以新型脂肽为佐剂的LP-LNP构建及其对mRNA疫苗的增效作用

目的构建以新型脂肽为佐剂的递送系统脂肽-脂质纳米颗粒(lipopeptide-lipid nanoparticle,LP-LNP),初步探究其对mRNA疫苗的增效作用。方法设计并合成2种新型脂肽SS-10和SQ18,微流控技术将编码增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)、萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,F-luc)和卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)的mRNA包载到LP-LNP中,构建以新型脂肽为佐剂的mRNA递送系统;利用动态光散射法表征LP-LNP的粒径、多分散系数;利用HEK-Blue TM mTLR2报告细胞检测其Toll样受体2(Toll-like receptors 2,TLR2)的激活作用,筛选最优脂肽掺入比;将优选的LP-LNP-eGFP-mRNA转染至HEK293T细胞,荧光显微镜观察eGFP的表达;利用活体成像技术考察LP-LNP-F-luc-mRNA在小鼠体内的表达水平;流式细胞术评价LP-LNP-OVA-mRNA免疫小鼠后诱导引流淋巴结中树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟水平以及交叉递呈抗原的能力。结果脂肽SQ18和SS-10分别以0.50%、0.75%的摩尔比掺入后,得到的LP-LNP平均粒径分别为127和121 nm,平均多分散系数分别为0.11和0.08,包封率均在90%以上,且体外安全性好;该配方条件下激活TLR2的能力显著强于阳性对照Pam 2 CSK 4(P<0.01);优选的LP-LNP均可以实现有效的体外转染,其中SQ18以0.50%掺入制备的LP-LNP体内转染效果显著优于传统LNP(P<0.01),且可以显著促进引流淋巴结DCs的成熟以及抗原的交叉递呈(P<0.05)。结论以新型脂肽为佐剂的LP-LNP可以增强mRNA的递送能力,进一步提高mRNA疫苗的免疫效果。

山楂叶总黄酮对AS模型大鼠PPARα、LXR、ABCA1 mRNA表达的影响

目的探讨PPARα活化后对肝脏X受体(LXR)、三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ABCA1)mRNA表达的影响,及其在AS发生、发展和治疗中的作用及机制。方法以高脂饲料饮食配合维生素D3注射建立Wistar大鼠AS模型,并设立对照组、模型组、给药组。采用半定量RT-PCR方法检测各组动脉壁中PPARα、LXR和ABCA1基因的表达,采用血清生物化学检测法检测大鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C及TC/HDL的含量。结果 AS模型组大鼠血清TG高于对照组(P<0.05)、TC、LDL-C、TC/HDL-C的水平均明显高于对照组(P<0.01),但HDL-C水平与对照组比较略有降低(P>0.05)。给药组大鼠血清TG、TC、LDL-C均较AS模型大鼠降低(P<0.05),TC/HDL-C较AS模型大鼠明显降低(P<0.01),但HDL-C较模型组升高(P<0.05)。与对照组比较,AS模型组PPARα、LXR、ABCA1基因表达含量降低(P<0.05)。与AS模型组比较,给药组PPARα表达水平明显升高(P<0.01)、LXR、ABCA1表达水平升高(P<0.05)。结论山楂叶总黄酮可通过激活PPARα提高LXR和ABCA1的表达促进TC的逆向转运,降低TC的负荷,从而达到防止AS发生的危险。

病例讨论式教学法在临床检验基础教学中的设计与应用

目的:探讨病例讨论式教学法在临床检验基础教学中的设计方案和教学效果。方法:选择2009级和2010级医学检验专业学生,分别采用传统教学方法和病例讨论式教学方法后,通过问卷调查和期末考试对两组学生进行研究和比较。结果:98.13%认为病例讨论式教学法优于传统教学方法。同时,实验组学生期末考试成绩也明显高于对照组。结论:病例讨论式教学法增强了学生的学习兴趣,提高了学习效率,值得在日后继续推广和完善。

