生物大分子功能的研究:——酵母甘露聚糖对8.2Gy^(60)Coγ-射线辐照小鼠的辐射防护作用

目的：为了解酵母甘露聚糖对小鼠辐射损伤的保护作用。方法：６０ Ｃｏ γ射线以８２ Ｇｙ 照射 ６０ 只小鼠，雌雄各半。其中 ３０ 只在辐照前 １０ 分钟腹腔注射 ４００ｍ ｇ Ｍ ａｎ／ｋｇ，另 ３０ 只注射生理盐水。结果：从比较研究项目：鼠的存活率，成活天数；４０ 天体重的动态变化；外同血 Ｗ Ｂ Ｃ、 Ｒ Ｂ Ｃ及 Ｐ Ｌ Ｔ 及脾指数等的数值差异上，均显示酸母甘露聚糖对６０ Ｃｏ γ射线辐射损伤有保护作用。同时也发现该保护作用存在性别敏感性差异。结论：酵母甘露聚糖是一种比较好的辐射防护剂；酵母甘露聚糖对雄性鼠辐射损伤的保护作用显著，有统计学意义（ Ｐ＜ ００１）。

XeCl准分子紫外激光辐照生物大分子BSA(V)对其蛋白质结构的影响

XeCl(308 nm)准分子紫外激光(单脉冲输出能量25 mJ,33.3 mJ^34.4 mJ,脉冲频率每秒两次,光斑15 mm×7 mm或4.5 mm×0.5 mm,透镜焦距300 mm),辐照小牛血清白蛋白[bovine serum albumin fraction V,BSA(V)]固体或溶液样品的时间分别为15 s、30 s、45 s或60 s;样品距激光光源的距离分别为:150 mm、250mm、290 mm、340 mm。改变激光参量辐照BSA(V)样品和其对照,用光谱法测试其FT-IR(IR)、Vis-UV(UV)、FR光谱,并比较分析。受辐照后的BSA(V)与主链构象相关的酰胺平面的特征FT-IR谱线,特别是与蛋白质二级结构敏感的酰胺面Ⅰ,1 652 cm-1;与α-螺旋结构相关的FT-IR 1 140 cm-1~500 cm-1;及与蛋白质侧链氨基酸残基Tyr、Phe、Trp相关的特征峰UV277.6 nm、UV216 nm和FR 340 nm、FR 680 nm的峰强度(T%或OD%或Q%)和它们的峰位(cm-1或nm)均受激光辐照的影响,其影响程度与使用的XeCl激光参量的改变有一定的敏感性和相关性。实验结果与讨论对认识激光生物学效应的分子机理、探索建立激光-生物学效应的关系参数,以便进一步发现新的有效的激光生物学效应,发现和认识潜在(后继)的正、负面的激光生物学效应,进而加以调控有一定的理论与实用参考价值。

XeCl(308nm)准分子紫外激光对生物大分子酵母甘露聚糖分子结构的辐照效应

激光在农业和医疗等方面已有广泛应用,并且取得增产和一定疗效,但也有费介现象(暂称后继效应或潜在效应)。激光辐照生物体虽然是局部的有限时间,但对由多种生物大分子组成的生物体的影响可能是综合的。为了探索激光生物学效应的分子机理,以便进一步认识和掌握激光的生物学效应,对激光直接辐照有生物活性的生物大分子—酵母甘露聚糖产生的效应进行电镜扫描观察和紫外及红外光谱法分析研究。实验结果表明:308 nm激光(单脉冲25 m J,33.3 m J^34.4 m J,脉冲频率2次/s)无论是固定辐照时间(45 s)变化样品所置距离,或反之固定样品所置距离(290 mm)改变辐照时间为15 s、30 s、45 s或60 s,都能引起受照样品的结构(构象)变化,特别是糖分子结构中富含的-OH-、CH-OH、-C-O-C--、N-C=O-、C=O等结构部件处的IR谱线对激光能量变化影响敏感。它们既是糖分子内或分子间形成氢键和糖苷键的结构基础部件,又是甘露聚糖(M an-nan)糖基化其他生物大分子进而影响它们在生物信息流中作用的重要结构部件。结果显示糖在激光生物效应中起了不可忽视的作用,这为综合探索激光生物效应分子机理和糖在生物信息传递中的作用提供了重要线索,为选择甘露聚糖作为生物导弹载体提供了参考依据。

