基于miR-155/JAK2/STAT3信号通路探讨仙茅苷减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用机制

目的探讨仙茅苷对心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌损伤的改善作用及对微小RNA(miR)-155/Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导及转录激活蛋白3(JAK2/STAT3)信号通路的调节作用。方法将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、仙茅苷组、miR-155过表达组和miR-155过表达+仙茅苷组。除假手术组外,其余组大鼠采用冠状动脉左前降支结扎法建立心肌I/R模型,仙茅苷组和miR-155过表达+仙茅苷组大鼠于建模前6 d腹腔注射仙茅苷50 mg/kg,1次/d;miR-155过表达组和miR-155过表达+仙茅苷组大鼠于建模前在左心室上取3个位点注射miR-155 mimic。再灌注24 h后超声心动图检测心功能,TTC染色检测心肌梗死面积,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测心肌组织中miR-155表达水平,苏木精-伊红(HE)染色观察心肌损伤病理表现,ELISA检测血清中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)和乳酸脱氢酶(LDH)水平,蛋白质免疫印迹法检测心肌组织中p-JAK2和p-STAT3蛋白相对表达量。结果与模型组比较,仙茅苷组心肌组织miR-155水平降低,心肌梗死面积减小,左室射血分数(LVEF)和左室缩短分数(LVFS)升高,左室舒张末期内径(LVESD)和左室收缩末期内径(LVEDD)减小,血清中CK-MB、cTnT、LDH水平下降,心肌组织中p-JAK2和p-STAT3蛋白相对表达量升高,而miR-155过表达组以上各指标变化趋势相反(均P<0.05);与miR-155过表达+仙茅苷组比较,miR-155过表达组miR-155水平升高,心肌梗死面积增大,LVEF和LVFS降低,LVESD和LVEDD增大,血清中CK-MB、cTnT、LDH水平上升,p-JAK2和p-STAT3蛋白相对表达量降低,而仙茅苷组以上各指标变化呈相反趋势(均P<0.05)。结论仙茅苷可减轻大鼠心肌I/R损伤,改善心功能,其可能通过抑制miR-155表达从而上调JAK2/STAT3信号通路发挥作用。

≤10 kg婴幼儿先天性心脏病的围手术期治疗

目的评估低体重(≤10 kg)婴幼儿先心病的外科手术效果,总结临床经验。方法回顾性分析心外科低体重(≤10 kg)婴幼儿先心病1382例的临床资料。男性665例,女性717例;年龄6 d~3岁,平均(9.58±1.84)个月;体重1.6~10.0 kg,平均(8.82±1.13)kg。其中1305例在全身麻醉下行心脏畸形根治术,77例行姑息手术。结果全组手术顺利,术后死亡13例,占0.94%。死亡原因:低心排综合征7例,恶性心律失常1例,低氧血症5例(其中严重肺部感染2例)。结论低体重婴幼儿先心病的外科手术治疗是安全可行且有价值的,临床效果肯定,但必须正确掌握手术时机,缩短手术时间,严格进行围手术期管理,提高手术疗效。

miR-26a-3p靶向调控Survivin表达对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响

目的探讨miR-26a-3p对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠心肌细胞(H9c2)损伤的影响及其机制。方法取对数生长期H9c2心肌细胞进行缺氧(1%O 2)6 h,复氧不同时间(2、4、8、12 h)建立细胞H/R模型,另设常氧组,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活性;比色法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-26a-3p和生存素(Survivin)mRNA表达水平;Western blot检测细胞中Survivin蛋白表达水平。将miR-26a-3p inhibitor及其阴性对照inhibitor NC、Survivin基因siRNA干扰质粒(si-Survivin)及其阴性对照si-NC共转染至H9c2细胞中,随后进行H/R干预,CCK-8检测各组细胞增殖水平;比色法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及上清液中LDH水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡水平;Western blot检测各组细胞中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、活化型半胱天冬酶-3(cleaved caspase-3)和Survivin蛋白表达水平;双荧光素酶测定miR-26a-3p和Survivin基因的靶向关系。结果与常氧组细胞比较,随着复氧时间的延长,H9c2细胞增殖活性、Survivin mRNA和蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05),而LDH及miR-26a-3p表达水平逐渐升高(P<0.05)。下调miR-26a-3p表达可提高H/R暴露下H9c2细胞增殖活性、SOD活性、Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05),同时降低MDA含量、LDH释放量、凋亡率、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平(P<0.05);而Survivin缺失可明显逆转miR-26a-3p inhibitor对H/R诱导下H9c2细胞的保护作用。双荧光素酶报告基因实验表明Survivin是miR-93-5p的靶基因。结论miR-26a-3p在H/R诱导的心肌细胞损伤中高表达,抑制miR-26a-3p表达可通过靶向上调Survivin表达抑制H/R诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激。

