siRNA对SGC7901/VCR细胞mdr1基因沉默效果的影响因素分析

目的分析siRNA沉默人胃癌SGC7901/VCR细胞mdr1基因效果的相关因素。方法设计并体外转录合成4条靶向mdr1的siRNA(mdr1si326、mdr1si1513、mdr1si2631和mdr1si3071),转染SGC7901/VCR细胞,用RTPCR和免疫印迹检测mdr1mRNA和Pgp的表达、流式细胞仪检测细胞内阿霉素的蓄积和MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性,综合这4方面结果评价4条siRNA的沉默效果情况;用分子生物学软分析siRNA沉默效果的影响因素。结果沉默效果最好的mdr1si326和较好的mdr1si2631靶序列编码Pgp的跨膜区而且自身无茎和袢;沉默效果较差的mdr1si3071和最差的mdr1si1513靶序列编码Pgp的胞内区,前者自身成茎和成袢。沉默效果最好的mdr1si326和较好的mdr1si2631靶序列在靶位点和靶位点外间有较少的碱基配对和氢键。siRNA的沉默效果与siRNA3’5’端3个碱基中的A/U数量、N1和N19、GC含量间无规律可循。结论siRNA沉默SGC7901/VCR细胞mdr1的效果与靶序列的结构关系密切。

mdr1基因在多药耐药相关的几种人胃癌细胞系的表达

目的探讨mdr1在多药耐药相关的几种人胃癌细胞系中的转录、翻译、P-gp功能变动趋势。方法培养SGC7901/VCR(人胃癌多药耐药细胞亚系)、SGC7901和BGC823(人胃腺癌细胞系)于RPMI1640,用RT-PCR和原位杂交检测mdr1mRNA的表达,用免疫印迹和免疫组化检测P-gp的表达,用流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积。结果半定量RT-PCR显示,SGC7901/VCRmdr1和β-actin吸收峰面积之比为5.63,SGC7901为0.61,BGC823为0.85。杂交信号呈紫蓝色颗粒,分布于胞质。免疫印迹显示SGC7901/VCRP-gp的表达最强,SGC7901最弱。P-gp阳性呈棕黄色颗粒,位于细胞膜上。SGC7901中,少数细胞P-gp表达极强。SGC7901/VCR平均光密度为(1.8310±0.8401),SGC7901为(0.3590±0.2512),BGC823为(0.6260±0.4996)(P<0.05)。SGC7901/VCR阿霉素特异荧光强度为(6.59±50.30),SGC7901为(35.88±14.55),BGC823为(27.44±7.06)(P<0.001)。结论在多药耐药相关的人胃癌细胞系SGC7901/VCR、SGC7901和BGC823中,mdr1基因均表达,P-gp具有药物外排功能,SGC7901/VCR的mdr1表达最强,SGC7901最弱,BGC823居中。

胃上皮永生细胞、胃腺癌细胞和胃腺癌淋巴结转移细胞多耐药基因1和P-糖蛋白的表达

目的:探讨胃上皮永生细胞、胃腺癌细胞和胃腺癌淋巴结转移细胞中多耐药基因1(mdr1)和P糖蛋白(P gp)的表达。方法:常规培养胃上皮永生细胞系(GES-1)、胃腺癌细胞系(BGC823)和胃腺癌淋巴结转移细胞系(SGC7901)细胞,用RT PCR和原位杂交检测此3种细胞的mdr1mRNA表达,用免疫印迹和免疫组化检测它们的P gp表达,用流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积以判断它们的P gp功能状态。结果:在原位杂交的标本上,杂交信号呈紫蓝色颗粒,分布于胞质。GES1细胞颗粒数量少,BGC823颗粒数量多,细胞轮廓十分明显;SGC7901颗粒细小而少,少数细胞杂交信号丰富。免疫印迹显示GES1P gp的表达较BGC823和SGC7901弱;GES1P- gp积分光密度为46.36±19.24,BGC823为61.32±28.46,SGC7901为50.45±21.36,BGC823的P gp表达强于SGC7901和GES1(P<0.05),SGC7901和GES1的差异无统计学意义(P>0.05)。GES1阿霉素特异荧光强度为10.12±4.18,BGC823为27.44±7.06,SGC7901为35.88±14.55,3者相比差异有统计学意义(P<0.001)。结论:在胃癌的发生发展中,细胞对抗肿瘤药的反应性不同,随着细胞恶性变,P gp介导的耐药性增加。

