全内脏反位腹腔镜胆囊切除术1例

内脏反位患者其脏器左右完全相反,与正常人呈镜面像,又称＂镜面人＂,其发生机制目前认为可能是染色体及其携带的基因异常[1],或者胚胎发育期间旋转不良导致[2]。全内脏反位患者胆囊结石临床少见,行腹腔镜胆囊切除术的手术难度增加,可能会发生血管或胆管损伤,需引起警惕。我科于2016年4月行全内脏反位腹腔镜胆囊切除术1例,无并发症发生,现报道如下。

腹腔镜辅助下胰十二指肠切除术2例报告

目的:探讨腹腔镜下行胰十二指肠切除可能性。方法:于2010年1月完成2例腹腔镜辅助下胰十二指肠切除术,术中进行胆囊、胆管、十二指肠、部分空场、胰头胃部分切除,体外完成胰肠、胆肠、胃肠吻合。结果:2例患者手术顺利,手术时间分别为330、360 min,术中出血量分别为500、350 ml,术中无输血,分别于术后第4天、第5天恢复肠道功能,术后15、17天出院,术后病理分别为:十二指肠乳头腺癌Ⅱ级和十二指肠乳头腺癌Ⅰ～Ⅱ级。结论:腹腔镜辅助下胰十二指肠切除术是可行的,必须严格掌握手术适应证。

腹腔镜技术在胰十二指肠切除术中的应用体会

目的探讨腹腔镜辅助下胰十二指肠切除术手术难点以及手术适应症。方法回顾分析我科于2010年1月～2011年9月共完成的9例腹腔镜辅助下胰十二指肠切除术。结果 9例患者手术顺利,手术时间(372±27)min,术中出血量平均为(587±121)ml,术后(5.0±1.0)d恢复肠道功能,术后(17.2±5.1)d出院,1例发生胰瘘。结论腹腔镜辅助下胰十二指肠切除术具有相对优势,但手术难度大,对腹腔镜下操作技术及开腹经验要求高,同时需严格掌握适应证。

全反式维甲酸对人胰腺癌细胞生长及Survivin基因表达的影响

目的:观察全反式维甲酸(ATRA)对人胰腺癌细胞株PC-3生长的抑制作用以及细胞株PC-3 Survivin基因表达的变化。方法:应用MTT比色法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法测定Survivin基因表达,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:经过ATRA作用后,PC-3细胞增殖受到抑制,呈时间和剂量依赖性。凋亡比例明显增加,Survivin mRNA的表达随着作用时间的延长而呈逐渐下降趋势。结论:ATRA对人胰腺癌细胞株PC-3的生长有抑制作用,同时可诱导其凋亡,提示其可能与Survivin基因表达下调有关。

RNAi沉默Plk1对胰腺癌细胞系AsPC-1侵袭转移的影响

目的探讨RNAi沉默Plk1基因表达与胰腺癌细胞侵袭转移能力的关系。方法根据Plk1基因特点,设计并用化学方法合成了4个小干扰核糖核酸分子(siRNA)(shplk1-1、shplk1-2、shplk1-3、shplk1-4),脂质体转染法将短链siRNA转入AsPC-1细胞;细胞分为:未处理组为对照组、空质粒组、shplk1-1组、shplk1-2组、shplk1-3组、shplk1-4组。采用RT-PCR和Western blot法检测siRNA对Plk1表达的抑制效果;采用Transwell法检测转染后细胞侵袭能力;采用划痕实验检测转然后细胞迁移能力。结果 RT-PCR和Western blot结果示所设计的4个siRNA均能明显抑制AsPC-1细胞Plk1 mRNA水平,以shplk1-3效果最好,与对照组、空质粒组及其他三组比较,转染shplk1-3组Plk1 mRNA和蛋白的表达水平显著降低(P<0.01);以转染shplk1-3处理AsPC-1细胞后与对照组、空质粒组比较,Transwell侵袭实验证实:细胞转染24 h后,正常对照组、空质粒组和shplk1-3组穿过人工基底膜的侵袭细胞数分别为(195±16)、(176±13)、(83±5)个,侵袭能力明显降低,差异有高度统计学意义(P<0.01);细胞划痕实验证实:shplk1-3组迁移能力明显降低。结论抑制胰腺癌细胞Plk1基因,侵袭迁移能力明显降低,能够为胰腺癌的治疗提供新的策略。

