基于特征图谱及多成分定量的首乌藤饮片与标准汤剂量值传递规律研究

本文建立首乌藤的含量测定方法和指纹图谱评价方法,研究首乌藤饮片到标准汤剂的量值传递规律。收集全国主产地和道地产地具有代表性的20批首乌藤药材,按《中国药典》2020年版规定制备成首乌藤饮片,并按《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求》制备成首乌藤标准汤剂;采用HPLC建立适用测定含量及指纹图谱方法,以转移率、出膏率及指纹图谱相似度为指标,分析首乌藤饮片到标准汤剂的量值传递规律。结果显示,20批首乌藤标准汤剂出膏率为10.4%~16.1%,均值为12.9%,均位于均值的±30%范围内。除了四川产地的样品外,其余产地首乌藤饮片及其标准汤剂HPLC对照指纹图谱相似度均良好(>0.9),且二者具6个共有峰,并通过对照品指认其中的4个峰分别2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄素甲醚。四个已知成分的转移率分别为26.58%~53.07%(2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)、12.37%~42.84%(大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷)、3.83%~18.71%(大黄素)、0.35%~4.13%(大黄素甲醚)。本文建立了首乌藤饮片及其标准汤剂含量测定方法和指纹图谱方法,阐明了二者之间的化学成分的量值传递规律,为首乌藤水提物及其配方颗粒质量控制提供参考。

基于UPLC特征图谱和含量测定的不同产地筋骨草质量评价

目的:建立筋骨草超高效液相色谱法(UPLC)特征图谱和其中哈巴苷、乙酰哈巴苷的含量测定方法。方法:采用Waters BEH C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-甲醇(4∶1)为流动相A、0.2%磷酸水溶液为流动相B,梯度洗脱,流速为0.30 mL·min^(-1),柱温为30℃,检测波长为202 nm,进样量为2μL,建立筋骨草特征图谱,测定其中哈巴苷、乙酰哈巴苷的含量。结果:17批筋骨草特征图谱有10个共有峰,指认了其中4个成分分别为哈巴苷、乙酰哈巴苷、木犀草素-7-二葡萄糖苷酸、芹菜素-7-二葡萄糖苷酸;17批筋骨草中哈巴苷质量分数为0.33%~0.95%,乙酰哈巴苷质量分数为0.47%~1.93%。结论:建立的UPLC特征图谱和哈巴苷、乙酰哈巴苷含量测定方法可为筋骨草质量评价提供参考。

基于化学计量学的通草水提物三氯甲烷部位 UPLC指纹图谱研究

目的:建立通草水提物三氯甲烷部位UPLC指纹图谱,并结合化学计量学进行分析。方法:采用Waters CORTECS T3(150 mm×2.1 mm,1.6μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱;流速为0.2 mL/min;检测波长为320 nm;柱温为35℃;进样量为3μL。通过聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析对16批通草进行质量评价和差异性分析。结果:建立的通草水提物三氯甲烷部位UPLC指纹图谱共标定17个共有峰;聚类分析和主成分分析结果一致;利用正交偏最小二乘判别分析筛选出7个差异性成分,可作为通草药材质量控制的标志物。结论:该研究建立的通草水提物三氯甲烷部位UPLC指纹图谱可较全面的表征其化学质量特征,指纹图谱的化学计量学分析可为通草质量标准的制定提供依据。

通草的本草考证及药理作用研究

通草[Tetrapanax papyrifer(Hook.)K.Koch]为五加科通脱木属植物,干燥茎髓为入药部位,在临床应用上十分广泛。但通草和其他中药材存在混淆使用的情况,其中木通与通草的混淆使用最为常见。两者名称相似且功效相近,不仅从古时即存在“同名异物”“同物异名”的情况,如今混淆使用的情况依然存在。考虑到药材之间不能相互替代,如今《中华人民共和国药典》也将二者作为不同的药物进行收载,因此本研究梳理二者的历史变迁过程,以正其名,为其辨证使用提供参考,并对经典名方中的“通草”进行分析,论述药方中的“通草”实为何种药材,归纳整理通草的泌乳、利下、抗炎、抗肝毒性、抗艾滋病活性等药理作用。

