低级别胶质瘤术后复发和恶性转化的分子标志物及其预测价值

目的探索低级别胶质瘤(low-grade glioma,LGG)患者术后出现复发及恶性转化(malignant transformation,MT)的危险因素。方法回顾性收集2009年3月至2019年4月接受LGG切除手术及随后进行术后随访的163例患者资料。将术后未出现复发或MT的患者纳入对照组(85例),术后出现复发的患者纳入观察1组(44例),术后出现MT的患者纳入观察2组(34例)。基于3组患者的临床资料,分析患者临床特征,并运用Logistic回归模型和受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线探讨复发和MT的危险因素与预测价值。结果对照组和观察1组患者在术前癫痫发作、术前卡氏(Karnofsky performance status,KPS)评分和手术方式方面均有统计学差异(P<0.05)。对照组和观察2组患者在性别、术前KPS评分、肿瘤大小和手术方式方面均有统计学差异(P<0.05)。对照组和观察1组患者在异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)突变、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、癌—睾丸抗原OY-TES-1、OY-TES-1 mRNA、肿瘤抑制蛋白p53、鼠双微粒体2(mouse double minute 2,MDM2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)均有统计学差异(P<0.05)。对照组和观察2组患者PCNA、MMP-9、癌—睾丸抗原OY-TES-1、OY-TES-1 mRNA和VEGF均有统计学差异(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示IDH突变、MMP-9和PCNA是LGG复发的独立危险因素(P<0.05),VEGF、MMP-9和PCNA是LGG患者MT的独立危险因素(P<0.05)。PCNA、MMP-9和IDH突变对预测LGG术后复发的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.744、0.790和0.799。PCNA、MMP-9和VEGF对预测LGG术后复发的AUC分别为0.729、0.750和0.900。结论IDH突变、MMP-9和PCNA是LGG复发的独立危险因素,VEGF、MMP-9和PCNA是LGG MT的独立危险因素。这些蛋白在预测LGG术后复发和MT方面具有较高的准确性,可能在LGG的生物学行为和治疗效果中起重要作用,可以作为LGG术后患者的预后评估和个体化治疗的参考指标。

扩大经鼻内镜手术切除鞍结节脑膜瘤临床应用和分析

目的总结神经内镜下经鼻扩大入路切除鞍结节脑膜瘤的安全性及有效性。方法回顾性分析2018年1月至2023年6月鼻扩大入路切除鞍结节脑膜瘤的106例患者的临床资料,总结分析其疗效、并发症和手术优越性。根据不同情况进行颅底多层重建。结果Simpson I级切除99例(93.4%),5例Ⅱ级切除,Ⅲ级切除2例,围术期死亡1例(0.9%)。头痛症状明显缓解41例(41/47,87.2%),视力明显改善39例(39/53,73.6%)。术后共15例(14.0%)出现并发症,其中3例(2.8%)出现脑脊液鼻漏行二次修补手术;5例(4.7%)单纯颅内感染,4例(3.8%)出现视力损害,1例(0.9%)术区出血,1例(0.9%)出现短暂性尿崩症,新发1例(0.9%)出现垂体功能低下,所有患者术后随访6-72个月无复发。结论神经内镜下经鼻扩大入路切除鞍结节脑膜瘤对提高患者手术疗效具有重要意义,具有手术创伤小、手术时间短及可达SimpsonⅠ级切除的优点,是一种理想的手术入路,临床应用前景好。经鼻内镜并不适合所有鞍结节脑膜瘤,需严格把握手术指征。

