液相色谱-串联质谱法测定不同基质样品中硝基呋喃代谢物残留量

建立液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋、虾、鱼等农产品中硝基呋喃代谢物的残留量。样品中的硝基呋喃残留物经盐酸水解后,以2-硝基苯甲醛衍生,采用乙酸乙酯提取,浓缩,净化后再用C18色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液-乙腈溶液作为流动相梯度洗脱,电喷雾离子源(ESI)下以多反应监测(MRM)正离子模式扫描检测,内标法定量分析。呋喃它酮代谢物、呋喃西林代谢物、呋喃妥因代谢物、呋喃唑酮代谢物的质量浓度在0.5~50 ng/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均大于0.995,检出限分别为0.13、0.035、0.14、0.017μg/kg。在鸡蛋、虾、鱼中添加2、5、10μg/kg硝基呋喃代谢物时,平均回收率为88.71%~105.16%,测定结果的相对标准偏差为3.12%~9.08%(n=6)。该方法简便、快捷、准确度高,可用于测定鸡蛋、虾、鱼等农副产品中的硝基呋喃代谢物。

高效液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿化妆品中12种防腐剂

建立高效液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿化妆品中卡松和对羟基苯甲酸酯类等12种防腐剂。样品经甲醇溶解,超声提取,使用飞诺美Kinetex^(?)C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,用0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾离子源正负离子多反应监测模式下同时检测。12种防腐剂的质量浓度在1~100 ng/mL范围内与对应的色谱峰面积线性关系良好,相关系数为0.997~0.999 6,检出限为0.01~0.12μg/g,定量限为0.02~0.40μg/g。膏霜类样品基质效应较小,可不予考虑。样品在0.625、1.25、6.25μg/g 3个加标水平时的平均回收率为72.97%~106.53%,测定结果的相对标准偏差为1.13%~9.67%(n=6)。该方法简单、灵敏,可用于不同类型婴幼儿化妆品中卡松和对羟基苯甲酸酯类等12种防腐剂的测定。

高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中9种二苯甲酮类紫外吸收剂的含量

建立了高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定化妆品中9种二苯甲酮类紫外吸收剂含量的方法。将样品0.1 g用乙腈30 mL超声提取30 min,冷却至室温,稀释至50 mL,过滤,以C_(18)色谱柱为固定相,以不同体积比的乙腈和0.1%(体积分数)甲酸溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱。质谱分析中采用电喷雾正离子源和多反应监测模式检测,外标法定量。结果表明:样品基质效应较小,可不予考虑。9种二苯甲酮类化合物的质量浓度均在0.50~500μg·L^(-1)内与其对应的响应值呈线性关系,检出限(3s/k)为0.022~0.652μg·L^(-1)。连续测定混合标准溶液,9种二苯甲酮类紫外吸收剂测定值的相对标准偏差(n=6)均小于5.0%。按标准加入法进行回收试验,测得回收率为70.9%~116%。按此方法分析了15批样品,2批检出二苯酮-3,检出量为1.53%和4.67%,1批检出二苯酮-10,检出量为0.00126%。

中药注射剂过敏反应非临床评价方法研究进展

中药注射剂作为我国传统医药的新剂型,获得临床广泛应用的同时,其可能产生的不良反应特别是过敏反应也不容忽视。本文归纳综述近年来国内外过敏反应检测技术的研究进展,为中药注射剂的临床前安全性评价提供新思路。

假博路定的鉴别研究

目的:通过组合检验方式,识别假冒抗乙肝药物博路定。方法:以博路定为例,研究建立其外观鉴别法;采用超高效液相色谱-质谱联用技术对博路定伪品进行实验室确证,色谱柱为Agilent ZORBAX Exlend Plus C18(2.1 mm×50 mm,1.8μm),流动相为乙腈和0.02 mol·L^-1乙酸铵溶液(含0.1%甲酸),梯度洗脱,检测波长为254 nm,流速为0.3 mol·min-1,柱温为35℃。ESI离子源,正离子检测模式,离子源温度为350℃。结果:博路定真、伪品的外观存在明显差别,利用外观鉴别法初步判断其真伪。在液质联用的谱图中,博路定伪品出现与阿德福韦酯对照品色谱保留时间、一级质谱图和二级质谱图一致的色谱峰,证明博路定伪品中的主药成分为阿德福韦酯。结论:运用简便外观鉴别技术,可初步筛查可疑性假药,经液质联用验证,能有效提高药品监督的质量。

