基于网络药理学与动物实验探究人参—黄连—三七药串治疗糖尿病肾病的作用机制

目的 应用网络药理学的研究方法筛选人参—黄连—三七药串治疗糖尿病肾病的作用靶点及相关信号通路,通过动物实验明确其疗效与作用机制。方法 运用Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform(TCMSP)数据库检索获取人参—黄连—三七的主要化学成分以及相关作用靶点;使用DisGeNET筛选胰岛素抵抗与糖尿病肾病的相关靶标基因;通过Venn软件筛选出药物与疾病的共同作用靶点;构建出疾病—靶点—成分—药物网络;使用STRING数据库完成蛋白质—蛋白质相互作用网络(protein-protein interaction networks, PPI)的构建;通过基因本体(gene ontology, GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)通路富集分析对有效作用靶点进行分析。以db/db小鼠作为动物模型,于给药第4、第8周后留取各组小鼠8小时尿液,检测各组小鼠尿微量白蛋白排泄水平;采用蛋白免疫印迹法法对网络药理学的研究预测的关键通路及靶点进行进一步的实验验证。结果 本研究共筛选得到人参—黄连—三七药串的人参皂苷Rh2、人参皂苷F2、槲皮素、小檗碱等39种有效成分;获得人参—黄连—三七药串治疗糖尿病肾病潜在靶点18个,其中PTEN、CCL2、IL6、TNF、HIF1A等11个与其他靶点相互作用较强,可能在网络中起到关键作用;通过GO分析和KEGG分析分别获得2595个条目和107条信号通路,其中包括磷脂酰肌醇-3-激酶丝氨酸/苏氨酸特异性蛋白激酶(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路、晚期糖基化终末产物—晚期糖基化终末产物受体信号通路、低氧诱导因子-1信号通路、细胞迁移的正调控、细胞因子活性、细胞因子受体结合、血小板α颗粒等。动物实验显示,在给药第4周及第8周后,中药组小鼠尿微量白蛋白排泄水平均较模型组下降(P<0.05)。对于PI3K/Akt信号通路的相关蛋白检测结果表明,中药组小鼠肾脏PI3K、p-Akt表达水平较模型组明显下降(P<0.05),磷酸酶张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, PTEN)水平较模型组升高(P<0.05)。结论 人参—黄连—三七药串能够有效改善db/db小鼠糖尿病肾病引起的蛋白尿,其作用机制可能与激活PTEN抑制PI3K/Akt信号通路有关。

基于内皮细胞功能障碍探讨糖尿病微血管病变“微型癥瘕”病机理论的科学内涵

基于中医理论及当前科学研究发现,糖尿病微血管病变内皮细胞功能障碍与中医“微型癥瘕”病机理论存在着深刻的联系。糖尿病热伤气阴,病久入络后可致血脉气血阴阳亏虚,人体正气亏虚,瘕聚阶段无形可查;持续进展可致痰、热、郁、瘀痼结于络脉形成癥积而有形可征。国医大师吕仁和教授称之为“微型癥瘕”病机理论,其中正气亏虚是瘕聚发生的基础,痰热郁瘀是癥积形成的关键,这与微血管在内皮细胞功能异常的基础上进一步进展至结构改变,最终导致糖尿病微血管内皮细胞功能障碍的病理过程相一致。内皮细胞功能异常与结构改变可视为正气亏虚及痰热郁瘀的微观体现,共同诠释糖尿病微血管病变“微型癥瘕”病机理论的科学内涵。此认识可为中医药防治糖尿病微血管病变提供新的研究角度和方向,为临床和科研的开展提供充分的理论支撑。

