基于转录组数据挖掘外源褪黑激素影响水貂卵巢发育的分子机制

旨在探究外源褪黑激素(melatonin,MLT)影响水貂卵巢发育的分子机制。本研究随机选取相同饲养条件下、体重相似的200只3月龄健康白色雌性水貂,均分为试验组和对照组。试验组埋植1粒含MLT 18 mg·粒-1的埋植剂,对照组埋植1粒不含MLT的空粒,当水貂处于准备配种期时随机采集试验组和对照组各4只水貂的卵巢,然后采用Trizol法进行总RNA提取,构建cDNA文库,并利用Illumina平台测序后进行生物信息学分析,对差异表达基因进行GO功能分类和KEGG通路注释,寻找MLT调控卵巢发育的相关候选基因和代谢通路。为进一步验证测序数据的可靠性,随机选取6个差异表达基因进行qPCR验证。转录组结果显示,试验组和对照组的SNPs位点均在120000个以上,且均主要出现在基因区,两组的SNP突变类型均为转换型多于颠换型和杂合型;试验组与对照组相比,差异表达基因发生SE事件的数量最多;本试验共获得9631个新基因,其中有1323个、1317个新基因分别注释到TrEMBL和NR数据库,注释比例明显高于其他数据。试验组与对照组相比共发现206个差异表达基因(其中有36个未被注释的基因),69个为上调基因,137个为下调基因;GO功能富集显示,共计7个差异表达基因富集于生殖过程;KEGG通路富集结果显示,共计7个差异表达基因富集于5条与繁殖相关的通路。综合GO功能分类和KEGG通路注释结果分析,共筛选得到4个与MLT影响卵巢发育相关的候选基因,均为上调基因,分别是KRT19、GSTT1、ALAS 1和NR 4A1。本研究通过对MLT埋植和未埋植MLT的准备配种期水貂卵巢进行转录组学分析,挖掘出MLT可能通过调节KRT19、GSTT1、ALAS1、NR 4A1等基因促进卵巢发育,研究结果对水貂的育种工作提供了理论基础。

MLT埋植剂对准备配种期水貂卵巢形态学和显微结构的影响

为探讨褪黑素(melatonin,MLT)埋植剂埋植不同时间对准备配种期水貂卵巢形态学和显微结构的影响,试验随机将75日龄、平均体重为(875±5)g的120只健康雌性白色水貂平均分为A、B、C、D 4组,于7月2日对A、C组水貂颈部皮下埋植MLT埋植剂1粒(含MLT 18 mg),B、D组作为对照组不做任何处理,分别在埋植满98 d(10月8日)的A、B组及埋植满158 d(12月7日)的C、D组宰杀3只水貂并采集卵巢,进行形态学检测和显微结构观察。结果表明:与同期对照组相比,埋植满98 d和158 d,A、C两组水貂卵巢体积均显著增大(P<0.05),次级卵泡直径极显著增大(P<0.01),三级卵泡的直径和卵母细胞直径显著增加(P<0.05),生殖上皮细胞分别提前发育为椭圆状和柱状,三级卵泡颗粒细胞层数增多;与D组相比,A组卵巢长径、宽径、厚径、体积、次级卵泡直径、三级卵泡直径和卵母细胞直径差异不显著(P>0.05)。说明埋植MLT埋植剂满98 d和158 d可促进水貂卵巢发育,埋植满98 d时卵巢可提前发育至158 d的对照组水平。

褪黑素埋植138 d对水貂血清主要生殖激素含量和卵巢发育的影响

为探究褪黑素(MLT)埋植剂对准备配种中期水貂血清主要生殖激素含量和卵巢发育的影响,试验在埋植MLT 138天时,随机选取试验组(埋植MLT 1粒,18 mg/粒)和对照组(不做任何处理)水貂各3只,采集血液测定血清主要生殖激素含量,采集卵巢测量长径、宽径、厚径和重量,计算体积,并制备石蜡切片观察卵巢组织结构。结果表明:与对照组相比,试验组水貂血清促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)含量极显著升高(P≤0.01),促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)和孕酮(progesterone,P4)含量均显著升高(P≤0.05);卵巢表面出现可视卵泡,卵巢长径、宽径、厚径、重量、体积均不同程度增大,其中宽径和体积增加显著(P≤0.05);卵巢皮质中提前出现成熟卵泡,且三级卵泡的数量、直径和卵母细胞直径均显著升高(P≤0.05)。说明埋植MLT埋植剂138 d可使准备配种中期水貂血清GnRH、FSH、LH和P_(4)含量升高,并促进卵巢形态学参数增加和有腔卵泡发育。

