罗汉果苷V调控高糖状态巨噬细胞M1极化促进骨髓间充质干细胞的成骨分化

背景:糖尿病微环境会造成巨噬细胞过度M1极化,这种高糖炎症状态会抑制骨髓间充质干细胞的成骨分化,从而影响糖尿病骨缺损的愈合。研究表明罗汉果苷Ⅴ具有抗炎、抗氧化、降血糖的作用,但其能否调节高糖炎症状态下巨噬细胞M1极化及骨髓间充质干细胞的成骨分化尚不清楚。目的:探讨罗汉果苷Ⅴ在高糖炎症状态下调节巨噬细胞M1型极化对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法:构建糖尿病C57BL/6小鼠模型,从正常和糖尿病小鼠分离骨髓来源巨噬细胞,分别培养于低糖和高糖培养基。使用脂多糖和干扰素γ作为炎症刺激诱导骨髓来源巨噬细胞的M1型极化,同时以160,320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ干预,用流式细胞术检测F4/80^(+)CD86^(+)细胞比例,qRT-PCR检测诱导型一氧化氮合酶、白细胞介素1β、白细胞介素6的mRNA表达水平,ELISA检测骨髓来源巨噬细胞上清液中肿瘤坏死因子α水平。分离C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,分别使用低糖或高糖成骨诱导液诱导成骨分化,添加M1型巨噬细胞条件培养基作为炎症刺激,以及320μmol/L罗汉果苷Ⅴ干预,成骨诱导14 d后采用qRT-PCR检测碱性磷酸酶、Runt相关因子2、骨钙素、骨桥蛋白的mRNA表达水平,成骨诱导21 d后进行茜素红染色及定量分析。结果与结论:①流式细胞术结果显示320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ组的F4/80^(+)CD86^(+)细胞比例明显低于高糖炎症对照组(P<0.05);②qRT-PCR结果显示160,320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ组的诱导型一氧化氮合酶、白细胞介素6的mRNA相对表达量较高糖炎症对照组显著降低(P<0.05),320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ组白细胞介素1β的mRNA相对表达量较高糖炎症对照组显著降低(P<0.05);③ELISA结果显示160,320,640μmol/L罗汉果苷Ⅴ组的肿瘤坏死因子α分泌水平较高糖炎症对照组显著降低(P<0.05);④320μmol/L罗汉果苷Ⅴ干预后,高糖炎症状态下骨髓间充质干细胞的钙盐沉积增加(P<0.05),且碱性磷酸酶、Runt相关因子2和骨桥蛋白的mRNA相对表达量增加(P<0.05)。结果表明,罗汉果苷Ⅴ可通过抑制高糖炎症状态下骨髓来源巨噬细胞的M1型极化及炎症因子表达,促进骨髓间充质干细胞的成骨分化。

乳酸干预破骨细胞条件培养基促进内皮细胞血管的生成

背景:聚乳酸作为可降解的骨组织工程支架材料被广泛用于组织再生与修复研究,在促进组织愈合与新骨形成、血管生成中具有重要作用。目的:观察聚乳酸降解终产物乳酸对破骨细胞的作用,以及乳酸干预后破骨细胞条件培养基对血管内皮细胞增殖、迁移和小管形成功能的影响。方法:(1)取对数生长期的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7,贴壁后分别加入含0,5,10,20 mmol/L乳酸的破骨诱导培养基(含核因子κB受体活化因子配体、体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基),培养5 d后分别进行抗酒石酸酸性磷酸酶与细胞骨架纤维状肌动蛋白染色,培养24h后采用RT-PCR检测抗酒石酸酸性磷酸酶5 m RNA表达。(2)取对数生长期的RAW264.7细胞,贴壁后分2组培养:对照组加入破骨诱导培养基,实验组加入含10 mmol/L乳酸的破骨诱导培养基,培养5 d后更换为无血清DMEM培养基继续培养24 h,离心取上清液,分别与等体积含体积分数10%胎牛血清DMEM培养基混合后作用条件培养基备用。取对数生长期的人脐静脉内皮细胞,分别与对照组、实验组条件培养基共培养,通过CCK-8、Transwell、划痕、成管实验观察细胞的增殖、迁移和成管能力,通过RT-PCR和Western Blot检测血管生成相关基因和蛋白的表达。结果与结论:(1)抗酒石酸酸性磷酸酶与肌动蛋白染色结果显示,5,10 mmol/L乳酸可促进RAW264.7细胞破骨向分化,其中以10 mmol/L乳酸的促进作用更显著;RT-PCR检测结果显示,5,10,20 mmol/L乳酸均可提高酒石酸酸性磷酸酶5 m RNA的表达,其中以10 mmol/L乳酸的提高作用最显著;(2)与对照组条件培养基相比,实验组条件培养基可促进人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移与成管能力(P<0.05),提高血管内皮生长因子、血管生成素1的m RNA和蛋白表达(P<0.05);(3)结果表明,乳酸诱导分化的破骨细胞条件培养基可促进内皮细胞的血管生成,机制可能与提高血管内皮生长因子、血管生成素1表达相关。

