基于SPOC+虚实结合的教学模式在机能学实验教学中的应用

针对当前机能学实验传统教学模式的不足,文章探索设计了小规模限制性在线课程(Small Private Online Course,SPOC)与虚拟仿真实验教学、实验室实体实验深度融合的混合教学模式,建立多元化成绩评价体系,并将其应用于机能学实验课教学实践,随后通过问卷调查评价教学效果。结果显示,95%的学生对SPOC+虚实结合的教学模式表示认可,但也有40%的学生认为该模式增加了学习时间和工作量。该模式虽然为机能学实验课程教学质量提升积累了实践经验,但是在后续教学实践中仍需改进,以提高教学效果。

石蝉草总木脂素含量测定方法建立及提取工艺优选

[目的]建立石蝉草总木脂素含量测定的方法并通过正交试验优选石蝉草总木脂素的最佳提取工艺。[方法]以五味子乙素为对照品绘制标准曲线,采用变色酸-硫酸显色体系,紫外-可见分光光度法测定石蝉草乙醇提取物中总木脂素含量;采用L_(9)(3^(4))正交试验法,以总木脂素含量为考察指标,优选石蝉草总木脂素的提取工艺。[结果]五味子乙素在4.00~24.00μg/mL线性关系良好(R^(2)=0.9961),平均回收率为97.68%,RSD为1.11%,石蝉草总木脂素优化的提取工艺为8倍量80%乙醇回流提取3次,每次2 h。[结论]该含量测定方法准确、简便、经济,适用于石蝉草总木脂素的含量测定,优选得到的提取工艺可为石蝉草总木脂素的提取提供参考。

玉郎伞提取物抗炎作用及机制研究

目的:研究玉郎伞(YLS)的抗炎作用及其可能的机制。方法:采用二甲苯致小鼠耳肿胀和角叉菜胶致小鼠足肿胀模型,考察YLS水提取物(TYLS,以生药计剂量分别为80,40 g.kg-1)及其总黄酮(FYLS,0.14,0.07 g.kg-1)的抗炎作用,连续灌胃给药7 d后测定小鼠耳肿胀度和炎症足前列腺素E2(PGE2)及一氧化氮(NO)的含量。采用去除双侧肾上腺小鼠足肿胀模型,观察TYLS(以生药计剂量分别为80,40 g.kg-1)及FYLS(0.14,0.07 g.kg-1)灌胃给药对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响。正常大鼠灌胃TYLS(以生药计剂量分别为60,30 g.kg-1)及FYLS(0.1,0.05 g.kg-1)7 d后,测定大鼠肾上腺中维生素C和胆固醇含量及肾上腺重量。结果:TYLS及FYLS对二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致正常小鼠足肿胀均有显著的抑制作用,但对去肾上腺小鼠二甲苯所致耳肿胀无抑制作用(P>0.05);可降低炎症渗出物中PGE2含量,但对NO含量无显著影响(P>0.05);可降低正常大鼠肾上腺中维生素C和胆固醇的含量,对肾上腺指数无明显影响。结论:YLS具有明显抗炎作用,其作用可能与抑制PGE2产生,激动下丘脑-垂体-肾上腺轴有关,但对NO无显著抑制作用。

光裸方格星虫纤溶酶对急性血瘀模型大鼠血液流变性异常及血管内皮损伤的改善作用研究

目的:研究光裸方格星虫纤溶酶(SNFE)对急性血瘀模型大鼠血液流变性异常及血管内皮损伤的改善作用。方法:将SD大鼠随机分为对照组、模型组、阿司匹林组(100 mg/kg)和SNFE低、高剂量组(2 500、5 000 U/kg),每组10只,每天灌胃1次,连续给药7 d,第6天给药后1 h,除对照组外,其余各组大鼠均皮下注射盐酸肾上腺素0.8 mg/kg,再以冰水浴复制急性血瘀模型。次日给药后2 h腹主动脉采血,使用全自动血流变仪测定全血黏度(高、中、低切变率)、血浆黏度、红细胞比容、红细胞聚集指数、红细胞变形指数等血液流变学指标,酶联免疫吸附法测定血浆中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)含量及其比值,苏木精-伊红(HE)染色观察主动脉血管内皮的损伤程度。结果:与对照组比较,模型组大鼠的高、中、低切变率的全血黏度以及血浆黏度、红细胞聚集指数、ET-1含量均显著升高,红细胞变形指数、NO含量和NO/ET-1比值均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,SNFE高剂量组大鼠的高、中、低切变率的全血黏度以及血浆黏度、红细胞比容、红细胞聚集指数、ET-1含量均显著降低,红细胞变形指数、NO含量和NO/ET-1比值均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);SNFE低剂量组大鼠仅红细胞变形指数和NO/ET-1比值均显著增加,ET-1含量显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。血管内皮染色图显示,与对照组比较,模型组大鼠主动脉各层结构松散无序,内膜缺损不完整,空泡增加,内皮损伤明显;各给药组大鼠内皮也均有不同程度损伤,但损伤程度均较模型组轻。结论:SNFE对急性血瘀模型大鼠的血液流变性异常和血管内皮损伤均有改善作用。

