王不留行提取物对H_(22)荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究

目的:观察王不留行提取物对小鼠H22移植瘤生长的抑制作用。方法:将移植H22瘤株的昆明小鼠随机分成模型组及王不留行提取物高、中、低剂量(5、2.5、1 mg/kg)组,另设正常对照组。王不留行提取物各组每天给药1次,连续灌胃给药13 d。观察各组小鼠的体质量和主要脏器指数,观察荷瘤小鼠的肿瘤生长情况,计算抑瘤率。通过HE染色法光学显微镜下观察肿瘤组织形态、TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡,以免疫组化法检测血小板内皮细胞黏附分子CD31的表达显示肿瘤微血管密度的变化。结果:王不留行提取物中、高剂量对H22荷瘤小鼠的抑瘤率超过50%;与模型组比较,王不留行给药组肿瘤细胞凋亡显著增加,微血管密度显著降低。结论:王不留行提取物能显著抑制H22移植性肿瘤的生长,该作用可能与其促进肿瘤细胞凋亡及抑制新生血管有关。

王不留行提取物的急性毒理学研究

探究了王不留行提取物对小鼠的毒性剂量并对其毒性表现进行观察。采用常规急性毒理学研究的方法,选用ICR小鼠探究最小致毒量和最小致死量,HE染色观察其主要器官形态学变化,玻璃毛细管法测定血液凝固时间,生化法测定组织SOD活力、MDA含量及血清BUN、AST、ALT含量。结果显示:(1)致毒剂量:王不留行提取物对小鼠的最小致毒量为100 mg/kg,最小致死量为1500 mg/kg;(2)毒性表现:低剂量组(200 mg/kg)给药后1 d凝血时间缩短,其余指标与对照组相比无显著差异,高剂量组(1000 mg/kg)小鼠自主活动减少,体重增长率明显下降,给药后1 d血液凝固时间缩短,主要器官形态学明显改变,心脏SOD活性降低,MDA含量升高,血清BUN含量升高,其余指标未见明显改变。王不留行提取物高剂量(1000 mg/kg)对小鼠的血液凝固、心和肾脏有一定的毒性作用。

颐和春口服液对肾阳虚大鼠睾丸功能的影响

目的观察颐和春口服液对肾阳虚大鼠睾丸功能的影响并探讨其机制。方法用腺嘌呤制备肾阳虚大鼠模型。实验分为正常对照组、肾阳虚模型组、阳性药物治疗组和颐和春治疗组。观察颐和春口服液对肾阳虚大鼠睾丸形态学、血清雄性激素及睾丸组织MDA和SOD的影响,并观察对腺垂体细胞凋亡及下丘脑区兴奋性及抑制性氨基酸比值的影响。HE染色观察睾丸形态学改变、放免法测定血清雄性激素、生化法测定睾丸组织MDA和SOD,末端标记法测定腺垂体细胞凋亡,HPLC测定脑组织氨基酸。结果颐和春明显改善肾阳虚引起的睾丸损伤,提高雄性激素水平,降低睾丸组织MDA,提高SOD,减少腺垂体细胞凋亡,调节下丘脑兴奋性和抑制性氨基酸比值。结论颐和春口服液对肾阳虚大鼠生殖能力有一定改善作用,可能与其对下丘脑-腺垂体-睾丸轴的调节作用有关。

液质联用技术应用于药理学实验教学的探索

为培养制药工程本科生的药物评价能力,基于前期成熟的科研成果,将已建立的液质联用分析方法应用于药理学设计性实验,设计了题为“化合物X在小鼠体内药物代谢动力学研究”的实验.小鼠一次性灌胃化合物X溶液,取各时间点小鼠血浆,采用乙腈沉淀蛋白法,运用内标法进行高效液相色谱-质谱联用技术检测血浆中药物浓度,并用DAS2.0软件计算药代动力学参数.经过上述实验过程,学生了解了化学药物药代谢动力学研究的一般思路与方法,掌握了动物给药、取血、生物样本处理方法及药物含量测定等一系列综合实验技能,学会了高效液相色谱-质谱联用分析方法,参与了实验设计与结果分析,提高了学生研究、解决制药工程实际问题的能力.