医护人员对残疾人态度量表的汉化及信度、效度检验

目的对医护人员对残疾态度量表进行汉化及信度、效度检验,为测量我国医护人员对残疾人的态度提供评估工具。方法2020年8月获得原作者授权,2020年9月采用Brislin翻译模型对英文版量表进行翻译、回译、文化调试及预实验,形成中文版医护人员对残疾人态度量表;2021年3月采用便利抽样法,选取锦州市、盘锦市、营口市和抚顺市8所综合性医院的400名康复科医护人员对量表的信度、效度进行检验。结果357名康复科医护人员完成研究。中文版医护人员对残疾人态度量表共20个条目,4个维度,分别为知识技能(4个条目)、临床责任(4个条目)、临床行为(8个条目)、情绪反应(4个条目);总量表的Cronbachα系数为0.943,折半信度为0.824,重测信度为0.899;各维度Cronbachα系数为0.843~0.944,折半信度为0.854~0.904,重测信度为0.701~0.913。探索性因子分析KMO值为0.921,Bartrett球形检验值为5534.981(P<0.01),累积方差贡献率为73.050%。结论中文版医护人员对残疾人态度量表具有良好的信度、效度,可用于测评我国医护人员对残疾人态度的现状。

D-阿洛糖治疗脑缺血再灌注损伤后小鼠星形胶质细胞焦亡的影响

目的 研究D-阿洛糖对小鼠脑缺血再灌注损伤(IRI)导致的星形胶质细胞细胞焦亡的保护作用。方法 构建大脑中动脉缺血栓塞模型模拟小鼠脑IRI,经腹腔注射D-阿洛糖治疗(400mg·kg^(-1)),神经功能评分以及行为学实验检测其大脑损伤情况,苏木精-伊红染色观察大脑组织病理结构改变,TUNEL染色检测细胞凋亡情况,蛋白印迹检测焦亡相关蛋白消皮素D (GSDMD)和白细胞介素-18 (IL-18)的表达水平,免疫组化与免疫荧光实验检测星形胶质细胞中的焦亡相关蛋白(GSDMD、IL-18)的表达情况。结果 相较于IRI组,经D-阿洛糖治疗后改善了神经功能评分以及行为学表现,减轻了因IRI导致的脑形态学改变,在大脑皮质中焦亡相关蛋白(GSDMD、IL-18)表达降低,并且减少了在星形胶质细胞中焦亡相关蛋白(GSDMD)的表达。结论 在小鼠脑IRI模型中,D-阿洛糖可以减轻星形胶质细胞的焦亡,从而起到保护大脑神经元的作用。

小鼠脑Willis环的解剖及其对局灶性脑缺血模型的影响

目的:研究小鼠W illis环的解剖结构,为不同种系小鼠局灶性脑缺血模型提供解剖学依据。方法:雄性昆明小鼠和Balb/C小鼠各20只,各随机等分成两组即分别为K1、K2、B1、B2组。K1和B1组经左心室灌注墨汁乳胶液约2m l,去骨取脑,观察颈内动脉及W illis环的结构。K2和B2组采用插线法制作永久性大脑中动脉栓塞(M CAO)模型,术后1h和24h观察并记录小鼠神经功能评分后,取脑并切成2mm厚片,2%TTC染色,运用图像分析系统对梗死体积进行统计分析。结果:昆明小鼠后交通动脉多发育良好,90%有完整的W illis环;而Balb/C小鼠后交通动脉多发育不良或缺失,90%W illis环不完整。昆明小鼠M CAO模型梗死灶仅波及大脑中动脉供血区,24h症状轻,生存率100%;而Balb/C小鼠M CAO模型梗死灶波及大脑中动脉和大脑后动脉供血区,24h症状重,病死率40%。结论:小鼠M CAO模型的梗死灶大小与W illis环的结构密切相关;昆明小鼠与Balb/C小鼠比较,更适宜制作永久性M CAO模型。