红景天苷体外灌流对大鼠心肌细胞膜钠通道电流的影响

目的观察红景天苷体外灌流对SD大鼠心肌细胞膜钠通道电流(INa)的影响。方法 SD大鼠颈部脱臼处死后,开胸剪断主动脉并取下心脏,采用Langendorff逆行主动脉灌流法急性分离SD大鼠单个心室肌细胞,置于培养皿,以电极外液灌流冲洗。置入微电极,充灌电极内液,采用全细胞模式的膜片钳技术检测INa,电流稳定后灌注红景天苷100μmol/L,再次检测INa。绘制电流-电压关系(I-V)曲线、稳态激活曲线及稳态失活曲线,观察灌流前后大鼠心肌细胞INa及相关曲线的变化。结果红景天苷灌流后INa幅值增加。红景天苷灌流后INa I-V曲线下移,但不改变I-V曲线形状、最大激活电位和反转电位。红景天苷灌流前后INa密度最大峰值分别为(-29.71±4.37)、(-58.66±8.21)p A/p F,灌流前后相比,P<0.05。红景天苷灌流前后INa稳态失活曲线的半数失活电压分别为(-66.67±1.57)、(-61.45±1.57)m V,半数失活电压向正值方向移动,斜率因子分别为-10.23±1.30、-7.71±1.12,灌流前后半数失活电压相比,P<0.05。红景天苷灌流前后INa稳态激活曲线半数激活电压差异无统计学意义。结论红景天苷体外灌流可使SD大鼠心肌细胞膜INa的I-V曲线下移,增加电流幅值,该作用可能与红景天苷增加钠通道失活电位、抑制电流失活有关。

玉郎伞提取物对角叉菜胶致大鼠急性胸膜炎的影响

目的观察玉郎伞(YLS)提取物对角叉菜胶诱导的大鼠胸膜炎的影响。方法56只Wistar雄性大鼠随机分为正常组,模型组,地塞米松组,YLS水提取物(TYLS)高、低剂量组,总黄酮(FYLS)高、低剂量组。各组术前连续灌胃7 d,于末次给药30 min后造模,采用胸膜腔注射角叉菜胶诱导胸膜炎模型。造模8 h后检测胸腔渗出液体积、渗出液中白细胞计数、蛋白含量、前列腺素E_2(PGE_2)、丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)的活性。结果与正常组比较,模型组大鼠胸腔渗液体积和白细胞总数显著升高(P<0.01)。与模型组比较,YLS水提取物及其总黄酮能够减少大鼠胸腔渗出液体积、白细胞数量、蛋白含量、PGE_2及MDA的含量并降低MPO活性,提高胸腔渗出液SOD活性。结论YLS提取物对胸膜炎有明显的抑制作用,可能是通过抑制炎症介质PGE_2的生成、抑制白细胞浸润和游走及抗氧自由基等环节产生抗炎作用的。

螺旋藻激酶的体外抗氧化作用研究

目的:研究螺旋藻激酶(SPK)的体外抗氧化作用。方法:采用邻二氮菲-Fe2+氧化法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法和邻苯三酚自氧化法,分别测定不同浓度SPK对羟基(OH^-)自由基、DPPH自由基和对超氧阴离子(O_2^-)自由基的清除能力,并计算半数抑制浓度(IC_(50));采用普鲁士蓝反应法测定不同浓度SPK对Fe3+的还原能力(以吸光度值反映)。以上试验均以维生素C(VC)为阳性对照。结果:SPK对OH^-自由基、DPPH自由基及O_2^-自由基的清除能力均呈一定的浓度依赖性,SPK对OH^-自由基、DPPH自由基最大清除率分别86.82%、78.89%(IC_(50)分别为54.31、0.636 g/L),比VC(64.77%、73.49%)高;SPK对O_2^-自由基最大清除率为78.31%(IC_(50)为3.918 g/L),比VC(94.14%)低;在还原能力试验中,SPK使体系吸光度值增加,其最大吸光度值与VC相近,并呈明显浓度依赖性。结论:螺旋藻激酶具有明显的体外抗氧化活性。