基于《内经》“二阳结谓之消”探讨糖尿病“热伤气阴”病机

传统中医认为“阴虚为本,燥热为标”是糖尿病的基本病机,部分学者对此存在异议,认为其并不符合疾病特点,但各家学说自成体系,不利于我们把握疾病本质特点。本文基于《内经》“二阳结谓之消”理论,综合古今医家的阐释和发挥,认为此理论蕴含着糖尿病“热伤气阴”病机内涵,胃、大肠及手足阳明经之热是糖尿病的始动因素,胃肠及其经脉是重要病位,“二阳之热”难以消除,耗伤气阴,最终发展为糖尿病。因此,“二阳结谓之消”可视为古代医家对糖尿病“热伤气阴”复杂病机的准确把握和高度凝练。结合现代医学发病机制,由脂肪堆积和肠道菌群紊乱参与的全身性弥漫性低度炎症反应是触发胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能障碍的关键病理环节,这与“二阳结谓之消”蕴含的“热伤气阴”病机高度契合,可为清热益气养阴治法的确立和相关研究的开展提供理论依据和支撑。

基于“二阳结谓之消”探讨糖尿病性便秘病机及防治策略

“二阳结谓之消”语出《素问·阴阳别论篇》,是认识糖尿病性便秘的早期记载,但目前学界多据此仅从二阳(足阳明胃经、手阳明大肠经)结滞化热来解释消渴期发生便秘的病机,存在一定局限性。通过考究发现“二阳”并不单指手足阳明经脉或胃肠二腑,而是包括胃、大肠二腑及手足阳明经脉;“结”也并不完全指结热这一病邪,而是指病邪胶结难解、疾病难以治愈的程度,并且“二阳”之热易伤血脉,造成络脉瘀滞。基于对“二阳结谓之消”的重新理解,笔者认为糖尿病性便秘在糖尿病期以“热伤气阴”为主要病机,糖尿病并发症期以热伤血络、血脉瘀滞为主要病机。治疗方面,糖尿病期以清热益气养阴为本,糖尿病并发症期以活血化瘀为核心,此外还需重视体质从化,全面把握糖尿病性便秘的诊治。

基于“微型癥瘕”理论探讨糖尿病肾病的分期论治

糖尿病肾病是糖尿病患者的主要微血管并发症之一,也是导致糖尿病患者死亡的重要原因。国医大师吕仁和教授基于长期的临床经验创造性地提出了“微型癥瘕”理论。本文旨从“热伤气阴”的特点及“癥瘕致病,虚实相因”这一总病机切入,从糖尿病肾病病程的三期分析病机,进而分期论治及用药:初期益气补虚,养阴清热;中期补益脾肾,祛痰散瘀;后期阴阳并补,消散癥结。意将扶正和消癥相结合,从而维持肾中络脉血流通畅。通过总结和分析目前糖尿病肾病的研究现状,将糖尿病肾病初期、中期和晚期的治法和用药进行总结,以期为中医药临床实践提供用药理论依据,为临床从中医药角度防治糖尿病肾病提供参考。

基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS和网络药理学探讨益气祛风方治疗糖尿病肾病作用机制

[目的]借助超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱质谱仪(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)技术结合网络药理学和分子对接技术,分析益气祛风方防治糖尿病肾病(DN)的物质基础和作用机制。[方法]采用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS鉴定益气祛风方的主要化学成分,采用网络药理学方法构建“主要成分-核心靶点-信号通路”网络,进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,对主要活性成分与核心靶点进行分子对接。[结果]从益气祛风方共鉴定出115个化学成分,获得40个核心靶点,主要涉及磷脂酰肌醇-3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路、脂质及动脉硬化、糖基化终产物及受体(AGE-RAGE)信号通路、趋化因子信号通路及低氧诱导因子(HIF)1信号通路等。分子对接结果表明生松素、荠苧黄酮、槲皮素、N-乙酰多巴胺二聚体-1、N-乙酰多巴胺二聚体-2等成分与部分核心靶点有较好的结合活性。[结论]本研究初步鉴定了益气祛风方治疗DN潜在的有效成分并预测了其作用靶点,为进一步研究中医“从风论治”法和益气祛风方治疗糖尿病肾病的作用机制提供了新的思路。