下调miR-320a表达对缺氧/复氧诱导的心肌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨下调miR-320a表达对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型的影响,并阐明其相关作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测急性心肌梗死(AMI)患者血清中和H/R诱导的心肌H9C2细胞中miR-320a表达水平。将miR-320a inhibitor、inhibitor NC、小干扰Janus激酶(si-JAK2)和si-NC质粒分别转染至H9C2细胞中,同时设空白对照组,确定转染成功后进行H/R处理。H9C2细胞分为对照组、H/R组、H/R+inhibitor NC组、H/R+miR-320a inhibitor组、H/R+miR-320a inhibitor+si-NC组和H/R+miR-320a inhibitor+si-JAK2组。双荧光素酶报告基因检测miR-320a与Janus激酶2(JAK2)的靶向关系,CCK-8法检测各组细胞增殖率,生化法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平和细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,RT-qPCR法检测各组细胞中miR-320a和JAK2 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、剪切型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase-3)、JAK2、信号转导因子和转录激活因子3(STAT3)及磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达水平。结果:AMI患者血清中和H/R组H9C2细胞中miR-320a表达水平明显高于对照组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测结果提示miR-320a可与JAK2靶向结合。与对照组比较,H/R组细胞增殖率和细胞中SOD活性明显降低(P<0.05),细胞凋亡率、细胞中MDA水平和细胞培养上清液中LDH活性明显升高(P<0.05),细胞中Bcl-2和JAK2蛋白表达水平及p-STAT3/STAT3比值明显降低(P<0.05),Bax和cleaved-caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与H/R组比较,H/R+miR-320a inhibitor组细胞增殖率和细胞中SOD活性明显升高(P<0.05),细胞凋亡率、细胞中MDA水平和细胞培养上清液中LDH活性明显降低(P<0.05),细胞中Bcl-2和JAK2蛋白表达水平及p-STAT3/STAT3比值明显升高(P<0.05),Bax和cleaved-caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与H/R+miR-320ainhibitor+si-NC组比较,H/R+miR-320a inhibitor+si-JAK2组细胞增殖率和细胞中SOD活性明显降低(P<0.05),细胞凋亡率、细胞中MDA水平和细胞培养上清液中LDH活性明显升高(P<0.05)。结论:下调miR-320a表达可抑制H/R诱导的心肌细胞凋亡,增加细胞增殖活性,其作用机制与靶向调控JAK2/STAT3信号通路有关。

天然气长输管道安全管理措施

在社会发展背景下,石油化工行业发展前景良好。随着我国现阶段天然气规模逐渐增加,管道施工项目日益增多。相比于其他材料,天然气属于清洁能源,可减少对周围环境的影响。但在长输管道施工方面,对专业性的要求较高,一旦管理效果不佳,会影响天然气运输安全,难以达到标准化生产需求。鉴于此,本文将重点围绕天然气长输管道安全管理措施开展分析,以此为提升行业发展质量奠定基础。

