氯霉素滴眼液中羟苯乙酯和硫柳汞含量的测定

目的建立测定氯霉素滴眼液中常用抑菌剂羟苯乙酯、硫柳汞的HPLC含量测定方法。方法羟苯乙酯采用DiamonsilC18色谱柱;流动相为0.1%庚烷磺酸钠溶液(0.1%庚烷磺酸钠溶液500mL与二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL,混匀)-乙腈(75∶25);流速:1.0mL·min-1;检测波长为272nm;柱温30℃;硫柳汞采用AgilentEclipseXDB-C18色谱柱;流动相:0.02mol·L-1乙酸铵-甲醇(70∶30);流速:1.0mL·min-1;检测波长为240nm,柱温20℃。结果羟苯乙酯在0.60～300μg·mL-1范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率在98.4%～99.9%之间,硫柳汞在0.50～500μg·mL-1范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系(r=0.99999),平均回收率在97.65%～98.89%之间,RSD<0.5%。结论通过对市售不同生产单位的氯霉素滴眼液中羟苯乙酯、硫柳汞含量测定,证明方法灵敏、准确,专属性好,适用于检测氯霉素滴眼液中两种常用抑菌剂羟苯乙酯、硫柳汞的含量。

麦红吸浆虫蜕皮激素受体(EcR)基因的克隆与表达分析

为了研究蜕皮激素受体(EcR)在麦红吸浆虫Sitodiplosis mosellana(Géhin)滞育活动中的作用,利用RT-PCR和RACE技术克隆得到了麦红吸浆虫蜕皮激素受体基因cDNA全长,并通过Real-time quantitative PCR研究了其表达情况。该cDNA全长序列被命名为SmEcR(GenBank登录号:KC491135),其开放阅读框长1386bp,编码461个氨基酸残基。其蛋白预测分子量52.90kD,理论等电点6.24。该蛋白与其他已报道的昆虫EcR蛋白具有很高的同源性,其中与迟眼蕈蚊Bradysia coprophila中相应蛋白的氨基酸序列一致性高达92%。SmEcR在麦红吸浆虫不同滞育时期和不同虫态中均有表达,且在不同滞育时期、不同虫态中的表达量差异很大。在滞育不同时期以11月表达量最高,12月表达量最低;在不同虫态以麦穗幼虫中的表达量较低,而成虫中的表达水平很高。本研究为进一步明确SmEcR在麦红吸浆虫滞育调控中的作用奠定了基础。

苏云金芽孢杆菌杀虫机理及害虫对其抗性机制的研究进展

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白具有高度专一性,其只对靶标害虫有效,对天敌等其他昆虫无害,转Bt基因植物和Bt杀虫剂是目前世界上产量最大、应用最广泛的生物防治技术。通过对Bt的发现和分类、Bt的结构与功能、Bt毒蛋白的杀虫机理、昆虫对Bt的抗性机制及昆虫体内Bt受体蛋白与抗性的关系等研究现状的论述与分析,对Bt作物害虫抗性治理策略和前景进行了展望。

蔬菜蚜虫抗药性现状及抗性治理策略

蚜虫是为害蔬菜作物的一类重要害虫,如不防治会给蔬菜生产造成重大经济损失。长期以来主要依靠使用农药防治蔬菜蚜虫,但由于化学农药的不合理使用,蔬菜蚜虫对有机磷、拟除虫菊酯、氨基甲酸酯、新烟碱等多种类型的杀虫药剂均产生了不同程度的抗性。本文对常见的蔬菜蚜虫的抗药性现状、抗药性机理以及治理策略进行了论述,以期为该类害虫的可持续控制提供参考。