骨增量材料中血管新生性能的作用及认识

骨增量是种植治疗中解决骨量不足状况的必要手段,骨增量成功的关键之一是植入的骨增量材料应能发生血管新生,形成与宿主组织有效血氧交换的网络。本文就骨增量材料的血管新生作用研究进展进行阐述,为促进骨增量材料的研发及其临床转化提供建议和参考。

影响电脑比色仪临床测量精确度的分析研究

目的:了解VITA easyshade compact无线电脑比色仪在不同光源以及不同牙体部位的比色精确度以及可重复性,总结影响比色仪正确比色的操作因素,为临床工作进行准确颜色测量提供参考。方法:在自然光、日光灯和卤钨灯(椅位照明)3种不同光源下,挑选31名操作者,使用VITA easyshade compact比色仪分别测定VITA 3Dmaster比色板各牙片中1/3的颜色,将测出的色值与比色板色值进行比较,将两者相符的和不相符的结果分别记录,进行统计分析;在自然光下,将VITA 3D mas-ter比色板的牙片唇面体部以三分法分成近中1/3、中1/3、远中1/3三个部位,挑选31名操作者,使用VITA easyshade com-pact比色仪分别测定VITA 3Dmaster比色板各牙片近中1/3、中1/3、远中1/3三个部位的颜色,将测出的色值与比色板色值进行比较,将两者相符的和不相符的结果分别记录,进行统计分析。结果:在自然光、日光灯和卤钨灯3种不同光源下,电脑比色仪测量上颌中切牙中1/3部位的比色精确度没有明显差异(P>0.05);在自然光下,使用电脑比色仪对上颌中切牙的不同部位进行比色时,中1/3的精确度明显高于近中1/3和远中1/3(P<0.01),远中1/3的精确度高于近中1/3(P<0.05)。结论:不同光源下对VITA easyshade compact的比色操作精确度影响不大,牙齿的局部的解剖部位容易造成比色结果的差异。

增强miR-185-5p表达可减轻小鼠实验性牙周炎的炎症反应

背景:目前牙周炎的发生发展机制仍不十分明确,治疗靶点有待探讨。近年研究发现,miR-185-5p在多种疾病中表现出抗炎作用,其在牙周炎中的作用尚不清楚。目的:探讨调节miR-185-5p表达对小鼠实验性牙周炎炎症反应的影响。方法:C57B/6J小鼠24只随机分为正常对照组、牙周炎对照组、牙周炎miR-NC组、牙周炎miR-mimics组,每组6只。除正常对照组外,其余组均构建实验性牙周炎模型。造模4周后,在牙周炎miR-mimics组小鼠双侧下颌第二磨牙近远中牙龈乳头注射100μL含0.5 mmol/L miR-185-5p mimics的生理盐水,在牙周炎miR-NC组注射100μL含0.5 mmol/L阴性对照miR-NC的生理盐水,在正常对照组、牙周炎对照组注射等量生理盐水。给药8周后处死小鼠,Micro-CT检测左下颌骨,qRT-PCR检测左下颌牙龈miR-185-5p、MZB1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6基因表达,免疫组织化学染色检测小鼠右下颌牙龈MZB1、磷酸化p65核因子κB、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6蛋白表达。结果与结论:①Micro-CT检测显示,与牙周炎对照组及牙周炎miR-NC组相比,牙周炎miR-mimics组的牙槽骨丧失减少(P<0.05);②qRT-PCR结果显示,牙周炎miR-mimics组的miR-185-5p表达高于正常对照组、牙周炎对照组及牙周炎miR-NC组(P<0.05);与牙周炎对照组、牙周炎miR-NC组相比,牙周炎miR-mimics组的MZB1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的mRNA表达降低(P<0.05);③免疫组织化学染色结果显示,与牙周炎对照组及牙周炎miR-NC组相比,牙周炎miR-mimics组的MZB1、磷酸化p65核因子κB、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6蛋白表达减少(P<0.05);④提示增强miR-185-5p表达能抑制牙周炎炎症反应,抑制牙槽骨吸收,该作用可能与下调牙龈组织中MZB1、核因子κB通路有关。

