供体血浆回冲LRS室防止CD4+和CD8+T淋巴细胞减少的研究

目的探讨Trima Accel自动化采血系统最后回输时使用供体血浆回冲白细胞减少系统(LRS)室对预防CD4+、CD8+T淋巴细胞减少效果。方法本实验设计了纵向随访和横断面研究。我们选择CD4+计数<200个细胞/μL、CD8+计数<125个细胞/μL作为缺乏的判断标准。对18名初次单采血小板献血者进行随访,并于最近300 d内献血者第0次、3~6次、7~14次献血前检测淋巴细胞计数。以170名未献过血的健康献血者为对照组。按回输模式调整为使用供体血浆回冲的时间(2021年10月)为分界点,将88名最近365 d内(中位献血次数17.5次以上)主要使用自动化采血系统采集捐献单采血小板的既往频繁献血者分为3组并获血液样本:A、B、C各组开始捐献单采血小板的时间分别为2019年10月前、2019年10月至2021年9月、2021年10月后。对血液样本进行分析,以获取包含CD4+、CD8+T淋巴细胞在内的血细胞计数。通过对比分析,随访组不同献血次数时检测指标和对照组与A、B、C各组检测指标有无统计学差异,从而推断供体血浆回冲白细胞减少系统(LRS)室对预防CD4+、CD8+T淋巴细胞减少效果。结果调整回输模式后,18名初次献血者转化的频繁单采献血者,在第5、11次(中位献血次数)献血时没有出现CD4+和CD8+T淋巴细胞减少的情况,且上述指标与其0次献血时无统计学差异。既往频繁献血者中,B、C组CD4+、CD8+T淋巴细胞计数均高于判断标准值,与对照组没有统计学差异。A组CD4+T淋巴细胞正常,仅A组1人CD8+T淋巴细胞低于125个细胞/μL,其累计捐献单采血小板281次,其所在的组在回输模式调整前2~21年(中位数为5年)已经开始献血。A组CD4+、CD8+T淋巴细胞计数与对照组差异明显,其CD4+、CD8+T淋巴细胞计数中位数(A组/对照组)分别为359/521、257/372,P<0.001。A组0%(0/35)CD4+计数<200个细胞/μL,2.85%(1/35)的献血者CD8+<125个细胞/μL,远低于John M.Gansner和Mahboubeh Rahmani研究发现的频繁单采献血者CD4+、CD8+T细胞缺乏的比例。研究表明,回输模式调整后捐献单采血小板不但没有使献血者T淋巴细胞进一步降低,反而频繁献血者T淋巴细胞得到进一步恢复。这表明回输模式调整后献血者献血时可能没有CD4+、CD8+T淋巴细胞的损失,或者只有少量损失且献血者即使频繁捐献单采血小板也可以恢复。结论Trima Accel自动化采血系统使用供体血浆回冲白细胞减少系统(LRS)室对预防CD4+、CD8+T淋巴细胞减少有很好的效果。

献血者人类嗜T淋巴细胞病毒电化学发光测定值与免疫印迹确证结果的相关性研究

目的研究电化学发光免疫测定技术在献血者人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV)检测中的应用效果,评估发光检测COI值与免疫印迹确证结果的相关性,为血站选择最佳筛查策略并优化确证实验流程提供科学依据。方法将2016~2022年本省参加无偿献血且初筛不合格(HTLV酶免反应性)的1070份献血者血液标本纳入本次研究。所有标本分别使用电化学发光方法和蛋白质印迹方法(金标准)进行检测,对结果进行记录和分析并绘制受检者操作特征曲线(ROC)。利用ROC曲线寻找电化学发光免疫测定的最佳诊断临界值。结果1070份初筛不合格标本经电化学发光检测有285份阳性,阳性率26.64%(285/1070),经蛋白质印迹检测有70份阳性,确证阳性率6.54%(70/1070),该70份标本为发光和印迹双阳性。285份电化学发光阳性标本的平均COI值为81.92,中位数为4.98。按照印迹检测结果分为2组后,印迹阴性组中位数为2.76,印迹阳性组中位数为312.45(Z=-12.53,P<0.01)。根据ROC曲线,最佳诊断临界值为72.10(AUC=1,P<0.01),此时发光检测结果与印迹确证结果的符合率为99.35%。结论电化学发光免疫测定技术是一种灵敏度高、特异性强且适用于大规模检测的技术,合理设置诊断临界值后其检测结果与免疫印迹确证结果有很好的一致性,在献血者HTLV检测方面具有良好的应用前景。

