BOPPPS联合假骨Workshop教学方法在留学生关节外科临床教学中的应用研究

为探讨BOPPPS联合假骨Workshop教学方法在留学生关节外科临床教学中的应用,本研究选取2019年1月至2020年12月安徽医科大学第一附属医院关节外科临床实习的52名留学生,随机分为研究组和对照组,每组26名学生。研究组采用BOPPPS联合假骨Workshop教学方法,对照组采用传统教学结合典型案例为基础的教学方法。对两组留学生的理论知识及临床实践能力进行比较,同时比较两组学生对教学方式的满意度。研究组留学生理论知识水平及临床实践能力均显著优于对照组,对教学方式的满意度明显高于对照组,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。因此,BOPPPS联合假骨Workshop教学方法可更直观地帮助留学生理解理论知识、提升实践操作能力,提高学生的学习积极性和对临床教学的满意度。

OrthoPilot导航系统辅助全髋关节置换提高髋臼杯安置的安全与准确性

背景:人工全髋关节置换作为治疗股骨头坏死、股骨颈骨折等疾病的经典手术方式,一直存在假体位置安放不佳、术后脱位等问题。OrthoPilot导航辅助全髋关节置换理论上可以提高假体安置的准确性及安全性,目前国内对其应用于全髋关节置换的研究较少。目的:探讨OrthoPilot导航辅助全髋关节置换的可行性以及短期临床疗效。方法:回顾性分析2019年6月至2022年4月于安徽医科大学第一附属医院关节外科接受OrthoPilot导航辅助全髋关节置换的患者23例,按照性别、年龄、体质量指数及术前Harris评分进行1∶1匹配同期行徒手全髋关节置换患者23例。对术中、术后的外展角和前倾角进行测量与统计,对手术时间、总失血量、术后引流量、平均血红蛋白丢失量及术后Harris评分进行统计。结果与结论:(1)在手术时间方面,导航组为(152.4±39.9) min,非导航组为(115.3±35.4) min,两组差异有显著性意义(P=0.02);(2)在假体位置方面,导航组术中外展角为(42.3±3.5)°、术后外展角为(42.6±5.5)°,差异无显著性意义(P=0.574);导航组术中前倾角为(18.5±3.4)°、术后前倾角为(19.3±3.9)°,差异无显著性意义(P=0.567);(3)导航组术后臼杯在髋臼安全区范围内22例,安全区外1例;非导航组术后在髋臼安全区范围内17例,安全区外6例,差异有显著性意义(χ~2=4.212,P=0.04);(4)在手术疗效方面,术后两组总失血量、引流量、平均血红蛋白丢失量、Harris评分及术后下肢深静脉血栓发生率等差异无显著性意义;(5)术后平均随访3个月,两组均无早期感染及脱位患者;(6)结果表明,OrthoPilot导航辅助全髋关节置换可以提高髋臼杯安置的准确性及安全性,其短期临床效果与徒手全髋关节置换无明显差异。

股神经联合坐骨神经阻滞在全膝关节置换多模式镇痛中的应用

背景:股神经阻滞在全膝关节置换术围手术期镇痛中的有效性得到广泛认可,但对于联合坐骨神经阻滞的必要性一直存在争议。目的:探讨股神经联合坐骨神经阻滞在全膝关节置换围手术期多模式镇痛中的镇痛效果及对功能锻炼的影响。方法:将150例拟行全膝关节置换的患者随机分为3组,每组50例。全麻组术前行常规全麻;股神经阻滞组在全麻前行术侧股神经阻滞;股神经+坐骨神经阻滞组在全麻前分别行术侧股神经、坐骨神经阻滞。比较3组患者术后静息、运动状态下的目测类比评分,膝关节主动活动度,术后住院天数,不良反应及复诊时的膝关节HSS评分。结果与结论:(1)股神经阻滞组、股神经+坐骨神经阻滞组术后各时间点静息、运动目测类比评分均显著低于全麻组(P<0.05),股神经+坐骨神经阻滞组显著低于股神经阻滞组(P<0.05);(2)股神经阻滞组、股神经+坐骨神经阻滞组术后各时间点膝关节主动活动度均显著大于全麻组(P<0.05),股神经+坐骨神经阻滞组显著大于股神经阻滞组(P<0.05);(3)股神经阻滞组、股神经+坐骨神经阻滞组术后住院天数均显著少于全麻组(P<0.05),股神经+坐骨神经阻滞组显著少于股神经阻滞组(P<0.05);(4)术后1个月时,股神经阻滞组、股神经+坐骨神经阻滞组的膝关节HSS评分均显著高于全麻组(P<0.05),股神经+坐骨神经阻滞组显著高于股神经阻滞组(P<0.05);术后3个月和6个月时,3组间的膝关节HSS评分差异无显著性意义(P>0.05);(5)结果提示,与全麻及股神经阻滞相比,股神经联合坐骨神经阻滞在全膝置换围手术期多模式镇痛中有更好的术后镇痛效果,为全膝关节置换患者术后早期功能锻炼提供了有利条件。