小鼠大脑中动脉暂时性脑缺血模型的建立方法和时间窗探讨

目的:建立稳定的、可重复性的局灶性脑缺血再灌注动物模型。方法:采用插线法建立小鼠暂时性大脑中动脉栓塞模型。栓塞时间分别为30、60、90和120min。手术后24h分别对各组小鼠进行神经功能评分。完整端脑2mm冠状厚片行2%红四氮唑(TTC)染色,计算梗死体积。结果:栓塞120min组神经功能评分最高,且变化最小。TTC染色显示,栓塞120min可引起该侧大脑中动脉供血区域广泛的梗死灶,而且梗死灶大小适宜,稳定性好。结论:插线法是一种简单、可靠的制作小鼠暂时性大脑中动脉栓塞模型的方法,栓塞120min再灌注22h可引起稳定的梗死灶,适合于脑缺再灌注损伤的对照研究。

旁分泌形式作用的人AngiostatinK(1-3)抑制大鼠C6脑胶质瘤的研究

目的 :研究人AK(1 3) [AngiostatinKringle (1 3) ]对大鼠C6脑胶质瘤的抑瘤效应 .方法 :利用基因转染的方法获得重组人AK(1 3)基因的C6胶质瘤细胞 ;以细胞增殖试验及免疫组化等方法检测转染细胞株是否表达了具有生物活性的人AK(1 3) .正常大鼠C6脑胶质瘤模型作对照 ,研究转染细胞株在大鼠脑内的致瘤性 .脑组织切片进行Ⅷ因子染色 .结果 :大鼠C6胶质瘤细胞稳定表达的人AK(1 3) ,在体外明显抑制牛主动脉内皮细胞的增殖 ;在体内明显抑制了大鼠C6脑胶质瘤的生长 .试验组脑切片内仅见显微瘤灶 ,Ⅷ因子染色少见新生毛细血管 .结论 :旁分泌形式作用于大鼠C6脑胶质瘤内血管内皮细胞的人AK(1 3)可明显抑制肿瘤的血管生成 。

白藜芦醇对小鼠脑缺血再灌注损伤后MMP-9蛋白的影响

目的探讨白藜芦醇预治疗对小鼠暂时性脑缺血的脑保护作用及其对基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及活性的影响。方法采用插线法制作小鼠暂时性大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。白藜芦醇溶于20%环糊精/0.9%NaCL,50mg/kg强饲,1/d,于第7d行MCAO。MCAO2h再灌注22h取完整端脑,切成2mm冠状厚片,2%红四氮唑(TTC)染色,计算脑梗死灶的大小。分别于MCAO2h再灌注4h、10h及22h取患侧或对照侧端脑,提取总蛋白,采用Western blot和明胶酶谱分析方法研究MMP-9的表达及活性。结果白藜芦醇预治疗组MCAO2h再灌注22h时的梗死灶明显小于对照组(P<0.01)。Western blot和明胶酶谱分析结果证明,白藜芦醇预治疗可降低脑缺血再灌注损伤所诱导的MMP-9蛋白的表达及其活性水平。结论白藜芦醇预治疗对脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用,这可能得益于其抑制了MMP-9蛋白的高表达及活性增高。

Angiostatin kringle(1-3)体外诱导人脐静脉内皮细胞凋亡

目的 探讨 angiostatin kringle (1- 3) [简称 AK(1-3) ]抑制血管内皮细胞增殖的作用机制 .方法 以加入重组人 AK(1- 3)蛋白 (30 0 nmol· L- 1 )的含 10 0 m L· L- 1小牛血清 DMEM培养基培养人脐静脉内皮细胞 ECV30 4,72 h后 ,采用透射电镜、流式细胞术细胞周期分析和核 DNA琼脂糖凝胶 (15 g· L- 1 )电泳检测重组 AK(1- 3)蛋白作用后血管内皮细胞的凋亡情况 .结果 实验组 ECV30 4细胞检测到了典型的凋亡 .透射电镜下可见细胞核染色质浓缩、边集、核碎裂及胞质浓缩等凋亡细胞典型的形态学改变 ;流式细胞术周期分析显示在 G1期峰前存在一个凋亡峰 (2 0 .6 % ) ;核琼脂糖凝胶(DNA15 g· L- 1 )电泳呈梯状 .对照组 ECV30 4细胞表现正常 .结论 重组人 AK(1- 3)蛋白诱导了血管内皮细胞的凋亡 。