Plk1在胰腺癌细胞中的表达及其临床意义

目的探讨胰腺癌细胞系中Plk1表达的意义。方法以胰腺癌细胞株(AsPC-1、PANC1、BxPC3)和正常胰腺细胞株(HPDE6C7,一种永生但非转化的胰腺上皮细胞来源的细胞株)为研究对象,应用RT-PCR检测Plk1 mRNA的表达,用Western blot检测Plk1蛋白的表达。结果 Plk1 mRNA和Plk1蛋白在胰腺癌细胞中均有高表达,而在正常胰腺细胞株中几乎不表达。结论 Plk1在胰腺癌细胞中的表达具有一定肿瘤特异性,有可能成为胰腺癌治疗的新靶标。

过表达Plk-1对gemcitabine诱导的胰腺癌细胞化疗敏感性的影响

目的观察Plk-1基因过表达对gemcitabine诱导胰腺癌细胞AsPC-1化疗敏感性的影响。方法①将携带有人外源性Plk-1基因的真核表达质粒转染AsPC-1细胞系设为处理组,转染空载体设为对照组,无处理组设为空白组,转染24 h后,提取细胞总RNA和总蛋白,利用RT-PCR法及Western blot鉴定AsPC-1细胞内Plk-1基因和蛋白表达水平。②采用流式细胞术检测转染组细胞凋亡的改变。③不同浓度gemcitabine作用于转染细胞,MTT法测定转染48 h后细胞增殖能力。结果①测序结果表明成功的从AsPC-1细胞总RNA中扩增Plk-1基因。RT-PCR结果表明:未转染组AsPC-1细胞组、转染空载体pcDNA3.1组及pcDNA3.1/Plk-1组24 h各组细胞内Plk-1 mRNA相对量分别为(2.14±0.16)、(2.18±0.15)、(2.58±0.18),转染pcDNA3.1/Plk-1组与其他各组相比,差异有高度统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示:未转染组AsPC-1细胞组、转染空载体pcDNA3.1及pcDNA3.1/Plk-1组24 h各组细胞内Plk-1基因的蛋白表达水平为(0.989±0.018)、(1.022±0.021)、(1.243±0.143),转染pcDNA3.1/Plk-1组与其他各组相比,差异有高度统计学意义(P<0.01)。②在gemcitabine作用下,pcDNA3.1/Plk-1转染组细胞凋亡率明显低于未转染组及空载体转染组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。③AsPC-1/Plk-1转染组细胞的生长抑制率亦明显高于未转染组及空载体转染组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论胞浆过表达Plk-1活性分子可明显降低gemcitabine诱导的AsPC-1细胞凋亡,增强其对化疗药物的耐受性。

全反式维甲酸对人胰腺癌细胞PC-3诱导分化作用及其对Survivin表达的影响

维甲酸类药物是一类细胞诱导分化剂，能够抑制多种肿瘤细胞的增殖，调节着细胞的生长和分化，全反式维甲酸（A—TRA）作为维甲酸类药物的代表，具有显著的抗肿瘤作用。我们用ATRA诱导人胰腺癌细胞PC-3，观察细胞周期的改变和Survivin基因表达的变化，以及ATRA对人胰腺癌细胞增殖的抑制作用，为维甲酸类药物临床应用于胰腺癌的治疗提供实验依据。

一期腹腔镜结肠癌根治术联合肝转移灶切除术治疗同时性结肠癌肝转移一例

收集2017年8月南京医科大学第二附属医院普外科收治的1例乙状结肠癌伴肝转移患者的临床病例资料。对于不可切除的结肠癌肝转移患者,经转化治疗后行一期全腹腔镜切除原发灶及肝转移灶是安全的,近期疗效较好。