正交实验优选水田七总皂苷的提取工艺研究

目的优选水田七中总皂苷的最佳提取工艺。方法以提取液中总皂苷含量为考察指标,分光光度法测定其含量,采用L9(34)正交实验法优选水田七总皂苷的提取工艺。结果水田七中总皂苷较优的提取工艺为提取2次,每次2h,乙醇浓度80%,乙醇用量4倍。结论优选得到的提取工艺可为水田七总皂苷的提取提供参考。

玉郎伞多糖和皂苷对氧自由基清除作用研究

目的:探讨玉郎伞(YLS)多糖、皂苷体外对氧自由基的抑制和清除作用。方法:采用分光光度法检测YLS多糖、皂苷对超氧阴离子自由基(O2.-)和羟自由基(·OH)的清除及抑制作用。结果:YLS多糖浓度为0.25、0.5、1.0mg/ml在体外对O2.-的清除率分别为38.5%、49.1%和58.9%,对O2.-生成的抑制率分别为29.7%、38.1%和55.3%;对.OH的清除率分别为24.2%、35.6%、56.9%。YLS皂苷浓度为0.15、0.3、0.6mg/ml在体外对O2.-清除率分别为19.3%、33.8%和44.6%,对O2.-生成的抑制率分别为17.1%、33.4%和41.3%,对OH则有促进生成的作用,其清除率分别为-11.9%、-18.4%、-32.2%。结论:YLS多糖、皂苷对O2.-具有明显的抑制及清除作用,YLS多糖对.OH也有一定的清除作用,而YLS皂苷对.OH则是促进生成的作用。

玉郎伞水提物对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

目的探讨玉郎伞水提物对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法将大鼠随机分为5组,即正常对照组,模型组,玉郎伞水提物低、高剂量组(含生药量3,12 g·L-1),阳性对照药维拉帕米组(含维拉帕米5×10-7mol·L-1)。离体大鼠心脏采用Langendorff法灌流,停灌30 min再灌30 min造成心肌缺血-再灌注损伤模型。于左心室插入水囊导管,采用MPA心功能分析系统记录心脏血流动力学各项指标,测定冠脉流量(coronary artery flow,CF)和冠脉流出液中肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(MB isoenzyme of creatine kinas e,CK-MB)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、乳酸脱氢酶同工酶-1(lactate dehydrogenase isozyme-1,LDH-1)活性以及心肌组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果与模型组比较,玉郎伞水提物高剂量组可明显改善缺血-再灌注损伤心功能的各项指标,降低CK、CK-MB、LDH、LDH-1的活性,增加心肌组织SOD的活性,减少MDA的产生。结论玉郎伞水提物对缺血-再灌注所致的心肌损伤具有保护作用,其作用机制可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化反应有关。

月光花豆乙醇提取物的镇痛作用及其机制研究

目的考察月光花豆乙醇提取物的镇痛作用并初步探讨其作用机制。方法采用醋酸致小鼠扭体法,小鼠热板法及小鼠温浴法,观察月光花豆乙醇提取物的镇痛作用,同时检测热板法小鼠的血清和脑组织PGE2、MDA的含量及SOD活性。结果月光花豆乙醇提取物能显著减少小鼠的扭体次数,显著延长小鼠热板反应舔足潜伏期及温浴致小鼠缩尾反应潜伏期,同时能使热板法小鼠血清和脑组织PGE2,MDA含量明显降低,SOD活性明显增强。结论月光花豆乙醇提取物具有显著的镇痛作用,其作用机制可能与减少PGE2和MDA含量、提高SOD活性有关。

柿叶不同溶剂萃取物对糖尿病小鼠抗氧化能力的影响

目的:研究柿叶不同溶剂萃取物对链脲佐菌素(STZ)糖尿病模型小鼠抗氧化能力的影响。方法:柿叶乙醇总提物分别用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,得到不同溶剂萃取物。经乙醇提取后得到柿叶残渣,经水煮乙醇沉淀后得水提醇沉萃取物。将实验小鼠随机分成:正常对照组,模型组,格列本脲组[25 mg/(kg.d)],不同溶剂萃取物低、高剂量组。连续灌胃给药15 d,在相应时间采血测定丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶(SOD)等指标。结果:乙酸乙酯萃取物和水提醇沉萃取物显著降低STZ所致糖尿病小鼠肝脏MDA含量和提高肝脏SOD活力(P<0.01或0.05),提高肝脏抗氧化能力;氯仿萃取物和正丁醇萃取物对STZ所致糖尿病小鼠无抗氧化作用。结论:提高糖尿病小鼠机体抗氧化能力可能是柿叶乙酸乙酯萃取物和水提醇沉萃取物降糖作用的机制之一。