PTH 1-34对鹿茸间充质干细胞成骨机制的转录组学分析

PTH 1-34对鹿茸间充质干细胞具有促成骨作用,旨在利用高通量无参转录组测序方法探索PTH 1-34促进鹿茸间充质干细胞成骨的可能机制。选用第3代鹿茸间充质干细胞,按试验要求随机分为3组(对照组、诱导组、PTH 1-34干预组),每组3个重复,诱导组添加成骨诱导液诱导鹿茸间充质干细胞成骨分化,PTH 1-34干预组在诱导组基础上添加10 nmol/L PTH 1-34。培养21 d,采用碱性磷酸酶和茜素红染色的方法对标志物和钙结节进行鉴定,鉴定完毕后,使用TRIzol法进行总RNA提取并采用第二代测序技术(Next-Generation Sequencing),基于Illumina测序平台,对这些文库进行双末端测序。添加浓度为10 mmol/L PTH 1-34进行成骨诱导,可明显增加鹿茸间充质干细胞碱性磷酸酶活性和钙结节的产生量。因与NCBI所发布的鹿科动物基因序列比对效率低于50%,选择了无参转录组测序。通过对差异基因富集分析,共筛选出5737个差异表达基因,其中1877个上调,3860个下调;GO富集分析显示,在生物过程作用下,差异基因的种类主要包括细胞运动、细胞增殖、细胞迁移、骨发育、血管生成和形态发生相关;通过筛选,找到了8个与成骨相关基因:RUNX2、BGN、ALPL、SPARC、OPN、CPNE1、STRN4、VAPB;2个与细胞自噬相关基因:WiPi2、ATG14;4个与血管生成相关基因:UNC5B、SHC1、FLNA、TNFSF15,使用qRT-PCR方法进行验证,结果与测序结果一致;转录因子预测相关性较高的家族为zf-C2H2,并筛选到了成骨转录因子SP7。PTH 1-34可通过上调RUNX2、SP7、BGN、ALPL、SPARC、OPN、CPNE1、STRN4、VAPB的mRNA表达来促进鹿茸间充质干细胞的成骨分化;可能通过抑制血管生成和细胞自噬来调节鹿茸的骨化过程。

东北梅花鹿卵泡发育的显微结构

为揭示雌性东北梅花鹿的生殖机理提供组织依据，利用光学显微镜观察7只成年东北梅花鹿卵巢的组织结构和卵泡的发育过程，同时利用目镜测微尺和显微照相技术分别对60个原始卵泡、60个初级卵泡、25个次级卵泡、34个三级卵泡和3个成熟卵泡及透明带厚度进行测量和拍照。结果表明，东北梅花鹿卵巢组织也是由生殖上皮、白膜、皮质和髓质构成；皮质部在卵巢的外周，但间质腺不发达；髓质位于皮质深层，分布有较多的血管。卵泡在发育过程中，各级卵母细胞和卵泡的直径差异较大，卵泡和卵母细胞的生长呈双向生长；透明带物质出现于3～4层卵泡细胞包围卵母细胞时；卵泡闭锁发生于卵泡生长的各个时期，主要表现为卵母细胞和卵泡细胞的形态变化，有两种形式；三级卵泡的闭锁过程分为早期、中期和后期3个阶段。

鹿的同期发情技术研究进展

针对同期发情技术在家畜和家禽的繁殖中已广泛应用．并已取得很多有成效的结果、但在野生动物特别是鹿的繁殖中、同期发情技术正在研究中的现状．对国内外鹿同期发情技术研究的情况进行了详细论述。结合我国茸鹿同期发情技术研究中存在的问题．提出了在我国茸鹿同期发情技术的研究方向和应用前景。

梅花鹿的同期发情技术

于 2 0 0 0年 9月 9日 ,在吉林松花湖鹿场对 30头东北梅花鹿分两试验群进行了同期发情试验。两试验群分别采用不同的试验药物进行处理 :第一试验群 (共 14头 )采用了 18甲基炔诺酮埋植并配合PMSG、HCG和雌二醇的处理方法 ,其中 18甲基炔诺酮采用了高 (80mg/头 )和低 (6 0mg/头 )两剂量进行了对比试验 ;第二试验群 (共 16头 )采用了PG两次处理同时配合PMSG和HCG的处理方法 ,其中PG也采用高 (6 0 0 μg/头 )、低 (5 0 0 μg/头 )两剂量进行对比试验。通过试验 ,第一试验群中 :18甲基炔诺酮高、低两剂量组的同期发情率分别为 5 7.14 %和 0 ,其中 18甲基炔诺酮高剂量组的双仔率为 4 2 .86 % ,产仔时间也较上一年有明显的缩短 ,平均缩短天数为 2 3d。第二试验群中 :PG高、低两剂量组的第一情期同期发情率分别为 2 5 %和 14 .2 % ,PG低剂量组产仔时间也比上一年缩短了 2 1d。本次试验的两试验群的受胎率均为 10 0 % 。

