基于代谢组学研究XLS对白色念珠菌的代谢变化及抑菌机制

目的:血链球菌提取物XLS是从口腔血链球菌中提取的具有抑菌作用的胞内蛋白,本文通过非靶向代谢组学技术检测分析XLS作用于白色念珠菌所产生的代谢变化,并初步分析其作用机制。方法:(1)非靶向代谢组样本制备:实验组:0.5 mg/mL XLS与白色念珠菌共培养12 h对照组:单纯白色念珠菌培养12 h,每组6个生物学重复。(2)利用非靶向代谢组学技术对两组样本进行代谢变化研究,运用多变量分析[主成分分析(principal components analysis,PCA)和偏最小二乘法判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)]和单变量分析(t检验)比较两组样本之间的差异。结果:PLS-DA和PCA分析结果显示两组样本差异性显著。本研究筛选出160个正离子差异代谢物,其中68个代谢物上调,92个代谢物下调;90个负离子差异代谢物,其中52个代谢物上调,38个代谢物下调。通过京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析发现,富集显著的通路主要包括抗坏血酸与醛酸代谢通路、氨基酸合成、嘌呤嘧啶代谢通路。此外,还发现了一些与氧化应激反应相关的代谢物,与对照组相比,其在实验组均表达上调。结论:(1)XLS对白色念珠菌的氨基酸代谢、脂质代谢、嘌呤嘧啶代谢等过程产生显著影响;(2)XLS可能通过引起白色念珠菌菌体的氧化应激反应导致白色念珠菌细胞的氧化损伤,从而抑制白色念珠菌的生长繁殖。

在校大学生口腔健康状况的调查分析

目的:了解和掌握目前在校大学生的口腔卫生健康状况。方法:随机抽取哈尔滨理工大学19～21岁的648名大学生进行口腔卫生健康检查。结果:222人每天只在早晨刷1次牙,占总受检人数的34.26%、牙石指数为1的受检人数占总受检人数的62.96%、456名大学生患龋,患龋率为70.37%、龋面充填构成比为30.74%。结论:大学生的口腔健康意识和保健知识非常薄弱。

血链球菌细菌素对唾液生物膜中牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌拮抗作用的实验研究

目的:提取血链球菌标准菌株(ATCC10556)细菌素,研究其对唾液生物膜中牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的拮抗作用。方法:通过超声破碎,高速离心,盐析等方法提取血链球菌细菌素;采用二倍稀释法,测定血链球菌细菌素对浮游状态下牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的最小抑制浓度(MIC);在体外建立牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌唾液生物膜模型,利用激光共聚焦扫描电镜观察该生物膜中细菌活性的变化。结果:血链球菌细菌素对浮游状态下的牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的MIC为0.5 g/L;使用血链球菌细菌素作用牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌生物膜,活菌百分比显著下降,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论:血链球菌细菌素对浮游状态下和生物膜中的牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌生长均有显著的抑制作用。

血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌生长曲线及细胞内钙离子浓度的影响

目的：研究血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis P．g）生长曲线的影响。探讨血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌细胞内钙离子浓度的影响。方法：通过低温高速离心，超声破碎等方法提取血链素，使血链素作用P．g，于37℃厌氧培养：采用微量液体对倍稀释法测定血链素对P．g的最小抑菌浓度（MIC）。选用不同浓度的血链素作用P．g，分别于0、4、8、12、16、20、24、48h时测定各组细菌悬液在590nm波长处的A值，并绘制生长曲线。用Fluo-3／AM负载P．g细胞内钙离子，在激光共聚焦显微镜下观察Ca抖荧光强度变化。结果：血链素对P．g有显著抑制作用，其MIC为0．0625g／L。血链素作用后，P．g的生长曲线在8～16h发生显著改变，对数生长期被延迟了8h。血链素作用后，P．g细胞内钙离子浓度显著降低，与对照组相比差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌有明显的抑制作用，在本实验范围内，随着血链素浓度的升高其抑制作用逐渐增强。血链球菌细菌素可导致牙龈卟啉单胞菌细胞膜钙离子通透性增强。