基于新药研发能力培养的药理学实验教学探索

设计性实验在培养学生创新思维及新药研发能力中发挥着重要作用,以灵芝发酵菌丝体粉急性毒性研究为例,进行了药理学设计性实验教学的实践与探索。采用固定剂量法(50、500、2 000、5 000 mg/kg),一次性给小鼠灌胃相应灵芝发酵菌丝体粉水溶液,观察小鼠一般活动状态,检测小鼠血清中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的含量,病理切片观察重要脏器的形态学变化。通过实验,学生可掌握药物急性毒性研究的基本概念、基本原则、主要研究内容和实验方法,巩固了实验动物基本技能操作,又学习了药理、生化及病理等多门学科综合实验技术技能,通过设计性实验的实践,学生的动手实践能力、创新意识及新药研发能力得到了提高。

王不留行不同提取部位抑制新生血管作用的研究

目的比较不同工艺路线得到的王不留行提取部位体外抑制新生血管作用。方法采用系统溶剂萃取法和按目标萃取将王不留行水提物及醇提物分别进行部位分离,得到有机萃取相,经旋蒸、冷冻干燥得冻干粉末。SRB法测定药物对人微血管内皮HMEC-1细胞增殖的影响及IC50大小;划线法测定细胞迁移率;通过测定细胞外液LDH的释放监测并比较不同提取部位的细胞毒性。结果 A4,A7,B4,B7 4个组分IC50分别为6.44±0.2,12.78±0.4,7.25±0.07及10.35±0.21;药效依次为A4>B4>B7>A7;细胞迁移距离为B4<A4<A7<B7;细胞培养液LDH活性(U.L-1)分别为758.1±19.73,1006.54±129.41,1111.11±36.97及617.45,4-75.93。结论王不留行醇提取物按系统溶剂萃取法得到的正丁醇部位是相对活性好毒性小的有效部位。

优化制药工程专业药理学实验内容,培养学生创新能力

药理学的实验教学是药理学教学的重要组成部分,通过实验教学可以提高学生的动手能力、观察能力、分析问题和解决问题的能力,为了更有效的培养学生的能力,我们将制药工程专业实验体系分为三个层次:基本实验能力训练、综合能力训练和科研创新能力的训练。注重考核,不但保证了教学质量,更提高了学生的综合能力。

药物对离体肠管平滑肌的作用虚拟仿真实验教学方案

在目前的药理学实验教学改革中,一些综合性实验或设计性实验比例不断增加,导致一些经典的验证性实验课时数大量减少。将经典的验证性实验制作成虚拟仿真实验项目,可以方便学生在课外自主学习,强化对理论知识的认知。此外,一些操作难度较大的实验制成虚拟仿真实验项目,可课前提供给学生预习或者课后复习,也有利于学生对实验技能的掌握。这种虚实互补的教学方法的实施,正成为现代化教学改革的发展趋势,本文以"药物对离体肠管平滑肌的作用"的实验为例,探讨仿真教学的实验设计与应用。

VC对组胺致小鼠的毒性预防及治疗作用

采用常规急性毒理学研究的方法,探讨维生素C(VC)对组胺毒性的预防及治疗作用。组胺对小鼠饮食饮水无影响。组胺引起小鼠的痛阈下降,自主活动减少;肾、胃、肠、胸腺器官指数下降,SOD活力降低,MDA活性升高。VC对痛阈和器官指数下降有较好预防作用,对自主活动和SOD活性改善有明显治疗作用。VC对组胺毒性具有一定的预防及治疗作用。