福建辣椒蓟马识别及防治

辣椒是福建优势特色蔬菜之一,近年来蓟马发生为害严重,产业发展受阻。本文通过调查、分析发现福建辣椒蓟马种类以花蓟马为主,还包含黄胸蓟马、棕榈蓟马、八节黄蓟马、亮蓟马、豆大蓟马和中华简管蓟马;对蓟马的防控是一项综合、绿色、可持续的过程,其中农业防治是基础,可从清园改土、良种选用和促生诱抗方面着手,从根本上遏制蓟马的发生和为害;物理防治直接、有效,可从防虫隔离、理化诱控和覆盖地膜方面着手,实现监测与防控并举;生物防治安全、有效且持久,可应用天敌昆虫和施用生物农药,实现蓟马生态调控的良性循环;化学防治不可缺少,但要注重施用高效、低风险的化学农药和加强轮换用药。

赖氏通元针法治疗脾肾两虚型肾性贫血的疗效观察及对Hb、RBC、HCT水平的影响

目的:观察赖氏通元针法治疗脾肾两虚型肾性贫血的临床疗效及对血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、血细胞比容(HCT)的影响。方法:按照纳入和排除标准筛选符合条件的60例维持血液透析的脾肾两虚型肾性贫血患者,随机分为对照组(31例)、试验组(31例)。两组患者均予基础治疗,对照组予注射用重组人促红细胞生成素,试验组在对照组治疗基础上联合赖氏通元针法针刺百会、中脘、气海、关元、天枢(双)、足三里(双)、太溪(双)、三阴交(双)、心俞(双)、膈俞(双)、肝俞(双)、脾俞(双)、肾俞(双)。每周3次,两组疗程均为4周。4周后观察两组患者中医证候积分及Hb、RBC、HCT水平的变化,评价赖氏通元针法的疗效。结果:研究过程中两组各脱落1例,最终有效病例每组各30例。(1)两组临床疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05),但控效率试验组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)治疗后两组患者中医证候积分均降低,试验组治疗后中医证候积分低于对照组,治疗前后中医证候积分差值高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。(3)治疗后两组患者Hb、RBC、HCT水平均升高,试验组治疗后Hb、RBC、HCT水平及治疗前后Hb、RBC、HCT水平差值均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:赖氏通元针法治疗脾肾两虚型肾性贫血具有较好的临床疗效,值得在临床推广应用。

西红花苷对大鼠缺血缺氧心肌损伤的保护作用及其机制

目的:探讨西红花苷对大鼠缺血缺氧心肌损伤的保护作用,并阐明其作用机制。方法:50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、低剂量(20 mg·kg^-1)西红花苷组、中剂量(40 mg·kg^-1)西红花苷组和高剂量(80 mg·kg^-1)西红花苷组,每组10只。通过结扎左冠状动脉前降支再灌注建立大鼠缺血缺氧心肌损伤模型。采用HE染色观察大鼠心肌组织形态表现,原位末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡情况并计算细胞凋亡指数(AI),逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blotting法检测大鼠心肌组织中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)mRNA及蛋白表达水平,采用试剂盒检测各组大鼠血清中丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性。结果:假手术组大鼠心肌纤维排列整齐;模型组大鼠心肌纤维紊乱、出现水肿,心肌间质大量炎细胞浸润;与模型组比较,低剂量西红花苷组大鼠心肌组织中炎细胞浸润和心肌纤维水肿程度明显减轻,中和高剂量西红花苷组大鼠心肌纤维无明显水肿,少量炎细胞浸润。与假手术组比较,模型组大鼠心肌AI明显升高(P<0.05),心肌组织中Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bax和caspase-3 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05),血清中MDA水平明显升高(P<0.05),SOD活性明显降低(P<0.05),LDH和CK活性明显升高(P<0.05);与模型组比较,低、中和高剂量西红花苷组大鼠心肌AI明显降低(P<0.05),心肌组织中Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bax和caspase-3 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05),血清中MDA水平明显降低(P<0.05),SOD活性明显升高(P<0.05),LDH和CK活性明显降低(P<0.05);与低剂量西红花苷组比较,中和高剂量西红花苷组大鼠心肌AI明显降低(P<0.05),心肌组织中Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bax和caspase-3 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05),血清中MDA水平及SOD、LDH和CK活性差异无统计学意义(P>0.05);与中剂量西红花苷组比较,高剂量西红花苷组大鼠心肌AI明显降低(P<0.05),心肌组织中Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bax和caspase-3 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05),血清中MDA水平及SOD、LDH和CK活性差异无统计学意义(P>0.05)。结论:不同剂量西红花苷对缺血缺氧心肌损伤具有保护作用,且具有剂量依赖性,其作用机制可能与减少心肌细胞凋亡及缓解心肌组织氧化应激损伤有关。