大鼠Neurogenesin-1基因真核表达载体的构建及在cos-7细胞中的表达

目的克隆大鼠海马中Neurogenesin-1(Ng1)基因片段,构建pSecTag2/HygroB-Ng1真核表达载体,并检测其在cos-7细胞中的表达,为进一步研究该基因对脊髓神经干细胞分化的影响提供实验依据。方法在无RNA酶污染的条件下提取出大鼠海马总RNA。利用逆转录聚合酶链反应扩增出Ng1基因片段。将该基因片段连接到真核表达载体pSecTag2/HygroB,聚合酶链反应初步筛选,双酶切鉴定后送测序。将构建成功的重组真核表达载体转染入cos-7细胞,Westernblot鉴定重组Ng1蛋白的表达。结果逆转录聚合酶链反应成功获得大鼠Ng1cDNA。随机挑选10个重组真核表达载体的克隆,聚合酶链反应筛选出阳性克隆2个,经双酶切鉴定、测序及Blast分析鉴定重组质粒构建成功。脂质体介导转染cos-7细胞48h后,Westernblot鉴定重组Ng1蛋白在cos-7细胞中的表达,在46ku处出现阳性条带。结论大鼠海马Ng1基因的真核表达载体pSecTag2/HygroB-Ng1构建成功,转染cos-7细胞后能够表达重组Ng1蛋白。

TBL+Seminar教学模式在骨科实习教学中的应用效果

目的探究TBL+Seminar教学模式在骨科实习教学中的应用效果。方法选取2019-01至2019-03在安徽医科大学第一附属医院骨科实习的60名医学生作为研究对象,按随机数表法分为对照组与研究组,每组30名。对照组采用TBL模式进行实习教学,研究组采用TBL+Seminar模式进行实习教学,比较两组实习生实习前后理论知识与操作技能的掌握情况,以及对骨科实习教学的满意度。结果实习前,两组实习生理论知识与操作技能得分比较,差异无统计学意义(P>0.05),完成实习教学后,理论知识与操作技能分数均较实习期有提高,且研究组分数高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。课程结束后,研究组学生对实习教学的满意度高于对照组,差异有统计学意义(Z=2.233,P=0.026)。结论将TBL+Seminar教学模式应用于骨科实习教学中,能显著提高实习生的理论知识与操作技能成绩,并提高其对骨科实习教学的满意度,值得推广。

股骨颈骨折修复后股骨头坏死7个相关因素:199例回顾分析

背景:股骨颈骨折内固定后发生股骨头坏死率较高,其危险因素一直没有明确的专家共识。目的:回顾性提出和分析60岁以下股骨颈骨折内固定后发生股骨头坏死的相关危险因素。方法:对199例60岁以下股骨颈骨折行闭合复位空心钉内固定的病例进行回顾性分析。对年龄,性别,体质量指数,Garden分型,骨折季节,骨折复位质量,内固定后完全负重下床时间7个因素进行统计分析,评估这些因素与股骨头坏死之间的关系。结果与结论:(1)199例股骨颈骨折患者内固定后股骨头坏死发生率13%;(2)体质量指数,Garden分型,骨折季节季节性变动及骨折复位质量与内固定后股骨头坏死密切相关。患者年龄、性别,内固定后负重时间与内固定后股骨头坏死无明显相关性;(3)Logistic回归多因素分析,Garden分型、骨折复位质量和骨折季节性变动(冬季vs夏季)对于股骨颈骨折后股骨头坏死的发展有明显影响;(4)结果提示,股骨颈骨折的Garden分型及骨折复位质量对股骨颈骨折术后愈合有很大的影响;冬季骨折可能是股骨颈骨折内固定后发生股骨头坏死的危险因素。