基于转录组测序技术分析吡虫啉或氟啶虫胺腈对麦二叉蚜细胞色素P450基因表达的影响

为了筛选出麦二叉蚜Schizaphis graminum参与吡虫啉或氟啶虫胺腈代谢调节的细胞色素P450(P450)基因,采用浸渍法,用吡虫啉或氟啶虫胺腈处理麦二叉蚜24 h后,通过构建转录组测序文库,并进行RNA-seq测序,筛选出差异性表达的P450基因,并进行实时荧光定量PCR(qPCR)验证。结果表明:用吡虫啉处理麦二叉蚜后,有19个P450基因上调表达,15个P450基因下调表达;用氟啶虫胺腈处理麦二叉蚜后,有18个P450基因上调表达,15个P450基因下调表达。运用qPCR验证了吡虫啉对12个P450基因的诱导表达,其结果与DGE测序文库显示的结果基本一致。这些结果可为深入研究麦二叉蚜P450对蚍虫啉和氟啶虫胺腈的解毒代谢作用提供依据。

市级药检所应用《药品质量应急检验排查基本模式》的思考

目的探讨基层药检所如何结合实际,为应用《药品质量应急检验排查基本模式》(以下简称《排查模式》)提供技术支撑。方法列举了我所应用《排查模式》处理应急检验的两个例子,总结了应急检验的实战经验。结果制订了《汕头市药品检验所应急检验实验室保障工作条例(暂行)》。结论基层药检所应用《排查模式》必须简化程序、强化演练、探索建立适合自己的应急体系。

常见“凉茶”中毒案例的分析及预防

探讨收集的常见"凉茶"中毒案例及药害信息,对其进行研究分析并汇总归类,强调"是药三分毒",规范了有毒中药的管理,强化并方便广大人民群众对常见有毒中草药(或植株)的识别及合理用药。药监部门应加强用药安全的宣传和监督,使易发生中毒的中草药得到有效的监控。

湖北四个地区草地贪夜蛾田间种群的杀虫剂敏感性及靶标突变检测

【目的】测定湖北草地贪夜蛾田间种群对4种杀虫剂的敏感性,并对杀虫剂靶标Ace-1,VGSC和RyR的基因型和突变频率进行检测,以明确湖北草地贪夜蛾田间种群药剂敏感性现状,进而指导田间科学用药。【方法】采集湖北黄冈、武穴、咸宁和荆州4个地区玉米田中的草地贪夜蛾幼虫,采用浸叶法测定其对氯虫苯甲酰胺、乙基多杀菌素、茚虫威和甲维盐4种杀虫剂的敏感性;提取4个种群80头个体的单头总RNA合成cDNA,利用特异性引物进行PCR扩增,获得目的基因片段,根据序列比对和测序峰图分析,确定Ace-1,VGSC和RyR的基因型和靶标突变位点的突变频率。【结果】生测结果表明,湖北这4个田间种群的草地贪夜蛾幼虫对氯虫苯甲酰胺、乙基多杀菌素、茚虫威和甲维盐均比较敏感,敏感性从高到低依次为:甲维盐>乙基多杀菌素>氯虫苯甲酰胺>茚虫威。分子检测结果表明,湖北草地贪夜蛾这4个田间种群Ace-1基因在A201S, G227A和F290V位点均存在抗性杂合突变,且在F290V位点检测到抗性纯合突变,而VGSC和RyR两个基因均没有检测到靶标位点突变。【结论】湖北草地贪夜蛾4个田间种群对氯虫苯甲酰胺、乙基多杀菌素、茚虫威和甲维盐这4种杀虫剂均较敏感,但这4个草地贪夜蛾田间种群均携带有对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性基因,存在潜在的抗性风险,田间防治建议少用或不用该类杀虫剂,同时需要进一步加强抗性监测工作。

变了又变 推陈出新——寿光菜三变成“金身”

日前,正当西葫芦,甘蓝都是论“堆”卖的时候,人们在山东省寿光市绿色食品蔬菜示范基地看到的却是截然不同的景象:颜色金黄、状如香蕉的西葫芦和形如一串大葡萄的抱子甘蓝,每千克分别卖到6元和10元。基地的张主任介绍,寿光蔬菜之所以长盛不衰,关键是能不断推陈出新,在创新中求生存、谋发展,而技术创新,贯穿着寿光蔬菜发展的全过程。目前,寿光蔬菜面积已发展到4万公顷,年产优质蔬菜30亿千克,收入28亿元。 变季节——人无我有。1989年,寿光市三元朱村党支部书记王乐义带领党员、干部对传统的土温室进行了五项改造,在全国率先实验成功了冬暖式蔬菜大棚。