直肠癌患者术后近期并发症危险因素分析及列线图预测模型的构建

目的探讨直肠癌患者术后近期并发症发生的相关危险因素并构建临床预测列线图模型。方法采用回顾性研究方法,收集分析2015年1月至2018年9月在南京医科大学第二附属医院普外科行直肠癌根治术的患者临床病理资料及相关手术信息资料。共纳入204例患者,其中男性患者135例,女性患者69例;病理TNM分期0期11例,Ⅰ期42例,Ⅱ期62例,Ⅲ期89例。根据2009版改良Clavien-Dindo手术并发症分级标准对患者术后出现的并发症进行分级,将Ⅱ级以上的并发症定义为临床有意义并发症。分析患者一般基线特征、病理特征及手术相关信息特征与临床有意义并发症发生之间的关系,对临床变量采用单因素、多因素分析。运用R软件(R4.0.3)绘制列线图临床预测模型,采用ROC曲线及C-index验证和评价列线图模型。结果204例患者中,共有39例(19.11%)患者出现临床有意义并发症,术后常见的并发症依次为吻合口漏(14例,9.03%;行Dixon术式和结肠肛管吻合术共155例)、肠梗阻(14例,6.86%)、肺部感染(13例,6.37%)、肠造口相关并发症(5例,5.95%;包括Miles术式、Hartmann术式预防性造口共84例)、术后出血(9例,4.41%)、腹腔感染/盆腔感染(6例,2.94%)、排尿困难/尿潴留/尿路感染(5例,2.45%)、切口感染(3例,1.47%)、静脉血栓(1例,0.49%)。单因素分析显示:合并基础疾病(χ^(2)=6.677,P=0.010)、既往腹部手术史(χ^(2)=5.260,P=0.022)、术前白蛋白<40 g/L(χ^(2)=9.495,P=0.002)、术前CEA增高(χ^(2)=4.976,P=0.026)、肿瘤下缘距肛缘距离≤7 cm(χ^(2)=6.683,P=0.010)、术中出血量>100 mL(χ^(2)=10.694,P=0.001)是直肠癌术后出现临床有意义并发症的相关危险因素。多因素分析结果提示:合并基础疾病(OR=2.770,95%CI:1.175~6.531,P=0.020)、既往腹部手术史(OR=2.538,95%CI:1.023~6.295,P=0.044)、肿瘤下缘距肛缘距离≤7 cm(OR=2.376,95%CI:1.077~5.239,P=0.032)、术中出血量>100 mL(OR=3.154,95%CI:1.339~7.427,P=0.009)、术前白蛋白<40 g/L(OR=3.403,95%CI:1.514~7.653,P=0.003)是直肠癌根治术后出现临床有意义并发症的独立危险因素。由此构建直肠癌术后有临床意义并发症列线图临床预测模型,合并基础疾病78分、既往腹部手术史72分、肿瘤下缘距肛缘距离≤7 cm为74分、术前白蛋白<40 g/L为100分、术中出血量>100 mL为80分,各因素积分总和即为总分,总分对应的概率即为该模型预测直肠癌根治术后有临床意义并发症发生率。区分度测试结果显示该模型AUC值为0.775(95%CI:0.694~0.855),重复抽样内部验证校正后C-index指数为0.747,校正曲线显示该列线图模型的预测结果与实际结果之间具备较好的一致性。结论合并基础疾病、既往腹部手术史、肿瘤下缘距肛缘距离≤7 cm、术中出血量>100 mL、术前白蛋白<40 g/L是直肠癌根治术后出现临床有意义并发症的独立危险因素。充分的术前评估、营养支持和术中精细操作、减少出血量是降低直肠癌患者术后出现临床有意义并发症的有效措施。本研究构建的列线图预测模型对直肠癌根治术后出现临床有意义并发症的概率有较高的预测价值。

食管癌术后膈疝致横结肠及小肠梗阻一例并文献复习

胃食管肿瘤患者术后膈疝的发生率很低,为0.1%～1.3%,临床比较少见[1]。但近年来其发生率呈上升趋势,达到2.5%左右[2],其发生往往是由于腹腔内的压力急骤增加,使得缝合的膈肌撕裂,腹腔内脏器疝入胸腔。南京医科大学第二附属医院收治食管癌术后膈疝致肠梗阻患者1例,

固体食物饮食联合腹腔引流管间断冲洗治疗直肠癌术后吻合口漏的疗效观察

目的探讨固体食物饮食联合腹腔引流管间断冲洗在直肠癌术后吻合口漏治疗中的疗效及应用价值。方法采用回顾性研究方法,收集2015年1月至2018年9月在南京医科大学第二附属医院普外科行直肠癌根治术(Dixon术式)患者资料,术中于吻合口背侧置硅胶引流管及橡胶引流管,对术后出现吻合口漏的患者采取固体食物饮食及腹腔引流管间断冲洗的方法进行治疗,观察其疗效。结果152例行直肠癌根治术(Dixon术式)患者中,有14例患者术后出现吻合口漏,其中2例患者接受再次手术治疗,1例行末端回肠造口,1例行结肠造口;12例患者经固体食物饮食联合腹腔引流管间断冲洗治疗后全部治愈。结论固体食物饮食联合腹腔引流管间断冲洗能够改善吻合口漏口周边环境,促进漏口愈合。