合肥地区人工髋关节置换病因及相关因素:6年5所医院3056例回顾性分析

背景:引起人工髋关节置换的病因较多,主要有股骨颈骨折、股骨头缺血性坏死、原发性骨关节炎、先天性髋关节发育不良、类风湿关节炎、强直性脊柱炎、创伤性关节炎、感染性关节炎等。上述疾病的病因及流行病学特点不同,导致其在人工髋关节置换中所占的比例也不同。目的:分析合肥地区行人工髋关节置换患者的病因构成及其在性别、年龄及发病趋势上的分布特点,以期对影响髋关节健康的疾病及易感因素进行早期筛查及预防。方法:对2008年1月至2013年12月在合肥地区5所医院收治的3 056例行人工髋关节置换患者的病历资料行回顾性分析,按照出院诊断分成11类,统计其年龄和性别构成比并进行比较。结果与结论:在3 056例行人工髋关节置换患者中,髋部骨折1 763例(56.78%),股骨头缺血性坏死545例(17.55%),原发性骨关节炎461例(14.85%),先天性髋关节发育不良196例(6.31%),类风湿关节炎35例(1.13%),强直性脊柱炎10例(0.32%),创伤性关节炎26例(0.84%),感染性关节炎12例(0.39%),髋部肿瘤4例(0.13%),骨纤维性发育不良3例(0.097%),大骨节病1例(0.032%)。50岁以上患者所占比例显著大于50岁以下(包括50岁)(χ2=12.7,P<0.05)。女性所占比例高于男性(χ2=61.07,P<0.05)。提示合肥地区行人工髋关节置换患者的病因复杂,主要病因是髋部骨折、股骨头缺血性坏死和原发性髋关节炎,以50岁以上患者为主,女性所占比例高于男性。

后交叉韧带保留型和后稳定型全膝关节假体置换后早期关节遗忘度的对比

背景:临床长期随访显示,后交叉韧带保留型与后稳定型假体置换后的膝关节活动度、10-15年假体生存率及主要临床表现等方面无明显区别,但针对两种膝关节假体孰优孰劣的争论依然存在。目的:对比后叉韧带保留型和后稳定型假体置换治疗单侧膝关节骨关节炎术后患者早期功能恢复的差别。方法:选择2018年7月至2019年9月安徽医科大学第一附属医院收治的60例膝关节骨关节炎患者,其中男13例,女47例,年龄46-83岁,其中30例接受后叉韧带保留型假体置换治疗,另30例接受后稳定型假体置换治疗。术后3个月及末次随访时,进行关节遗忘评分、膝关节功能HSS评分、目测类比评分与膝关节活动度评价。研究获得安徽医科大学第一附属医院伦理委员会批准。结果与结论:①60例患者获得5-16个月随访,随访期内均未出现假体周围感染、松动、脱位及僵硬等并发症;②术后3个月及末次随访时,两组间关节遗忘评分、膝关节功能HSS评分、目测类比评分与膝关节活动度比较差异均无显著性意义(P>0.05);③结果表明,后叉韧带保留型和后稳定型假体置换治疗单侧膝关节骨关节炎术后患者早期关节遗忘度无差别。

