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生物柴油放热规律预测模型与试验分析 被引量:2
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作者 黄兆春 马淋军 +1 位作者 王忠 严明 《拖拉机与农用运输车》 北大核心 2007年第3期30-32,共3页
用燃烧生物柴油的直喷式柴油机示功图数据,计算了生物柴油的放热规律,并应用双韦伯函数对标定转速和最大转矩转速的生物柴油放热规律进行了拟合。在此基础上,提出了生物柴油放热规律的双韦伯函数的修正参数,建立了不同配比混合燃料的双... 用燃烧生物柴油的直喷式柴油机示功图数据,计算了生物柴油的放热规律,并应用双韦伯函数对标定转速和最大转矩转速的生物柴油放热规律进行了拟合。在此基础上,提出了生物柴油放热规律的双韦伯函数的修正参数,建立了不同配比混合燃料的双韦伯函数修正系数,对其他工况的生物柴油及混合燃料的放热规律进行了预测。预测结果表明:生物柴油比例高的混合燃料的燃烧始点、最大放热率、放热第二峰值有所提前,其中预混合燃烧阶段的燃烧峰值较小,扩散燃烧阶段的放热峰值较大,预混合燃烧期缩短。 展开更多
关键词 生物柴油 韦伯函数 模型修正
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生物柴油自由喷雾特性的数值模拟和试验研究 被引量:10
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作者 毛功平 王忠 +2 位作者 杨殿勇 袁银男 黄兆春 《内燃机工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期45-49,共5页
运用三维CFD软件,建立了生物柴油和柴油自由喷雾的计算模型,计算了两种燃料自由喷雾的贯穿距离和液滴的索特平均直径,模拟了喷雾的发展历程;利用高速摄影装置,拍摄了两种燃料自由喷雾历程的照片。对两种燃料的喷雾特性进行了比较分析,... 运用三维CFD软件,建立了生物柴油和柴油自由喷雾的计算模型,计算了两种燃料自由喷雾的贯穿距离和液滴的索特平均直径,模拟了喷雾的发展历程;利用高速摄影装置,拍摄了两种燃料自由喷雾历程的照片。对两种燃料的喷雾特性进行了比较分析,对喷雾特性差异的成因进行了探讨。研究结果表明:模拟计算与高速摄影试验结果基本一致;生物柴油喷雾的贯穿距离和索特平均直径均较柴油的大,喷雾锥角较柴油的小;燃料的密度、粘度和挥发性的差别是导致喷雾特性差异的主要因素。 展开更多
关键词 内燃机 生物柴油 自由喷雾 数值模拟 高速摄影
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降低柴油机排放的多因素匹配试验研究 被引量:15
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作者 王忠 黄兆春 +2 位作者 王林 查红 马金荣 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期120-124,共5页
以增压器、喷油器、喷油泵以及供油提前角为试验因素,以降低NOx和PM排放为研究目标,采用单纯形法的多因素试验法,进行了柴油机低排放匹配试验。结果表明:单纯形法可以优选柴油机多因素的匹配方案。多因素匹配结果为:选用进气压力和过量... 以增压器、喷油器、喷油泵以及供油提前角为试验因素,以降低NOx和PM排放为研究目标,采用单纯形法的多因素试验法,进行了柴油机低排放匹配试验。结果表明:单纯形法可以优选柴油机多因素的匹配方案。多因素匹配结果为:选用进气压力和过量空气系数较大的增压器,适当的增大喷孔孔径,选用柱塞直径较大的喷油泵,适当的调整供油提前角,可使柴油机的NO x和PM排放分别降低了19.8%和26.9%。 展开更多
关键词 柴油机 单纯形法 排放
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生物柴油喷油器变参数研究 被引量:5
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作者 李立琳 王忠 +2 位作者 陈林 许广举 黄兆春 《机械设计与制造》 北大核心 2012年第6期129-131,共3页