XeCl准分子激光辐照生物大分子对其结构影响初步研究——Ⅰ308nm紫外激光辐照小牛胸腺 DNA的电镜观察与分析

XeCl308nm紫外激光(单脉冲输出能量33.4mJ,脉冲频率2次/秒,辐照时间45秒,光斑6×3mm,透镜焦距300mm)辐照330mm处小牛胸腺DNA(固体)。用扫描电子显微镜和透射电子显微镜可以观察到DNA受照射后有断裂、分叉、扭曲、聚集和交联等现象,影响生物大分子的初级结构和高级结构的变化。在我们的实验条件下是以影响DNA构象变化为主。

激光在研究生物大分子结构与功能中的应用——酵母甘露聚糖波谱性质和形成分子载体的初步研究

为了进一步了解酵母甘露聚糖的精细结构信息，以便研究其功能，我们采用本实验室“拟规模化制备酵母甘露聚糖新工艺”，从废啤酒酵母（工厂下脚料）和市售鲜酵母细胞壁中制取了纯化的酵母甘露聚糖（ｍａｎｎａｎ）。气相色谱法测定它们的糖组分和其相对含量，并且测定和比较分析酵母甘露聚糖与其组份糖的游离形式（甘露糖和葡萄糖）和酸解后的单体糖的可见—紫外吸收光谱和荧光发射光谱，和以Ｈｅ—Ｎｅ激光为激发光源的红外光谱。从中获得了：组份单糖聚合成甘露聚糖和多聚糖再分解成组份糖单体的光谱特征峰；和这些相关样品的光谱特征峰在聚合和分解过程中的变化与相应糖的细微结构变化的相关光谱信息。这些糖结构光谱特征相关信息为我们制备新型分子载体——甘露聚糖的聚合物（ｐｏｌｙｍａｎｎａｎ）和其功能研究提供了研究基础。

试论生物信息流与激光生物效应的相关性——激光生物效应分子机理研究

为了探索激光生物学效应的分子机理,以便更好的掌控和利用激光生物效应,用XeCl(308 nm)准分子紫外激光以相同变化的激光参量直接辐照有生物活性的生物大分子BTG DNA、BSA(v)蛋白质和糖Mannan。实验结果分析告知:电镜法观察到受辐照的三类生物大分子的表观结构、构象(含结构信息)和光谱法(IR、Vis-UV、FR、CD)分析指出生物大分子的内在结构部件的相关的特征峰的峰位、峰值都受影响,其变迁都与激光参量的变化相呼应;与三类生物大分子中分子内、分子间沟通与信息传递相关的氢键、糖苷键等的形成与否的类似或相同的结构部件(如-C-H、-N-H、-CH-OH、-C-O、-C=O等)其特征峰的变迁都更敏感于激光参量的改变。激光辐照生物体时,激光似生物信号分子通过它的能量以粒子性、电磁波相干性影响生物大分子的分子结构、构象(含结构信息)的稳定性、增加分子内、分子间相互沟通、信息传递,亦增加了结构部件的被修饰的可能性。进而影响着生物信息流的流量与流向和细胞信号转导的协同与整体表达,产生相应的生物效应。掌握获得功能生物大分子结构构象信息与使用适宜的激光参量的相关的关系值(阈值)是重要的关键。

生物信息大分子功能的研究——酵母甘露聚糖对鼠Sarcoma-180瘤生长的抑制效应

酵母甘露聚糖(Mannan,简称Man)是能参与生物信息流影响生物体、特别是在糖基化方面起着重要调控作用的生物信息大分子。它是否能在抑制生物机体中肿瘤生长方面具有重要作用?研究结果表明:酵母甘露聚糖既能使患S-180瘤鼠的体质增强的同时又有抑制其体内所患S-180瘤生长的功效。Man抑制患鼠机体内的S-180瘤生长的功效(抑瘤率)随用量的增加而提高,当Man用量达360 mg(40 mg/Kg/d·9d)时,其抑瘤率达98.4%的最高水平,此时鼠体重增加1.66倍。Man的抑瘤功效有最佳适用量并存在性别敏感性,通常是雄性鼠的抑瘤率高于雌性鼠。Man抑制鼠S-180肿瘤生长的作用优于市售5-氟尿嘧啶的作用。

左手螺旋Z-DNA的研究 Ⅴ 环境因子对Oligo-d(G-C)_6构象的影响

脱氧寡聚核苷酸ｄ（Ｇ－Ｃ）６是迄今所报道的同类脱氧多聚核苷酸中能形成左手螺旋ＤＮＡ（Ｚ－ＤＮＡ）的最短序列。环境因子如ＰＨ，温度和离子的类别与浓度对ｄ（Ｇ－Ｃ）６在溶液中的Ｚ－构象的形成和Ｂ－、Ｚ－构象的相对稳定性有着明显的影响。在合适的条件下，ｄ（Ｇ－Ｃ）６在溶液中可呈现Ｂ－构象区，Ｚ－构象相对稳定区和Ｂ－、Ｚ－构象跃迁过渡区。