全膝关节置换流行病学分析:2008至2013年合肥市1146例回顾

背景:众所周知膝关节骨关节炎普遍存在于亚洲的中老年人中,但是关于全膝关节置换开展情况的流行病学调查国内相关报道较少。目的:通过对合肥市相关医院进行全膝关节置换的病例资料进行回顾性分析,调查合肥市过去6年全膝关节置换患者年龄和性别的人口发展趋势。方法:回顾性分析2008-01-01/2013-12-31合肥市相关医院收治的诊断为膝骨关节炎并进行全膝关节置换的患者资料,病例资料来源于合肥市相关医院病案室数据库,调查内容包括性别、年龄、病程、教育水平、体质量指数及手术部位等。在其中一家医院调取更加详细的临床信息,便于更详细的对男女性别间临床特征的差异进行比较。结果与结论:2008至2013年共有1 146例患者因膝骨关节炎行全膝关节置换。全膝关节置换增长速率明显增快,且女性高于男性。其中在一家医院的调查结果显示,接受全膝关节置换的患者中,不同性别间在年龄、病程、教育水平、体质量指数及手术部位方面差异无显著性意义。调查结果发现合肥市从2008至2013年间接受全膝关节置换患者的数量稳步增长,且女性比例较男性高。但造成接受全膝关节置换患者数量差距的相关危险因素还有待进一步调查。

膝关节置换中以ROM技术定位胫骨假体的旋转力线

背景:ROM技术是膝关节置换过程中确定胫骨假体旋转力线的常用方法,但该技术的准确性仍存在争议,目前ROM技术可能的影响因素尚未见报道。目的:探讨膝关节置换过程中运用ROM技术确定胫骨假体旋转力线的影响因素。方法:纳入61例初次接受单侧膝关节置换的患者,男18例,女43例,年龄55-78岁,术前均诊断为膝关节骨性关节炎,所有手术均采用后稳定型膝关节假体。所有患者对治疗方案均知情同意,且得到医院伦理委员会批准。根据ROM技术确定闭合与未闭合内侧支持带时胫骨假体旋转轴线,同时定位后交叉韧带止点中点与髌韧带内侧缘连线(Akagi线)作为参考线,测量2种情况下ROM技术确定的胫骨假体旋转轴线与Akagi线的相对位置关系,术中判断髌骨轨迹分型,从而确定髌骨轨迹分型及闭合内侧支持带与否是否为ROM技术的影响因素。结果与结论:①术中出现Ⅰ,Ⅱ及Ⅲ型髌骨轨迹时,未闭合内侧支持带时ROM技术确定的胫骨假体旋转轴线与Akagi线之间的夹角分别为(0.5±2.5)°,(-0.9±2.6)°及(-3.9±3.4)°;闭合内侧支持带时夹角分别为(0.6±2.3)°,(-0.3±2.2)°及(-1.5±2.9)°;②Ⅲ型髌骨轨迹可导致ROM技术确定的胫骨旋转轴线与Akagi线之间的夹角明显偏内(P<0.05);③对于Ⅰ,Ⅱ型髌骨轨迹,是否闭合内侧支持带对ROM技术确定的胫骨假体轴线无明显影响(P>0.05);对于Ⅲ型髌骨轨迹,闭合内侧支持带可明显减小ROM技术确定的胫骨假体旋转轴线与Akagi线之间的差异(P<0.05);④结果提示,ROM技术对Ⅰ,Ⅱ型髌骨轨迹的全膝关节置换能够较准确地定位胫骨假体的旋转轴线,无需闭合内侧支持带;出现Ⅲ型髌骨轨迹时,无论是否闭合内侧支持带都可能造成胫骨假体过度内旋。

骨髓源性EPCs对脊髓源性NSCs增殖分化的影响

目的观察骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)对脊髓源性神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法通过密度梯度离心法获取骨髓血单个核细胞,以EBM-2进行诱导培养EPCs并进行免疫细胞化学染色鉴定,成熟的方法获取及鉴定SD大鼠的脊髓NSCs,1×105/ml第3代NSCs置于Transwell小室下层与1×105/ml上层原代EPCs进行体外1∶1共培养,以单纯第3代的NSCs培养为对照,培养7 d,双盲法分别计数各组在相差显微镜下神经球形成的数目,并用目镜测微尺测量神经球的平均直径,通过5%血清诱导培养NSCs7 d后,行β-微管蛋白-Ⅲ免疫荧光染色,Hoechst细胞核染色后在显微镜下计算神经元/细胞总数得出百分率。结果骨髓源性EPCs与脊髓源性NSCs共培养组神经球平均数目为(22.27±3.85)个,平均直径为(61.70±7.21)μm,诱导培养后分化为神经元的平均百分率为(46.10±3.70)%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论骨髓源性EPCs能促进脊髓源性NSCs增殖及其向神经元分化。