应用三维CFD软件FIRE,修正了柴油机燃烧生物柴油的喷油器的喷雾模型,模拟了生物柴油的燃烧过程,探讨了喷雾锥角、喷孔直径和喷油提前角对燃烧生物柴油的气缸压力和放热规律的影响。结果表明:喷雾锥角增加,喷孔直径减小,喷油提前角增大,... 应用三维CFD软件FIRE,修正了柴油机燃烧生物柴油的喷油器的喷雾模型,模拟了生物柴油的燃烧过程,探讨了喷雾锥角、喷孔直径和喷油提前角对燃烧生物柴油的气缸压力和放热规律的影响。结果表明:喷雾锥角增加,喷孔直径减小,喷油提前角增大,气缸内最大压力升高率增加;随喷雾锥角、喷孔直径和喷油提前角的增大,燃烧放热的峰值降低。计算结果对燃用生物柴油的柴油机的喷油器的试验和分析提供了依据。 展开更多
关键词 生物柴油 喷油器参数 数值模拟
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降低柴油机排放的匹配试验与燃烧过程分析 被引量:2
5
作者 王忠 黄兆春 +3 位作者 王林 查红 马金荣 张晓春 《农业机械学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第4期190-193,共4页
为同时降低柴油机的NOx和碳烟排放,对不同孔径的喷油器、不同柱塞直径的喷油泵,不同供油提前角的燃烧过程进行了分析,对喷油泵、增压器、喷油器以及供油提前角等参数进行优化匹配。结果表明:在原机供油提前角的基础上,采用推迟供油、较... 为同时降低柴油机的NOx和碳烟排放,对不同孔径的喷油器、不同柱塞直径的喷油泵,不同供油提前角的燃烧过程进行了分析,对喷油泵、增压器、喷油器以及供油提前角等参数进行优化匹配。结果表明:在原机供油提前角的基础上,采用推迟供油、较小孔径的喷油器、大柱塞直径的喷油泵,改善燃油混合过程,减少燃烧预混期的燃油量,降低最高燃烧温度,缩短后燃。经过综合匹配,柴油机的NOx和碳烟排放分别降低了19.8%和26.9%。 展开更多
关键词 柴油机 排放 匹配 燃烧过程
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基于PC与IPM感应电机解耦控制系统的研制 被引量:1
6
作者 黄兆春 刘国海 《电力电子技术》 CSCD 北大核心 2001年第3期47-50,共4页
介绍了一种应用非线性状态反馈对感应电机进行解耦并线性化的交流调速系统。该系统以工控PC作为控制电路的核心部件 ,以智能功率模块 (IPM )组成主电路。给出解耦控制系统的硬件、软件组成及设计方法。实验结果表明 ,该系统具有理想的... 介绍了一种应用非线性状态反馈对感应电机进行解耦并线性化的交流调速系统。该系统以工控PC作为控制电路的核心部件 ,以智能功率模块 (IPM )组成主电路。给出解耦控制系统的硬件、软件组成及设计方法。实验结果表明 ,该系统具有理想的动态与静态性能。 展开更多
关键词 感应电机 解耦控制系统 PC IPM 交流调速系统
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生物柴油发动机NO_x排放控制技术 被引量:2
7
作者 毛功平 王忠 +3 位作者 顾士强 黄兆春 许光举 黄慧龙 《小型内燃机与摩托车》 CAS 北大核心 2008年第5期66-70,共5页
控制生物柴油发动机NO_x的排放是目前生物柴油应用研究领域的一个研究热点和难点。根据NO_x生成的条件和关键化学反应方程式,阐述了生物柴油发动机较柴油机NO_x排放偏高的机理,在分析目前国内外降低生物柴油发动机NO_x排放的各种控制策... 控制生物柴油发动机NO_x的排放是目前生物柴油应用研究领域的一个研究热点和难点。根据NO_x生成的条件和关键化学反应方程式,阐述了生物柴油发动机较柴油机NO_x排放偏高的机理,在分析目前国内外降低生物柴油发动机NO_x排放的各种控制策略和技术方法的基础上,重点介绍了针对生物柴油特殊的分子结构所采取的燃料改性的方法,对该方法的理论依据、国内外最新的研究成果和研究结论进行了阐述,分析了降低生物柴油发动机NO_x排放的各种控制策略的优缺点,探讨了生物柴油发动机NO_x排放控制技术的发展前景。 展开更多
关键词 生物柴油 排放 氮氧化物 发动机
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汽油发动机密封系统的开发及应用 被引量:3
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作者 冉帆 郎伟钦 黄兆春 《上海汽车》 2018年第11期9-15,共7页
