体正平衡。入ICU期间治疗组患者液体净平衡量明显低于对照组（P〈0.05）。单纯左室舒张功能障碍发生率为39.3%，高于收缩功能障碍（23.2%）等其他类型的心功能不全。入ICU 第3天及第7天治疗组E/e＇及cTnI较对照组明显下降，第7天治疗组NT-proBNP较对照组明显下降（P〈0.05）。与入ICU 6 h比较，两组患者于第3天E/e＇、cTnI及NT-proBNP均明显升高（P〈0.05）。与第3天比较，治疗组于第7天E/e＇、cTnI及NT-proBNP明显下降（P〈0.05）；而对照组E/e＇、cTnI下降不明显，NT-proBNP较第3天有所升高（P〉0.05）。结论 感染性休克患者广泛存在左心室舒张功能障碍，通过实施限制性液体管理策略可明显改善感染性休克患者左心室舒张功能，减轻心肌损伤和心肌抑制，对预后改善作用明显。

胃癌根治术后养正消积胶囊联合ZELOX方案化疗对患者生存质量及免疫功能的影响

目的:观察胃癌根治术后患者化疗同时联合养正消积胶囊对生存质量及免疫功能的影响。方法:将80例胃癌术后的患者随机分为2组,治疗组40例,在化疗的同时给予口服养正消积胶囊,对照组40例单纯进行化疗,观察两组消化道反应、白细胞减少、化疗完成率、焦虑抑郁、KPS评分及CD4/CD8的水平。结果:治疗组消化道反应率为20.0%,对照组消化道反应率为37.5%,两组间比较有统计学意义(P<0.05);治疗组白细胞减少率为12.5%,对照组白细胞减少率为25.0%,两组间比较有统计学意义(P<0.01);治疗组化疗完成率为95.0%,对照组化疗完成率为75.0%,两组间比较有统计学意义(P<0.01);治疗组焦虑/抑郁率为12.5%,对照组为25.0%,两组间比较有统计学意义(P<0.01);治疗组KPS评分≥60分的比例为87.5%,对照组为70.0%,两组间比较有统计学意义(P<0.01);治疗组CD4/CD8显著高于对照组,有统计学意义(P<0.01)。结论:胃癌术后化疗联合中药治疗,可减轻患者化疗毒副反应,提高生存质量及免疫功能。

半枝莲提取物对DEN诱发大鼠肝癌的抑制作用

目的:探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbateextracts,ESB)对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱发大鼠肝癌形成的抑制作用。方法:采用低剂量DEN间断给药诱发大鼠肝癌模型。60只清洁级雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组,模型组,ESB高、低剂量组,每组15只。实验16周后停止给药,实验第18周处死所有大鼠,观察各组大鼠肝表面癌结节数、大鼠体质量、肝质量、肝/体质量比,比较各组大鼠体质量的改变,检测血清肝功指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU),并进行肝脏病理组织学检查。结果:造模各组大鼠的ALT、AST、TBIL、ALP、γ-GT、AFU均显著升高(P<0.05),ESB治疗可以减轻肝脏损害。与肝癌模型组比较,ESB各剂量组血清各项肝功指标水平显著下降。病理组织学显示,ESB各剂量组肝脏表面癌结节数较肝癌模型组明显减少,且癌细胞分化程度高。结论:ESB对大鼠实验性肝癌形成具有一定的抑制作用,并能改善肝功能的各项指标。

TE方案与TEC方案在乳腺癌新辅助化疗中的疗效比较

目的:比较TE与TEC方案在乳腺癌新辅助化疗中的近期疗效及毒副反应。方法:83例Ⅱ～Ⅲ期期乳腺癌患者随机分为两组,分别接受TE和TEC方案化疗。21d为1周期。评价两组的近期疗效和毒副反应。结果:TE组与TEC组有效率分别为78.60%(33/42)、75.6%(31/41),两者无显著差异。TECⅢ组～Ⅳ度白细胞减少发生率、粒细胞缺乏性发热发生率均较TE组高。结论:TE与TEC方案在乳腺癌新辅助化疗中的有效率相似,TE方案骨髓抑制较轻,值得临床广泛推广。

废镁铬砖加入量对镁质浇注料性能的影响

将回转窑烧成带废弃直接结合镁铬砖经过处理后,制成废镁铬砖再生料,用它替代镁质浇注料中的镁砂原料。文章研究了废镁铬砖的加入量对镁质浇注料性能的影响。结果表明:经过一定工艺处理后的废镁铬砖满足掺入要求,并且随着废砖加入量的增加,试样的烘干、高温和中温耐压强度、抗折强度、体积密度均逐渐增大。实验证明加入量为37%时,其性能指标接近对照试样,并对高温烧后试样进行了SEM及XRD分析。