大鼠睾丸支持细胞的分离、纯化和鉴定

目的 培养高纯度的大鼠睾丸支持细胞，并应用检测ABP mRNA原位杂交方法加以鉴定。方法 选用18～22d龄SD雄性大鼠睾丸，采用0．25％胰蛋白酶、0．1％透明质酸酶、0．1％胶原酶三酶依次消化法分离支持细胞，置于32℃5％CO2的培养箱培养，48h后用20mmol／L Tris—HCl低渗处理培养细胞。培养1周后应用伊红染色、吖啶橙荧光染色、Feulgen染色对所培养的支持细胞进行鉴定，同时应用原位杂交检测ABP mRNA方法鉴定分离培养的支持细胞。结果 培养1周后所获培养的支持细胞纯度达95％以上。分离培养的支持细胞ABP mRNA表达阳性，其形态结构特征与用其他方法鉴定为支持细胞的形态结构特征一致。结论 采用三酶连续消化及低渗处理法分离培养的支持细胞纯度高，而且应用原位杂交方法检测ABP mRNA是一种新的、特异、有效的鉴定支持细朐及萁功能的方法．

卵母细胞培养技术的研究进展

近年来,我国的不孕不育率不断升高,女性卵巢功能下降明显。卵母细胞体外培养是获取窦卵泡中未成熟的颗粒细胞-卵母细胞复合体进行体外成熟的一项技术,其在培养方式上可分为二维和三维培养,三维培养以海藻凝胶和纤维蛋白等材料构建培养环境,模拟卵母细胞的体内环境,成熟率较二维培养显著提高;在培养种类上可分为裸卵培养、颗粒细胞与卵母细胞共培养,共培养可以防止胚胎的阻滞并提高发育潜力。除卵母细胞分离培养外,还可应用卵巢组织进行体外培养,如原始卵泡体外激活,目前已有成功的临床应用案例,为卵巢早衰患者带来了希望。

白蛋白与卵黄联合应用于人类精液冷冻保存的研究

目的:初步探讨白蛋白与卵黄两种蛋白联合应用于人类精液冷冻保存的效果,以期为人类精液冷冻提供一种更为有效的冷冻保护液。方法:以卵黄甘油柠檬酸钠作为对照组,其内加不同浓度的白蛋白(1、2、3、4、5 g/L)作为实验组,对人类精液进行冷冻保存,冷冻前后运用计算机辅助精液分析系统(CASA)进行精子运动参数分析;在实验组中选用冷冻复苏后精子运动参数最佳的加1 g/L白蛋白的卵黄甘油柠檬酸钠组及卵黄甘油柠檬酸钠对照组,进行精子存活率、膜功能、线粒体功能、超微结构比较分析。结果:加1 g/L白蛋白的卵黄甘油柠檬酸钠组,其精子活率、活力明显高于对照组及其他实验组(P<0.05);精子存活率、精子头部未着色率明显高于对照组(P<0.05);精子琥珀酸脱氢酶活性明显高于对照组(P<0.01);精子超微结构优于对照组。结论:白蛋白与卵黄两种蛋白联合应用冷冻保存人类精液的效果优于单用卵黄,且白蛋白的作用与其使用浓度有关;白蛋白与卵黄联合使用在人精液冷冻保存中可能具有相加和互补功能。

中西医综合治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期临床观察

目的:探讨中西医综合治疗对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者的疗效.方法:采用随机、对照、单盲的临床试验方案采用随机对照单盲临床研究方法,将在呼吸专科门诊入选的COPD稳定期患者63例随机分为治疗组(n=32)与对照组(n=31).两组患者均按相关指南采用西医基础治疗,治疗组32例除基础治疗外还加服玉屏风颗粒、百令胶囊,健脾益肺冲剂.疗程均为3 mo.结果:治疗组在增加6 min步行距离与生活质量评分、减少急性加重次数上优于对照组(P<0.05),而肺功能改善与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:中西医综合治疗较单纯西医基础治疗可提高患者的生活质量、行走耐力,减少其急性加重次数,不良反应轻微,患者依从性好.

中医师承教育与院校教育相融合的思考

现行的中医高等院校教育已有半个世纪的历程,为中医药事业培养了大批医、教、研人才。而面对目前中医人才队伍日趋萎缩和西化的现状,院校教育的承办者与承担者进行了深入的思考,师承教育重新被审视,越来越多地出现在中医院校。如何使中医院校教育与师承教育恰当、有效地融合,