针对发动机整机开发过程中密封件开发滞后的问题,提出了密封系统的设计概念,并根据发动机内部不同的密封介质,将其分为气体密封系统、机油密封系统和冷却液密封系统。在每个子系统里,梳理了重要的密封接口,并给出了相关密封件的材料选... 针对发动机整机开发过程中密封件开发滞后的问题,提出了密封系统的设计概念,并根据发动机内部不同的密封介质,将其分为气体密封系统、机油密封系统和冷却液密封系统。在每个子系统里,梳理了重要的密封接口,并给出了相关密封件的材料选型和设计要求,使发动机密封系统开发与发动机整机开发同步,可以减少后期因无法满足密封需求而带来的泄漏问题。 展开更多
关键词 发动机 密封系统 气体 机油 冷却液
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养种兼作 综合利用
9
作者 黄兆春 《中国水产》 1982年第1期19-19,共1页
宝应县金湖渔业大队和大汕渔业大队各有一个外荡,前者叫大洼子,后者称小汕子。这两个荡都在三千亩左右,不仅面积相同,生产条件也大致相似。然而由于经营方法不同,经济效益却大不一样:1978年至1980年三年间,小汕子共产鱼货10万余... 宝应县金湖渔业大队和大汕渔业大队各有一个外荡,前者叫大洼子,后者称小汕子。这两个荡都在三千亩左右,不仅面积相同,生产条件也大致相似。然而由于经营方法不同,经济效益却大不一样:1978年至1980年三年间,小汕子共产鱼货10万余斤,总产值4.1万余元,大洼子共产鱼货15.3万斤,总产值40.9万元, 展开更多
关键词 总产值 经营方法 渔业 金湖 生产条件 经济效益 宝应县 综合利用
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发动机正时张紧器O形密封圈挤出失效研究 被引量:2
10
作者 许昆朋 陈凯 +3 位作者 陶鸿莹 黄兆春 张贝 冉帆 《柴油机设计与制造》 2012年第3期41-46,共6页
基于某发动机正时张紧器O形圈的一实际问题的分析处理,对O形圈典型的挤出失效展开了研究,分析了嵌件间隙、圆角、材料特性、压缩率、压力循环等各因子对挤出失效的影响与作用。
关键词 正时张紧器 O形密封圈 挤出失效
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多路温度自适应控制系统的研究 被引量:7
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作者 张春龙 刘国海 黄兆春 《计算机测量与控制》 CSCD 2002年第7期452-453,458,共3页
温度控制是一种重要的非线性控制 ,有很多的控制类型。文章利用简化的自适应算法 ,给出了控制系统的数学模型 ,通过计算机仿真并在实际工程实验中得以实现 ,取得了良好的控制效果。
关键词 自适应控制系统 温度控制 算法 计算机仿真
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小尾寒羊不同乳腺发育时期7种激素分泌规律 被引量:1
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作者 黄兆春 霍应栋 +6 位作者 赵喜棪 郝志云 沈继源 罗玉柱 刘秀 李少斌 王继卿 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2023年第2期9-15,共7页
【目的】激素调控了奶牛和奶山羊的乳腺生长发育和泌乳,但目前在绵羊中的研究还不够全面和系统。【方法】以小尾寒羊为研究对象,在空怀期、妊娠早期、妊娠中期、妊娠末期、泌乳早期和泌乳中后期6个乳腺发育时期,采用酶联免疫吸附法测定... 【目的】激素调控了奶牛和奶山羊的乳腺生长发育和泌乳,但目前在绵羊中的研究还不够全面和系统。【方法】以小尾寒羊为研究对象,在空怀期、妊娠早期、妊娠中期、妊娠末期、泌乳早期和泌乳中后期6个乳腺发育时期,采用酶联免疫吸附法测定血液中雌激素、孕酮、催乳素、生长激素、糖皮质激素,胰岛素和胰岛素样生长因子I的浓度,分析激素对绵羊乳腺发育的调控作用。【结果】雌激素和孕酮浓度呈先上升后下降的总体趋势,它们在妊娠末期的浓度最高(分别为73.01 pg/mL和530.48 pmol/L),在空怀期的浓度最低(分别为35.69 pg/mL和485.46 pmol/L);从空怀期开始,催乳素浓度持续升高,在泌乳早期达到最大值,其在泌乳早期的浓度分别比妊娠中期、泌乳中后期、妊娠早期和空怀期高12.47%、16.17%、46.15%和59.66%(P<0.05);妊娠末期的糖皮质激素浓度最大(495.28 pg/mL),较妊娠早期和空怀期分别高14.36%和12.42%(P<0.05);胰岛素含量由大到小依次为妊娠早期(36.22 mIU/L)>妊娠末期(36.10 mIU/L)>泌乳早期(35.98 mIU/L)>妊娠中期(35.49 mIU/L)>空怀期(33.78 mIU/L)>泌乳中后期(32.22 mIU/L),空怀期、泌乳中后期与其它时期的胰岛素含量差异显著(P<0.05)。然而,生长激素和胰岛素样生长因子I的浓度在6个时期之间无显著差异(P>0.05)。【结论】在绵羊6个乳腺发育时期,雌激素、孕酮、催乳素、糖皮质激素和胰岛素这5种激素的浓度有显著差异(P<0.05),说明它们可能影响了绵羊乳腺的生长发育和泌乳功能。 展开更多