广州地区无偿献血人群不同时期新冠病毒抗体检测分析

目的了解广州市无偿献血人群体内新冠病毒抗体水平,为恢复期血浆采集和临床使用提供数据支持。方法使用酶联免疫吸附法对不同时期在广州血液中心献血的合格献血者血液标本做新冠病毒抗体检测,其中对2023年2月献血的326人检测IgG抗体,444人检测中和抗体;对2023年7月献血的398人同时检测IgG和IgM抗体。结果724份血液标本经生理盐水160倍稀释后有399份的IgG检测结果为反应性(55.11%)。不同性别,不同年龄段的IgG反应性率无差异(P<0.05),但不同时间采集的标本的IgG反应性率有差异(2月25.46%vs 7月79.40%,χ2=210.74,P<0.05,95%CI:7.97,15.98)。398份血液标本经检测有5份为IgM反应性(1.26%)。该5名献血者的IgG检测结果均为反应性,血液核酸检测结果均为阴性。444份血液标本中有440份(99.10%)检出中和抗体,其中71.59%的中和抗体反应性献血者体内的中和抗体水平≥10μg/mL。结论广州地区无偿献血人群有较高的新冠病毒抗体水平,具备为临床提供恢复期血浆的条件。

HLA-DRB1^(*)11:01与HCV感染的病毒选择压力及与CD4+T细胞表位的关系探讨

目的我们前期研究显示,无论在汉族人群还是黎族人群中,HLA-DRB1^(*)11∶01均是与机体自发清除HCV相关联的HLA-Ⅱ类基因,因此,本研究的目的是探讨HLA-DRB1^(*)11∶01基因与HCV感染的病毒选择压力及与CD4+T细胞表位的关系。方法对广东地区常见的HCV 6a慢性感染者HLA-DRB1^(*)11∶01阳性组和阴性组的E1E2和NS3基因进行病毒选择压力以及病毒群体扩张的分析。采用覆盖我国常见HCV基因型保守区的CD4+T细胞表位的重叠肽段刺激HCV自发清除组和慢性感染组,通过ELISPT实验,根据每孔的斑点形成细胞数以及在不同组出现的频次评估HLA-DRB1^(*)11∶01基因与CD4+T细胞表位的关系。结果广东地区常见的HCV 6a感染者HLA-DRB1^(*)11∶01阴性组E1E2和NS3的阳性选择位点以及位于CD4+T细胞表位的位点数均大于HLA-DRB1^(*)11∶01阳性组;两组HCV 6a感染者在广东地区均具有群体扩张趋势,且HLA-DRB1^(*)11∶01阴性组的扩张趋势明显高于HLA-DRB1^(*)11∶01阳性组。HCV自发清除组对其中5条肽段(C-52 E2691-707、C-119 NS31545-1560、C-134 NS4A1669-1684、C-154 NS4B1912-1927和C-159 NS4B1929-1944)刺激的应答率较高,HCV慢性感染组对其中的2条肽段(C-111 NS31497-1512和C-130 NS31650-1665)刺激的应答率较高。当考虑HLA-DRB1^(*)11∶01分型时,在慢性感染组和自发清除组HLA-DRB1^(*)11∶01阳性和HLA-DRB1^(*)11∶01阴性PBMCs产生的HCV特异性免疫应答均无统计学差异。结论研究揭示了HLA-Ⅱ类基因HLA-DRB1^(*)11∶01与HCV感染的病毒选择压力及与CD4+T细胞表位的关系,同时,获得HCV泛基因型CD4+T细胞抗原候选表位,为研发适合HCV泛基因型的T细胞疫苗提供基础数据。