一测多评法同时测定野生和家种防风药材中4种有效成分的含量

目的:采用一测多评法同时测定防风药材中升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷的含量,为野生和家种防风药材质量评价提供依据。方法:色谱柱为Waters BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱;流速为0.35 mL/min;检测波长为254 nm;柱温为30℃;进样量为1μL。以升麻素苷为内参物,测定升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷的相对校正因子,利用相对校正因子计算含量,建立一测多评法,并将一测多评的计算结果与外标法测定结果进行比较,从而确定一测多评的准确性。同时比较野生和家种防风4种有效成分的含量差异。结果:采用所建立的一测多评法计算的防风药材升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷的含量与外标法计算的含量相对偏差均小于5.0%,野生防风中升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷含量均明显高于家种防风(P<0.05),而升麻素苷在野生与家种中的含量无明显差异(P>0.05)。结论:该一测多评法准确、便捷,能够为防风药材的质量评价提供参考依据。

基于化学计量学和熵权TOPSIS法对不同产地白茅根药材的质量评价

目的:采用UPLC法建立白茅根指纹图谱,测定5个酚酸类成分含量,并进行综合评价。方法:采用Waters CORTECS T3 C_(18)(150 mm×2.1 mm,1.6μm)色谱柱;以甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;建立21批白茅根指纹图谱,并以指纹图谱共有峰峰面积为依据,进行聚类分析(CA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA);对21批白茅根样品中新绿原酸、咖啡酸、绿原酸、隐绿原酸和对羟基肉桂酸的含量进行TOPSIS综合评价。结果:白茅根指纹图谱共确定14个共有峰,CA结果与OPLS-DA结果一致,均可将21批样品分为3类,并筛选出3个VIP值>1的差异性成分。由TOPSIS法分析得出21批白茅根样品中河北产地的质量最优,其次为河南产地。结论:该研究建立的方法能有效分析不同产地白茅根药材质量的差异性,为不同产地白茅根药材的质量评价提供参考。

灵芝饮片标准汤剂质量标准研究

目的建立灵芝标准汤剂的质量标准,为灵芝配方颗粒质量标准的制定提供依据。方法收集16批不同产地灵芝药材,制备16批灵芝饮片标准汤剂,计算出膏率;采用紫外分光光度法和超高效液相色谱法(UPLC)分别测定灵芝标准汤剂中三萜和甾醇类以及灵芝酸A的含量;采用UPLC建立灵芝标准汤剂指纹图谱,计算指纹图谱相似度,并采用UPLC-质谱联用技术对灵芝标准汤剂的指纹峰进行指认。结果16批灵芝标准汤剂出膏率为3.41%~9.61%,三萜及甾醇类含量为2.29%~4.67%,灵芝酸A含量为0.31%~1.84%。灵芝标准汤剂UPLC指纹图谱共有7个指纹峰,经质谱确证,指认出6个指纹峰,分别为灵芝酸C2、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸H、灵芝酸D和灵芝酸F。标准汤剂指纹图谱的相似度为0.963~0.991。结论本研究建立的方法可为灵芝配方颗粒质量标准的制定提供依据。

基于UPLC指纹图谱和多指标成分定量的不同产地白茅根标准汤剂质量评价研究

本研究通过超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱结合多成分定量对不同产地的白茅根标准汤剂的质量进行评价。采用相似度计算、聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对指纹图谱数据进行分析。结果显示,18批白茅根标准汤剂指纹图谱共标识出9个共有指纹峰,指纹图谱相似度在0.920~0.997;HCA将18批样品分为3类,河北产区的样品自成一类,江苏与安徽、河南的样品在分类上存在交叉;PCA结果显示,除江苏外,同一产区白茅根标准汤剂指纹图谱共有峰的差异较小;OPLS-DA筛选出3个差异标志性色谱峰,分别为峰9(对羟基肉桂酸)、峰6和峰5(绿原酸)。对白茅根标准汤剂中绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸和对羟基肉桂酸的含量进行测定,结果显示,4种酚酸的总含量:河北>安徽>江苏>河南,不同产区的样品4种酚酸的总含量差异明显;其中河南产区的样品绿原酸、新绿原酸和隐绿原酸的含量明显低于其他产区,安徽产区的样品对羟基肉桂酸的平均含量最高且比较稳定,江苏产区的样品对羟基肉桂酸和4种酚酸的总含量波动较大。所建立的分析方法稳定可靠,重复性好,为白茅根标准汤剂及其相关制剂的质量评价提供参考。