关键词 小尾寒羊 乳腺发育 激素 酶联免疫吸附法
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小尾寒羊泌乳性状重要lncRNAs的筛选、鉴定及功能分析 被引量:5
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作者 王继卿 郝志云 +7 位作者 沈继源 柯娜 黄兆春 梁维炜 罗玉柱 胡江 刘秀 李少斌 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第14期3113-3123,共11页
【目的】长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一类长度大于200 nt的非编码RNA分子,它对奶牛和奶山羊的乳腺发育和泌乳过程发挥了重要调控作用,然而在绵羊上研究甚少。为此开展lncRNAs对绵羊泌乳性能的调控作用研究,为解析绵... 【目的】长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一类长度大于200 nt的非编码RNA分子,它对奶牛和奶山羊的乳腺发育和泌乳过程发挥了重要调控作用,然而在绵羊上研究甚少。为此开展lncRNAs对绵羊泌乳性能的调控作用研究,为解析绵羊泌乳性能的分子机理提供理论基础。【方法】选取高泌乳性能(高泌乳量、高乳脂率)和低泌乳性能(低泌乳量、低乳脂率)小尾寒羊各3只,采集泌乳期乳腺组织,用RNA-Seq构建lncRNAs表达谱,研究差异表达lncRNAs靶基因的GO和KEGG富集通路,最后用实时荧光定量PCR(reverse transcription-quantitative PCR, RT-qPCR)对16个差异表达lncRNAs进行验证。【结果】在小尾寒羊乳腺组织中共鉴定出7 239个表达的lncRNAs,包括2 262个已知lncRNAs和4977个新的lncRNAs,大部分lncRNAs呈低丰度表达。在两组小尾寒羊中发现120个差异表达lncRNAs,其中68个lncRNAs在高泌乳性能小尾寒羊中上调表达,52个lncRNAs下调表达。差异表达lncRNAs的靶基因显著富集在硫化物代谢过程、硫酯生物合成过程、酰基辅酶A生物合成过程、Rap1信号通路、粘附连接等通路上。LncRNA-miRNA网络分析发现,MSTRG.125242.6、MSTRG.59580.8等6个最显著差异表达lncRNAs的靶向miRNAs海绵体在家畜乳腺发育和泌乳过程中发挥了重要作用。RT-qPCR结果表明,16个lncRNAs的表达趋势与RNA-Seq结果完全吻合,证实了RNA-Seq测序结果的准确性和真实性。【结论】筛选的差异表达lncRNAs参与了绵羊乳腺发育及泌乳性能的调控,该结果将为解析绵羊泌乳性状的分子遗传机制提供理论参考。 展开更多
关键词 绵羊 乳腺 长链非编码RNA(lncRNA) 泌乳期
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全国技巧高级教练员岗培班在上体举办
14
作者 黄兆春 《中国体育教练员》 1996年第4期19-19,共1页
1996年6月11月至8月28日全国技巧高级教练员岗位培训班在上海体院举办,整个班分为两个阶段,第一阶段在上海体院进行基础理论专题和主要部分的专项理论专题教学,然后学员们带着学完的这些知识回单位,去备战全国少年技巧锦标赛和全国技巧... 1996年6月11月至8月28日全国技巧高级教练员岗位培训班在上海体院举办,整个班分为两个阶段,第一阶段在上海体院进行基础理论专题和主要部分的专项理论专题教学,然后学员们带着学完的这些知识回单位,去备战全国少年技巧锦标赛和全国技巧冠军赛.第二阶段的教学则安排在上述两项赛事间进行,增加学员们观摩、交流的机会,整个教学走出教室直驱赛场,既生动又直观,使得理论联系实际,使理论获得了充分展现的机会. 展开更多
关键词 高级教练员 基础理论 技巧运动 学员 专题教学 理论联系实际 专项理论课 锦标赛 训练方法 理论建设
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芡实栽培技术