基于PI3K/Akt信号通路探索益气活血祛风通络法治疗糖尿病肾病的作用机制

目的基于PI3K/Akt信号通路探索益气活血祛风通络法治疗糖尿病肾病的分子机制。方法 40只GK大鼠,随机分为模型组、假手术组、益气活血组、祛风通络组、益气活血祛风通络(全方)组,每组8只。糖尿病肾病模型通过高脂高糖喂养加单肾切除术复制。益气活血组、祛风通络组、全方组分别给予益气活血颗粒、祛风通络颗粒、益气活血祛风通络颗粒,模型组、假手术组给予纯净水。干预8周,观察大鼠在干预后肾脏的病理改变以及24小时尿蛋白变化,同时肾脏组织的pPI3K、p-Akt和PTEN的表达情况采用Western blotting以及免疫组化法检测,PI3K mRNA、Akt mRNA以及PTEN mRNA的表达水平采用RT-PCR法检测。结果 HE染色结果显示,中药干预的大鼠肾小管上皮细胞空泡变性程度、纤维化以及肾小球硬化比模型组以及假手术组要轻,且在肾间质纤维化方面,全方组要好于益气活血组以及祛风通络组;PASM染色和Masson染色阳性率均显示益气活血组、祛风通络组、全方组阳性率明显低于模型组(P<0.01),但全方组阳性率与益气活血组以及祛风通络组无统计学差异(P>0.05);益气活血组、祛风通络组、全方组的24小时尿蛋白在中药干预后明显减少,而且与模型组对比具有显著性的差异(P<0.01)。Western blotting结果显示,中药干预的三组pPI3K、p-Akt的表达明显高于模型组(P<0.01),而PTEN的表达显著低于模型组(P<0.01)。免疫组化结果显示,p-PI3K、p-Akt在药物干预的三组表达显著低于模型组(P<0.05);PTEN在祛风通络组以及全方组的表达显著低于模型组(P<0.01),在活血化瘀组表达水平与模型组差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR结果显示PI3K mRNA、Akt mRNA在中药干预的三组均明显低于模型组(P<0.05),而PTEN mRNA的表达水平则显著高于模型组(P<0.01)。结论益气活血、祛风通络法治疗糖尿病肾病均可以起到降低蛋白尿、减轻肾间质纤维化以及延缓肾小球硬化的作用,二者结合在延缓肾间质纤维化方面效果更好,三者作用分子机制均可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关,且祛风通络法及益气活血祛风通络法抑制效果要略强于单独益气活血法。

益气活血散结法对糖尿病肾病大鼠肾组织中MCP-1、TGF-β的影响

目的:通过动物实验,基于免疫炎性反应因子MCP-1、TGF-β,探索益气活血散结法改善肾小球硬化的分子机制。方法:24只GK大鼠,随机分为模型组、假手术组、益气活血散结组。通过高脂高能量喂养加单肾切除术复制糖尿病肾病模型。检测各组大鼠的24 h尿蛋白,观察大鼠在干预后肾脏组织的病理改变,同时采用Western blotting以及免疫组化法检测肾脏组织的MCP-1和TGF-β的表达情况,采用RT-PCR法检测MCP-1mRNA以及TGF-βmRNA的表达水平。结果:PASM染色和Masson染色显示:益气活血散结组阳性率明显低于模型组(P<0.01)。益气活血散结组中24 h尿蛋白在药物干预后明显减少(P<0.01)。Western blotting、免疫组化结果均显示:益气活血散结组MCP-1(P<0.05)、TGF-β(P<0.01)的表达程度明显低于模型组。同样,RT-PCR结果也显示:MCP-1mRNA(P<0.01)、TGF-βmRNA(P<0.05)水平在益气活血散结组明显低于模型组。结论:益气活血散结法可以有效地减少24 h尿蛋白定量、延缓肾小球纤维化,其机制可能与抑制肾脏组织中MCP-1和TGF-β的表达有关。