合欢皮总皂苷对小鼠呼吸系统的毒性及机制研究

目的:研究合欢皮总皂苷对小鼠呼吸系统的毒性及机制。方法:以昆明小鼠为受试对象,实验随机分为生理盐水对照组、合欢皮总皂苷低剂量致毒组(7.5 mg/kg)、合欢皮总皂苷高剂量致毒组(750 mg/kg),灌胃给药14d后,气管插管术,生物信号记录系统记录呼吸的频率和幅值。取肺组织,HE染色观察病理形态的变化,生化法测定肺组织SOD和GSH-Px活性,末端标记法(TUNEL法)检测肺组织细胞凋亡,免疫组织化学法检测肺组织COX-1、COX-2基因蛋白的表达。结果:合欢皮总皂苷致毒剂量对小鼠呼吸频率和幅值无显著影响;肺组织病理变化明显,其SOD、GSH-Px活性与生理盐水组比较致毒组肺组织SOD和GSH-Px的活性显著降低,与低剂量致毒组比较高剂量致毒组SOD活性显著降低而GSH-Px活性无显著差异;与对照组比较,致毒组肺间质及支气管黏膜上皮细胞凋亡数目增多,COX-2表达增加,COX-1表达无显著改变。结论:致毒剂量合欢皮总皂苷对小鼠呼吸频率和肺通气量无明显影响,对呼吸系统的毒性主要表现在促使支气管黏膜上皮细胞凋亡、肺组织的氧化损伤及炎症反应。

药物化学课程教学改革

药物化学改革对本课程内容、教学模式及教学方法做出进一步的改进,以增强学生对现代药学化学理论知识的全面深入理解,提高其对于药物创新的理性认识,同时强化实践环节。

面向制药工程专业的《药理学》SPOC在线课程建设

小规模在线课程(SPOC)是一种新型混合教学模式,是大规模开放性在线课程(慕课,MOOC)与传统课堂教学的融合与创新。药理学是研究药物与机体(含病原体)相互作用及其规律和作用机制的一门学科,也是制药工程本科专业的核心课程。根据制药工程专业培养目标,以药物评价为核心,从课程设计理念、课程定位与目标、内容设计、课程考核等方面探讨《药理学》SPOC课程的改革与创新问题。

合欢皮总皂苷对大鼠循环系统的影响

目的观察合欢皮总皂苷低剂量组(5.25mg·kg-1)和高剂量组(26.25mg·kg-1)对大鼠血液循环系统及血液常规的影响。方法SD雄性大鼠,实验分为低剂量组(5.25mg·kg-1)、高剂量组(26.25mg·kg-1)及生理盐水(NS)对照组,生物信号记录系统记录给药后1h的血压、心电图(ECG)、脉搏及血常规的变化。动脉插管测定血压针式电极测定Ⅱ导联心电图,尾动脉记录脉搏波,细胞计数法测定血液常规。结果(1)血压:与正常对照组相比,低剂量组无显著变化,高剂量组明显升高。(2)脉搏:与正常对照组相比,低剂量组搏动频率、幅值和上升斜率均无显著差异;高剂量均增加。(3)心电图:与正常对照组相比,低剂量组无显著变化,高剂量组P-R间期和Q-T间期延长,P波、QR波S和T波幅值升高。(4)血液常规:低剂量对血常规无显著影响,高剂量使白细胞计数、血小板计数和血红蛋白含量明显下降。结论高剂量合欢皮总皂苷对大鼠血液及循环系统有一定的毒性作用。

酒精性肝损伤保护的药理实验教学设计

以酒精性肝病为研究主题,结合现代医药研究热点肠道微生态,融合药理、病理、生物化学、分析化学等多项实验技术,探索并实践生物制药专业药理学教学实验——以肠道微生态药物为主的酒精性肝损伤保护实验。以树立研究思维、掌握研究方法、提高研究能力为目标进行教学设计,借助翻转课堂的教学模式,引导学生完成动物造模、疾病观察、药物治疗以及病症指标检测等一系列实验过程;将基础研究与本科实验教学有机结合,学习新药研发前的药物筛选过程,训练学生高层次的综合分析、逻辑思维能力,有助于培养其应用能力与创新能力,提高综合科研素质。

浅谈大学生创新团队中综合素质培养

传统的高校教育造成大学生缺乏创新精神,现代高等教育要求知识型向素质型转化,着重培养学生的学习能力、动手能力和综合解决问题的能力。创新团队是实现这一目的较为有效的形式。通过创新团队,不仅提高学生创新素质,还提高了学生终身学习素质、团结协作素质、吃苦耐劳素质和科研道德素质。