血链球菌胞内蛋白与胞外蛋白对中间普氏菌与牙龈卟啉单胞菌生物膜作用的研究

目的:提取血链球菌胞内蛋白与胞外蛋白,研究两者对中间普氏菌(P.i)与牙龈卟啉单胞菌(P.g)生物膜的作用。方法:通过低温超速离心,有机溶剂萃取法提取血链球菌胞外蛋白;通过超声破碎,硫酸铵盐析,SephadexG-25除盐及透析的方法提取血链球菌胞内蛋白。观察血链球菌胞内蛋白与胞外蛋白对P.i及P.g的作用。观察血链球菌胞内蛋白与胞外蛋白对P.i及P.g混合培养形成的生物膜作用。结果:血链球菌胞内蛋白对混合培养的P.i与P.g的生长有明显抑制作用,其最小抑菌浓度为0.125g/L;血链球菌胞外蛋白对P.i与P.g未见抑菌作用。P.i与P.g混合培养形成的生物膜在血链球菌胞内蛋白作用后,生物膜活性降低,与对照组相比具有显著差异(P<0.05);但在血链球菌胞外蛋白作用后,生物膜活性与对照组相比差异不具有统计学意义。结论:血链球菌胞内蛋白对P.i和P.g及两者混合培养形成的生物膜具有明显抑制作用;而血链球菌胞外蛋白对P.i和P.g及两者混合培养形成的生物膜无抑制作用。

血链球菌细菌素对白色念珠菌生物膜抑制作用的研究

目的:提取血链球菌标准株ATCC10556的有效抗菌物质细菌素,进一步研究血链球菌细菌素对白色念珠菌生物膜的作用机理。方法:通过超声破碎、盐析、sephadex G-25过柱脱盐、透析、浓缩的方法分离血链球菌细菌素,使之作用于白色念珠菌生物膜,并在2h、6h、12h、24h、48h、72h观察白色念珠菌生物膜厚度的变化。结果:24h内白色念珠菌生物膜厚度有明显改变,12h效果最为显著。结论:血链球菌细菌素对白色念株菌生物膜具有显著的抑制作用。

血链球菌细菌素对念珠菌菌体细胞膜通透性及超微结构的影响

目的:探讨血链素的抑菌动力学特点;2)检测3种念珠菌菌体细胞内无机磷和大分子物质泄漏情况;3)观察血链素作用3种念珠菌后,菌体细胞超微结构的变化。方法:采用液体培养抑菌法观察血链素分别对C.a、C.t及C.g的抑菌动力学特点;分别检测血链素对C.a、C.t及C.g菌体细胞内磷外泄量及紫外吸收物质渗透率;利用扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)对血链素作用后的C.a、C.t及C.g菌体细胞超微结构进行观察。结果:血链素对C.a、C.t、C.g两两之间的抑菌动力学特点存在相似性,且血链素对3念珠菌的抑制作用均在24h达高峰。经血链素作用的C.a、C.t及C.g菌体细胞内无机磷及大分子物质发生泄漏。通过SEM观察:血链素对C.a、C.t及C.g作用24h时菌体细胞表面出现凹陷、缺损,菌体呈现不规则形态。通过TEM观察:血链素对C.a作用24h时,菌体细胞皱缩,细胞壁及细胞膜结构分界不清,细胞核消失,胞质不均匀;血链素对C.t作用24h时,菌体出现质壁分离,细胞质固缩,细胞壁及细胞膜连续性破坏或断裂,细胞核溶解;血链素对C.g作用24h时,菌体细胞膜及细胞壁呈现凹坑状缺损,胞核消失。结论:血链素对C.a、C.t及C.g具有相似的抑菌动力学特点。血链素可导致念珠菌菌体细胞膜通透性发生改变。血链素可导致念珠菌菌体细胞的超微结构发生改变。

血链球菌胞内蛋白及膜蛋白分别对热带念珠菌生物膜作用的研究

目的:提取血链球菌标准株ATCC10556的胞内蛋白及膜蛋白,研究血链球菌胞内蛋白及血链球菌膜蛋白对热带念珠菌生物膜的生物学作用。方法:参照Fujimura[1]方法分离血链球菌胞内蛋白有效成分,使之作用于热带念珠菌生物膜,并以激光共聚焦显微镜观察热带念珠菌生物膜厚度的变化。参照碳酸钠梯度离心法[2]提取膜蛋白,观察其对热带念珠菌及其生物膜是否具有抑制作用。结果:在胞内蛋白作用下,24h内热带念珠菌生物膜厚度明显变薄与阴性对照组相比有显著差异,并且12h效果最为显著(P<0.05)。膜蛋白作用下的热带念珠菌生物膜厚度与阴性对照组相比未见明显差异。结论:血链球菌胞内蛋白对热带念珠菌生物膜具有显著的抑制作用。血链球菌膜蛋白对热带念珠菌及其生物膜无抑制作用。