小分子干扰RNA逆转胃癌SGC7901/VCR细胞mdr1介导的多药耐药

目的研究小分子干扰RNA(siRNA)逆转胃癌多药耐药细胞亚系SGC7901/VCR mdr1介导的多药耐药效应。方法根据mdr1cDNA已知序列,设计并体外转录2条含21个核苷酸的siRNA(mdr1si2631和mdr1si3071),转染SGC7901/VCR细胞,用RT-PCR检测mdr1基因mRNA的表达,免疫组织化学检测P-gp的表达,流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积,MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性。结果siRNA转染SGC7901/VCR细胞48 h后,mdr1基因mRNA和P-gp的表达水平下降,细胞内阿霉素积累量增加,对阿霉素敏感性的相对逆转率各达79.59%及59.98%。结论siRNA可逆转SGC7901/VCR细胞mdr1介导的多药耐药。

mdr1介导的获得性多药耐药性在胃癌细胞SGC7901的自然逆转

目的:探讨mdr1介导的获得性多药耐药在胃癌细胞SGC7901的自然逆转情况.方法:将培养细胞分为SGC7901、加长春新碱(VCR)的SGC7901/VCR和停VCR 6个月的SGC7901/VCR(设为SGC7901/VCR-)3组,用RT-PCR和原位杂交检测mdr1 mRNA的表达,免疫印迹和免疫组化检测P-gp的表达,流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积和潴留,MTT法检测细胞对化疗药物的敏感性.结果:SGC7901/VCR-组mdr1 mRNA和P-gp表达水平介于SGC7901和SGC7901/VCR之间.SGC7901/VCR-阿霉素蓄积和潴留均高于SGC7901/VCR,低于SGC7901(P<0.05).SGC7901/VCR-对化疗药物的IC50小于SGC7901/VCR,大于SGC7901(P<0.01);对DDP和ADR的耐药指数低于SGC7901/VCR(P<0.05).结论:停化疗药物6个月后,胃癌耐药细胞亚系SGC7901/VCR的多药耐药性降低,但未降到亲本SGC7901水平.

胃癌多药耐药基因1表达及其与生物学行为的关系

目的了解胃癌多药耐药基因1(mdr1)的表达及其与生物学行为的关系。方法应用现代信息技术,收集有关文献进行综合分析。结果正常和病理胃均可表达mdr1,胃癌的mdr1表达水平最高。胃癌的mdr1表达和胃癌对抗肿瘤药物敏感性及病人的生存期、生存率呈负相关,和组织分化、肿瘤浸润、分期及转移的关系不肯定,和肿瘤发生部位、大小、组织类型、患者年龄、性别之间无相关性。结论胃癌mdr1基因表达和生物学行为相关。

人胎胸腺皮髓质体积发育的形态定量学研究

目的 探讨人胎胸腺皮髓质体积发育的规律。方法 应用体视学原理和统计学方法 ,对 79例胎龄 13～ 4 1周的正常人胎胸腺皮髓质体积进行形态定量研究。结果 在人胎胸腺发育过程中 ,皮质体积密度、髓质体积密度及皮、髓质体积比均较稳定 ,不同胎龄间无显著差异。 95 %正常值范围 (mm0 )分别为 :0 .6 39± 0 .14 1、0 .2 4 3± 0 .12 2及 2 .86 7± 2 .0 39;95 %可信限 (mm0 ) :0 .6 39± 0 .0 16、0 .2 4 3± 0 .0 14及 2 .86 7± 0 .2 13。皮质体积密度显著大于髓质 ,皮、髓质体积密度间呈负相关。结论 在正常人胎胸腺发育中 ,胸腺皮、髓质体积的发育与胸腺体积的发育保持平衡。胸腺皮、髓质体积密度与皮。

雌兔甲状旁腺的结构与位置

目的探讨雌兔甲状旁腺的结构与位置以及在不同年龄、不同生理状态下雌兔甲状旁腺的结构变化．方法用连续切片间隔贴片法对不同年龄及不同生理状态下的１５只雌兔甲状腺及其毗邻组织进行光镜观察．结果不同年龄及不同生理状态下，雌兔甲状旁腺光镜结构无明显差异，其实质均由主细胞组成．无嗜酸性细胞．从与甲状腺的关系，甲状旁腺的位置可分为三类，按例数多少，依次为甲状腺旁、甲状腺实质内及远离甲状腺．结论雌兔甲状旁腺光镜下仅由主细胞组成，不同年龄、不同生理状态下无明显差异，但是否有功能改变，尚待进一步的研究．甲状旁腺的位置变化较大，与其胚胎发生发育过程有明显关系．

组织学光镜结构及其观察法录像对教学的作用

本文介绍并分析了利用组织学光镜结构及其观察法录像进行教学改革的做法和体会.指出这种形式对微观形态学教学很有益处.