山楂叶总黄酮对大鼠动脉粥样硬化血管内皮损伤机制影响的研究

目的探讨山楂叶总黄酮对动脉粥样硬化内皮损伤的机制的影响。方法建立大鼠动脉粥样硬化模型(A组),同时设立对照组(D组)和给药组(A组),采用血清生物化学法测大鼠TG、TC、HDL-C、LDL-C含量;RT-PCR法检测腹主动脉血管壁PPARγ、MCP-1、ICAM-1、VCAM-1mRNA的表达;HE染色进行腹主动脉血管壁病理学检测。结果与D组比较,A组大鼠血中TG水平升高(P<0.05),TC、LDL-C显著升高(P<0.01)。血管壁PPARγmRNA含量明显降低(P<0.01),MCP-1、ICAM-1、VCAM-1mRNA含量均增加(P<0.05),差异具有统计学意义。腹主动脉病理学检测可见呈典型的AS表现。与A组相比,G组大鼠血中TC、TG、LDL-C水平降低(P<0.05),PPARγmRNA含量明显增加(P<0.01),MCP-1、ICAM-1、VCAM-1mRNA含量均降低(P<0.05),差异具有统计学意义。病理学观察,病变程度较A组减轻。结论山楂叶总黄酮可激活并增加PPARγ的表达,进而减少MCP-1的表达,抑制粘附分子ICAM-1和VCAM-1的生成,阻止单核细胞向内皮下迁移并聚集到动脉硬化斑块中,而发挥抗炎作用。

山楂叶总黄酮治疗大鼠动脉粥样硬化作用的分子机制研究

目的:以山楂叶总黄酮为主要药物治疗AS大鼠,以此研究该病的分子机制,为临床寻找治疗AS的新途径。方法:以AS造模大鼠为研究对象,通过自动生化分析仪检测血清血脂四项,ELISA法检测外周血血清MCP-1、MMP-9和TIMP-1三种蛋白含量,通过RT-PCR检测这三种蛋白mRNA的表达量。结果:形态学观察大鼠造模成功,模型组与正常对照组比较,血脂四项有显著性差异,血清中MCP-1、MMP-9和TIMP-1三种蛋白含量明显升高,其mRNA表达水平显著升高。山楂叶总黄酮治疗组与模型组比较,MCP-1和MMP-9含量显著降低,TIMP-1含量显著升高,其mRNA表达量也呈相应改变,呈一定的剂量相关性。结论:山楂叶总黄酮在治疗和预防AS中起到了阻止早期发生,扭转病情,减缓发展的作用,为临床提供了一种较好的中药治疗选择。

医学专业大学生亚健康状态及影响因素的调查

目的:探讨医学专业大学生的亚健康状态及相关影响因素,积极寻找有效的干预方案,确保培养更多高质量的人才。方法:采用《大学生亚健康症状自评量表》和《大学亚健康症状影响因素调查问卷》对佳木斯大学在校本科生进行调查研究。结果:医学专业大学生亚健康发生率高于非医学专业,女生高于男生,毕业班高于非毕业班。其中就业压力大、学习负担重等九项是主要的影响因素。结论:医学专业大学生的亚健康状况应该引起社会、家庭、学校更多的重视,积极寻找有效的预防措施。

荧光定量PCR联合ELISA检测丙型肝炎病毒的临床应用研究

目的:探讨荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)联合检测丙型肝炎病毒的临床意义。方法:用FQ-PCR联合ELISA方法检测117例临床已确诊为丙型肝炎患者的血清,同时检测它们的丙氨酸氨基转移酶(AAT)。结果:1抗-HCV阳性率随着HCV-RNA含量的升高而增高,其阳性率与HCV-RNA含量呈正相关。287例HCV-RNA阳性标本中,有50例ALT异常,其异常率随着HCV-RNA含量的升高而增高,ALT异常率与HCV-RNA含量呈正相关,ALT水平和HCV-RNA含量之间呈正相关。3FQ-PCR检测敏感性为74.4%(87/117),漏检率为25.6%(30/117)。ELISA法检测敏感性为76.9%(90/117),漏检率为23.1%(27/117)。两种方法联合检测敏感性为92.3%(108/117),漏检率为7.7%(9/117)。结论:两种方法联合检测,互相补充,大大提高了丙型肝炎病毒的检出率,为临床早期,准确诊断丙型病毒肝炎、监测病情、观察疗效提供了有力的依据,为献血人员筛选和血制品安全提供了有力保障。