Wistar大鼠牙周炎动物模型口腔菌群及病理观察

本文以Ｗｉｓｔａｒ大鼠为实验对象，以激素＋剥离的方法成功地制造了类似人类牙周炎动物模型。纵观牙周炎全过程，菌群失调贯穿自始至终，菌群失调持续一定时间后才出现病理改变，证明菌群失调是导致牙周炎的因素之一。

Wistar大鼠口腔优势菌的初步检测

本文选取Ｗｉｓｔａｒ大鼠作为实验对象，从微生态学角度初步探索了大鼠口腔菌群的测定技术。文中探讨了大鼠活体取菌方法，初步确立口腔优势菌属，摸索出以纸片法取菌滴种培养基的最佳稀释度及四种口腔优势菌定量检测结果，为开展口腔微生态学的研究提供一定参考。

血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌形貌及力学性质的影响

目的:研究血链球菌细菌素(简称血链素)对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)形貌特征及力学性质的影响。方法:1)复苏、传代并鉴定血链球菌标准菌株ATCC10556、牙龈卟啉单胞菌标准菌株ATCC33277。2)将血链球菌低温高速离心、细胞破碎等方法提取血链素,使之作用于P.g,于37℃厌氧培养48h。3)采用原子力显微镜(AFM)的接触模式,观察血链素作用前后P.g菌体的形貌变化。4)利用AFM测定血链素作用前后P.g的力-距离曲线,并计算黏附力及杨氏模量。结果:1)通过AFM的观察:P.g在血链素的作用下,菌体直径缩小、平均粗糙度及平均峰高度增加(P<0.05)。2)通过AFM的观察:血链素作用后,P.g的黏附力、杨氏模量显著降低(P<0.001)。正常P.g的黏附力平均值为(0.70±0.10)nN、杨氏模量平均值为(5.54±0.16)MPa;经血链素作用后P.g的黏附力平均值为(0.50±0.10)nN、杨氏模量平均值为(3.97±0.64)MPa。结论:1)血链素可引起牙龈卟啉单胞菌形貌特征发生改变。2)血链素可导致牙龈卟啉单胞菌的黏附力及杨氏模量降低。

血链球菌细菌素对白色念珠菌及热带念珠菌菌体形态影响的研究

目的:研究血链球菌细菌素对白色念珠菌(C.a)及热带念珠菌(C.t)的抑制作用及形态学影响。方法:通过低温高速离心,超声破碎等方法提取血链素,使血链素分别作用于单独及混合培养的C.a及C.t,于37℃下80r/min振荡培养。培养12h时,以平板菌落计数法测定不同浓度血链素的抑菌活性;每2h测1次各组菌悬液的A值,并绘制生长曲线,观察血链素对C.a及C.t生长曲线的影响。在血链素对C.a及C.t的作用过程中,利用光学显微镜及扫描电镜对菌体形态进行观察。结果:单独及混合培养的C.a及C.t在1g/L血链素作用后菌落数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血链素作用后,C.a及C.t的生长曲线在6～14h发生显著改变,对数生长期被推迟8h。血链素作用后,C.a及C.t的孢子及菌丝表面出现"盘状凹陷"形态。结论:血链素对单独及混合培养的C.a及C.t具有显著抑制作用。血链素使C.a及C.t的对数生长期推迟。血链素可导致念珠菌C.a及C.t的菌体形态发生改变。

牙周炎病人龈下韦荣球菌的实验观察

目的 探讨牙周炎病人龈下韦荣球菌的变化及牙周炎的细菌因素。方法 采用厌氧培养及活菌计数 ( CFU)的方法检测莲球菌 ( Streptococcus)、韦荣球菌 ( Veillonella)、乳杆菌 ( L actobacillus)及类杆菌( Bacteroids)的含量。结果牙周炎病人龈下莲球菌含量显著低于正常对照组 ( P<0 .0 0 1) ,韦荣球菌、乳杆菌及类杆菌的含量显著高于正常对照组 ( P<0 .0 0 1)。结论 牙周炎病人龈下菌群处于严重失调状态 。