15
作者 黄兆春 《中国水产》 1982年第5期23-23,共1页
刺芡的果实称芡实,也叫鸡头米,一年生水生植物,原系野生。近几年,江苏省宝应县中港公社金湖渔业大队,进行人工栽培刺芡以来,产量逐年增长,经济收益大大提高。1981年,他们在3000亩的外荡中栽种刺芡2500亩,收获31.2万斤,产值2... 刺芡的果实称芡实,也叫鸡头米,一年生水生植物,原系野生。近几年,江苏省宝应县中港公社金湖渔业大队,进行人工栽培刺芡以来,产量逐年增长,经济收益大大提高。1981年,他们在3000亩的外荡中栽种刺芡2500亩,收获31.2万斤,产值28万元;另有鲜鱼4万斤,两项总产值30万元,平均亩产值100元。刺芡的栽种方法如下。 展开更多
关键词 栽种 栽培技术 芡实 一年生 收获 人工栽培 果实 总产值 经济收益 渔业
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性成熟期辽宁绒山羊与子午岭黑山羊睾丸发育比较 被引量:2
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作者 梁维炜 李明娜 +7 位作者 罗玉柱 王继卿 柯娜 沈继源 郝志云 金夏阳 鲁玉洁 黄兆春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期3461-3470,共10页
本研究旨在探究性成熟期辽宁绒山羊与子午岭黑山羊睾丸发育是否存在差异,并对两品种繁殖性能进行比较。选取性成熟期健康的辽宁绒山羊和子午岭黑山羊各5只,采集睾丸组织,通过大体解剖和苏木精-伊红(HE)染色石蜡切片,比较两品种山羊睾丸... 本研究旨在探究性成熟期辽宁绒山羊与子午岭黑山羊睾丸发育是否存在差异,并对两品种繁殖性能进行比较。选取性成熟期健康的辽宁绒山羊和子午岭黑山羊各5只,采集睾丸组织,通过大体解剖和苏木精-伊红(HE)染色石蜡切片,比较两品种山羊睾丸组织发育及形态学差异;ELISA检测雄激素浓度;实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)检测两品种山羊睾丸组织中死盒多肽4(DEAD box polypeptide 4,DDX 4)和类无精症缺失基因(deleted in azoospermia-like gene,DAZL)的表达情况。结果显示,辽宁绒山羊睾丸总重和睾丸长周径极显著高于子午岭黑山羊(P<0.01),而睾丸短周径、睾丸脏体比和睾丸胴体比均差异不显著(P>0.05);辽宁绒山羊生精上皮厚度显著高于子午岭黑山羊(P<0.05),而两者精细管面积、直径和单位面积内精细管数量均无显著差异(P>0.05);两品种山羊睾丸中雄激素分泌无显著差异(P>0.05);辽宁绒山羊DDX4 mRNA及蛋白表达量均显著高于子午岭黑山羊(P<0.01或P<0.05),DAZL mRNA表达量极显著高于子午岭黑山羊(P<0.01),而蛋白表达量差异不显著(P>0.05)。以上结果表明,性成熟期辽宁绒山羊性腺发育程度与子午岭黑山羊一致,但生精上皮较子午岭黑山羊厚,生殖标记基因表达量存在差异,推测可能会影响两品种的生精能力。 展开更多
关键词 辽宁绒山羊 子午岭黑山羊 睾丸 DDX4 DAZL
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绵羊MYF6基因多态性对胴体瘦肉性状的影响 被引量:2
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作者 鲁玉洁 周辉通 +7 位作者 柯娜 王继卿 黄兆春 梁维炜 甄慧敏 罗玉柱 刘秀 李少斌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2022年第3期10-16,共7页
【目的】研究绵羊生肌因子6(myogenic factor 6,MYF6)基因的多态性,分析其对羔羊胴体瘦肉性状的影响。【方法】以215只新西兰罗姆尼公羔为对象,采集其血样,屠宰后测定其后腿、腰部和肩部瘦肉量等胴体指标。提取血样基因组DNA,采用PCR-S... 【目的】研究绵羊生肌因子6(myogenic factor 6,MYF6)基因的多态性,分析其对羔羊胴体瘦肉性状的影响。【方法】以215只新西兰罗姆尼公羔为对象,采集其血样,屠宰后测定其后腿、腰部和肩部瘦肉量等胴体指标。提取血样基因组DNA,采用PCR-SSCP检测MYF6基因5′UTR和第1外显子2个区域的多态性,分析核苷酸序列变异对羔羊胴体瘦肉性状的影响。