非创伤性股骨头坏死髋关节积液与坏死分期及髋关节功能的相关性分析

目的探讨非创伤性股骨头坏死(NONFH)患者髋关节积液与坏死分期、关节功能之间的相关性,了解股骨头坏死对关节积液的影响。方法对46例NONFH患者74髋资料进行回顾性分析。根据MRI影像将关节积液分为0~Ⅲ级;依据ARCO分期将NONFH分为Ⅰ~Ⅳ期;髋关节功能按照Harris评分标准评分并分为4个等级。分析关节积液与坏死分期、Harris评分之间的相关性。结果 74髋中65髋发生关节积液。ARCO分期与关节积液分级相关(r=0.50,P<0.001),不同ARCO分期的关节积液分级差异有统计学意义(χ2=24.81,P<0.001),关节积液分级随着坏死分期(Ⅰ~Ⅲ期)增加而增加,以Ⅲ期患者的关节积液最常见。Harris评分等级与关节积液分级有相关性(r=0.52,P<0.001),不同功能评分等级的关节积液分级差异有统计学意义(χ2=21.97,P<0.001),关节积液分级随Harris评分等级降低而增加。结论 NONFH关节积液的发生情况与坏死分期及关节功能评分明显相关,关节积液在一定程度上可以作为预测疾病发生和进展的辅助指标。

脊髓损伤后反应性星形胶质细胞的分离培养及多能性鉴定

目的探讨脊髓损伤(SCI)后反应性星形胶质细胞(RAS)的多能性,为其对SCI的临床治疗提供理论依据。方法成年大鼠SCI后,分离培养脊髓内RAS;对分离培养的细胞以及诱导分化后细胞行细胞免疫荧光鉴定;在培养RAS的培养基中添加5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),观察分离培养的细胞的增殖情况。结果分离培养的细胞可同时表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和巢蛋白(nestin),诱导分化细胞可表达微球相关蛋白2(MAP-2)、受体相互作用蛋白(RIP)和GFAP,培养基中添加BrdU培养一段时间后细胞球可表达BrdU。结论体内分离培养的成体大鼠SCI后的RAS具有多能性及自我更新潜能,可能作为内源性神经干细胞修复损伤脊髓。

直接贴壁法体外分离培养大鼠骨髓内皮祖细胞

取90gSPF级SD大鼠的双后肢骨髓,分别使用直接贴壁法和密度梯度离心法获得大鼠骨髓单个核细胞,用内皮培养体系EGM-2培养基进行定向诱导分化7~14d获得大鼠内皮祖细胞。免疫荧光染色和细胞功能学鉴定内皮祖细胞,观察内皮祖细胞出现的时间和数量,CCK-8法鉴定细胞的增殖能力。与密度梯度离心法相比,直接贴壁法在内皮祖细胞出现的时间、数量和增殖能力差异有统计学意义（P〈0.01）。因此,相对于密度梯度离心法,直接贴壁法培养出的内皮祖细胞分化时间更短、数量更多且增殖能力更强。

Wnt3a基因沉默对内皮祖细胞增殖的影响

目的探讨wnt3a基因沉默对内皮祖细胞(EPCs)增殖的影响。方法体外分离、培养及鉴定EPCs。将沉默型p EGFP-shRNA-wnt3a重组质粒转染EPCs;Western blot法分析wnt3a在EPCs中的表达变化;MTT分析wnt3a沉默对EPCs增殖的影响。结果鉴定培养的细胞为EPCs;Western blot法结果提示p EGFP-shRNA-wnt3a转染EPCs后明显抑制了wnt3a蛋白的表达。MTT提示沉默型pEGFP-shRNAwnt3a转染组吸光度值明显低于空白对照组。结论成功分离、培养出EPCs,wnt3a有效沉默明显抑制EPCs的增殖,为进一步的实验提供了基础。