低剂量啶虫脒和双丙环虫酯对棉蚜茧蜂寄生功能的影响

为明确低剂量化学杀虫剂对寄生性天敌昆虫的影响,以棉蚜茧蜂为对象,测定了常用杀虫剂啶虫脒和新型杀虫剂双丙环虫酯在LC_(5)和LC_(30)剂量下对棉蚜茧蜂寄生功能反应的影响。结果表明:啶虫脒和双丙环虫酯对棉蚜的LC_(50)值分别为442.6和1.67 mg/L,对棉蚜茧蜂的LD_(50)值分别为0.007和20.58μg/cm^(2)。经低剂量的2种杀虫剂处理后,棉蚜茧蜂寄生量与棉蚜密度呈负加速曲线,随棉蚜密度的增加棉蚜茧蜂寄生量逐渐增大,最终趋于平缓。模型拟合结果表明,寄生功能反应模型的基本结构仍然属于Holling-Ⅱ模型,但模型的各项参数均发生了改变。在棉蚜密度为20、40和100头/皿时,除LC_(5)剂量双丙环虫酯处理棉蚜(间接处理)组棉蚜茧蜂的寄生量与对照组无显著差异外,其他各药剂处理组的寄生量均显著低于对照组,其中LD_(30)剂量啶虫脒直接处理棉蚜茧蜂对其寄生能力的抑制作用最强。经低剂量药剂间接处理后,棉蚜茧蜂处理每头棉蚜所用的时间与对照相比均显著延长,且药剂处理组的最大日寄生量均显著低于对照组。此外,低剂量的啶虫脒和双丙环虫酯均能显著抑制棉蚜茧蜂的寻找效应。研究表明,低剂量啶虫脒和双丙环虫酯对棉蚜茧蜂的寄生作用存在负面影响,这对保护和利用天敌以及指导农药科学合理使用均具有重要参考意义。

褐飞虱对环氧虫啶的抗性选育和遗传方式

为明确褐飞虱Nilaparvata lugens对环氧虫啶的抗性遗传方式,进而指导田间合理用药。经过34代选育获得抗环氧虫啶褐飞虱品系(CYC-R),其抗性水平相较于敏感品系(CYC-S)提高了102.42倍。抗性遗传方式分析结果表明,环氧虫啶对CYC-R和CYC-S的正、反交后代(F_(1)RS和F_(1)SR)的毒力无显著性差异,且正、反交后代显性度分别为0.33和0.34,表明褐飞虱对环氧虫啶的抗性为常染色体、不完全显性遗传。自交和回交的后代(F_(2)RS、F_(2)SR和F_(2)BC)经环氧虫啶处理后的实际死亡率与期望值经卡方检验,均差异显著,表明褐飞虱对环氧虫啶的抗性由多基因控制。因此,一旦褐飞虱田间种群对环氧虫啶产生抗性,环氧虫啶的使用寿命将会缩短,抗性治理难度较大,建议采用预防性抗性治理策略。

寿光市重视发展成人教育

寿光市重视发展成人教育任志祥，马康生近年来，山东省寿光南通过上上下下齐努力，基础教育有了突破性发展，率先普及了九年义务教育，高标准通过了国家被委“两基”评估验收，平均每年向大中专院校输送１４００任名新生。虽然基础教育成绩显著，但成人教育发展却相对不足...