适应CDIO教育理念的《药理学》精品课程建设

制药工程专业型技术人才工作在药品生产第一线,注重的问题是如何评价所生产药品的药学质量。根据制药工程专业培养定位,我们将制药工程专业药理学课程定位于以药物评价为核心、符合GLP规范的专业化人才培养。在实践环节,以基本实验技能培养为核心,设计了基础性实验内容;以药品评价实践能力培养为主线,实施了综合性实验;以研究项目为载体,开展了开放性设计创新实验。通过构建多层次自主学习体系、运用多种教学手段和考核方式确保了教学目标实现。

基于药物研发的药学综合实验设计

以模拟药物研发为主线,设计并实践了融合药学多学科知识的扑热息痛合成及表征、质量分析、药效学评价、剂型制备及质量评价综合实验。实验内容融合了药物化学、药物分析、药理学、药剂学、波谱分析等学科理论知识及实验技能,内容丰富多样,涉及的专业知识广泛;同时运用对比教学法,采用不同方法比较实验结果,提高学生对理论知识的理解和认知程度,加深对新药研发过程的理解。对提高学生的综合实验技能、专业知识融会贯通及药物研发能力具有重要作用。

颐和春口服液对肾阳虚大鼠肾损伤的保护作用

目的观察颐和春口服液对肾阳虚大鼠肾功能的保护作用,并初步探讨其机制。方法用腺嘌呤灌胃制备肾阳虚大鼠模型。实验分为正常对照组、肾阳虚模型组、肾阳虚阳性药物治疗组和肾阳虚颐和春治疗组。给药10d后观察颐和春口服液对肾阳虚大鼠体重、肾指数、肾功能及肾形态学改变,并从凋亡和抗氧化方面探讨其保护机制。HE染色观察肾形态学改变、生化法测定血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr),末端标记法测定肾组织凋亡。结果颐和春可改善肾阳虚引起的大鼠体重下降,使肾指数增加,降低血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,改善肾形态学表现,减轻肾小管上皮细胞凋亡,提高血清谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)活性。结论颐和春口服液对肾阳虚大鼠肾功能有明显的保护作用,可能与提高抗凋亡和抗氧化能力有关。

高效液相色谱-串联质谱法测定小鼠组织中的新型抗心力衰竭化合物AF-HF001

建立了基于高效液相色谱-质谱联用技术的新型抗心力衰竭化合物AF-HF001在小鼠组织中的测定方法,并考察了其在小鼠体内的组织分布。采用液-液萃取对样品进行预处理,以Thermo Hypersil Gold C18色谱柱进行分离,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,采用选择性反应监测(SRM)正离子模式检测分析物。小鼠组织中AF-HF001含量在0.5~10μg/mL范围内线性关系良好(r>0.996),在加标量为1.5,4,10μg/mL的组织样品中,提取回收率大于58%,基质效应在100.38%~109.99%之间,日内和日间精密度RSD均小于15%。该方法为AF-HF001的体内分布研究及进一步药物研发提供了依据。初步结果表明,该化合物能够迅速到达心脏并迅速代谢,主要分布在肝脏组织中,其他组织中分布较少。

蛹虫草虫草素对ANIT诱导胆汁淤积性肝损伤的保护作用

本研究探讨虫草素对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导胆汁淤积性肝损伤的改善作用及保护机制。首先建立ANIT诱导胆汁淤积性肝损伤模型,通过检测血生化指标、HE染色观察肝脏组织病理的情况评价虫草素的保肝作用,进一步通过Westernblot和实时定量PCR技术分析胆汁酸合成、分解、转运以及炎症相关通路的变化。结果显示,与模型组相比,虫草素可以有效降低血清中总胆汁酸水平,改善肝功能,明显降低肝脏病理损伤和炎性细胞浸润。同时,虫草素激活胆汁酸核受体FXR,上调胆汁酸转运体NTCP、BSEP表达,缓解肝内的胆汁酸淤积情况。此外,虫草素还可通过调控NF-κB信号通路抑制肝脏IL-6和IL-1β表达。结果提示,虫草素对ANIT诱导的胆汁淤积模型小鼠肝损伤具有保护作用,其机制可能与其减少肝内胆汁淤积和抑制炎症有关。