提高梅花鹿再生茸产量的研究

于１９９０年３月～６月分别在黑龙江省海林县三部落鹿场和吉林省松花湖鹿场进行试验。用止血、提高动物营养和人工降雨增加鹿舍相对湿度的三种方法对梅花鹿再生茸生产生长的影响和潜力进行了研究。研究结果表明：单纯地进行锯茸止血或提高动物营养对再生茸的产量没有明显影响（Ｐ＞０．０５）；在止血和提高动物营养的基础上同时进行人工降雨，可明显增加再生茸的产量１７５±２８ｇ（Ｐ＜０．０１），使锯口愈合时间提前４．６±０．４ｄ（Ｐ＜０．０１）；单纯地增加鹿舍相对湿度、可明显加速再生茸的生长。

休情期银黑狐卵巢形态和卵泡发育的显微结构观察

研究休情期银黑狐卵巢形态和卵泡的显微结构,以揭示银黑狐卵巢发育的一般规律。本试验于2012年12月份采集5只健康一岁龄银黑狐卵巢10枚,用游标卡尺测量其长、宽、厚,用电子天平测量其重量,并对其表面可见卵泡数量进行统计,然后利用光学显微镜对各级卵泡分别观察1~3个,共计原始卵泡30个,初级卵泡20个,次级卵泡15个,三级卵泡12个,成熟卵泡10个,并进行拍照。结果表明：随银黑狐卵巢体积不断增大,其中80%的卵巢重量也随之增大;可见卵泡数量与卵巢体积及重量没有相关性;卵巢由被膜、皮质和髓质构成,髓质位于卵巢内层,分布着较多血管,皮质位于卵巢外层,内有不同发育阶段的卵泡;原始卵泡由卵母细胞和颗粒细胞构成,初级卵泡开始出现透明带物质,到次级卵泡阶段发育完整,三级卵泡出现卵泡腔,卵泡及卵母细胞直径在有腔卵泡阶段比腔前卵泡阶段增长速度快,成熟卵泡的直径及透明带厚度达到最大,各级卵泡均有闭锁现象。

光照对繁殖期水貂体内孕酮及繁殖性能的影响

探讨延长光照对母貂体内孕酮(progesterone,P4)水平和繁殖性能的影响。试验随机选择120只母貂,随机平均分为控光组和对照组,控光组从母貂配种结束开始至约1/2母貂产仔结束期间有规律的延长光照,对照组母貂只接受自然光照;试验自准备配种后期、配种期、妊娠期每隔1 d和产仔后连续3 d分别收集2组母貂的鲜粪,采用酶联免疫法测定粪中P4含量并统计母貂的妊娠时间、胎平均产仔数等指标。结果表明:延长光照前19 d 2组P4在738.2 pmol/L水平波动(P>0.05);施加光照后,控光组P4水平逐渐上升并于第6 d升至峰值1 213.65 pmol/L,较对照组提前2 d(P<0.05);然后P4缓慢下降,至第38 d波动于825.48 pmol/L水平(P<0.05);随后逐渐下降至第49 d两组P4在729.47 pmol/L水平波动(P>0.05)。控光组母貂平均妊娠期47.76 d,胎平均产仔数为5.75只,仔貂3日龄成活率82.91%。由此说明,从配种落点开始,对母貂有规律的延长光照可使P4提前2 d达到峰值,有利于胚泡早着床;母貂妊娠期缩短1.84 d(P<0.05),胎平均产仔数增加1.28只(P<0.05),仔貂3日龄成活率提高12.03%(P<0.05),75.0%母貂于6日内集中产仔。

窝箱温度对初生仔貂死亡率的影响

为了探讨水貂分娩前和分娩后窝箱温度变化与初生仔貂死亡率的关系,对处于不同环境气候条件下的分娩前和分娩后15 d的共计4组140个母貂的窝箱温度,采用红外测温仪进行了测定,同时对分娩后15 d内仔貂的死亡率进行了统计。结果表明：（1）分娩前15 d的窝箱温度始终在12℃以下变化,变化幅度大小主要受窝箱所处周围风力和光照的影响;分娩后15 d的窝箱温度逐渐升高,至第35 d达到或超过12℃,达到或超过12℃所需时间长短主要受母性强弱的影响。（2）分娩后的5 d内各组仔貂的平均死亡率为13.87%。分娩后15 d各天仔貂死亡率高低主要受窝箱温度高低的影响,以分娩当天窝箱温度最低,死亡率最高为5.61%（P〈0.05）,以后各天随窝箱温度逐渐升高,死亡率逐渐下降,至分娩后34 d窝箱温度达到或超过12℃时,死亡率为0。