广州地区无偿献血者HCV基因分型与病毒滴度的相关性研究

目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)6a亚型与病毒滴度的关系。方法从2009年11月～2011年8月收集广州地区无偿献血人群中抗-HCV阳性标本527份,对其进行HCV核酸检测(nucleic acid test,NAT)。对核酸阳性的标本采用罗氏COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HCV test进行病毒滴度的定量检测,以及采用NS5B基因扩增和直接测序法进行HCV基因分型的鉴定。对于标本的病毒滴度与基因分型采用SPSS16.0软件进行关联性分析。结果 527份抗-HCV阳性标本中,299份标本成功获得病毒滴度和分型结果。HCV 1型(1a+1b)、2型(2a)、3型(3a+3b)和6型(6a)的比例分别为48.8%,8.7%,12.4%和30.1%。统计分析结果表明,不同基因型之间的病毒滴度存在显著差异(F=6.675,P<0.01)。HCV 1型和6型的平均滴度分别为6.04,6.15 log10 IU/ml,均高于2型和3型(平均滴度分别为5.66和5.49 log10 IU/ml)。结论 HCV 1b和6a是广东地区无偿献血者人群中流行的主要亚型。HCV 1型(1a+1b)和6型(6a)的病毒滴度显著高于2型和3型。HCV 6a在广东地区的流行和传播可能其较高病毒滴度有关。研究HCV基因分型与病毒滴度的关系的研究有助于广东地区HCV的防控策略以及各亚型治疗方案的制定。

HCV 3b亚型全长序列测定及基线耐药相关置换的分析

目的探讨二代测序法(NGS)在HCV 3b全长序列及基线耐药相关置换(RAS)检测中的应用。方法从1例2016年7月在广州血液中心献血的献血者(HCV RNA阳性)血浆中提取核酸,经序列非依赖性扩增后,构建测序文库并采用illumina Hiseq进行深度测序,然后通过生物信息学方法分析HCV全长序列、病毒基因分型以及针对直接抗病毒药物(DAA)的基线RAS。结果NGS获得8.4 Gb原始测序数据,序列数(reads)超过56 M。经生物信息学分析获得HCV全长序列,平均测序深度为488007,基因分型结果为3b亚型。病毒氨基酸序列里含有12个RAS,分别是NS3区域的Y56H、Q80K、Q80R、A156G,NS5A区域的M28G、Q/A30G、Q/A30K、L31F、L31M、Y93H,以及NS5B区域的S282T和V321A,其中位于NS5A区域的Q/A30K和L31M属于高丰度RAS(99.16%和98.37%),其余10个RAS丰度较低(<0.5%)。结论NGS用于HCV 3b亚型的全长序列检测和基因分型,最终鉴定出基线RAS,对于HCV 3b的流行病学研究和DAA治疗方案的制订有重要意义。

外周血髓源性抑制细胞水平与丙型肝炎病毒感染的关联

目的探讨外周血髓源性抑制细胞(MDSC)的水平与丙型肝炎病毒(HCV)感染的相关性。方法以2018年2月~2020年9月间在广州血液中心献血的109名无偿献血者为研究对象,根据抗-HCV和HCV RNA检测结果分为慢性感染者(CHC)组(n=48)、自发清除(SC)组(n=29)和健康献血者对照(Control)组(n=32)。从研究对象的新鲜血样分离出外周血单个核细胞(PBMC),采用荧光标记抗体做MDSC细胞表面标志物染色,通过流式细胞术检测单核系(M-MDSC)和多形核系MDSC(PMN-MDSC)的频率;测定血浆HCV RNA、ALT、AST、GGT、TBIL和DBIL等肝功能指标。通过单因素方差分析比较3组之间外周血M-MDSC和PMN-MDSC频率以及肝功能水平的差异;组间两两比较采用Bonferroni法做多重检验校正(校正后的P值以Pc表示)。结果 CHC组、SC组和Control组的M-MDSC频率(%)分别为1.39±0.86 vs 0.85±0.63 vs 0.57±0.23(P<0.01),CHC组明显高于SC组(Pc<0.01)和Control组(Pc<0.05);PMN-MDSC频率(%)0.81±0.54 vs 0.65±0.40 vs 0.62±0.29(P>0.05)。此外,CHC组与Control组的AST(U/L)34.4±19.2 vs 23.0±7.78(Pc<0.05),GGT(U/L)为40.8±31.4 vs 22.3±7.40(Pc<0.01)。结论 HCV慢性感染者外周血M-MDSC水平明显升高,可能与HCV感染的慢性化发展有关。