7种生物源杀虫剂对草地贪夜蛾的室内毒力研究

为科学、有效防控草地贪夜蛾,应用饲料浸毒法测定了7种生物源杀虫剂对草地贪夜蛾3龄幼虫的室内毒力。结果表明,100亿孢子/mL短稳杆菌悬浮剂、0.3%印楝素乳油、30亿PIB/mL甘蓝夜蛾核型多角体病毒悬浮剂、80亿孢子/mL金龟子绿僵菌油悬浮剂、10亿PIB/mL苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒悬浮剂、32000 IU/mg苏云金杆菌可湿性粉剂和1×10^(7)PIB/mL苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒+2000 IU/μL苏云金杆菌悬浮剂对草地贪夜蛾3龄初幼虫的LC分别为8.82×10^(7)孢子/mL、4.22 mg/L、959.65 PIB/mL、3.55×10^(7)孢子/mL、2.32×10^(7) PIB/mL、2901.63 IU/mL和1.49×10^(5) PIB/mL+29.81 IU/μL。表明30亿PIB/mL甘蓝夜蛾核型多角体病毒悬浮剂、32000 IU/mg苏云金杆菌可湿性粉剂和0.3%印楝素乳油对草地贪夜蛾具有较高的生物活性,该研究结果对草地贪夜蛾高效低风险防控药剂筛选具有重要意义。

公共卫生监督质量评价模式研究

运用层次分析法对公共卫生监督质量进行评价，试图从确定卫生监督指标体系，去建立卫生监督的质量评价模式。该法是以卫生监督的内容与质量要求，确立各项考核指标与等级划分，用一致性指标（Ｃ，Ｉ）检验对比等级是否符合逻辑，使评价因素逻辑判断定量化。结合实例验证。

温、湿度及处理时间对麦红吸浆虫老熟幼虫脱穗的影响

为研究温、湿度对麦红吸浆虫老熟幼虫脱穗的影响,在室内条件下,以小麦黄熟期麦红吸浆虫老熟幼虫尚未脱穗的被害麦穗为材料,测定不同温、湿度及处理时间对麦红吸浆虫老熟幼虫脱穗的影响,其中湿度通过PE自封袋加水调节。温度为12～16℃时老熟幼虫脱穗率明显高于其它温度处理,14℃达到峰值24.78%。每袋加水2 mL时脱穗率达39.6%,明显高于其它湿度处理。处理12～36h脱穗率明显增加,处理48h时脱穗率与36h差异不显著。表明在14℃、每袋加水2mL、处理时间为36 h时麦红吸浆虫老熟幼虫最易脱穗活动。

荧光增白剂对Cry1Ac抗感棉铃虫围食膜的影响及增效作用

为了提高Bt的杀虫活性,运用扫描电镜、SDS-PAGE电泳和生物测定技术,研究了荧光增白剂FB28对棉铃虫Cry1Ac抗性和敏感品系围食膜的影响及对Cry1Ac杀虫蛋白的增效作用。结果表明,正常棉铃虫围食膜表面光滑致密,没有空洞和缝隙。用含1%FB28的人工饲料饲喂刚蜕皮的5龄棉铃虫幼虫2 h后,抗感棉铃虫围食膜表面均出现许多空洞,且敏感棉铃虫的空洞明显大于抗性棉铃虫;随着处理时间的延长,围食膜上的空洞逐渐变小,13 h后恢复正常。用1%FB28离体或活体处理抗、感品系棉铃虫,均可造成围食膜蛋白被降解。用1%FB28与Cry1Ac杀虫蛋白混合饲喂抗、感棉铃虫初孵幼虫,可明显提高棉铃虫的死亡率,且对抗性品系的增效作用明显大于敏感品系,对敏感和抗性品系棉铃虫的增效比分别为2.23和9.34;1%FB28还可以明显增加对抗、感品系3龄棉铃虫幼虫的生长抑制作用。