红外热像技术在早孕诊断中的临床应用分析

将50例正常妇女及33例诊断为早期宫内妊娠的妇女,进行盆腔和乳腺红外热像分析。结果发现早期宫内妊娠妇女红外透视图像特征在子宫区显示为团块状高温区,与周围组织温差平均为0.35±0.17℃,明显高于未孕妇女平均温差0.04±0.10℃(P<0.01);早孕妇女附件区与周围组织温差平均为0.39±0.23℃,明显高于未孕妇女平均温差0.26±0.14℃(P<0.05);早孕妇女乳腺呈热引流型红外热图,乳腺高温区与周围组织温差平均为0.63±0.06℃,明显高于未孕妇女平均温差-0.14±0.30℃(P<0.01)。结论是红外热像技术对早孕的临床诊断具有一定的临床价值,红外热像技术对于胎儿与孕妇来说无放射性、无损伤、安全,在优生、优育方面有其重要的意义。

喘可治注射液通过调节Th17/Treg平衡抑制哮喘模型小鼠气道炎症的实验研究

目的:初步探讨喘可治注射液通过调节Th17/Treg平衡对哮喘模型小鼠气道炎症的影响。方法:以Balb/C小鼠为研究对象,随机分为正常对照组、模型组、喘可治组,每组20只。采用屋尘螨变应原经腹腔注射致敏加滴鼻激发复制支气管哮喘气道炎症模型,观察各组炎症指标及免疫学指标的变化。结果:①模型组肺脏中RORγt mRNA表达显著高于正常对照组(P<0.05);模型组肺泡灌洗液(BALF)中IL-17、IL-6含量高于正常对照组(P<0.05);模型组脾脏中CD4+IL-17+占CD4+的比例高于正常对照组,而FOXp3+CD4+CD25+占CD4+的比例低于正常对照组,二者均有统计学意义(P<0.05)。②喘可治组肺泡灌洗液(BALF)中IL-6的含量少于模型组(P<0.05);喘可治组脾脏中CD4+IL-17+占CD4+的比例低于模型组(P<0.05),FOXp3+CD4+CD25+占CD4+的比例高于模型组(P<0.05)。结论:①在哮喘模型小鼠中存在着Th17与Treg的失衡,主要表现为CD4+IL-17+的增多和FOXp3+CD4+CD25+的减少。②喘可治注射液可以通过下调RORγt mRNA的表达抑制IL-17、IL-6等炎症因子的释放,同时提高调节性T细胞(Treg)的功能,改善哮喘小鼠的免疫紊乱状态,综合改善哮喘症状,喘可治注射液可能以Th17为靶点抑制哮喘气道的炎症反应。

喘可治配合西药治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期50例

目的:观察温肾补肺、止咳平喘类中药配合西药治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期的疗效。方法:采用喘可治注射液(淫羊藿、巴戟天)穴位(肺俞、脾俞、肾俞、足三里)注射配合西药治疗本病50例,并设对照组观察。结果:治疗组总有效率93.3%,对照组总有效率73.3%;治疗组血气分析指标、肺通气功能指标改善情况均优于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:本方法对本病有温肾补肺,止咳平喘的功效,可改善肺功能及血气分析指标。

大学生性与生殖健康的教学内容探讨

随着社会的发展,大学生性与生殖健康教育日益成为重要的课题。自新《婚姻法》颁布实施以来,高校学生的婚前性行为发生率有了明显的上升,且其发生率随年级递增。[1]前不久,国家人口计生委发布的一组数据显示,中国每年人工流产多达1300万人次,位居世界第一。其中25岁以下女性占一半以上,大学生成为人流"主力军"。这是由于大学生性知识较缺乏,性态度较为开放,从而导致意外妊娠与人工流产的比例也大幅增加。[2]因此为大学生提供性与生殖健康教育,帮助大学生树立正确的性价值观,已成为当前大学生教育中刻不容缓的任务。

痰热清注射液治疗慢性阻塞性肺病急性加重期临床观察

目的:探讨痰热清注射液对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期的疗效。方法:采用随机对照方法将98例慢性阻塞性肺病急性加重期患者通过软件随机分为观察组和对照组,观察组50例在西药常规治疗的基础上加用痰热清注射液治疗,对照组48例采用西药常规治疗。结果:临床总有效率观察组92%,对照组75%;观察组血气分析指标、肺通气功能指标的改善与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:痰热清注射液对慢性阻塞性肺病急性加重有较好疗效,与西药联用能提高疗效。

冷冻对人精子遗传物质的影响

精液冷冻是辅助生殖技术的一个必要环节。由于AID的广泛应用及人类精子库的建立 ,关于冷冻保存对人精子遗传物质的影响日益受到重视。

uPAR在大鼠睾丸第一精子发生波中的表达变化

目的:探讨uPAR在大鼠精子发生中的作用。方法:取出生后d0、d5、d10、d15、d21、d28、d35、d42、d49、d56SD大鼠睾丸组织,采用实时荧光定量分析法检测各年龄组大鼠尿激酶受体(uPAR)mRNA表达,并用Western印迹法检测各年龄组大鼠uPAR蛋白表达。结果:大鼠睾丸组织uPARmRNA表达与蛋白表达有相似的趋势:刚出生时表达水平较高,后逐渐下降,约在d15达最低,到d28时开始增加,到d35时到达高峰,随后d42下降,之后保持一定的水平。双变量回归相关分析显示,uPARmRNA表达与蛋白表达为中度正相关。结论:大鼠睾丸uPAR表达在第一精子发生波中出现2个高峰,第一高峰在刚出生时,说明uPAR与精子发生的启动有着密切联系。第二高峰是在出生第5周,这说明uPAR可能参与精子排放过程中的组织重塑及精子变态过程。

