枸杞多糖对大鼠生殖系统保护作用的机制探讨

目的 :探讨枸杞多糖 (LBP)对大鼠生殖系统保护作用的可能机制。方法 :36只雄性Wistar大鼠 ,按给予枸杞多糖的不同剂量分组 (0剂量对照组、0剂量阳性对照组、1 0 ,5 0 ,1 0 0 ,2 0 0mg·kg-1 ·d-1 剂量组 ) ,每组 6只。 1 4d后以温水浴构造大鼠睾丸损伤模型 ,测定血清性激素水平、睾丸组织中超氧化物歧化酶 (SOD)活性、丙二醛 (MDA)含量及观察睾丸组织形态学改变。结果 :大鼠血清性激素水平、SOD活性低于LBP组 ;MDA含量则高于LBP组 ,最佳剂量为LBP 1 0mg·kg-1 ·d-1 ;LBP能降低高温引起的生精细胞损伤、促进睾丸生殖细胞正常发育。结论 :LBP对大鼠生殖系统具有保护作用 ,其机制可能是通过抗氧化作用及调节下丘脑 垂体

气相色谱质谱法测定食品中的甲醛

建立了用气相色谱质谱选择离子检测(GCMSSIM)测定食品中甲醛和次硫酸氢钠甲醛的新方法。改进了样品提取方法,考察了样品提取时间及衍生条件等因素的影响,确定最佳提取条件为超声波振荡40min,衍生条件为2g/L的2,4二硝基苯肼(DNPH)作衍生剂避光反应6h;采用选择离子m/z79和m/z210进行GCMS检测。结果表明,本法可消除复杂基体的干扰,简便快速,准确可靠,灵敏度高,相对标准偏差小于7%;回收率在88.4%～93.8%;检出限为0.1mg/kg。该方法已应用于面粉、面条、啤酒、饮料等各类食品中甲醛和次硫酸氢钠甲醛的测定。

枸杞多糖对H_2O_2诱导的小鼠生殖细胞损伤的影响

目的:探讨枸杞多糖(LBP)对化学物质导致的生殖细胞损伤的影响。方法:用彗星电泳技术检测睾丸细胞拖尾细胞百分率及尾长。实验分四组:正常对照组;阳性对照组,睾丸细胞中仅加入H2O2染毒;LBP对照组,细胞中加入不同浓度的LBP;LBP+H2O2组,细胞先用不同浓度LBP作用1h,再加入H2O2共同培养25min。结果:LBP各剂量均能使过氧化氢染毒细胞的拖尾细胞百分率和尾长显著降低,二者呈剂量-反应关系。结论:LBP能抑制H2O2诱导的睾丸细胞损伤,对生殖细胞具有明显的保护作用。

枸杞多糖对小鼠睾丸细胞DNA损伤的保护作用

目的 :研究枸杞多糖 (LBP)对过氧化氢 (H2 O2 )引起的睾丸细胞DNA氧化损伤的保护作用。方法 :睾丸细胞先用不同浓度LBP作用 1h ,再加入 10 0 μmol LH2 O2 共同培养 2 5min ,然后用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)测定DNA链断裂情况 ,分析LBP的抗氧化损伤作用。结果 :H2 O2 作用一定时间后 ,可引起DNA链断裂。 50、10 0、2 0 0、40 0 μg mL的LBP预处理可使H2 O2 染毒细胞的拖尾百分率和尾长显著降低。结论 :LBP本身没有致氧化损伤作用 ,它能够清除自由基 。

液相色谱-质谱法测定纺织品和皮革制品中痕量全氟辛烷磺酸盐

建立了纺织品和皮革制品中全氟辛烷磺酸盐（PFOS）的液相色谱-二级质谱（LC-MS^2）测定方法。样品经0．1mol／L HCl和甲醇超声波振荡提取，高效液相色谱分离；色谱柱为ZorbaxSB-C18；流动相为V（甲醇）：V（10mmol／L乙酸铵水溶液）=70：30，流速为0．3mL／min。采用负离子模式的电喷雾质谱检测。以一级质谱得到的准分子离子m／z 499作为母离子，进行二级质谱（MS^2）分析。选择MS^2的碎片离子m／z 169、230、280、330及419定性确证，MS。总离子流色谱（TIC）峰面积定量。实验优化了样品提取方法和色谱、质谱条件，并对二级质谱碎裂机理和特征离子进行了研究。结果表明，本法简便快速，准确可靠，相对标准偏差小于8．6％，回收率在90％～99％之间；检出限为1．5mg／kg，远低于欧盟指令50mg／kg的限量规定。本方法已成功应用于纺织品、皮革制品中痕量PFOS的测定。