牙齿比色训练系统对口腔比色准确性的影响

目的:评价牙齿比色训练系统(TTB)对受训者辨色能力的影响。方法:选择大学5年级口腔专业本科生68名作为受训者,采用TTB进行牙齿比色训练,采用秩和检验分析训练前后受训者比色准确性的差异。结果:全体受训者训练后成绩比训练前平均提高(32.32±71.96)分(P<0.01),操作时间比训练前平均加快了(4.45±3.84)min(P<0.01);其中男性加快了(3.80±3.79)min(P<0.01);女性加快了(4.90±3.88)min(P<0.01)。训练前后的男女性之间成绩、操作时间相互比较,均无明显差异(P>0.05)。结论:经过牙齿比色训练系统的专业训练,口腔医学生比色能力有明显提高。

将美学引入口腔修复教学必要性的调查分析

牙齿各种类型的缺损或缺失均会不同程度地影响患者的美观、发音和咀嚼等功能。尤其是前牙的缺损和缺失,如果长期得不到修复,常常会引起患者心理改变,对生活、工作造成不同程度的影响^（[1]）。我们所制作的每一件修复体,要像艺术家创造作品一样,合理构思设计、精雕细琢,追求真实、自然,使每一件修复作品是技术与艺术的结合体,这是每一个口腔医务工作者的追求和责任^（[2,3]）。口腔美学和修复学相互渗透,是交叉学科,

使用双侧闪光灯摄影比色技术对上颌中切牙进行比色的可行性研究（英文）

目的:研究使用数码相机双侧闪光灯摄影比色技术对上颌中切牙进行比色的可行性,并了解青年人上颌左右中切牙的颜色差异。方法:采用数码相机和双侧闪光灯获取155例志愿者的两侧上颌中切牙的数码照片。利用计算机软件对每颗牙齿照片的的L(明度)、a(红绿色度)和b(黄蓝色度)的颜色坐标进行测量。采用可靠性内相关系数(ICC)比较每颗右上颌中切牙两次拍照之间的色彩差异,检验该技术的一致性。采用配对样本t检验对左右上颌中切牙的L、a、b值分别进行统计学分析,比较左右上颌中切牙的颜色差异。结果:L、a、b的ICC检验值均在良好的可信度范围内(0.75~1.00)。左右两侧上颌中切牙的红绿色度a在切端、中部和颈部均有明显差异,明度L仅在两侧上颌中切牙的切端具有明显差异,黄蓝色度b仅在两侧上颌中切牙的牙颈部有明显差异。结论:使用双侧闪光灯摄影比色技术在牙齿比色过程中可以输出稳定的结果,具有较高的可信度;青年人左右两侧上颌中切牙的颜色并不是完全相同的。

小鼠单核细胞破骨向分化与乳酸浓度的关系

背景:前期研究发现聚乳酸复合材料可以加快骨改建速率,其作用机制有待进一步研究。目的:观察不同乳酸浓度对小鼠单核细胞破骨向分化的影响。方法:分别用含0,5,10,20 mmol/L乳酸的DMEM完全培养基,在50μg/L RANKL的诱导下培养小鼠RAW264.7细胞5 d,0 mmol/L乳酸组即为对照组。CCK-8法分析乳酸浓度对细胞增殖率的影响;使用抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒对抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核细胞进行染色和计数;RT-PCR检测酸性磷酸酶5、活化T细胞核因子c1、RANK的基因表达;Western Blot检测组织蛋白酶K、活化T细胞核因子c1的蛋白表达。结果与结论:①5 mmol/L乳酸浓度条件下,小鼠RAW264.7细胞的增殖率最高,20 mmol/L乳酸浓度条件下的细胞增殖率最低;与对照组相比,10 mmol/L乳酸浓度对小鼠RAW264.7细胞增殖率无显著性意义;②在10mmol/L乳酸浓度条件下,抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性率最高,酸性磷酸酶5、活化T细胞核因子c1、RANK的m RNA表达量最高;③随着乳酸浓度的升高,组织蛋白酶K蛋白表达水平呈递增趋势,而活化T细胞核因子c1的蛋白表达水平呈递减趋势;④提示在目前实验条件下,随着乳酸浓度的升高,乳酸促小鼠RAW264.7细胞破骨向分化的能力先升高后降低,10 mmol/L乳酸为促小鼠RAW264.7细胞破骨向分化的最适浓度。乳酸可以绕过核因子κB信号通路中活化T细胞核因子c1位点影响小鼠RAW264.7细胞破骨向分化。