脂肪干细胞诱导神经干细胞分化的体外实验研究

目的研究脂肪干细胞（ADSCs）体外诱导神经干细胞（NSCs）分化的作用。方法从新生BALB／c小鼠中分别分离获得ADSCs及NSCs，进行体外培养和传代。构建ADSCs与NSCs共培养体系，以单纯NSCs组为对照，进行ADSCs诱导分化研究。共培养4、8、12d后行神经元特异性神经丝200免疫组化鉴定，统计NSCs分化为神经元的百分率。结果共培养后8—12d，可见大量成熟神经元，大多为多极神经元，少部分为双极神经元或假单极神经元，带有较长的轴突。共培养组NSCs分化为神经元的百分率大约为21％，而单纯NSCs培养组约为4％。共培养组神经元的转化率与单纯NSCs培养组神经元的转化率之间有显著性差异（P〈0．05）。结论ADSCs在体外能够促进NSCs向神经元转化。

白藜芦醇对暂时性氧糖剥夺致神经元损伤的保护作用

目的:探讨白藜芦醇对暂时性氧糖剥夺致神经元损伤的保护作用及机制。方法:以小鼠大脑皮层原代神经元氧糖剥夺4h"再灌注"20h模型为对照。白藜芦醇浓度分别为10、25、50、100μmol/L,治疗时间从缺氧开始,直至试验结束。台盼蓝染色法和LDH漏出率评估细胞活力。采用免疫印迹法分析基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达,采用RT-PCR检测MMP-9 mRNA水平。结果:台盼蓝染色和LDH漏出率结果显示,50μmol/L白藜芦醇即可对离体神经元缺血再灌注损伤具有良好保护作用,浓度高达100μmol/L亦没有发现明显的副作用。免疫印迹和半定量RT-PCR结果显示,与损伤组比较,50和100μmol/L两种浓度的白藜芦醇可降低MMP-9蛋白的表达及MMP-9 mRNA的水平(P<0.01)。结论:白藜芦醇可抑制神经元MMP-9的表达,从而发挥其对暂时性氧糖剥夺致神经元损伤的保护作用。

经鼻内镜脑干海绵状血管瘤切除病例报道

中枢神经系统海绵状血管瘤约占颅内血管畸形的5％～10％，而脑干海绵状血管瘤约占颅内海绵状血管瘤的9％～35％。海绵状血管瘤体积并不影响海绵状血管瘤出血，而既往的出血病史是海绵状血管瘤再次出血的风险因素，女性患者出血风险高于男性患者，怀孕可能是脑干海绵状血管瘤恶性行为的危险因素之一。

人endostatin体外诱导血管内皮细胞凋亡的实验研究

目的 探讨人endostatin抑制血管内皮细胞增殖的作用机制。方法 在含重组人endostatin蛋白和 10 %小牛血清的DMEM培养基中 ,培养人脐静脉内皮细胞ECV30 4。72h后 ,采用透射电镜、流式细胞术细胞周期分析和细胞核DNA的 1.5 %琼脂糖凝胶电泳 ,检测重组人endostatin蛋白作用后 ,血管内皮细胞的凋亡。结果 透射电镜下可见实验组ECV30 4细胞核染色质浓缩、边集、核碎裂及胞浆浓缩等 ,呈典型的凋亡细胞的形态学表现。流式细胞术细胞周期分析显示 ,在G1期峰前存在 1个凋亡峰 (2 0 .6 % )。 1.5 %琼脂糖凝胶电泳显示 ,细胞核DNA呈梯状。对照组ECV30 4细胞表现正常。结论 重组人endostatin蛋白可诱导血管内皮细胞凋亡 ,是其抑制血管内皮细胞增殖的原因之一。