GC—MS／SIM法同时测定食品中的苏丹红Ⅰ～Ⅳ

采用气相色谱-质谱(GC-MS)选择离子检测法(SIM),建立了准确可靠、灵敏度高、快速简便的同时测定食品中苏丹红Ⅰ～Ⅳ的新方法.色谱柱为PR-SR石英毛细管柱(20 m×0.25 mm),进样口温度280℃,柱温200℃,以15℃/min升至280℃;柱前压130 kPa,载气He;EI离子源,选择m/z 77,105,115,143,176,247,248,261,352,380用于SIM检测,并按不同的采样时间分成4组,每组4个离子,分别对应于每种苏丹红进行定性分析确证;选择苏丹红Ⅰ～Ⅳ各自的分子离子峰m/z 248,276,352,380作抽出离子图进行定量分析.苏丹红Ⅰ、Ⅱ的线性范围为0.01～10.0 mg/L,苏丹红Ⅲ、Ⅳ的线性范围为0.1～10.0 mg/L;检出限苏丹红Ⅰ、Ⅱ为1μg/kg,苏丹红Ⅲ为5μg/kg,苏丹红Ⅳ为10μg/kg;回收率86%～95%.本法与欧洲健康与消费者保护委员会的方法(HPLC法)相比灵敏度高1～2个数量级,分析时间缩短,用色谱保留时间、质谱同时定性,消除了食品中杂质的干扰,结果准确可靠,选择性和重复性好,适用于所有食品成品及原料的检验.

枸杞多糖对雄性大鼠睾丸组织损伤的保护作用

目的 研究枸杞多糖 (LBP)对雄性大鼠睾丸组织损伤的保护作用 ,找出LBP最佳作用剂量。方法 通过给雄性Wistar大鼠灌胃不同剂量的LBP〔0 ,10 ,5 0 ,10 0及 2 0 0mg/ (kg·d)〕2周后温水浴造模观察大鼠血清性激素水平、睾丸、附睾的脏器系数、睾丸组织中超氧化物歧化酶 (SOD)活性、丙二醛 (MDA)含量及睾丸组织形态学改变。结果 LBP可使睾丸损伤大鼠血清性激素水平升高 ;增加睾丸、附睾的脏器系数 ;提高大鼠睾丸组织SOD活性 ,降低MDA含量 ;使受损的睾丸组织恢复到接近正常。结论 LBP对大鼠睾丸损伤具有保护作用 ,10mg/ (kg·d)为其最佳剂量。

奶粉中高氯酸盐的液相色谱-串联质谱测定

建立了奶粉中高氯酸盐的液相色谱-串联质谱（LC—MS／MS）测定方法。奶粉样品用水-乙腈（体积比1：2）超声波振荡提取2次，于4000r／min离心后，上清液经Oasis HLB固相萃取小柱净化；采用离子交换色谱分离，色谱柱为METROSEP A Supp5（150mm×4．0mm）阴离子交换柱，流动相为0．2mol／L乙酸铵溶液-乙腈（体积比1：1），流速0．7mL／min；电喷雾负离子模式电离，质谱多反应选择离子检测（MRM），检测离子对为m／z99→83和m／z 101→85，其中m／z99→83为定量离子对。方法的相对标准偏差为3．59％，回收率为91％～106％，检出限为1．0μg/kg，定量下限为5．0μg/kg。结果表明，该法简便快速、准确可靠，也适用于鲜牛奶、酸牛奶等其他乳制品中高氯酸盐的测定。

液相色谱-串联质谱测定面条和米粉中的硫脲

建立了米面制品中硫脲的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法。实验优化了样品提取方法、液相色谱条件和质谱参数。样品用80%乙醇超声波提取,离子交换色谱分离,色谱柱为NUCLEOSIL100-5SA阳离子交换柱,流动相为乙腈-(1%乙酸+0.2%乙酸铵)水溶液(30:70),流速0.5mL/min。采用电喷雾质谱正离子模式电离,多反应选择离子检测,检测离子对为m/z77/60和m/z77/43,其中m/z77/60为定量离子对。结果表明:本方法简便快速、准确可靠,相对标准偏差<4.0%;回收率为83%～90%;检出限为0.5mg/kg;定量下限为5mg/kg。