高肺血流性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌中钙敏感受体表达和血浆中H_2S含量的检测及其意义

目的:检测钙敏感受体(CaSR)在高肺血流性肺动脉高压(PH)大鼠肺动脉平滑肌中的表达水平及血浆中H2S含量,阐明两者在PH形成机制中的作用。方法:18只雄性SD大鼠随机分为对照组和PH组,对照组大鼠行单纯开胸,PH组大鼠行左肺切除手术。饲养35d后,应用右心导管法分别测定各组大鼠肺动脉平均压(PAMP),检测右心室/体质量(RV/BW)和右心室/左心室+室间隔[RV/(LV+S)]比值,光学显微镜观察肺血管结构的变化,分光光度法检测血浆H2S含量,应用实时荧光定量PCR方法检测大鼠肺动脉平滑肌细胞CaSR mRNA的表达水平。结果:PH组大鼠PAMP、RV/BW及RV/(LV+S)比值均明显高于对照组(P<0.05),光镜下肺小血管肌化程度明显增强,肺中、小肌型动脉相对中膜厚度明显增加(P<0.05)。PH组大鼠肺动脉平滑肌细胞CaSR mRNA的表达水平较对照组明显增高(P<0.05);PH组大鼠血浆中H2S含量较对照组明显降低(P<0.05)。大鼠肺动平滑肌细胞CaSR mRNA的表达水平与血浆H2S含量呈负相关(r=-0.931,P<0.05)。结论:高肺血流时肺动脉平滑肌细胞CaSR mRNA表达的改变可能通过改变内源性H2S的产生参与PH的形成。

螺旋藻激酶对动脉粥样硬化模型大鼠血管内皮功能的影响

目的:研究螺旋藻激酶(SPK)对动脉粥样硬化模型大鼠血管内皮功能的影响。方法:将60只大鼠随机分为正常对照组(蒸馏水)、模型组(蒸馏水)、阳性对照组(辛伐他汀,0.005 g/kg)和SPK低、中、高剂量组(80、160、320 U/kg)。除正常对照组外,其余各组大鼠均复制动脉粥样硬化模型;同时,各组大鼠ig相应药物,每天1次,连续给药12周。测定大鼠血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;苏木精-伊红染色观察大鼠胸主动脉血管内膜的形态改变。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清中TC、TG、LDL-C、IL-6和TNF-α含量增加(P<0.01),HDL-C含量降低(P<0.01);血管内皮细胞脱落,内膜增生、向管腔内突起,平滑肌细胞增殖且排列紊乱,中膜弹力纤维崩解断裂。与模型组比较,各给药组大鼠血清中TC、TG、LDL-C、IL-6和TNF-α含量下降(P<0.05或P<0.01),阳性对照组和SPK中、高剂量组大鼠血清中HDL-C含量增加(P<0.05);给药组大鼠血管内皮细胞形态较模型组明显改善,其中SPK中、高剂量组大鼠血管内皮细胞各层结构完整、内膜基本光滑,SPK中剂量组大鼠血管中膜平滑肌细胞排列稍紊乱,与正常对照组比较无明显变化。结论:SPK有明显的降脂和抗炎作用,可保护血管内皮功能;其作用机制可能与降低血清中TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α含量和升高血清中HDL-C含量有关。

玉郎伞查尔酮激活Nrf2/ARE信号通路减轻缺氧/复氧所致的H9c2细胞凋亡及氧化应激损伤

研究玉郎伞查尔酮(YLSC)对缺氧/复氧所致的H9c2细胞损伤的影响及可能的作用机制。缺氧12 h、复氧24 h建立心肌细胞缺氧/复氧模型,并对细胞凋亡、氧化应激相关指标和Nuclear-Nrf2等蛋白表达进行了检测。结果显示,YLSC可明显增加细胞生存率,提高SOD、GSH-Px水平,降低细胞凋亡率和LDH、ROS、MDA水平。使Nuclear-Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达增高而Cleaved caspase 3、Bax蛋白表达减少,联合应用Nrf2抑制剂可抑制YLSC作用效果。结果表明,YLSC可以减轻缺氧/复氧所致的心肌细胞凋亡及氧化应激损伤,其机制可能与激活Nrf2/ARE信号通路有关。