基因1型和6型HCV CD4 T细胞抗原表位的初步鉴定

目的 研究基因1型(GT1)和6型(GT6)HCV Core蛋白和NS3蛋白的CD4 T细胞抗原表位。方法 合成覆盖GT1和GT6 HCV Core和NS3全长的重叠肽段(16-mer)298条。通过肽段库刺激17例HCV+献血者和7例健康献血者的外周血单个核细胞(PBMC),IFN-γELISPOT测定T细胞应答,初步筛选出21条阳性肽段。再将这些肽段单独刺激20例HCV+和18例健康献血者PBMC。比较2组之间对阳性肽段的应答频率的差异。结果 综合分析肽段库和单条肽段的试验结果,HCV+组对其中5条肽段(GT1 NS3_(1273-1288)和NS3_(1315-1330);GT6 NS3_(1033-1048)、NS3_(1087-1102)和NS3_(1351-1366))刺激的应答频率较高(18.9%~27.0%),且健康对照组无应答或低应答(0%~4.0%),2组之间应答频率有差异(P<0.05)。经序列比对,免疫表位数据库(IEDB)中没有与这5条肽段序列一致的抗原表位。结论 本研究鉴定出HCV GT1和GT6 HCV NS3蛋白新的CD4 T细胞抗原表位,对HCV疫苗的研发具有潜在的应用价值。

2010～2011年广州地区输血传播HBV、HCV、HIV残余风险评估

目的评估广州地区输血传播HBV、HCV、HIV的残余风险,建立适合广州地区献血人群残余风险评估的数学模型。方法收集2010年1月～2011年12月551 047人次广州地区无偿献血者的基本资料及血液ELISA与核酸检测(NAT)的HBV、HCV、HIV数据,利用(WP/I)及WP/LTR模型分别评估重复献血者及初次献血者传播HBV、HCV、HIV的残余风险。结果 2010～2011年广州地区献血者HBV、HCV、HIV经ELISA后的残余风险分别为1/30 147、1/70 591、1/645 099;经NAT检测后的残余风险分别为1/46 643、1/723 526、1/1 254 770。结论广州地区重复献血者传播HBV、HCV、HIV的残余风险低于初次献血者;采用NAT检测后,献血者传播HBV、HCV、HIV的残余风险大大降低。

广州献血人群抗-HCV ELISA检测S/CO值与确证试验结果的相关性

目的研究广州献血人群抗-HCV ELISA检测试验S/CO值与确证试验(NAT和RIBA)结果的相关性。方法采用进口(Abbot或Ortho)和国产(科华)抗-HCV ELISA试剂对2009年2月～2012年4月广州血液中心采集的无偿献血者血浆标本作抗-HCV检测,从中随机收集664份双试剂呈反应性的血浆标本进一步作确证试验;使用ROC曲线分析3种ELISA试剂的S/CO值与确证试验结果的相关性。结果 ROC曲线分析显示3种ELISA试剂检测的S/CO值与确证试验结果具有相关性:以Youden指数最大时的S/CO值为最佳阈值,Abbot、Ortho及科华试剂分别为3.234、4.460和6.976,均可预测>95%的确证试验阳性结果。结论不同试剂具有各自的最佳S/CO阈值,可以通过S/CO值预测HCV感染确证试验的阳性结果。

广东地区临床患者和献血者HCV感染者HCV基因分型比较

目的了解广东地区临床患者和献血者HCV基因型(亚型)分布。方法收集广东地区临床患者HCV RNA阳性标本191(人)份、无偿献血者HCV RNA阳性标本222(人)份,采用逆转录巢式PCR对HCV E1基因扩增并测序;应用MEGA5软件构建分子进化树并对其做基因分型。采用SPSS16.0软件对2组人群中不同基因亚型的分布做比较。结果共检测出HCV-1a、1b、2a、3a、3b、6a和6n等7个基因亚型,其中临床患者分别为1.05%(2/191)、66.49%(127/191)、8.90%(17/191)、2.62%(5/191)、2.62%(5/191)、17.80%(34/191)和0.52%(1/191);献血者分别为0.45%(1/222)、41.44%(92/222)、6.76%(15/222)、8.56%(19/222)、4.95%(11/222)、37.39%(83/222)和0.45%(1/222)。2组人群比较,临床患者1b的比例高于献血者(P<0.01),献血者中3a、6a的比例高于临床患者(P<0.05及P<0.01)。结论广东地区临床患者和献血者中的HCV基因亚型主要是HCV-1b和6a,但HCV-1b、3a和6a亚型在2组人群中所占的比例不同。