双股寡聚d(G-C)_6 DNA Z-构象的形成及其构象转换的动态研究(英文)

研究揭示,生物信息的形成,传递与DNA构象的多样性,特别是其中的左手螺旋Z-构象DNA(Z-DNA)相关。在机体DNA链中,普遍存在的特异序列结构d(C-G)n和d(G-C)n片段易形成Z-构象。但对d(G-C)n序列结构的寡聚体Oligo-d(G-C)n,(n小于8)能转换形成Z-DNA片段少见报道。为促进对Z-DNA尤其是其中的短片段Z-DNA与生物功能的相关性研究,我们对合成并纯化后的寡聚体Oligo-d(G-C)n,n分别为4,6,8,10,及Oligo-d(C-G)6和多聚体poly-d(G-C)500-900进行Z-构象的形成和其构象转换的比较研究。研究结果发现:①d(GpCpGpCpGpCpG-pCpGpCpGpC)是d(G-C)n序列结构中能转换形成Z-构象的最短片段(n=6)。其转换成Z-构象能力有链长依赖性(poly d(G-C)500-900易于Oligo-d(G-C)6);②Oligo-d(G-C)6的Z-构象形成能力因溶液中的介质性质不同而异。Co(NH3)3+>Mg2+>Na+;C1O4->Cl-,因此要求盐溶液的浓度差异很大。③PH7.2,室温条件下,在MgCl2,NaClO4,NaCl溶液浓度分别由0 mol/L增至6.0 mol/L,Oligo-d(G-C)6的B、Z构象转换都出现:B-构象相对稳定期,B-、Z-构象转换跃迁期和Z-构象相对稳定期。每个阶段要求跨越的盐浓度变迁范围也因所用介质而异。当溶液中Oligo-d(G-C)6B-构象、Z-构象各占50%(θ1/2)时,其盐浓度分别为1.72 mol/L(MgCl2),2.88 mol/L(NaClO4),3.85 mol/L(NaCl)。④Oligo-d(G-C)6的B-,Z-构象转换程度受盐浓度影响:当Oligo-d(G-C)6处于最适条件和不同盐溶液其浓度为θ21浓度时,温度由8℃→22℃,在MgCl2,NaClO4溶液中的Oligo-d(G-C)6形成Z-构象能力增加,当由22℃→60℃,MgCl2溶液中的Z-构象Oligo-d(G-C)6加速增加,而在NaClO4溶液中则是急速向B-型Oligo-d(G-C)6方向转换;温度变化对处于NaCl溶液中的Oligo-d(G-C)6B-、Z-构象相对平衡影响较小。⑤甲基化胞嘧啶即Oligo-d(G-mC)6或d(mC-G)6均增大Z-构象形成能力。⑥在4 mol/L MgCl2溶液中的Oligo-d(G-C)6或Oligo-d(C-G)6或poly d(G-C)500-900的UVab谱、UVcd谱均显示出非B-型或Z-型DNA的新谱型。并且有链长依赖性和因溶液浓度改变出现构象可逆性转变。提示在Oligo-d(G-C)6的构象转换过程中可能存在新构象“X”型,即B Z X构象转换模式。

激光生物效应的生化分析与机理研究──激光对大豆作用的生化分析与作用机理的初步探讨

比较分析研究红宝石、Ｎ＿２、ＣＯ＿２激光对大（青）豆单独或复合辐照的作用，观察到激光软应对生物大分子的含量和生物活住的影响因激光种类和剂量不同而异，特别是不同激光效应对大（青）豆系列种子蛋白中的组份氢基酸含量的影响各具类型。尤以Ｇｌｕ，Ｍｅｔ含量变化显著而特异。

左手螺旋Z-DNA的研究:人工合成的Oligod(G—C)_n在PAGE中的异常泳动行为

为研究DNA的B,Z构象的相互转换,我们人工合成了dG-dC交替互补顺序的六聚体与十二聚体,在用PAGE法纯化过程中,发现5',3'-末端为双羟基的寡聚体的泳动速率是d(G-C)_3>d(G-C)_2>d(G-C),5'—末端带磷酸基的相应寡聚体的泳动速率则是:d~*(G-C)>d~*(G-C)_2>d~*(G-C)_3,二者行为正好相反,而5',3'—末端为双羟基的d(G-C)_5与d(G-C)_6和5'—末端带磷酸基的十聚与十二聚体在PAGE中的泳动行为是一致的。由此推测5',3'—末端为双羟基的寡聚体在PAGE中的异常行为的转折点在六聚到十聚之间。