吉西他滨对胰腺癌细胞增殖、凋亡及保罗样激酶-1表达的影响

目的 观察吉西他滨对胰腺癌细胞增殖、凋亡及保罗样激酶-1（PLK-1）表达的影响.方法 采用不同浓度的吉西他滨处理胰腺癌AsPC-1细胞,在电镜下观察细胞的形态,噻唑蓝（MTT）法测定细胞生长抑制情况;不同浓度（2、5 μmol/L）的吉西他滨处理细胞12、24、48、72 h后,流式细胞分析法检测细胞凋亡,以半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测PLK-1 mRNA及PLK-1蛋白的表达.结果 MTT结果示随吉西他滨浓度增加,细胞增殖率明显下降（P＜0.05）;流式细胞分析法检测凋亡结果示：处理组凋亡率较空白对照组明显增加（P＜0.05）;RT-PCR和Western blot检测PLK-1 mRNA及PLK-1蛋白的表达结果显示,不同时间点PLK-1 mRNA相对表达量分别为：对照组0.70 ±0.15、0.65 ±0.27、0.72 ±0.13、0.68±0.30;2 μmnol/L组：0.88 ±0.58、0.95±0.53、2.36±0.57、3.53 ±0.89;5 μmol/L组：0.89 ±0.60、1.02±0.32、3.95±1.84、4.52 ±2.25及PLK-1蛋白的表达水平分别为：对照组：0.82 ±0.41、0.78 ±0.46、1.01 ±0.05、0.88±0.25;2 μmol/L组：0.89±0.28、1.61 ±0.88、1.66 ±0.18、3.28±1.33;5μ.mol/L组：0.85±0.36、1.89±0.18、2.73±0.78、4.32±2.13,也相应升高（P＜0.05）.结论 吉西他滨能诱导AsPC-1细胞凋亡,其机制可能与细胞内的PLK-1水平改变有关.PLK-1基因表达水平与胰腺癌化疗药物敏感性密切相关.

核心蛋白聚糖在胆管癌中的表达及其临床意义

目的 探讨胆管癌组织中核心蛋白聚糖表达的临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测44例胆管癌和40例正常胆管组织核心蛋白聚糖的表达,并分析核心蛋白聚糖的表达水平与胆管癌患者的性别、年龄、肿瘤细胞的分化程度和淋巴结转移的关系.结果 胆管癌组织核心蛋白聚糖表达明显下调,而在正常癌旁组织高水平表达.44例胆管癌患者胆管癌组织核心蛋白聚糖阳性18例（阳性率为40.91％）,而40例正常癌旁癌组织核心蛋白聚糖表达均呈阳性（阳性率为100.00％,P＜0.01）.高、中分化组肿瘤核心蛋白聚糖表达显著高于低分化组肿瘤（62.5％比15.0％,P＜0.01）.无淋巴结转移者中核心蛋白聚糖的表达（57.14％）明显高于已有区域淋巴结转移者（26.09％,P＜0.05）.核心蛋白聚糖的表达水平与胆管癌患者的性别、年龄、肿瘤的大小无明显相关.结论 核心蛋白聚糖在胆管癌组织中的表达具有一定肿瘤特异性.

腹腔镜辅助下胰十二指肠切除术五例分析

目的探讨腹腔镜辅助下行胰十二指肠切除的可行性。方法收集2010年1月至5月行腹腔镜辅助下胰十二指肠切除术的5例患者。其中2例术前诊断为胆总管下端腺癌，2例为十二指肠降部腺癌，1例术中诊断为胰头癌。术中首先行腹腔镜探查，在腹腔镜下分离并切除胆囊、远端胆管、远端胃、十二指肠、部分空肠及胰头，然后再剖腹完成消化道重建。结果5例患者手术顺利，手术时间平均为（339±54）min，术中出血量平均为（538±106）ml，术中无输血；术后平均（4．0±1．0）d恢复肠道功能，术后（15．8±4．7）d出院；一例发生胰瘘，经非手术治疗后愈合。结论腹腔镜辅助下胰十二指肠切除术具有微创、手术时间短、术后恢复快等优点，值得临床上进一步探讨。