广州地区献血人群中HCV感染者HCV基因分型及感染途径研究

目的了解广州地区献血人群中HCV感染者的感染途径及其HCV基因型/亚型。方法收集2009年10月-2013年7月在广州献血并成功随访到的抗-HCV ELISA呈反应性的献血者标本296(人)份,以转录介导的扩增(TMA)方法检测其HCV RNA;对HCV RNA阴性标本采用RIBA法确证,对HCV RNA阳性标本,膜吸附法提取HCV RNA经RT-PCR扩增E1和NS5B基因后进行sanger核苷酸序列测定。运用DNASTAR,Bio Edit,Mega5.0等软件作序列分析和基因分型。对献血者HCV感染途径的调查采用问卷调查的方法。结果 296名HCV感染者中,有197人(157例RNA阳性+40例RIBA阳性)确证为HCV感染者,按照HCV感染途径分为4组:静脉吸毒组8.63%(17/197)、输血或者血制品组17.26%(34/197)、其他途径组(除静脉吸毒和输血或血制品以外的传播途径,如手术、纹身等)13.71%(27/197)和感染途径不明组60.40%(119/197)。感染者不同年龄的比例为:18岁-<25岁32.49%(64/197),25岁-<35岁26.39%(52/197),35岁-<45岁29.95%(59/197),45岁-54岁11.17%(22/197),不同感染途径中不同年龄的分布总体比较具有明显差异(P<0.05)。HCV RNA阳性者157例,其中153人成功获得HCV基因分型:HCV-1b、2a、3a、3b和6a,分别占58.17%(89/153)、4.58%(7/153)、7.84%(12/153)、3.27%(5/153)和26.14%(40/153);静脉吸毒和输血或者血制品2组间HCV基因型分布有明显差异(P<0.01):静脉吸毒组中HCV-6a占58.82%(10/17),输血或血液制品组中HCV-1b占54.16%(13/24)。结论目前广州献血人群中HCV感染者的感染途径多数尚不明确;HCV毒株以HCV-1b和6a亚型最多见,静脉吸毒者中6a的流行率较高,有输血或血制品史的献血者中1b亚型的比例较高。

2016—2018年广州献血者HTLV流行概况及基因分型

目的系统地了解广州地区无偿献血人群中HTLV感染的流行情况。方法采用电化学发光法对2016年3月—2018年4月广州血液中心635 456名献血者中ELSIA初筛阳性的129例标本进行抗-HTLV筛检,对ELISA及电化学发光法检测均为阳性的标本经RT-PCR或WB法检测确证并通过巢式PCR扩增确定其HTLV分型。结果 ELISA及电化学发光法筛查-HTLV均为阳性标本33例;经RT-PCR或WB法检测确证为HTLV-1型标本9例,阳性率为1.4/100 000(9/635 456)。巢式PCR扩增出gp46及LTR序列的8例标本均属于HTLV-1A亚型,其中1例为日本人种亚群,其余均为世界人种亚群。结论广州属于HTLV低流行地区,无偿献血人群中仅存在HTLV-1的感染其分型主要为HTLV-1A中世界人种亚群及日本人种亚群;献血者的HTLV常规筛查可有效杜绝HTLV的经血传播,进一步提高血液安全。

广州献血人群HLA多态性与慢性HCV感染的关联研究

目的了解广州人群的HLA基因多态性与慢性HCV感染的相关性,获得中国南方人群遗传背景下HCV感染相关的宿主免疫因素。方法本研究从广州无偿献血人群中随机抽取426例慢性HCV感染者和709名健康对照献血者为研究对象,采用PCR-SBT高分辨分型技术对HLA-Ⅰ类(A和B)和Ⅱ类(DRB1)基因进行分型,分析比较2组研究对象间的HLA等位基因频率分布差异,获得HLA等位基因多态性与慢性HCV感染的关联性。结果 HLA高分辨水平分析和FDR(False Discovery Rate)多重检验校正的结果显示,4条HLA-B等位基因的分布差异具有统计学意义:B*13∶02(P=0.009,OR=1.515)和B*15∶01(P=0.010,OR=1.561)在慢性HCV感染组的频率高于健康对照组,可能与慢性HCV感染相关;而B*07∶05(P=0.001,OR=0.299)和B*15∶02(P=0.016,OR=0.778)则在健康对照组中频率更高,提示对HCV感染具有保护性。结论 4条HLA-B等位基因均是首次发现与HCV慢性感染相关,反映出以中国南方人群为遗传背景的宿主HLA基因在HCV感染中的独特作用。本研究的结果为HCV的防治以及疫苗的研发提供了科学依据。