C6细胞表达的人Angiostatin Kringle(1-3)体外抑制血管内皮细胞生长的研究

为研究人AngiostatinKringle( 1 3) [AK( 1 3) ]抑制血管内皮细胞生长的活性 ,利用脂质体法将带有大鼠血清白蛋白分泌信号的人AK( 1 3)基因导入大鼠C6胶质瘤细胞 ,并用G41 8筛选获得目的细胞株。采用电镜、流式细胞术、免疫组化和Westernblot等方法 ,检测转染前后细胞超微结构、细胞周期及AK( 1 3)蛋白表达情况 ,并用人脐静脉内皮细胞增殖实验检测目的细胞株表达的AK( 1 3)蛋白抑制血管内皮细胞生长的活性。结果表明 ,成功转染人AK( 1 3)基因的大鼠C6胶质瘤细胞可稳定表达AK( 1 3)蛋白 ,且具有抗血管内皮细胞增殖活性的良好作用 ,为进一步进行体内抗血管生成基因治疗奠定了基础。

PTEN基因诱导人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡及bcl-2蛋白表达下调

目的 探讨PTEN基因对人脑胶质瘤SHG 44细胞凋亡及凋亡相关基因bcl 2表达的影响 ,阐明PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的机理。方法 PTEN基因体外转染SHG 44细胞 ,筛选阳性细胞克隆 ,以原位杂交、免疫组化方法检测PTEN基因的表达情况采用透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞的凋亡情况以免疫荧光法检测bcl 2基因的表达。结果 PTEN基因转染的SHG 44细胞有PTEN基因和蛋白的表达。透射电镜下可见转染PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞浆浓缩、核碎裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表现 ;流式细胞仪示细胞周期从G1 期到S期发生抑制 ,并且在G1 期峰前出现一明显的凋亡峰 (1 2 .9% ) ;细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带 ;bcl 2的表达也显著下调。转染空载体和未转染的SHG 44细胞无明显的凋亡表现。结论 PTEN基因可诱导SHG 44细胞凋亡 ,并下调bcl 2蛋白的表达 。

唐古特大黄多糖对大鼠实验性颅脑外伤的保护作用

目的 :研究唐古特大黄多糖 (RheumtanguticumPolysaccharides ,RTP)对大鼠实验性脑外伤的保护作用。方法 :从青海产唐古特大黄中分离提取大黄多糖。SD大鼠 12 0只分为正常对照组 (6 ,2 4 ,4 8h)、模型组 (6 ,2 4 ,4 8h)和多糖 (10 0 ,2 0 0 ,4 0 0mg·kg-1)治疗组 (6 ,2 4 ,4 8h)共 15组 ,每天灌胃给药 1次 ,5d后 ,复制颅脑坠击伤模型 ,分别在造模后 6 ,2 4 ,4 8h测定脑含水量和脑组织超氧化物歧化酶 (SOD) ,Na+ K+ ATP酶活性 ,以及丙二醛(MDA)水平。结果 :RTP可降低脑损伤后的脑含水量和脑组织丙二醛水平 ,升高脑组织SOD和Na+ K+ ATP酶活性 ,作用持续至 4 8h。结论 :大黄多糖是中药大黄治疗脑损伤的有效成分之一 ,具有神经保护作用。