骨水泥强化椎弓根螺钉内固定治疗伴骨质疏松腰椎退行性疾病的1年随访

背景:椎弓根螺钉内固定系统是脊椎外科手术常用治疗方案,对于骨脆性较大的老年患者来说,骨骼弹性不足,对椎弓根螺钉的把持力不够,从而有螺钉松动、拔出的风险,导致脊柱复位和固定失败,所以需要探索新的方式来增加椎弓根螺钉系统的稳定性。目的:探究应用骨水泥强化椎弓根螺钉内固定治疗伴有骨质疏松的不同类型腰椎退行性病变的远期疗效。方法:纳入60例伴骨质疏松的腰椎退行性病变患者,随机分为对照组及试验组,每组30例,完善术前检查及X射线片、CT、MRI检查。对照组使用常规椎弓根螺钉技术,试验组在对照组基础上加用骨水泥治疗,比较2组患者术前1 d及术后1周、6个月、1年的疼痛目测类比评分、Oswestry功能障碍指数,并观察术后并发症发生情况,以此来评价手术疗效。结果与结论:①2组患者中,术后1周、6个月及1年的目测类比评分、Oswestry功能障碍指数均优于术前,差异有显著性意义(P<0.05);术后6个月、1年目测类比评分、Oswestry功能障碍指数均低于术后1周,差异有显著性意义(P<0.05);术后1年的目测类比评分、Oswestry功能障碍指数均低于术后6个月,差异有显著性意义(P<0.05);②试验组术后6个月及1年的目测类比评分、Oswestry功能障碍指数均优于对照组(P<0.05);③试验组术后内固定棒松动发生率低于对照组;④说明应用骨水泥强化椎弓根螺钉内固定技术治疗伴有骨质疏松的腰椎退行性病变时,可以有效改善患者临床症状,减少并发症的发生,在临床应用中安全有效,长期治疗效果尚可。

全髋关节置换术中全身及局部联合应用氨甲环酸的止血效果观察

目的观察全髋关节置换术(THA)中静脉滴注联合局部注射氨甲环酸(TXA)的止血效果。方法 110例拟行初次单侧THA的患者随机分为A组40例、B组40例、C组30例,A组THA切皮前10 min静脉滴注15 mg/kg TXA,B组于THA术缝皮结束后向关节腔内局部注射1.5 g TXA,C组行静脉滴注联合局部注射TXA。观察并记录三组手术时间、围手术期总失血量、围手术期输血情况、术后24 h引流量及术后Hb下降最大值。术后第5天采用VAS疼痛评分、术后1个月采用Harris评分评价三组疼痛情况。观察三组术后3个月双下肢深静脉血栓(DVT)及症状性肺栓(PE)发生情况。结果 A、B、C组手术时间比较,P均>0.05。A、B、C组围手术期总失血量分别为(886.20±35.58)、(971.87±68.55)、(773.89±58.60)m L,组间两两比较,P均<0.05;围手术期输血率分别为14.29%(5/40)、21.21%(7/40)、7.14%(2/30),C组术后Hb下降最大值低于A、B组,P均<0.05;术后24 h引流量分别为(223.68±26.46)、(198.41±15.42)、(175.84±17.94)m L,组间两两比较,P均<0.05。术后第5天A组VAS评分高于B、C组,P均<0.05。结论 THA术中静脉滴注联合局部注射TXA的止血效果较好,可降低围手术期总失血量、术后引流量且不增加血栓事件发生率,效果优于单纯静脉滴注或局部注射。

类风湿关节炎与骨关节炎全膝关节置换术术后并发症比较

目的比较类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)和骨关节炎(Osteoarthritis,OA)患者行全膝关节置换术术后并发症的差别,以期指导临床决策及治疗。方法回顾性分析安徽医科大学第一附属医院2009年1月至2014年1月因RA及OA行初次单侧全膝关节置换的患者,通过病例查阅,门诊随访及电话随访收集患者术后早期翻修率,假体周围骨折率,下肢深静脉血栓发生率,90 d感染率及90 d死亡率等数据并进行分析对比。结果共收集221例行全膝关节置换术患者,其中RA患者64例,OA患者157例,RA组术后翻修率1.6%(1/64),假体周围骨折率1.6%(1/64),下肢深静脉血栓发生率6.3%(4/64),切口感染率6.3%(4/64)及术后90 d死亡率1.6%(1/64)。上述观察指标OA组依次为1.9%(3/157),1.3%(2/157),3.8%(6/157),3.2%(5/157)及0%(0/157),两组均差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 RA患者行全膝关节置换术较OA患者不增加术后并发症的发生率。