高效液相色谱法同时测定化妆品中9种二苯甲酮类紫外吸收剂

建立同时测定化妆品中9种二苯甲酮类紫外吸收剂的高效液相色谱法。样品用乙腈溶解,经超声提取后,选择Waters Symmetry C18(250 mm×2.1 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,采用二极管阵列检测器检测,检测波长为322 nm,外标法定量。9种二苯甲酮类紫外吸收剂的质量浓度在0.25~50μg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数为0.995~0.999,检出限为2.9~12.6μg/g,定量限为9.7~41.9μg/g。样品在3个不同浓度水平的加标回收率为89.84%~112.04%,测定结果的相对标准偏差为0.2%~7.7%(n=6)。该方法可用于化妆品中多种二苯甲酮类紫外吸收剂的同时检测。

果糖二磷酸钠注射液中游离磷酸盐含量的不确定度评定

目的评定果糖二磷酸钠注射液中游离磷酸盐含量的不确定度。方法比色法测定果糖二磷酸钠注射液中游离磷酸盐的含量,评定所得结果的不确定度。结果本实验方法测量结果的扩展不确定度U=0.06%(k=2),置信概率95%。结论分析并量化了检测方法的不确定度,为优化实验方法提供科学依据。

高效液相色谱法同时测定5种抗乙肝药物的研究

目的建立高效液相色谱法同时测定五种抗乙肝药物。方法采用水-乙腈-三氟乙酸在Waters Xbridge C 18柱(4.6×250mm,5μm)上进行梯度洗脱,流速为1.0mL·min^-1,检测波长为260nm,柱温35℃。结果5种药物在35min内均能达到基线分离,线性范围良好,相关系数均大于0.999;平均回收率n=3为99.4~101.7%(RSD:0.1~1.7%),精密度和稳定性试验的RSD分别为0.6%~0.8%,0.4%~0.5%,检测限0.1~0.2μg·mL^-1。在恩替卡韦制剂样品中检出假阳性样品,检出物为阿德福韦酯。结论该方法适用于五种抗乙肝药物同时测定,并且能准确筛查出高仿假药。

复方蒿甲醚分散片的溶出度研究及其方法学验证

目的:建立并验证复方蒿甲醚分散片中蒿甲醚和苯芴醇的溶出度测定方法。方法:蒿甲醚的溶出以水1 000 mL为溶出介质,桨法,转速为100 r·min^(-1),于1 h和3 h取样测定,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Macherey-Nagel,Nucleosil 100-5,12.5cm×40 mm),以水-乙腈-正丙醇-三氟乙酸(400∶500∶100∶1)为流动相,检测波长为210 nm,流速为1mL·min^(-1);蒿甲醚检测波长为210 nm。苯芴醇的溶出以1%氯化苄基二甲基烷基胺的0.1 mol·L^(-1)盐酸溶液1 000 mL为介质,桨法,转速为100 r·min^(-1),45 min时取样测定,按吸收系数法(E11%cm)在342 nm波长处测定吸光度。结果:蒿甲醚在1 h和3 h的溶出分别为58.5%和85.9%以上;苯芴醇在45 min溶出82.8%以上。结论:该方法分别测定分散片中蒿甲醚和苯芴醇的溶出度,稳定性高,专属性强。