基于能量法的气缸盖低周热机疲劳寿命预测方法研究

通过测试气缸盖本体解剖试样,获得气缸盖材料的循环应力应变特性,并利用仿真方法验证其合理性。在此基础上,依据发动机低周疲劳台架考核方法,运用子模型分析技术,得到考核循环内气缸盖火力面的应力分布和塑性变形特性。基于塑性应变能理论,结合试验测试,对火力面低周热机疲劳寿命进行预测和评估,分析表明排气鼻梁区的寿命较低,约为1 100次。

某大功率柴油机机械损失试验研究

为了获得某大功率柴油机的机械损失随机油温度和转速的变化规律以及各系统的机械损失组成比例,采用倒拖法进行了机械损失试验研究。试验表明,同一转速下,机油温度每升高10℃,平均机械损失压力减小约0.01 MPa;将倒拖法测得的机械损失通过Chen-Flynn模型进行修正,和油耗线法测得的平均机械损失压力相比,倒拖法更为准确;获得了各系统的机械损失分配比例,其中活塞连杆组的机械损失所占比例最大,活塞平均速度为11.7m/s时所占机械损失比例达65.5%。

高原环境对缸内燃烧及壁面油膜的影响研究

为了分析高原环境下缸内燃烧过程及壁面油膜生成规律,采用CFD方法对不同海拔条件下柴油机燃烧过程进行了三维仿真计算,着重分析了海拔对壁面油膜的影响。结果表明:随海拔升高,过量空气系数降低,滞燃期延长,着火推迟,燃烧恶化,柴油机性能下降;高原条件对壁面油膜生成有较大影响,壁面累计油膜质量随海拔升高而增大,4 500m海拔下壁面油膜累计质量最大可达19mg,约占总油量的8%;壁面油膜在燃油喷射弹着点处形成,随着时间推移,油膜向活塞边缘扩散,在高海拔条件下,燃烧结束时活塞边缘仍有油膜残留。

前列腺增生和前列腺癌患者组织前列腺特异性抗原mRNA水平

目的探讨外周血前列腺特异性抗原(PSA)水平和良恶性疾病前列腺组织生成PSA能力的关系。方法应用实时荧光定量(RTPCR)技术测定前列腺癌(PCa)、前列腺增生(BPH)伴炎症和不伴炎症患者前列腺组织中的PSA mRNA含量。PSA定量检测采用电化学发光法。结果血PSA浓度在BPH组和PCa组比较差异显著(P<0.01),组织PSA mRNA表达量在BPH组和PCa组比较无显著性差异(P>0.05)。PCa组组织PSA mRNA表达量与外周血PSA值无相关性。结论 PCa患者血PSA水平与PSA生成能力无相关性,PCa分化差者PSA生成能力显著降低。

瘦素受体基因Gln223Arg多态性与2型糖尿病合并慢性肾功衰竭关系

目的探讨瘦素受体基因Gln223Arg多态性与2型糖尿病合并慢性肾功衰竭关系。方法采用聚合酶链反应及限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)分别测定126例2型糖尿病、108例2型糖尿病合并慢性肾功衰竭和185例对照组样本的瘦素受体基因Gln223Arg的基因型,同时检测各组不同基因型样本的血清瘦素水平。结果 2型糖尿病合并慢性肾功衰竭组与正常对照组瘦素受体基因Gln223Arg基因型频率及等位基因频率比较差异有显著性(P<0.01)。糖尿病组与正常对照组瘦素受体基因Gln223Arg基因型及等位基因分布频率差异显著性(P<0.05)。2型糖尿病合并慢性肾功衰竭组中GG基因型与AA+AG基因型血清瘦素水平比较差异有显著性(P<0.05)。相同基因型样本的血清瘦素水平组间比较,任意两组比较均有差异(P<0.05)。结论瘦素受体基因Gln223Arg多态性与2型糖尿病合并慢性肾功衰竭相关。

油田注水管网的分区拓扑优化研究

针对油田注水管网拓扑结构的可靠性和复杂性问题,根据管网水源和横切纵切原则,采用分区互为备份的方法,实现一种高可靠性的注水管网拓扑快速优化方法.通过对大庆油田注水管网拓扑结构的优化仿真,分析分区优化前后网络中节点度数、网络平均度数、节点流量和压损、节点可利用率以及流量可利用率的关系.结果表明,分区拓扑优化具有网络平均度数小、节点和流量可利用率高的优点,更好地保障了整个注水管网运行的可靠性.