白藜芦醇对小鼠局灶性缺血/再灌注后急性期的影响

目的探讨白藜芦醇对小鼠局灶脑缺血后急性期的影响和机制。方法90只健康♂Balb/c小鼠。随机分为单纯缺血组、白藜芦醇组及非诺贝特组,各组均为30只。采用线栓法制备小鼠大脑中动脉阻断(MCAO)模型,缺血2h,再灌注24h后,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法观察梗死范围和水肿程度;Evansblue染色观察血脑屏障破坏程度;RT-PCR技术检测过氧化物酶体增殖物激活受体α的mRNA水平。结果白藜芦醇和非诺贝特能够减少脑梗死体积〔(43.80±5.31)mm3、(45.57±5.63)mm3vs(63.87±9.33)mm3,P<0.01)〕,减少Evansblue外渗的体积〔(58.66±4.65)mm3、(78.72±5.78)mm3vs(102.06±6.07)mm3,P<0.01)和含量(6.40±0.92)μg.g-1、(12.47±1.24)μg·g-1vs(15.25±1.51)μg·g-1,P<0.01)〕,增强过氧化物酶体增殖物激活受体α的表达〔(0.893±0.028)、(1.117±0.042)vs(0.467±0.013),P<0.01〕。结论白藜芦醇可能通过诱导过氧化物酶体增殖物激活受体α表达增高,减轻血脑屏障的损害,从而对脑缺血/再灌注损伤起到保护作用。

针对Survivin基因的短发卡RNA诱导U251细胞凋亡

目的:观察针对Survivin基因的短发卡RNA(shRNA)对人脑胶质母细胞瘤U251细胞在体外凋亡的影响。方法:对U251细胞,稳定转染Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1-SR的U251-SR细胞,以及稳定转染空载体pWH1的U251-P细胞,分别采用相差显微镜、HE染色、Hoechst染色、TUNEL染色以及透射电镜观察各组细胞的形态学特征;采用流式细胞术(FCM)定量测定各组细胞的凋亡细胞数量。结果:相差显微镜、HE染色、Hoechst染色、TUNEL染色以及透射电镜观察显示,U251-SR凋亡细胞明显增多,并呈现典型的细胞凋亡形态学改变;FCM定量分析凋亡细胞数量显示,与U251(2.1%)和U251-P(2.7%)相比,U251-SR凋亡细胞增加约6倍,达14.4%。结论:针对Survivin基因的shRNA能够在体外诱导U251细胞发生大量凋亡。

PTEN基因诱导人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡及bcl-2表达下调

目的 探讨 PTEN基因对人脑胶质瘤 SHG- 4 4细胞凋亡及凋亡相关基因 bcl- 2表达的影响 ,阐明 PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的机制 .方法 PTEN基因体外转染 SHG- 4 4细胞 ,筛选阳性细胞克隆 ,以原位杂交、免疫组化方法检测PTEN基因的表达情况 ;采用透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞的凋亡情况 ;以免疫荧光法检测 bcl- 2基因的表达 .结果 PTEN基因转染的 SHG- 4 4细胞有 PTEN蛋白的表达 .透射电镜下可见转染 PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞质浓缩、核碎裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表现 ;流式细胞仪显示细胞周期从 G1 期到 S期发生抑制 ,并且在 G1 期峰前出现一明显的凋亡峰 (15 .9% ) ;细胞核 DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带 ;bcl-2的表达也显著下调 .结论 PTEN基因可诱导 SHG- 4 4细胞凋亡 ,并下调 bcl- 2蛋白的表达 ,这可能是

改良翼点入路显微直视手术切除海绵窦肿瘤

为总结海绵窦肿瘤显微神经外科治疗的经验 ,作者对 1990年 1月～ 2 0 0 1年 6月收治的 2 6例海绵窦肿瘤病例进行了回顾性分析。手术均采用改良翼点入路 ,显微直视手术 ,其中 6例在神经导航辅助下进行。结果全切 19例 (73 1% ) ,部分切除 7例 (2 6 9% )。术后 14例 (5 3 8% )颅神经症状逐渐改善 ,6例 (2 3 1% )出现新的颅神经损害症状 ,无死亡。对部分切除的病人 ,术后加立体定向放射外科治疗。随访 8个月～ 12年 ,未见肿瘤复发。作者认为 ,熟悉海绵窦区的显微解剖并具备熟练的显微神经外科技术 ,可使该类手术取得良好效果。