广州地区HCV阳性无偿献血者ALT检测结果分析

目的探讨HCV基因型、病毒载量与血浆ALT水平的相关性。方法采集HCV ELISA阳性,核酸阳性的无偿献血者血液标本262份,对HCV进行基因分型,检测血浆HCV RNA含量及ALT水平,统计学进行相关性分析。结果 262例标本中大多数为HCV 1型和6型(48.5%,31.7%);血浆ALT平均水平(65.6 U/L)高于正常值,男性高于女性(t=2.443,P<0.05),4种基因型之间ALT活性无统计学意义(F=1.015,P>0.05),ALT水平与病毒载量间无相关性(r=0.12,P>0.05)。结论 HCV阳性献血者ALT水平升高。性别是影响ALT水平的因素之一。HCV基因型和血浆ALT水平不相关,HCV病毒载量和血浆ALT水平也无相关性。尚不能用HCV基因型,基础RNA含量来判断肝脏炎症的活动程度。

性传播途径在广州地区无偿献血者HCV感染及传播中的风险研究

目的探讨性传播途径在广州地区无偿献血人群中HCV感染和传播中的风险。方法联系2009年10月—2013年7月在广州血液中心献血后HCV RNA检测为阳性,且已经完成基因分型的献血者153名,邀请其动员性伴侣知情同意后参加研究。抽取静脉血检测参与研究的献血者及其性伴侣的抗-HCV、HCV RNA,发放调查问卷了解其生活行为方式。若献血者的性伴侣检测为HCV RNA阳性,则进一步作基因分型;对比基因进化距离以判断感染是否来源于对方。对成功动员性伴侣参加研究的献血者感染HCV的风险因素按年龄分布作统计学分析。结果共成功随访了48位献血者的性伴侣,这48名献血者的HCV RNA阳性分型：HCV-1b占56.25%（27/48）、2a4.16%（2/48）、3a 10.41%（5/48）、3b 4.16%（2/48）和6a 25%（12/48）;不同年龄组献血者的HCV感染风险因素的年龄分布没有明显差异（P〉0.05）。48名HCV RNA阳性献血者的性伴侣抗-HCV ELISA、HCV RNA检测均为阴性。结论性传播途径在广州地区无偿献血者HCV感染及传播中的风险低。

无偿献血人群中HCV/OBI共感染者的分子流行病学特征

目的了解无偿献血人群丙型肝炎病毒(HCV)感染者中隐匿性乙肝感染(OBI)率,为进一步阐明HCV/OBI的作用机制提供科学依据。方法采用盖立复PROCLEIX TIGRIS、罗氏cobas s 201和罗氏E601等仪器对2011年1月—2015年7月广州无偿献血者中的933(人)份HCV感染者标本做HBV DNA和抗-HBc检测,比较HCV单纯感染者和HCV/OBI共感染者之间性别、年龄、民族和转氨酶的差异;巢式PCR扩增HCV/OBI共感染者HCV C区和S区,并构建进化树和基因分型,荧光定量PCR检测HCV和HBV的病毒载量;另外,随机选取同期本地HCV 6a基因型的44名单纯HCV感染者和16名HCV/HBV共感染者最为对照组,通过巢式PCR扩增各组HCV C区,并对3组对象的HCV核心蛋白氨基酸序列做比对分析。结果本组HCV感染的献血者标本中,有6(人)份HBV DNA和抗-HBc阳性,亦即OBI感染率为6.43‰(6/933);该6份HCV/OBI共感染标本的HCV基因型中6a占83.3%(5/6)、1b占16.7%(1/6),HCV病毒载量(log_(10)IU/mL)为3.8—5.7(5.0±0.69)。HCV单纯感染者和HCV/OBI共感染者的性别、年龄、民族、籍贯和ALT均无明显差异(P>0.05)。HCV单纯感染者、HCV/HBV共感染者和HCV/OBI共感染者HCV核心蛋白序列氨基酸变异数分别为0.8±1.3 vs 0.7±1.5 vs 0.4±0.5(P>0.05),没有在HCV/OBI共感染者中发现一致性的结构或突变规律。结论广州地区无偿献血人群HCV感染者中的OBI阳性率较高。