绣球菌子实体营养成分分析

绣球菌[Sparassis crispa（Wulf．）Fr．]又名绣球蘑、属担子菌亚门（Basidiomycotina）、异隔担子菌纲（Heteroba—sidiomycetes）、无隔担子菌亚纲（Holobasidi—omycetidae）、无褶菌目（Aphyllophorales）、绣球菌科（Sparassi—daceae）。该属全世界目前只发现1个种，即绣球菌，其子实体肉质洁白细嫩，鲜美可口，营养丰富，是一种珍贵的食用菌。

姬松茸对重金属的富集规律及控制技术研究

【研究目的】笔者研究了姬松茸生产栽培过程中对重金属Pb、As、Hg、Cd的富集规律及控制技术;【方法】采用定点取样和测定分析;【结果】结果表明:随着培养料的堆制,在微生物和菌丝的作用下将重金属Pb、As、Hg、Cd的迁移到子实体;子实体内Pb、As、Hg、Cd含量与培养料中Pb、As、Hg、Cd的含量关系密切,前三者随着潮数而递增,Cd则随潮数而递减;子实体对Pb和As的富集作用不显著,富集系数均值分别为0.22和0.56;而对Hg、Cd的富集作用明显,其富集系数分别达2.4￣4倍和27.8￣32.4。覆土土壤中的重金属在菌丝作用下部分迁移到子实体内;菌盖中Cd、Hg和As含量分别是菌柄的3.75、2.75和2.27倍;而Pb在菌盖和菌柄中含量则无差别;【结论】选择重金属低污染的培养料、覆土土壤和粗柄型菌株是实现姬松茸子实体重金属低富集的关键措施。

姬松茸镉累积特性研究:Ⅱ镉胁迫对菌丝及子实体生长发育的影响

通过测定菌丝生长速度和子实体中镉含量,研究重金属Cd胁迫对姬松茸菌丝和子实体生长发育的影响。结果表明,菌丝生长速度随镉浓度的增加而明显受到抑制,EC50为20.2375mg·kg-1。姬松茸子实体镉的富集随培养料中外源镉浓度的增加而明显递增,符合MICHAELISMENTEN曲线回归模型;当培养料中镉添加量低于10mg·kg-1,子实体内镉的富集系数相同;当外源镉浓度超过10mg·kg-1,富集系数降低,培养料外源镉浓度至80mg·kg-1,其富集系数降至12;镉浓度超过10mg·kg-1,子实体数量显著减少;镉浓度在40mg·kg-1以上,菌丝体发育为畸形菇。因此初步认为,姬松茸子实体生长发育耐镉的临界值为40mg·kg-1。不同浓度镉胁迫其菌盖镉的富集量均比菌柄高出3倍左右。

姬松茸镉累积特性研究Ⅰ.培养料镉污染对子实体的效应

对福建省姬松茸主产区培养料镉污染状况进行调查分析与测定,研究培养料配方镉污染对子实体的效应。结果表明:培养料中镉污染程度为:过磷酸钙>干牛粪>稻草;培养料配方中镉含量随堆料、菌丝吸收而累积并富集到子实体中。配方中镉含量与子实体中的镉含量呈显著正相关;回归方程y=-4.01+94.01x1+54.32x2+679.46x3,为子实体镉总量(y)与栽培配方中稻草比例中镉含量(x1)、牛粪比例中镉含量(x2)、过磷酸钙比例中镉含量(x3)的关系,且主导因子为过磷酸钙;培养料配方中牛粪对子实体产量及氨基酸总量起重要的作用。