抑制miR-145表达影响小鼠牙种植体周围炎炎症反应的实验研究

目的:探讨抑制miR-145对小鼠种植体周围炎炎症反应的影响。方法:将C57BL/6J雄性小鼠40只随机分为正常对照组、炎症对照组、炎症miR-NC组、炎症miR-inhibitor组。在各组上颌植入种植体,对3个炎症组拴丝形成种植体周围炎后,对炎症miR-inhibitor组局部注射miR-145抑制剂,在炎症miR-NC组局部注射miR-145抑制剂的阴性对照剂,微计算机断层扫描观察各组种植体周围骨丧失情况,苏木素-伊红染色观察种植体周围组织炎细胞浸润情况,实时荧光定量PCR检测种植体周围牙龈组织miR-145、趋化因子CC基序配体2(CCL2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)、基质金属蛋白酶8(MMP8)的表达水平。结果:与正常对照组小鼠相比,3个炎症组小鼠骨丧失量及炎细胞浸润明显增加(P<0.05),牙龈组织中炎症相关因子CCL2、TNF-α、IL-1β、IL-10、MMP8表达水平升高(P<0.05);抑制miR-145表达后,种植体周围炎小鼠骨丧失量、炎细胞浸润情况改善,CCL2、TNF-α、IL-1β、MMP8表达减少,IL-10表达升高(P<0.05)。结论:抑制miR-145的表达可缓解种植体周围炎炎症反应,可能与其调节牙龈组织中炎症相关因子表达有关。

基于虚拟现实技术的口腔修复学实验教学探索

目的评估口腔修复实验教学中基于虚拟现实技术的医疗教育模式的应用效果。方法选择广西医科大学口腔医学院2022至2023年需进行口腔修复学实验教学学习的口腔医学专业本科生,将其分为实验组与对照组,每组25名学生,在口腔修复学实验教学中,将基于虚拟现实技术的医学教育模式与传统教学方法进行对比。通过比较实验组和对照组学生的操作技能和理论成绩,结合问卷调查,评估了实验组学生对于虚拟现实技术在教学中的评价。结果教学过程实施后,实验组学生的技能成绩和理论成绩均明显高于对照组学生。结论将虚拟现实技术的医学教育模式应用于口腔修复学实验教学,不仅可提升学生对教学的满意程度,还有助于提高学生的操作水平、理论知识学习能力。

磷酸钙骨水泥与聚乳酸-羟基乙酸微球复合物用于拔牙位点骨质保存的动物实验

目的 初步探索可注射磷酸钙骨水泥（calcium phosphate cement,CPC）与聚乳酸-羟基乙酸[poly（lactic-co-glycolic acid）,PLGA]微球复合物作为修复材料应用于拔牙位点即刻修复的可行性.方法 用15只犬建立犬下颌即刻拔牙缺损模型,每只犬制备3个下颌骨缺损区,分别植入CPC-PLGA微球复合物（实验组,E组）、颗粒状骨粉（Bio-Oss,阳性对照组,P组）、自体血（空白对照组,B组）,4、8、12周后取材观察（每组每个时间点样本量为5）,比较各组骨密度、新生骨量.结果 4、8周时各组骨密度差异无统计学意义（P＞0.05）.12周时E组骨密度（114.9±8.4）与P组（117.4±12.1）差异无统计学意义（P＞0.05）,但均显著高于B组（95.0±12.6） （P ＜0.05）.术后4周新生骨量P组[（87.5±1.5）％]＞B组[（78.7±2.7）％]＞E组[（69.2±1.8）％]（P＜0.05）;8、12周新生骨量P组[（94.0±2.3）％和（93.5±1.9）％]与E组[（94.7±1.1）％和（96.0±0.9）％]均显著大于B组[（76.8±3.0）％和（87.0±2.4）％]（P＜0.05）.结论 CPC-PLGA微球复合物即刻修复拔牙位点的效果与颗粒状骨粉相似,可有效保存拔牙位点骨质.