高效液相色谱法同时测定化妆品中9种4-羟基苯甲酸酯类防腐剂

建立同时测定化妆品中9种4-羟基苯甲酸酯类防腐剂的高效液相色谱法。样品经甲醇溶解,超声提取,使用Waters Symmtery C_(18)(2.1 mm×250 mm,5μm)色谱柱,用0.1%磷酸溶液–乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用二极管阵列检测器进行检测,检测波长为254 nm,外标法定量。9种防腐剂的质量浓度在0.1~100μg/mL范围内与对应的色谱峰面积线性关系良好,相关系数为0.9993~0.9997,检出限为0.65~2.22μg/g,定量限为2.18~7.39μg/g。样品在25、50、250μg/g 3个加标水平时的平均回收率为95.73~104.06%,测定结果的相对标准偏差为0.58~5.28%(n=6)。该方法简单、准确、灵敏,可用于化妆品中9种4-羟基苯甲酸酯类防腐剂的测定。

复方蒿甲醚分散片的含量测定及其方法学研究

目的:建立并验证复方蒿甲醚分散片中蒿甲醚和苯芴醇的含量测定方法。方法:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以离子对溶液-乙腈(70∶30)为流动相A,离子对溶液-乙腈(30∶70)为流动相B,梯度洗脱,流速为1. 3 mL·min^(-1);蒿甲醚检测波长为210 nm,苯芴醇检测波长为380 nm。结果:蒿甲醚和苯芴醇分别在0. 051 0～0. 611 9 mg·mL^(-1)与0. 299 2～2. 392mg·mL^(-1)范围内呈良好的线性关系,相关系数分别为0. 999 9和0. 999 5,平均加标回收率分别为100. 2%和99. 6%。结论:该方法可同时测定分散片中蒿甲醚和苯芴醇的含量,简便、准确快速,分离度好,稳定性高,专属性强。

转移因子注射剂质量评价与研究

目的考察国产转移因子注射剂的质量现状及存在问题,对现行质量标准的科学性及检验方法进行研究,完善质量标准。方法转移因子注射剂为多组分生化药,是2013年国家药品计划抽验品种。通过对3个生产企业57批次转移因子注射剂,依据现行法定质量标准进行标准检验,运用多种统计学方法分析其质量总体水平,比较不同生产企业产品质量;通过探索性研究,建立并完善了多个检测方法,包括微量板-白细胞黏附抑制法、高效液相色谱-氨基酸差值法、酶解-反相离子对色谱法、高效液相色谱特征图谱法等,对该品种的质量状况及现行质量标准的可行性做出总体分析及评价。结果本次抽验中涉及的57批次样品按现行标准检验,合格率为91.2%。在5批不符合规定样品中,4批为转移因子注射液,均为可见异物不符合规定,1批为注射用转移因子,核糖含量不符合规定。法定检验与探索性研究结果之间存在显著差异,部分项目的检测反映出一些标准上的缺陷和问题;通过本次实验,对国家药品标准地升部十六册中收载的转移因子注射剂标准作了大幅提高和修订。结论从标准检验和探索研究结果的质量分析情况看,本品总体质量状况一般。探索性研究结果表明法定标准需提高,应采用更专属、准确、灵敏的方法全面控制产品质量。

转移因子脱E受体活力测定方法的优化及基于微量板-白细胞黏附抑制试验的新方法研究

目的优化现行标准中用于测定转移因子制剂活力的脱E受体法,并建立可用于替代的新方法,用上述方法对来自3个生产企业的57批转移因子制剂进行测定。方法采用改进的细胞涂片-染色法制备样品的细胞涂片;采用新鲜猪胸腺、兔胸腺分别与绵羊红细胞进行交叉试验;建立微量板-白细胞黏附抑制替代方法,对方法的线性、重复性、专属性等进行考察。结果改进的涂片-染色法,镜检效果清晰可靠,便于读数和保存。猪胸腺淋巴细胞与兔胸腺淋巴细胞均能与绵羊红细胞形成E玫瑰花结,两种方法试验结果无显著差异。白细胞黏附抑制率结果与玫瑰花结活力测定结果无显著性差异,可用于替代。结论以改进的染色涂片方法替代原有的细胞计数板法,能更清晰的反应样品的活力值,且可长期保存,适合对大批量样品的随时读片和复核。微量板-白细胞黏附试验替代方法,降低了人为主观因素,较原方法更加准确、快速、重现性好、专属性强,且适合大批量样本的高通量检测。