棉蚜对新烟碱类杀虫剂的抗性现状及其治理策略

棉蚜Aphis gossypii Glover是棉花生产中最严重的害虫之一。长期以来防治棉蚜主要依赖于化学杀虫剂,其中新烟碱类杀虫剂扮演着十分重要的角色,但由于其长期、大量的使用,棉蚜已对该类杀虫剂产生了较高水平的抗性,严重影响了对棉蚜的防治效果。抗性机制研究表明,棉蚜对新烟碱类杀虫剂产生抗性的机制主要涉及解毒代谢能力增强和靶标敏感性下降。细胞色素P450、羧酸酯酶、谷胱甘肽S-转移酶、UDP-葡糖基转移酶等解毒酶基因过量表达介导的解毒代谢增强和烟碱型乙酰胆碱受体β1亚基突变引起的靶标敏感性下降是棉蚜对新烟碱类杀虫剂产生抗性的关键。针对我国棉蚜对新烟碱类杀虫剂抗性问题突出的现状,为更好地利用该类药剂防治棉蚜,亟需根据棉蚜抗性机制制定合理的抗性治理策略。本文将从棉蚜对新烟碱类杀虫剂的抗性现状、抗性机制以及抗性治理策略等方面进行综述,以期为抗性棉蚜的科学治理提供参考。

我国甘肃和青海地区麦蚜田间种群对5种杀虫剂的抗性监测

[目的]研究明确甘肃和青海省麦蚜田间种群的抗性水平。[方法]用玻璃管药膜法测定5种杀虫剂对麦蚜的杀虫活性。[结果]采自甘肃省清水县、临夏县、文县的3个禾谷缢管蚜种群对吡虫啉、啶虫脒、抗蚜威、高效氯氰菊酯、氧乐果的抗性倍数介于0.54~1.92倍,均小于2倍,仍处于敏感状态。在采自甘肃省甘谷县、金昌市、民乐县、青海省湟中县的4个麦长管蚜种群中,仅青海省湟中县的麦长管蚜种群对抗蚜威的抗性倍数为3.3倍,处于敏感性下降水平,其余种群对5种杀虫剂的抗性倍数为0.18~2.83倍,均小于3倍,处于敏感水平。[结论]甘肃省和青海省一些地区的麦蚜种群对5种杀虫剂处于敏感状态,这5种杀虫剂可用于这些麦蚜防治。

二化螟响应Bt杀虫蛋白Cry1Ca的小RNA转录组分析

为有效防控二化螟Chilo suppressalis,采用Illumina Solexa二代测序技术对Bt杀虫蛋白Cry1Ca处理后二化螟中肠内的小RNA序列进行测序,并对其差异表达谱进行注释与分析,并用实时荧光定量PCR技术对测序结果进行验证。结果显示,Cry1Ca对二化螟的亚致死量LC30为0.061μg/g。Cry1Ca处理和对照处理后转录组中小RNA分布峰值均为22 nt,被注释的已知小RNA比例很低,分别为7.2%和7.9%。Cry1Ca处理后,二化螟中肠内miRNA、snoRNA、snRNA、rRNA、piRNA数量均少于对照。与对照相比,Cry1Ca处理后二化螟中肠内共有358个小RNA表达上调,747个小RNA表达下调,其中有25个已知miRNA的表达量较高,其中3个已知miRNA表达量显著上调,22个已知miRNA表达量显著下调;在新预测的novel miRNA中,有23个上调表达,43个下调表达。KEGG分析结果显示,Cry1Ca诱导的miRNA影响了丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路,这个通路包含17个靶基因,其中11个靶基因可被多个miRNA调控,每个靶基因可被59~665个miRNA靶向调控,参与靶向调控miRNA的相对表达量变化倍数介于0.01倍~23289倍之间,表明miRNA在调控二化螟防御Bt杀虫蛋白Cry1Ca方面发挥着重要作用。实时荧光定量PCR的结果与测序结果一致,表明测序结果正确。

棉蚜对外源性有毒物质适应的分子机制

害虫为了后代食物的供给,在进化的历史长河中需要扩大其食物来源,那么随着取食寄主植物的增加,植物特有的次生性有毒物质也会一起摄入体内.害虫为了生存首先要进化出强大的解毒代谢体系来克服有毒物质的毒害.害虫扩大食物来源和人类不可避免地产生了竞争食物的冲突,人们会用大量的农药来控制害虫的竞争.害虫采取的是什么机制来应对这些外源性的有毒物质呢?中国农业大学的高希武团队长期以来从事棉蚜对植物次生性代谢产物和杀虫剂适应的机制研究,取得了显著的进展.