腹腔镜“杂交手术”修补腹壁巨大切口疝合并隐匿性疝临床体会

目的探讨腹腔镜联合腹壁小切口"杂交手术"修复巨大腹壁切口疝合并腹股沟隐匿疝的手术优势及要点。方法运用腹腔镜联合腹壁小切口"杂交手术",及防粘连补片修复一例老年男性巨大腹壁切口疝并且合并腹股沟隐匿疝的病例。结果患者手术时间130 min,术后3 d拔除皮下引流管,术后48 h排气,术后64 h排便,术后5 d出院,术后9 d拆线,未发生明显并发症。结论"杂交手术"修补巨大型切口疝伴或不伴隐匿疝安全可行,并且具有创伤小、术后疼痛轻、恢复快、住院时间短、复发率低等优点。

过表达核心蛋白聚糖基因对胆管癌细胞周期及凋亡的影响

目的 观察过表达核心蛋白聚糖（DCN）基因对胆管癌细胞周期及凋亡的影响.方法 脂质体介导真核表达质粒pEGFP-DCN和空载体pEGFP-N1转入人胆管癌细胞株QBC939,Westernblot检测DCN蛋白的表达,实时定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测DCN mRNA的表达,克隆形成实验计算克隆形成率,噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡.结果 RT-qPCR示过表达DCN相对空载体上调32.34倍;Western blot结果示过表达组DCN上调2.00倍.pEGFP-DCN转染组细胞克隆形成数[（210.9±19.3）个]显著低于空质粒转染组[（608.7±56.3）个],差异有统计学意义（P＜0.05）.转染pEGFP-DCN细胞与空载体比较,细胞增殖能力显著降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.流式细胞周期检测显示,胆管癌细胞转染pEGFP-DCN后G1～ Go期细胞比例明显升高,而G2～S期细胞减少,细胞周期被阻滞在G1～Go期,凋亡分析转染pEGFP-DCN的QBC939细胞较转染空载体细胞凋亡显著增加,半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3明显增高,而B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）的表达水平明显降低（0.787±0.068比1.276±0.157）.结论 转染DCN能够显著抑制胆管癌细胞的增殖,明显促进胆管癌细胞凋亡,而DCN促进胆管细胞凋亡与上调Caspase-3和下调bcl-2蛋白相关.

过表达核心蛋白聚糖基因对胆管癌细胞迁移及侵袭的影响

目的 观察过表达核心蛋白聚糖（DCN）基因对胆管癌细胞迁移及侵袭功能的影响.方法 脂质体介导真核表达质粒pEGFP-DCN和空载体pEGFP-N1转入人胆管癌细胞株QBC939,Western blot检测DCN蛋白以及E-钙黏蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测DCNmRNA以及E-钙黏蛋白mRNA的表达,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力.结果 RT-PCR结果显示过表达DCN较pEGFP-N1上调32.34倍;Western blot结果显示过表达组DCN上调2倍.Transwell结果显示转染pEGFP-DCN的胆管癌细胞迁徙和侵袭能力较转染pEGFP-N1分别降低约56.9％和40.2％;转染pEGFP-DCN与pEGFP-N1胆管癌细胞中E-钙黏蛋白的表达水平,结果可见较转染pEGFP-N1体组胆管癌细胞比较,转染pEGFP-DCN组E-钙黏蛋白的表达水平明显升高.结论 DCN过表达可抑制QBC939细胞的迁移与侵袭能力,可能与升高E-钙黏蛋白表达相关.

胰十二指肠切除术后出血原因分析及治疗策略

胰十二指肠切除术是腹部外科创伤大、风险性高、较为复杂的手术,术后并发症发生率高,其中术后出血是其致命的并发症之一。早期的出血多与术中结扎线脱落、胰腺残端及吻合口处止血不彻底等技术性因素有关,晚期的出血多与各种吻合口瘘有关。术前纠正患者各器官功能,改善全身营养状况,术中强调精细操作、彻底止血、根据术者经验选择合理的吻合方式,术后严密观察,及时发现出血并止血,能有效提高患者术后生存率。

不同手术方式在低位直肠癌中的合理选择应用

直肠是结直肠发生恶性肿瘤最常见的部位,低位直肠癌发病率呈上升趋势,因恶性肿瘤邻近肛门、位于盆腔底部,保留肛门正常排便和控便及性功能、提高患者生活质量也需要考虑加入治疗的范畴。随着多学科讨论模式的发展及手术方式的革新,低位直肠癌的治疗方式呈现多样化趋势,但手术治疗低位直肠癌仍然是其关键。针对不同的患者,合理选择既安全、有效又能很好地保护肛门正常排便和控便及性功能的手术方式,是加快患者术后康复、提高生活质量及延长生存期的关键。