人胚胎胸腺发育的研究进展

60年代前,Bell E T(1905),Van Dyke J H(1941)等已对人胎胸腺开始观察。60年代后,随着对胸腺功能的肯定与免疫技术的进展,对人胎胸腺发育的研究进行得更为广泛,进展如下:1 胸腺的发生1.1 胸腺成形 5周胚时,第三对咽囊腹侧上皮细胞增生,形成胸腺原基。

医学生的生物知识与医学教育相关性

利用国内外关于生物知识对医学生在医学院校学习影响的报道,从生物知识对医学生学习的影响、医学专业课教师对医用生物学知识的需求和医用生物学与中学生物学的关系三方面进行了综述.国内外对医学生的学习成绩分析与医学专业课教师的调查,一致认为丰富的生物知识对医学教育尤其医学专业基础课的教育十分必要.随着中学生物学教学和医学教育的发展,医学院校生物学教学的改革--用细胞生物学取代医用生物学势在必行.作者提出为使改革顺利成功,尚需做很多调查研究,如在高考科目没有生物的情况下,医学院校新生的中学生物学教学状态如何?生物知识是否象中学生物学教材内容那样丰富?新生的生物知识状态能满足哪些专业基础课程的需要等.

组胚精品课程的教学素材建设

教师是课程实施的主导者，由于占大学生学习时间最多的是课堂教学，为了更好地提高课堂教学效果，采用全程多媒体教学，制作精美的教学课件，是当今教师备课的基本任务。纵观精品课程网页，所有涉及评估指标的内容尽收其中，有的只是课本内容的搬家，是电子化的课本内容，有的使用中却体会到课堂教学搬家的痕迹。普通教师想利用精品课程这一教学资源，寻找制作适合自己思路的课堂多媒体教学课件的教学素材，收获无几。

天花粉对人胎胸腺超微结构的影响

本文对胎龄为15周、水囊引产和天花粉引产的人胎儿胸腺各2例进行了透射电镜观察。结果发现:水囊引产儿胸腺结构清楚,细胞膜完整,细胞内细胞器完好。天花粉引产儿胸腺结构不清楚,细胞膜断裂,细胞内细胞器严重破坏,并对此进行了分析讨论。

长期高脂饲料喂养对大鼠主动脉结构的影响

目的观察长期高脂饲料喂养对大鼠主动脉结构的影响。方法SD大鼠14只,分为对照组和实验组。实验组给予高脂饲料12wk后,取主动脉常规制备标本,用光镜、透射电镜和扫描电镜观察。结果实验组主动脉内膜增厚,内皮细胞损伤脱落,有单核细胞黏附;弹力膜断裂,平滑肌细胞增生。透射电镜下内皮细胞的胞膜破溃,呈虫蚀样改变。内皮细胞的线粒体肿胀、空泡变,嵴溶解、断裂、消失;内质网扩张。内皮细胞间隙增大,细胞连接失去正常形态。并可见黏附于内皮表面的单核细胞伸出伪足潜入内皮间隙、内皮下层。有的基底膜随内皮细胞完全脱落。平滑肌细胞粗面内质网和核糖体增多。扫描电镜下内皮细胞肿胀,细胞表面呈大小不等的虫蚀状或火山口状,细胞间出现深大的缝隙。结论长期高脂饲料喂养大鼠可引起主动脉的内皮和弹力膜损伤,单核细胞黏附并侵入内皮和内皮下层,内皮下层和平滑肌增生。

精神分裂症患者脑脊液中神经元特异性烯醇化酶和髓鞘碱性蛋白的研究

目的 探讨精神分裂症患者是否有脑损伤。方法 对33例精神分裂症患者和9例对照组手术病人的脑脊液（CSF）中神经元特异性烯醇化酶（NSE）和髓鞘碱性蛋白（MBP）采用双抗体夹心酶联法测定。结果 病例组的NSE的含量与对照组比较有显著性差异（P<0.01）。病例组脑脊液中NSE和MBP的含量呈正相关。结论 提示精神分裂症患者有脑损伤。

血脂康对高脂饲料喂养大鼠主动脉结构的影响

目的:观察血脂康对高脂饲料喂养大鼠主动脉结构的影响。方法:SD大鼠高脂饲料造模,同时血脂康灌胃,实验6周后,取主动脉常规制备标本,用光镜、透射电镜和扫描电镜观察。结果:血脂康组内皮缺损较少,偶见单核细胞黏附,弹性膜断裂现象不明显,未见纤维母细胞样平滑肌细胞。透射电镜下可见内皮细胞的线粒体肿胀空泡变,内皮下层较厚,可见平滑肌细胞向内膜下迁移倾向;弹性膜有断裂,较模型组轻;扫描电镜下内皮细胞肿胀轻,细胞轮廓清楚,细胞表面血小板黏附现象少见,内皮损伤形成的残基小。结论:血脂康可减轻高脂饲料喂养大鼠主动脉的损伤。