基于标准汤剂的苍术配方颗粒质量标准研究

目的:建立基于标准汤剂的苍术配方颗粒的质量评价方法。方法:收集14批不同产地的苍术药材,根据技术要求,制备14批苍术标准汤剂及3批配方颗粒,分别以出膏率、绿原酸的含量、转移率及指纹图谱的相似度,对苍术配方颗粒进行质量评价。结果:标准汤剂出膏率均值为32.68%;3批配方颗粒的出膏率分别为27.47%、28.38%、28.13%;标准汤剂中绿原酸的含量均值为0.547mg/g,转移率均值为48.29%;3批配方颗粒中绿原酸的含量分别为0.826mg/g、0.994mg/g、0.809mg/g,转移率分别为32.9%、48.2%、40.9%。标准汤剂和配方颗粒指纹图谱均标识出19个共有峰,通过比对对照品指认出其中两个特征峰分别为绿原酸和苍术素。配方颗粒与标准汤剂对照指纹图谱的相似度分别为0.994、0.994、0.990。结论:3批苍术配方颗粒的质量指标与标准汤剂基本一致,该方法能够为苍术配方颗粒质量标准的制定提供依据。

HPLC指纹图谱结合一测多评的土贝母标准汤剂质量研究

目的采用HPLC法建立土贝母标准汤剂指纹图谱,并采用一测多评法对结构相似的3个有效成分含量进行测定,评价土贝母标准汤剂的质量。方法采用HPLC法建立15批土贝母标准汤剂指纹图谱,色谱柱为Waters XBridge苯基柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱。以共有峰的相对峰面积为依据,进行聚类分析和主成分分析,并采用与指纹图谱相同的方法建立土贝母标准汤剂土贝母苷甲、乙、丙的一测多评法。结果土贝母标准汤剂指纹图谱有14个共有峰,其中峰3为L-色氨酸,峰11为土贝母苷乙,峰12为土贝母苷丙,峰13为土贝母苷甲;聚类分析和主成分分析将15批不同产地的土贝母标准汤剂分为3类;一测多评法通过系统适用性考察,与外标法测定结果无显著差异。结论该方法准确、可靠,专属性良好,可有效评价土贝母标准汤剂的质量。

基于UPLC指纹图谱和多成分定量评价不同产地升麻药材质量

目的 采用超高效液相色谱法(UPLC)建立升麻药材指纹图谱,并同时测定3种有效成分的含量,评价不同产地升麻药材质量的差异。方法 采用UPLC法进行测定,色谱柱为Agilent SB C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,波长为320 nm,柱温为35℃,进样量为1μL;建立15批升麻药材指纹图谱,通过对照品比对并结合质谱分析,对共有峰进行鉴定,并对3种成分的含量进行测定;对15批升麻药材指纹图谱进行相似度评价及主成分分析(principal component analysis,PCA),利用正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)寻找不同产地升麻药材的差异性成分。结果 升麻药材指纹图谱有16个共有峰,指认出其中3个峰,分别为咖啡酸、阿魏酸和异阿魏酸;除辽宁产区的3批样品外,其余12批相似度均大于0.95;PCA将15批升麻药材划分为2类,OPLS-DA法确定7个差异标志物,差异显著性排序,分别为峰7>峰11>峰9>峰8>峰10>咖啡酸>峰4。辽宁产区咖啡酸、阿魏酸和异阿魏酸总含量明显高于其它产地。结论 该方法能有效地分析不同产地升麻药材质量的差异性,为不同产地升麻药材质量的评价提供参考。