糖尿病肾脏病大量蛋白尿和少量蛋白尿与证候相关性的对比研究

目的:研究糖尿病肾脏病大量蛋白尿与少量蛋白尿产生的机制的差异性。方法:依托"十一五"国家科技支撑项目,筛选出24 h尿蛋白定量≥0.5 g的患者142例,其中大量蛋白尿组(尿蛋白≥1.5 g/24 h)59例,少量蛋白尿组(0.5 g/24 h≤尿蛋白<1.5 g/24 h)83例,两组分别分析常见的七个证候与尿蛋白之间的相关性。结果:少量蛋白尿组,气虚证、阳虚证、血虚证与尿蛋白呈正相关,其中阳虚证与尿蛋白的相关系数最大,阴虚证与尿蛋白呈负相关,血瘀证、痰湿证、痰浊证与尿蛋白未显示有明显的相关性;大量蛋白尿组,尿蛋白与各证候均未显示有明显相关性。结论:糖尿病肾脏病在表现为少量蛋白尿时与表现为大量蛋白尿时与证候的相关性不同,二者的产生机制可能存在差异性,糖尿病肾脏病大量蛋白尿的产生机制有待进一步的研究。

基于快速热管理系统的乙醇SI-HCCI-SI模式转换控制策略研究

在一台经过改进的单缸发动机试验系统上基于快速热管理系统进行了乙醇燃料SI/HCCI燃烧模式转换的试验研究。研究结果表明,基于快速热管理系统能够实现乙醇燃料的SI/HCCI燃烧模式转换,在不同的工况下存在一个最佳点火提前角使转换过程最为平稳。在模式转换过程中为了使转换更平稳,采用了点火提前角、节气门和供油量协同控制的控制策略,这一策略能够有效地减少过渡过程的循环数,降低甚至消除转换过程中转速和平均有效压力pe的波动,实现平顺的模式转换。

咖啡因-β-环糊精包结物的研究

该文将咖啡因与β-环糊精形成包结物.研究了包结物的制备方法,并应用热重-差热分析、核磁共振谱和红外光谱三种方法鉴定了包结物的物性.实验结果表明,药物分子被包结在β-环糊精分子疏水性空穴内,其失重速率降低了,热稳定性提高了以及包结物中环糊精分子1位氢的δ值随咖啡因含量减少而增大.

8-羟甲基香豆素衍生物的DSC研究

本文对六种新合成的8-羟甲基香豆素衍生物A、B、C、D、E和F试样进行了DSC研究,提供了这些试样在相变时的DSC热谱图和热力学参数。实验发现,化合物A和B在相变过程中呈现吸热双峰,而化合物C、D、E和F则呈现吸热单峰。这表明,化合物A和B在熔化前曾经历了一个晶形转变过程,而化合物C、D、E和F则是直接进行熔化的。同时发现,这些化合物的熔点和熔化焓与它们的分子结构具有一定的联系。

进气温度对乙醇燃料均质压燃燃烧过程的影响

采用自行设计的进气温度控制系统,在一台由CA6110柴油机改造而成的均质压燃(HCCI)单缸机上进行了进气温度对乙醇HCCI燃烧影响的试验研究。研究发现,在每个工况下都存在一个对应于最大热效率的进气温度,称之为最佳进气温度(PIT),得到了发动机转速、过量空气系数和最佳进气温度间的MAP图。当实际进气温度低于最佳进气温度时,混合气燃烧不及时,指示效率下降;实际进气温度高于最佳进气温度时,混合气燃烧提前,压缩负功增大,指示效率下降;只有当进气温度处在最佳进气温度时,才有最大的指示效率。

8—羟甲基香豆素衍生物(Ⅱ)相变的DSC研究

本文报道了六种新合成的8—羟甲基香豆素衍生物(结构Ⅱ)试样相变热行为和相变热力学参数,同时报道了这些化合物的熔点和熔化焓与它们的分子结构之间相关性.