群体配置对菜用大豆产量及生理指标的影响

不同群体配置方式对菜用大豆的植株性状、青荚产量、叶面积指数、干物质积累量、干物质积累速度和各器官光合产物的分配均有不同程度的影响。每穴1株、2株比3株种植法青荚产量明显提高，单株干物质累积量增加，累积速度加快，光合产物在荚粒中的分配量分别增加1．11g和0．89g。

白金针菇工厂化生产工艺研究

采用白金针菇8903菌株进行工厂化袋栽生产工艺试验。结果表明：白金针菇对未处理的木屑的消化吸收能力差，菌丝培养中后期易吐黄水，原基偏黄，推迟开袋5～7d，菇体基部淡黄，产量低，品质差；新鲜蔗渣营养丰富，子实体产量质量均优于长期露天堆放蔗渣；菌包料高14cm可满足营养需求；光照（40W日光灯）20～24h可提高平整度，又可增产和提高品质；白金针菇对黄色光较敏感，绿色光次之，而对红色光则不敏感，以黄色光诱导效果佳。

绣球菌蛋白质的营养评价

采用国际上通用的营养评价方法,对绣球菌[Sparassis crispa(Wulf.)Fr.]子实体进行了蛋白质营养价值评价。结果为绣球菌子实体的粗蛋白质含量为12.9%,氨基酸总量为9.33%,其中必需氨基酸含量占氨基酸总量的33.9%。绣球菌的赖氨酸为第一限制氨基酸,苏氨酸相对过剩。绣球菌子实体蛋白质的化学评分(CS)、氨基酸评价(AAS)、必需氨基酸指数(EAAI)、生物价(BV)、营养指数(NI)和氨基酸比值系数分(SRCAA)分别为80.9,87.3,78.3,73.6,10.1和87.9。绣球菌的营养价值高于松口蘑(Tricholoma matsutake)和茶树菇(A-grocybe aegerita)。因此,绣球菌子实体是良好的菌类蛋白源。

气管狭窄患者的手术麻醉处理

由于需要手术治疗的气管疾病发病率较低，手术范围涉及下气道，麻醉处理困难，手术数量较少。我院自2。。5～2009年共实施气管狭窄手术麻醉¨例，现报道如下。

绣球菌菌丝营养生理特性研究

研究了绣球菌C2004菌株菌丝营养生理特性。结果表明,实验范围内绣球菌C2004菌丝生长最适碳源为糯米淀粉,适宜氮源为蛋白胨、酵母膏和豆饼粉;菌丝生长的最佳温度、抑制温度和最高致死温度分别为20 .2 ℃、35 ℃和40 ℃,最适pH为5 .25 ,培养料最适含水量为62 .5 %。

“292”菜用大豆干物质与其氮磷钾含量的动态研究

对菜用大豆品种“２９２”分别于二复叶期、始花期、结英期、采青期的植株进行化验分析的结果表明：（１）结荚至采青期为于物质积累最快时期，占总积累量的４３．９８％，始花至结荚为日增重最快阶段。（２）苗期至始花期氮、磷均以叶中含量最高，钾以茎中含量最高。采青期荚中氮、磷、钾含量最高。（３）不同器官中全氮、磷、钾含量存在较大差异，氮含量叶＞花荚＞茎、磷含量花荚＞叶＞茎、全钾含量茎＞叶＞花荚。（４）每１００ｋｇ青英需Ｎ１．７３ｋｇ，Ｐ２Ｏ５０．１９ｋｇ，Ｋ２Ｏ０．９４ｋｇ，氮、磷、钾比例为１：０．１１：０．５４。

菜用大豆“292”高产群体结构的研究

分析了菜用大豆“２９２”品种的不同密度、不同穴株数的产量、植株性状和群体生育的变化特点。结果表明：“２９２”要获得高产，其种植密度以每公顷２３．２５～２４万株，每穴１～２株为宜；叶面积指数（ＬＡＩ）峰值约３．８，且出现在结荚期；采青期单株干物重应在２７ｇ以上，且荚中的分配比例要大于４２％。