破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的分析

目的研究灵芝孢子粉多糖的组成、相对分子质量及相对分子质量分布,比较破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的异同。方法用不同提取方法提取灵芝孢子粉多糖,采用气相色谱-质谱(GC-MS)、高效液相色谱(HPLC)分析灵芝孢子粉多糖的单糖组成,用凝胶渗透色谱(GPC)分析灵芝孢子粉多糖的相对分子质量及其分布。结果不同提取方法所得灵芝孢子粉多糖的得率不同,破壁后灵芝孢子粉含的多糖是不破壁的1.7倍;灵芝孢子粉多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,破壁与不破壁的多糖组成完全相同,其相对质量分数略有区别;破壁灵芝孢子粉多糖的GPC有两个多糖峰,相对分子质量分别为7.80×104和1.17×104,而不破壁灵芝孢子粉多糖只有相对分子质量为7.80×104的一个峰。结论破壁与不破壁孢子粉多糖的单糖组成相同,但破壁灵芝孢子粉多糖较不破壁孢子粉的多糖高出70%,增加部分为相对分子质量较小的多糖。这可以解释破壁灵芝孢子粉的功效好于不破壁灵芝孢子粉的原因。

天花粉多糖的单糖组成和相对分子质量的测定

目的研究天花粉多糖的单糖组成、相对分子质量(Mr)及其分布。方法天花粉用超声波振荡提取、乙醇沉淀分离出多糖,并用重结晶、色谱柱纯化后,采用气相色谱-质谱(GC-MS)、高效液相色谱(HPLC)分析天花粉多糖的单糖组成,用凝胶渗透色谱(GPC)分析天花粉多糖的Mr及其分布。结果天花粉多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,经色谱柱纯化得到的天花粉多糖与未经纯化的天花粉粗多糖的单糖组成相同,但质量分数有所差别;天花粉多糖的GPC图有两个多糖峰,天花粉粗多糖的两个GPC峰的数均相对分子质量(Mn)分别为1.8×105和1 460,天花粉多糖的两个GPC峰的Mn分别为1.60×105和4 554。结论两种天花粉多糖的Mr及单糖组成的质量分数有区别。

液相色谱-电喷雾质谱法分析脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠

采用电喷雾质谱(ESI/MS)技术建立了脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)的烷基碳链分布、乙氧基分布及平均EO数、平均相对分子质量的测定方法;采用液相色谱-电喷雾质谱(LC-ESI/MS)测定了AES中的游离十二烷基硫酸钠(SDS)的含量。将本方法应用于实际样品的测定,并与核磁共振法测得的平均EO数进行比较,二者的测定结果相当吻合,从而验证了本法的可靠性。

天花粉多糖的提取、分离与纯化研究

目的系统地研究天花粉多糖分析的样品前处理方法,包括提取、分离及纯化方法,为进一步开展天花粉多糖的组成及相对分子质量等分析研究,探讨其药理药效奠定基础。方法试验了加热回流、不同温度浸提、超声波振荡等方法提取天花粉多糖,对天花粉多糖的沉淀分离条件进行了优化,并采用重结晶、透析、柱色谱等方法进行纯化,采用苯酚-硫酸分光光度法测定多糖的质量分数,并用核磁共振波谱法进行验证。结果天花粉多糖于45℃超声波振荡提取效果最佳,不同纯化方法所得天花粉多糖的质量分数不同,重结晶法得到的多糖质量分数为58.8%,透析法得到的多糖质量分数为51.3%,色谱柱纯化后的多糖质量分数最高可达94%。结论本研究建立了天花粉多糖的样品前处理分析方法,解决了天花粉中淀粉、蛋白以及柠檬酸等化合物的干扰问题,获得了质量分数较高的天花粉多糖,可用于天花粉多糖的进一步分析。

亲水作用液相色谱-串联质谱测定水产品中的消毒剂残留

首次建立了水产品中消毒剂二氯异氰尿酸和三氯异氰尿酸总残留量以及三氯生残留量的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)同时测定方法。水产样品用乙腈-5%氨水(体积比30∶70)提取,HyperSep RetainAX SPE固相萃取小柱净化,采用亲水作用色谱柱SeQuant ZIC-HILIC分离,以(0.1%甲酸+10 mmol/L乙酸铵)水溶液-乙腈体系为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾负离子模式下以多反应监测(MRM)方式检测。结果表明,在0.042～2.4 mg/L质量浓度范围内线性良好,相关系数大于0.99,在3个不同加标水平下,平均回收率为68%～96%,相对标准偏差(RSD)为5.9%～10.9%,检出限(LOD,S/N=3)和定量下限(LOQ,S/N=10)分别为0.015、0.05 mg/kg。实际样品测定表明,该方法适用于各种水产品中三氯生、二氯异氰尿酸和三氯异氰尿酸消毒剂残留量的测定。