邻醌式同系物的DSC研究

丹参(Salvia miltirrohiza)和红根草(S.Prionitis)均含有治疗冠心病有效成分—丹参酮Ⅱ-A等二萜醌类化合物,它们的扩冠作用,抑制血小板聚集,抑菌等活性常与该类化合物的结构、晶型、极性、溶解度、熔点有密切的相关性,如前报所述A环为脂环的化合物其熔化热低于芳环的化合物.丹参中的丹参醌Ⅱ-A(1),丹参醌Ⅱ-B(2)和红根草邻醌(3),其抗菌和抗肿瘤活性强度是3>2>1,为探究其晶型结构与药效的内在联系。

苯丙烯酸衍生物的热力学特性研究

The phase transitions of 2-methoxycinnamic acid, 3-methoxycinnamic acid,4-methoxycinnamic acid and 4-hydroxy-3-methoxycinnamic acid were studied by DSC.The thermodynamic parameters of phase transitions for these compounds are reported in this paper. In addition, the 1H-NMR spectra of compounds 2-methoxycinnamic acid, 3methoxycinnamic acid and 4-methoxycinnamic acid have been measured, and the change of β-H chemical shifts is consitent with that of DSC data fOr these compounds.

乙醇SI/HCCI燃烧模式平稳转换控制策略研究

如何将均质压燃(HCCI)应用到实际发动机上是当前HCCI研究的热点之一,采用HCCI/SI复合燃烧模式是潜力巨大的出路之一。当发动机采用这种复合燃烧模式时,HCCI只能在一定范围内运行的特点决定了发动机在HCCI和SI两种燃烧模式边界工况发生负荷变化时,需要进行两种燃烧模式的相互转换。实现两种燃烧模式的平稳转换需要对转换过程中影响转换平顺性的因素进行分析,综合控制。通过分析试验所得数据,本研究基于主节气门运动规律、点火提前角和供油规律3个主要影响因素提出了主动、协同的控制策略,实现了两种燃烧模式的平稳转换。

乙醇燃料均质压燃发动机的试验研究

利用进气预热和废气再循环(EGR)控制方法,在由CA6110柴油机改造的单缸发动机上进行了以乙醇为燃料的均质混合气压燃(Homogeneous Charge Compression Ignition,HCCI)试验研究.结果表明:在过量空气系数λ=1～9时,发动机可以实现HCCI燃烧,但由过量空气系数和EGR率表示的HCCI工作范围受爆震和部分燃烧的限制.乙醇燃料HCCI燃烧最大平均指示压力可达到0.6 MPa,指示效率可达到60%.在HCCI燃烧中只产生少量的NOx,但是未燃HC和CO的排放较高.

中医药防治糖尿病及其并发症研究述评

纵览中医药防治糖尿病及其并发症现状,展望中医药防治糖尿病及其并发症前景。综述古今文献,评述中医药防治糖尿病及其并发症研究现状,强调糖尿病病位在脾胃肝肾,基本病机为热伤气阴,应重视清热益气养阴治法。而糖尿病并发症则存在络脉瘀结,"微型癥瘕"形成病机,应重视散结消聚治法。中医药防治糖尿病及糖尿病肾脏病、视网膜病变、糖尿病足等,卓有成效,但仍存在诸多问题。应重视文献研究与名老中医经验传承,明确中医优势领域,科学评价中医综合治疗与个体化治疗优势,促进理论创新。

化油器发动机燃用不同比例乙醇汽油的性能和排放试验

在现有的化油器式汽油机结构不做变动和调整的情况下,研究了4种比例的乙醇汽油对发动机动力性、经济性和排放性的影响。研究表明:汽油机使用乙醇汽油,随燃料中乙醇添加比例的增加,过量空气系数逐渐增大;发动机的最大功率有所降低;燃料消耗率逐渐增加,能量消耗率变化不大;CO排放在中低负荷没有明显变化,在高负荷逐渐减少;HC排放逐渐减少;NOx排放在中低负荷逐渐减少,在高负荷逐渐增加。