丹参注射液对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠转化生长因子β_1的影响

目的研究丹参注射液对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺气道重塑的干预作用及其作用机制。方法通过熏香烟加气管内注射内毒素方法建立大鼠COPD模型。同时设立模型组、丹参组和空白对照组,用HE染色观察肺组织病理形态学变化和胶原沉积情况,用ELISA检测试剂盒测定血清和肺组织匀浆中转化生长因子β1(TGF-β1)水平,用免疫组织化学染色法观察TGF-β1在肺组织中的表达。结果血清TGF-β1含量空白组最高,丹参组次之,模型组最低,3组之间差异无统计学意义(P均>0.05);肺组织匀浆总TGF-β1含量模型组高于空白组和丹参组,差异有统计学意义(P<0.05);丹参组含量高于空白组,但差异无统计学意义(P>0.05);肺组织中TGF-β1mRNA表达模型组最强,与空白组、丹参组比较差异有统计学意义(P<0.05);丹参组与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论TGF-β1参与了COPD气道重塑的发病过程,丹参注射液可以通过下调TGF-β1干预COPD气道重塑。

参麦注射液治疗慢性阻塞性肺疾病130例疗效观察

目的:探索参麦注射液对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者机体免疫功能、血气分析、肺功能等的影响及临床疗效观察。方法:通过软件将130例COPD患者随机分组,治疗组68例,对照组62例,对照组采用常规抗感染、解痉平喘化痰等方法治疗,治疗组在上述治疗基础上加用参麦注射液静脉滴注。结果:治疗组临床总有效率94.12%;对照组总有效率77.42%;治疗组患者的血清CD4增加及免疫调节指数(CD4/CD8)升高,从而增强了细胞免疫功能,两组治疗前后有统计学意义(P<0.05);治疗组血气分析指标、肺通气功能指标的改善与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:参麦注射液能提高COPD患者机体的免疫功能,改善缺氧、二氧化碳潴留及肺功能,与西药联合应用可提高疗效。

大鼠睾丸生精细胞共培养系统的建立

目的建立生精细胞体外分化（如减数分裂、精子变态）培养体系,为研究精子发生中各种调控因素的作用提供一个良好的细胞模型。方法取20-22日龄的SD雄性大鼠睾丸,放在预冷的Hanks液中洗2次,用1 mg/mL胶原酶32℃消化15-20 min。然后将睾丸剪碎,重复用1 mg/mL胶原酶消化5-10 min。细胞用含10%胎牛血清及各种营养因子的HamF12/DMEM培养液悬浮,按约2×10^6/cm^2密度分别接种于双室培养槽（双室培养）或放有盖玻片的6孔板（单室培养）中,在32℃、95%空气、5%CO2条件下培养。每日在相差显微镜下观察共培养支持细胞/生精细胞的生长状态,定期进行苏木精-伊红染色、BrdU染色。结果在双室培养2周后,部分生精细胞可见鞭毛出现,培养4周后,培养体系中仍有一定数量的生精细胞附着在支持细胞上,部分生精细胞上可见鞭毛。单室培养的生精细胞在培养第4-5天开始出现明显脱落,培养1周后大多数生精细胞发生脱落死亡,生精细胞上未见鞭毛出现,但在培养体系中可见次级精母细胞及精子细胞。结论应用双室培养,生精细胞可存活达1月之久,而且部分生精细胞尾部出现鞭毛,从形态上发生了减数分裂及精子变态过程。

中西医结合治疗慢性肺心病急性发作60例疗效观察

目的:观察中西医结合治疗慢性肺心病急性发作的疗效。方法:采用随机对照方法将123例慢性肺心病急性发作患者分为观察组和对照组,对照组63例采用西药常规治疗,观察组60例在西药常规治疗的基础上加用复方丹参注射液、鱼腥草注射液治疗。结果:临床总有效率观察组86.7％,对照组69.8％;x线疗效总有效率观察组91.7％,对照组63.3％,差异均有显著性意义(P<0.05)。观察组血液流变学指标的改善与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:复方丹参注射液、鱼腥草注射液对肺心病急性发作有较好疗效,与西药联用能提高疗效。

咳嗽变异性哮喘辨治思路

咳嗽变异性哮喘是一种特殊类型的哮喘,咳嗽是主要临床表现,无明显喘息、气促等症状或体征,但有气道高反应性。对咳嗽变异性哮喘提出祛风、化痰、祛瘀、养阴润燥、补脾益肾的辨治思路。