大鼠表皮生长因子、睫状神经营养因子真核表达载体的构建及其体外表达的鉴定

背景:星形胶质细胞被激活后表现出神经干细胞的特性,细胞表面的神经营养因子(表皮生长因子、睫状神经营养因子)受体超表达,通过改善复杂的内环境,有利于定向诱导神经干细胞向神经元的分化。目的:构建大鼠pSecTag2/HygroB-EGF、pSecTag2/Hygro B-CNTF真核表达质粒,检测其在cos-7细胞中的共表达。方法:采用反转录-聚合酶链反应技术从大鼠颌下腺、坐骨神经组织总RNA中扩增出表皮生长因子、睫状神经营养因子基因功能区,将上述基因片段分别连接到真核表达载体pSecTag2/Hygro B,聚合酶链反应初步筛选、双酶切鉴定后送测序。将构建成功的两种重组载体单独及共转染cos-7细胞,Western blot法鉴定重组表皮生长因子、睫状神经营养因子蛋白的瞬时表达。结果与结论:反转录-聚合酶链反应结果证实成功获得大鼠表皮生长因子、睫状神经营养因子cDNA。DNA序列分析证实2种真核表达载体中的表皮生长因子、睫状神经营养因子序列与GenBank中目的序列一致。脂质体介导转染cos-7细胞48h后,Western blot鉴定重组表皮生长因子、睫状神经营养因子蛋白在cos-7细胞中的表达,分别在Mr6000,22000处出现阳性条带。提示大鼠表皮生长因子、睫状神经营养因子基因的真核表达载体pSecTag2/HygroB-EGF、pSecTag2/Hygro B-CNTF构建成功,共转染cos-7细胞后能够共表达重组表皮生长因子、睫状神经营养因子蛋白。

两种止血带使用方式对150例全膝关节置换术患者失血量和术后康复影响的前瞻性随机对照研究

背景:围手术期失血是全膝关节置换术(TKA)的一个主要问题,止血带的应用可以有效减少术中出血,但缺乏充足的科学依据证实手术患者能从止血带的使用中获益。目的:探讨术中全程使用止血带与安装假体至切口缝合包扎完毕间使用止血带对TKA患者围手术期失血量和功能恢复的影响。方法:前瞻性选取2018年8月至2019年10月接受初次单侧TKA的150例膝关节骨关节炎患者,术中全程使用止血带的75例为全程组,仅在安装假体至切口缝合包扎完毕使用止血带的75例为半程组。记录并比较两组患者的失血量、术后患肢周径增加率、术后VAS评分和HSS评分、ROM,术后血栓及切口并发症发生情况,并通过实验室检查测定手术前、后的IL-6,CRP以及肌酸激酶。结果:全程组术后显性失血量小于半程组,隐性失血大于假体组,差异有统计学意义(P<0.05);两组总失血量相当,差异无统计学意义(P>0.05);全程组术后大腿肿胀比和小腿肿胀比高于半程组,差异有统计学意义(P<0.05);全程组术后VAS评分高于半程组,差异有统计学意义(P<0.05);术后两组HSS评分均明显升高,半程组HSS评分高于全程组,差异有统计学意义(P<0.05);半程组术后5 d的ROM优于全程组,差异有统计学意义(P<0.05)。全程组术后15例出现不同程度的血栓(13例肌间静脉血栓及2例深静脉血栓形成),5例出现切口感染,半程组术后4例出现肌间静脉血栓,3例出现切口感染,差异有统计学意义(P<0.05)。半程组的术后血清IL-6、CRP、肌酸激酶水平均低于全程组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:全程使用止血带还是仅在安装假体至切口缝合包扎完毕使用止血带,尽管在显性失血量和隐形失血量存在差异,但总失血量方面并无差异,后者可以减轻术后疼痛肿胀的程度,降低术后血栓的发生率及炎症指标,术后膝关节功能也得到较快恢复。