血链球菌细菌素对念珠菌细胞表面疏水性和细胞膜钙离子通透性的影响

目的:研究血链球菌细菌素对单独及混合培养的白色念珠菌(C.a)及热带念珠菌(C.t)细胞表面疏水性的影响。研究血链球菌细菌素对单独及混合培养的白色念珠菌(C.a)及热带念珠菌(C.t)细胞膜钙离子通透性的影响。方法:复苏并传代血链球菌标准株ATCC10556,通过低温高速离心,细胞破碎等方法提取血链素,使其作用于1×106 cfu/mL单独及混合培养的C.a及C.t,于37℃,80r/min振荡培养。1)采用二倍稀释法,测定血链素对C.a及C.t最小抑制浓度(MIC);2)运用微生物黏着碳氢化合物的方法[1],用紫外分光光度计测A值,计算C.a及C.t的疏水率;3)分别向单独及混合培养的C.a及C.t菌悬液中装载钙离子荧光探针(Fluo-3AM),利用激光共聚焦显微镜观察血链素作用后的C.a及C.t细胞内钙离子浓度的变化。结果:血链素对单独培养的C.a及C.t的MIC为0.25g/L;血链素对等量混合培养的C.a及C.t的MIC为0.5g/L。2)血链素作用后,单独及混合培养的C.a及C.t细胞表面疏水率均明显降低,与对照组相比具有显著差异(P<0.05)。在血链素的作用下,单独及混合培养的C.a及C.t的细胞内钙离子浓度均明显降低,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。结论:血链素可以导致白色念珠菌及热带念珠菌细胞表面疏水性降低。血链素可以导致白色念珠菌及热带念珠菌细胞膜钙离子通透性增强。

血链球菌对白色念珠菌临床分离株的抑制作用研究

目的研究在体外培养条件下,血链球菌对白色念珠菌临床分离株的拮抗作用。方法对白色念珠菌临床分离株和血链球菌进行定量混合培养,以白色念珠菌临床株单独培养为实验对照,于培养12、24、36、48、72h取样,血细胞计数板计数并分析血链球菌对白色念珠菌的生长抑制情况。结果在混合培养组中,每个时间点取样的白色念珠菌生长均受到了明显抑制(P<0.05)。结论血链球菌对白色念珠菌临床分离株的生长有拮抗作用。

牙周炎病人牙龈组织PGE_2龈下韦荣菌的相关分析

目的 探讨牙周炎病人牙龈组织 PGE2 的含量及与细菌的关系。方法 采用放射免疫方法测定 PGE2 含量 ,以厌氧培养及活菌计数 (CFU)的方法检测了链球菌及韦荣菌的含量。结果 牙周炎病人牙龈组织 PGE2 的含量显著于健康对照组 ,并与韦菌的量呈显著正相关。结论 PGE2 与牙周炎骨质破坏关系密切 。

散步对老年人心脏功能的影响

本文通过对38名长期散步锻炼及36名未参加锻炼的健康老年人心脏功能的对照分析,发现老年人长期散步使左室射血时间(LVET)延长,射血前期(LPEP)缩短,心率(HR)及平均外周动脉压降低,每搏输出量(SV)、每分输出量(CO)增加,心电图ST—T异常发生率降低,与对照组相比有显著差异(P<0.05)。提示散步的运动量及运动强度虽然较小,但仍可改善心脏功能,是老年人的一种健身良法。

冬泳者心、肺功能10年检测

冬泳者心、肺功能１０年检测黑龙江省佳木斯医学院第一附属医院呼吸内科（１５４００２）任淑兰，李雪丽，韩梅，鲍文华黑龙江省佳木斯市房地局医院马晟利１９８３年至１９９３年，我们采用心阻抗法和肺量计法对我市５５岁（１９９３年）以上业余冬泳者的心、肺功能进行４...

老年人可摘局部义齿基牙就位道方向控制与检测的研究

牙列缺损或缺失是老年人最常见的口腔疾病之一,由于老年人牙列缺损的情况较为复杂,比较常见的如牙周萎缩导致临床牙冠伸长长期导致缺牙,余留牙倾斜,上下牙多间隙交叉缺失等,使各基牙分散,义齿修复时难以获得共同就位道,就位困难或就位后义齿不密合严重影响修复质量。