海南省白沙县黎族和汉族1992年后出生人群的HBV流行病学研究

目的本研究拟对1992年后出生的海南省黎族和汉族人群的HBV流行情况进行调查和统计。方法 2014年7月-2015年10月,收集海南省白沙县中学1992年后出生的学生和老师的血浆标本610份,用两种不同的ELISA试剂对HBsAg进行检测,用电化学发光法对抗-HBc和抗-HBs进行检测。对黎族和汉族之间HBsAg、抗-HBc和抗-HBs阳性率的差异进行卡方检验,通过卡方检验和多因素Logistics回归分析影响整个人群中HBsAg阳性和抗-HBc阳性的风险因素。结果黎族和汉族性别、年龄、HBsAg阳性率、抗-HBc阳性率无统计学差异,抗-HBs阳性者在汉族人群中明显高于黎族人群(OR=1.49, 95%CI 1.06-2.09,P<0.05)。统计分析显示穿耳洞为HBsAg阳性的独立影响因素(OR=3.28,95%CI 1.68-6.39,P<0.01),年龄(OR=1.80, 95%CI 13.4-2.43,P<0.01)和穿耳洞(OR=2.12,95%CI 1.34-3.43,P<0.01)为抗-HBc阳性的独立影响因素。结论白沙县1992年后出生黎族和汉族的HBV感染率没有明显差距,穿耳洞是目前白沙县HBV流行率高的一个风险因素,因此增加民众尤其学生对HBV感染风险的认知尤为重要。

深度测序法在检测HCV不同基因型/亚型混合感染中的应用

目的将深度测序法用于HCV感染者中不同基因型/亚型混合感染的检测。方法 2例HCV RNA阳性血浆标本(标记为1和2号标本),以NS5B和E1编码区为目的基因,经RT-PCR扩增后做sanger核苷酸序列测定,对其做基因分型发现2个编码区的分型结果后,重复3次NS5B基因PCR扩增;合并3次PCR产物用Ion TorrentTM半导体测序仪做深度测序。获得的序列用Geneious软件的"The map to reference algorithm"和"De novo assembly"2种方法做序列分析和比对,并用Mega 5构建进化树。结果 sanger测序:1、2号标本NS5B基因分型均为1b,E1基因分型均为2a;深度测序:2个标本均为HCV 1b与2a混合感染,其中The map to reference algorithm(Geneious)方法显示,1号标本中1b占92.7%、2a占3.8%、没有比对到的序列(unused seq)占3.5%,2号标本相应为84.3%、5.4%,没有比对到的序列占10.3%;De novo assembly(Geneious)方法显示,1号标本中1b占96.3%、2a占3.7%,2号标本相应为94.1%、5.9%。结论深度测序技术可以精确地获得HCV混合感染的不同基因型/亚型信息,De novo assembly(Geneious)分析HCV的深度测序数据更为精确和直观。

广州献血人群CMV-IgG阳性率及不同检测试剂的比较研究

目的 了解广州地区献血人群CMV-IgG阳性率,探讨不同检测试剂检测效能的差异,为采供血系统提高血液安全,提升临床服务能力奠定基础。方法 随机抽取2020年7~10月在本中心献血且常规筛查合格的献血者血液标本630份,使用酶联免疫(ELISA)试剂(单试剂)检测CMV-IgG。其中180份标本使用2种酶免试剂以及1种电化学发光(ECLIA)试剂做平行检测,对检测结果为阴性的标本进行CMV-DNA定量检测,对不同试剂检测结果进行比较分析。结果 630份标本中共筛查出598份阳性。使用3试剂检测的180份标本中,2种ELISA试剂检测结果分别为171份阳性和175份阳性,ECLIA试剂检测结果为175份阳性,3种试剂的检测结果具有一致性(Kappa>0.4),阳性率差异无统计学意义。180份标本中有阴性标本11份,其中3试剂均阴性标本3份,双试剂阴性标本2份,单试剂阴性标本6份,单试剂阴性标本均为ELISA试剂阴性。11份阴性标本的CMV-DNA检测结果均为阴性。结论 广州地区献血人群的CMV-IgG阳性率为94.9%(598/630),提示CMV流行程度高,在向免疫力低下的患者提供血液制品时可以考虑筛选CMV血清阴性血液以提高受血者安全。ELISA试剂和ELCIA试剂对CMV-IgG的检测结果一致性较高,电化学发光试剂的检测效能优于酶免试剂。