玉郎伞查尔酮对异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌缺血的保护作用

目的研究玉郎伞查尔酮(YLSC)对异丙肾上腺素所致的小鼠心肌缺血的影响及可能机制。方法60只雄性KM小鼠随机分为正常组、模型组、普萘洛尔组(1 mg/kg)、YLSC低、中、高剂量组(3,6,12 mg/kg)。各组尾静脉注射药物15 d,随后腹腔注射异丙肾上腺素(10 mg/kg)3 d建立小鼠心肌缺血模型。实验结束后,测定血清心肌肌钙蛋白(cTn)T、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-18含量。取心肌组织,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠心肌病理变化,并测定心肌丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量;Western印迹测定心肌NOD样受体蛋白(NLRP)3、凋亡相关颗粒样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1的蛋白表达量。结果与模型组比较,YLSC可明显减轻心肌病理损伤,提高SOD、CAT、GSH-Px水平,降低MDA、cTnT、CK-MB、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18水平(P<0.05,P<0.01),抑制心肌NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达(P<0.05,P<0.01),并呈剂量-效应关系。结论YLSC可减轻异丙肾上腺素所致的小鼠心肌缺血损伤,机制可能与减少氧化应激,抑制TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18的产生和NLRP3炎症小体的表达有关。

光裸方格星虫纤溶酶SNFE体外溶栓作用及安全性初评

研究光裸方格星虫纤溶酶SNFE体外溶栓作用并初步评价药物的生物安全性。通过标准纤维蛋白平板和加热纤维蛋白平板实验、剩余可凝纤维蛋白原法、体外溶栓实验研究SNFE体外溶栓作用及作用方式;通过皮下出血实验及体外溶血实验初步评估SNFE的生物安全性。结果发现,SNFE在体外不仅具有激酶活性,且能直接溶解纤维蛋白原和纤维蛋白,对血凝块具有良好的溶栓作用,同时无出血活性及溶血作用,具有一定的开发价值。

紫菜多糖对急性酒精灌胃小鼠胃组织SOD、GSH-Px的影响

目的观察紫菜多糖对急性酒精灌胃小鼠胃组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响,探讨其保护胃黏膜免受损伤的机制。方法将小鼠分为生理盐水组、模型组和低、中、高剂量紫菜多糖组。制作急性酒精性胃黏膜损伤模型,测定小鼠胃溃疡指数及胃组织SOD、GSH-Px。结果高、中、低剂量紫菜多糖组小鼠胃溃疡指数均低于模型组,高、中剂量紫菜多糖组小鼠胃组织SOD、GSH-Px高于模型组并呈一定剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论紫菜多糖可通过提高急性酒精灌小鼠组织SOD、GSH-Px保护胃黏膜免受损伤。

文献教学法在药理学全英教学中的探索与应用

文献教学法是一种适用于医学基础课程教学的创新性的教学模式,通过探讨文献教学模式在药理学全英教学中实施步骤,分析文献教学模式在药理学教学中的应用优点、注意事项及对策,发现文献教学模式在药理学教学中的应用可以获得良好的教学效果,对提高教学质量具有一定的借鉴作用。

紫菜多糖对急性酒精性胃黏膜损伤小鼠胃组织PGE_2及NO的影响

目的观察紫菜多糖对急性酒精性胃黏膜损伤小鼠胃组织中前列腺素E2(PGE2)和一氧化氮(NO)含量的影响,探讨其保护胃黏膜的机制。方法将小鼠随机分为正常组,模型组,西咪替丁组和紫菜多糖高、中、低剂量组。制作急性酒精性胃黏膜损伤模型,测定小鼠胃溃疡指数及胃组织中PGE2,NO含量。结果紫菜多糖高、中、低剂量组小鼠胃溃疡指数均低于模型组(P<0.05,P<0.01);紫菜多糖高、中剂量组小鼠胃组织PGE2,NO高于模型组(P<0.05,P<0.01);紫菜多糖高剂量组胃组织PGE2高于紫菜多糖低剂量组(P<0.01)。结论紫菜多糖可能通过提高急性酒精性胃黏膜损伤小鼠胃组织中PGE2,NO含量而起到保护胃黏膜的作用。