核酸水解产物嘌呤、嘧啶碱基在BDS柱上的分离及测定

用高效液相色谱法测定了核酸水解的中间产物及最终产物 6种嘌呤、嘧啶碱基 ,探讨了色谱柱、流动相等对其分离的影响 ,确定了最佳色谱条件为 :HypersilBDS C18柱 ,乙腈 0 1mol/LKH2 PO4 (H3 PO4 调节 pH至4 0 5 ) (体积比为 2∶98)作流动相 ,紫外检测器在 2 6 0nm波长下检测。方法的精密度在 3%以内 ,回收率在 82 %～ 114%。方法应用于酵母核酸样品的测定中 。

15种核酸水解产物的高效液相色谱分离及其在酵母抽提物分析中的应用

采用反相高效液相色谱同时分离１５种核酸水解产物，包括６种核苷酸、４种核苷和５种碱基，利用二极管矩阵检测器提供的紫外光谱图对复杂样品进行辅助定性及鉴定峰纯度，并将此方法应用于测定酵母抽提物中的核苷酸，取得了满意的结果。方法的精密度为相对标准偏差小于３．５％，回收率为９３．８％～１０４．６％。

上海市长宁区乳腺癌患者相关知识、行为及需求调查

目的了解上海市长宁区乳腺癌患者相关知识、信念、行为及健康教育方式的需求现状,为开展社区随访干预提供参考依据。方法整群抽取长宁区4个街道女性乳腺癌患者并进行问卷调查。结果共调查254人,其中对部分知识点如"40岁以上妇女应每年做一次乳腺的临床和X线钼靶检查"、"乳腺癌与高脂饮食的关系"、乳腺癌的危险因素、有关症状体征等知晓率低于80%,且大部分知识为患病后获得;57.9%的患者对自己的疾病充满信心,并且能以积极的态度治疗疾病;82.7%的患者认为社区医生的随访是有用的,并且愿意接受康复照料;95%以上的患者能够定期复查和化疗并且遵守和执行医护人员的指导;仅有61.8%的患者经常自查体表肿瘤;对健康教育方式需求依次为医护讲解、病友交流、宣传资料和科普手册,分别占54.7%、47.2%、36.2%和28.7%;在干预渠道上,比例最高的是电视,占66.1%,在支持来源上,比例最高的是家人,占79.5%。结论应加强对高危妇女的防癌知识宣传教育,在随访中加强对可干预因素的控制,发挥人际传播和电视宣传等在乳腺癌相关防治知识的传播中的主渠道作用。

高效液相色谱法同时测定制药废水中的交沙霉素、茶碱及扑热息痛

建立了同时测定制药废水中残留的交沙霉素、茶碱、扑热息痛等3种药物的高效液相色谱方法。样品经固相萃取处理后进行色谱分析。采用的色谱条件:色谱柱为HypersilODS柱(4.6mmi.d.×200mm);流动相A液为0.025mol/LKH2PO4H3PO4缓冲液(pH2.75),流动相B液为甲醇;梯度洗脱;紫外检测波长为230nm(交沙霉素)、272nm(茶碱)、243nm(扑热息痛)。制药废水中3种药物的加标回收率均高于93%,相对标准偏差(n=6)小于2.1%,检测下限(S/N=3)不高于1.0μg/L。该方法已应用于制药废水的生物强化降解研究。

发酵液中酸性物质的气相色谱测定法

采用四丁基氢氧化铵中和发酵液中的酸性物质 ,生成的盐与苄基溴反应成各种酸的苄酯衍生物 ,苄酯衍生物在HP 1大口径毛细管柱上取得满意的分离 ,并以 2 乙基丁二酸为内标进行定量测定。用该方法同时测定了发酵液中包括甲酸、乳酸在内的 10种酸类物质 ,平均回收率 >90 % ,相对标准偏差 <5%

液相色谱法测定生物发酵液中水溶性维生素的研究

本文采用反相离子对色谱测定了生物发酵液中的七种水溶性维生素。提出了用自行装填的酸性氧化铝（０．１９～０．１５ｍｍ）前置柱，和５％乙酸洗脱样品的前处理方法；并就有关的色谱条件进行了选择。色谱柱为ＮｏｖａＰａｋＣ１８；流动相Ａ液为０．０５ｍｏｌ／Ｌ庚烷磺酸盐（ＰＩＣＢ７），冰乙酸调ｐＨ＝２．５；Ｂ液为甲醇＋三乙胺（１００＋０．５）；梯度洗脱；ＵＶ２５４ｎｍ、２９０ｎｍ、３６０ｎｍ同时测定。线性范围为０．１～１０μｇ，各种维生素的ＲＳＤ在１．２％～３．０％之间（ＶｉｔａｍｉｎＢ１２除外），回收率大于９０％。