幼龄蓝孔雀日粮代谢率试验

采用全粪收集法对雌雄混群饲养的 2 0只幼龄 (5月龄 )蓝孔雀日粮 (粗蛋白质水平 2 8.2 0 %、总能水平 1810 4.4kJ/kg)中能量、粗蛋白质、干物质、粗脂肪、无氮浸出物和粗纤维的代谢率进行了测定 ,其结果分别是 :81.72 %、5 9.80 %、75 .46 %、46 .73%、88.5 5 %和 5 8.71%。

LTE核心网中基于PCC的QoS控制和能力开放技术研究

在LTE核心网中,通过引入PCC机制,来实现应用层业务数据流QoS需求到核心网承载层QoS分组过滤器之间的一致性映射和匹配问题。文章在详细介绍和分析LTE核心网中承载层QoS机制和PCC总体架构的基础上,研究如何将二者结合起来实现基于PCC和网络能力开放平台的QoS控制,从而提升运营商掌控网络提供业务的能力并改善用户的业务体验。

育成雄性梅花鹿越冬期配合颗粒饲料的研究

采用自行设计配方生产的配合颗粒饲料1、配合颗粒饲料2、配合颗粒饲料3和鹿场常规饲料对59只育成雄性梅花鹿,分两年进行饲养试验、消化试验和某些血液生化指标的测定。结果表明:饲喂配合颗粒饲料组梅花鹿在体增重、体尺增长、某些血液生化指标等方面与饲喂常规饲料组梅花鹿之间没有明显差异(P>0.05);但配合颗粒饲料能显著提高能量消化率达90.02%(P<0.05),并且饲喂配合颗粒饲料比常规饲料可增加经济收入3.07%～11.30%,降低了饲养成本。从而表明配合颗粒饲料饲喂育成雄性梅花鹿没有不良影响,可以在养鹿生产中应用。

美国水貂养殖业及其养殖技术

介绍了美国水貂养殖业现状、美国水貂的饲养场建设情况、饲料及配合技术、繁殖技术、主要疫病防治技术和褪黑激素应用技术,以便为水貂养殖者提供养殖技术参考。

鹿生殖系统解剖学和组织学的研究进展

综述了雌性和雄性鹿生殖系统的解剖学、组织学方面的研究概况,同时提出存在的相关问题及有关的研究方向,为鹿生殖系统的进一步研究提供参考。

5G异网漫游部署方案研究

5G异网漫游能最大限度地推进网络的开放共享,加强资源复用,提升5G网络的整体发展效能。5G异网漫游包括核心网漫游和接入网共享2种技术路线,在漫游区域,漫游运营商向本网用户和其他运营商的漫游用户提供语音、数据和短消息等业务,保证同等通信质量。当前5G异网漫游还存在诸多技术与合作机制方面的挑战,需要加快推进技术攻关、设备开发和测试验证。

发情前后雌性东北梅花鹿生殖激素变化规律

对3只雌性东北梅花鹿在发情前后利用吊圈保定法进行颈静脉采血,采用RIA测定血清中FSH、LH、E2和P的含量。结果表明:FSH从发情前第16d到10d缓慢升高,到第10d达2.89±0.21mIU/mL(P<0.05),然后处于平稳状态,直到发情后的第6d;LH从发情前第12d开始缓慢上升,到发情当天达峰值,发情后第2d又明显下降,之后变化不显著(P>0.05);E2在发情前第8d和第2d分别出现1个峰值(P<0.05或P<0.01),在发情当天显著下降(P<0.01),到发情后第2d下降到最低;P从发情前第16d缓慢上升,到第6d达峰值,在发情当天降为最低,在发情后第2d显著升高(0.84±0.16ng/mL,P<0.05),之后,保持平稳。在发情的24h内,各时间上FSH、LH、E2和P含量没有明显变化(P>0.05),并且与发情当天没有显著差异(P>0.05)。

IMS网间互通架构演进及网内实施方案

在对IMS网间互通架构演进、网间话务场景和网间路由进行分析的基础上,提出了基础电信运营商网内实施方案,包括网元建设和改造要求、网络数据配置方案、网间信令路由流程等,并对网间互通架构演进与5G、携号转网、IMS疏通长途话务、固移融合互通之间的关系进行了探讨。

VoLTEIMS集中化组网方案探讨

在对VoLTE商用部署涉及的技术难点和关键技术分析的基础上,重点对VoLTE IMS的组网方案进行研究和探讨。首先介绍了VoLTE的总体系统架构,然后对VoLTE IMS网元的分省设置与集中设置方式、固移融合设置与固移分别设置方式进行了分析,在此基础上提出了VoLTE IMS网元设置的方案和VoLTE IMS集中化组网的方案,并对VoLTE IMS集中组网的优势和挑战进行分析和探讨。