改革医学课程考核体系,提高医学生综合素质

当前我国医学院校课程设置,考核方式,考核内容等方面都存在着许多不足,很大程度上影响了复合型人才的培养。为提高学生的学习主动性,提高其创新能力,必须改革原有的考核方式,采取口试笔试结合、平时期末相结合等多种考核方式,对题型、内容等优化调整,并对教育体制、教师素质等提出了建议,以提高医学生的综合素质,培养具有创新精神和较强综合素质的高等医学人才。

血清总PSA、游离PSA检测在前列腺癌诊断中的临床应用

目的：探讨血清T—PSA、F—PSA检测在前列腺癌（PCa）诊断中的应用价值。方法：运用酶联免疫方法检测28例前列腺癌患者、50例前列腺增生（BPH）患者和20例健康成年男性血清中T—PSA、F—PSA的情况并计算F／T比值。结果：①PCa组血清T—PSA、F—PSA的水平明显高于BPH组和正常对照组，差异有显著性意义（P〈0．01）。PCa组的F／T比值明显低于BPH组和正常对照组，差异有显著性意义（P〈0．01）。②PCa组血清T—PSA在4～10btg／L内的F／T比值与BPH的相同区间的指标相比，差异有显著性意义（P〈0．01）。PCa血清T—PSA≥10μg／L组的T—PSA水平与BPH的相同区间的指标相比．差异有显著性意义（P〈0．01）。⑧通过对F／T比值不同取值的结果进行比较发现取F／T比值〈0．16为界值时诊断PCa和BPH的灵敏性分别为85．71％和28．00％，特异性为85．00％和75．00％，F／T和T—PSA对PCa诊断效率分别为85．42％、68．57％。结论：血清T—PSA用于筛选诊断PCa和鉴别诊断BPH的作用十分明确，同时以F—PSA和F／T比值作为辅助性指标鉴别血清T—PSA水平在4～10μg／L的PCa和BPH可以弥补T—PSA的不足。

COX-2在乳腺癌患者癌组织及血清中的表达及临床意义

乳腺癌是威胁当今女性健康的主要疾病之一。乳腺癌的侵袭和转移是导致患者死亡的主要原因,有效监控和及时发现肿瘤转移,是合理采用综合治疗方案治愈乳腺癌的关键。大量研究表明环氧化酶-2在恶性肿瘤,如前列腺癌、乳腺癌、结直肠肿瘤的发病机制中起着非常重要的作用。环氧化酶-2参与肿瘤的发生发展及转移,包括抑制凋亡和促进增殖,促进新生血管生成。

外周血PSA、PSA mRNA联合检测在前列腺癌诊断中的临床应用

目的探讨利用外周血PSA、PSA mRNA联合检测诊断前列腺癌(PCa)的临床应用及意义。方法运用酶联免疫分析和巢式RT-PCR检测22例PCa、10例良性前列腺增生(BPH)患者,5例健康男性和5例健康女性外周血中PSA、PSA mRNA的情况。结果PCa患者血清PSA的水平与临床分期、Gleason评分有关(P<0.05),而与年龄无关(P>0.05);外周血PSA、PSA mRNA与临床分期、内分泌治疗有关(P<0.05),而与年龄、Gleason评分无关(P<0.05);22例PCa标本中PSA mRNA阳性表达15例,阳性率68%,10例BPH和10例阴性对照标本无表达。结论利用外周血PSA、PSA mRNA联合检测是一种早期发现PCa微转移,判断其临床变化过程、分期、预计复发和评价疗效的方法。

益母草总碱在治疗丙酸睾丸素诱导大鼠前列腺增生模型中的应用研究

目的:探讨益母草总碱在治疗丙酸睾丸素诱导的大鼠前列腺增生模型中的作用及前列腺增生的发生机制。方法:以丙酸睾丸素诱导建立模型,再给予益母草总碱治疗,处死后立即取前列腺组织,以放射免疫法检测DHT和T,以免疫组化法检测EGF、bFGF、TGF-β1平均光密度值。结果:各实验组与模型组比较DHT、T都存在显著性差异,有统计学意义。各实验组前列腺组织中EGF、bFGF、TGF-β1平均光密度值与模型组比较都有统计学意义。结论:丙酸睾丸素诱导大鼠前列腺增生模型成立,益母草总碱在治疗前列腺增生方面有重要应用价值。