采集绵羊乳腺、肝脏、心脏、背最长肌、脾脏、肺脏、卵巢和肾脏组织,以β-actin为内参基因,用RT-qPCR等方法检测MYF6基因的相对表达量。【结果】在第1外显子区域,检测到1个SNP(c.129 C>T),有A和B 2种等位基因,存在AA和AB 2种基因型。在5′UTR区域检测到1个3 bp的碱基缺失(c.-589~-590 del ATA),有C和D 2种等位基因,存在CC和DD 2种基因型。2个区域的基因型分布均处于Hardy-Weinberg平衡状态。MYF6基因第1外显子的基因型极显著影响了羔羊后腿、腰部和肩部3个部位的瘦肉量,以及总瘦肉量和腰部瘦肉比例(P<0.01)。MYF6基因在绵羊乳腺、肝脏、心脏等8个组织中均有表达,但以背最长肌中的表达量最高(P<0.05)。【结论】绵羊MYF6基因具有丰富的多态性,其基因型对胴体瘦肉性状有显著影响。 展开更多
关键词 罗姆尼绵羊 MYF6基因 第1外显子 胴体性状
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miR-221靶向IRS1抑制绵羊乳腺上皮细胞活力和增殖
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作者 柯娜 郝志云 +9 位作者 王建清 甄慧敏 罗玉柱 胡江 刘秀 李少斌 赵志东 黄兆春 梁维炜 王继卿 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期2047-2056,共10页
【背景】MicroRNAs(miRNA)是一类小RNA分子(18—23nt),广泛参与了家畜乳腺发育和泌乳性能的调控。项目组前期在小尾寒羊上应用RNA-Seq研究发现,miR-221在空怀期乳腺组织中的表达量是泌乳期的3.6倍,但是尚不清楚miR-221对绵羊乳腺发育的... 【背景】MicroRNAs(miRNA)是一类小RNA分子(18—23nt),广泛参与了家畜乳腺发育和泌乳性能的调控。项目组前期在小尾寒羊上应用RNA-Seq研究发现,miR-221在空怀期乳腺组织中的表达量是泌乳期的3.6倍,但是尚不清楚miR-221对绵羊乳腺发育的调控机制。【目的】探讨miR-221是否通过靶向基因IRS1抑制绵羊乳腺上皮细胞的活力和增殖数量,为揭示miR-221对绵羊泌乳性能的分子调控机理提供理论参考。【方法】采集小尾寒羊乳腺、心脏、肝脏、肾脏、脾脏、肺脏、背最长肌和卵巢等8个组织样本,采用实时荧光定量PCR(reverse transcription-quantitative PCR,RT-qPCR)技术,构建miR-221在绵羊8个组织中的表达谱。采用细胞转染、CCK-8和Edu等方法,研究miR-221对绵羊乳腺上皮细胞活力和增殖的影响。利用miRDB和miRanda数据库,预测miR-221的靶基因,结合功能富集分析,确定目标靶基因,构建靶基因的野生型和突变型载体,进而用双荧光素酶报告实验,验证miR-221与预测靶基因间的靶向关系。分析过表达和沉默miR-221对靶基因及其信号通路下游功能基因的影响。【结果】RT-qPCR结果表明,miR-221在绵羊乳腺等8个组织中均表达,其中在肺脏和脾脏中的表达量最高,在背最长肌和肾脏中的表达量最低。CCK-8结果表明,miR-221模拟物抑制了绵羊乳腺上皮细胞的活力(P<0.01),而miR-221抑制剂提高了乳腺上皮细胞的活力(P<0.05)。Edu试验发现,miR-221模拟物减少了Edu标记的阳性乳腺上皮细胞数量(P<0.01),而miR-221抑制剂增加了Edu标记的阳性乳腺上皮细胞数量(P<0.01)。双荧光素酶报告实验结果表明,miR-221模拟物抑制了胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS1)基因3′UTR区域的双荧光素酶活性(P<0.01),而miR-221抑制剂提高了该基因的活性(P<0.05),表明IRS1是miR-221的一个靶基因。RT-qPCR结果进一步发现,过表达miR-221降低了绵羊乳腺上皮细胞中IRS1和PIK3R1的表达量(P<0.05),沉默miR-221则提高了这2个基因的表达量(P<0.05)。过表达或沉默miR-221对乳腺上皮细胞中IGF1R的表达量没有显著影响(P>0.05)。【结论】miR-221通过抑制靶基因IRS1的表达量,最终抑制了绵羊乳腺上皮细胞的活力和增殖数量。 展开更多
关键词 绵羊 MIR-221 胰岛素受体底物1 乳腺上皮细胞
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