寡聚脱氧核苷酸d(G-C)_3的激光喇曼谱及其分析

用改进的固相磷酰三酯法合成了oligo-d(G-C)_3。以氩离子激光为激发光源,波长488nm.,在室温条件下,分别测定了纯化后的oligo-d(G-C)_3和其组分单体5’-dGMP和5’-dCMP的激光喇曼谱。观察到被测定的物质在300-2500cm^(-1)频率区间,各自都有其特征的谱形和喇曼峰。5’-dGMP和5’-dCMP谱中大多数特征峰在寡聚体的谱中消失,而在oligo-d(G-C)_3谱中出现了几处新的喇曼峰。经查证,峰832,851和899cm^(-1)系糖-磷酸主链的特征喇曼峰,另外几处峰与DNA的构象有关。实验结果表明oligo-d(G-C)_3在水溶液中(室温)主要以B-构象存在。

生物信息大分子结构修饰对其功能的影响--酵母甘露聚糖硫酸酯化衍生物的制备及其对HIV-1细胞生长抑制效应的初步研究

研究由安徽大学ADF实验室以拟规模化环保型循环工艺生产流程分离、提取、纯化制得的生物多糖-酵母甘露聚糖(Yeast Mannan,简称Man),在对其结构、性质和生物活性研究的基础上,进一步对其结构进行硫酸酯化修饰,制得新产品硫酸酯化酵母甘露聚糖(Man-Sulfated),并探索Man、Man-Sulfated对HIV-1病毒细胞生长的抑制作用。研究结果表明:1)Man对宿主细胞C8166无毒性;2)实验用HIV-1病毒细胞对宿主细胞C8166有毒性,TCID50为1.1×10~6Cells/m L;3)用氯磺酸∶吡啶(2∶1)甲酰胺法制得的Man-Sulfated对宿主细胞C8166也无毒性,并具有抑制HIV-1病毒细胞生长的功能,而Man则无此新功能;4)Man-Sulfated具有抑制HIV-1生长的效能,其与硫酸酯化修饰Man结构时使用的硫酸酯化试剂类别、方法及反应条件的不同,而引起对Man结构、构象的修饰变化程度不同密切相关。浓硫酸酯化法对Man结构修饰太强烈,构象变化过大,影响其生物功能。

生物信号传导的研究——茶叶花对FSK-激活型腺苷酸环化酶的影响

腺苷酸环化酶是机体代谢调控中的关键酶之一，并且成为世界上研究衰老生化，肿瘤形成机制等新兴的重要研究课题中的最重要指标之一。Ｆｓｋ是腺苷酸环化酶的目前已知高效、专一的激活剂。是研究环化酶的有效工具。为了探明茶叶花—临床已证实具有降血压、强心等作用的一种单味中草药的作用机理，我们首先研究了Ｆｓｋ对羊肝腺苷酸环化酶的激活作用和相关的动力学，在此基础上研究茶叶花提取物（ＴＬＦＥ）对Ｆｓｋ－激活型环化酶活力的影响。研究结果指出：ＴＬＦＥ对Ｆｓｋ－激活型环化酶活力有抑制作用。并属非竞争性抑制作用类型。ＴＬＦＥ在腺苷酸环化酶的催化亚基上有结合位点，对酶的调节亚基没有明显的亲和性。它可能通过与催化亚基（Ｃ）结合，使Ｆｓｋ－Ａｃ变构而影响Ｆｓｋ－激活型环化酶活力，调整有关生物信息的传递从而产生药效。研究结果对茶叶花的作用机理的阐明提供了重要的依据，也为用近代生物化学和分子生物学理论和技术研究中草药的作用机理提供线索。

真菌(Aspergillus sp.)吸附Cu^(2+)的研究

利用真菌Aspergillus sp.制备生物吸附剂,吸附重金属离子铜,实验分析了影响吸附率和吸附量的因素,结果表明,优化条件下,30℃, pH值5.0,起始Cu2+浓度50mg/L,摇床转速150r/min,经1mol/L NaOH预处理的吸附剂用量为5g/L,吸附时间45min,该吸附剂对Cu2+的吸附率达到92.22%.通过细胞显微观察和X-射线光电子能谱技术手段推断该菌细胞壁是Cu2+ 吸附的主要部位.

抗UV-B辐射植物黄酮类化合物研究进展

Flavonoids have many biological functions.The research methods of their anti-UV are developed from the standards of biological individual and apparatus to the research of molecular synthesis.Their anti-UV mechanism may be through the elimination of oxygen free radicals or the absorbent of UV.Great attention should be paid to protective flavonoids.

重茬对山杏苗圃地土壤氨基酸组分及含量的影响

以头茬和重茬山杏育苗地的土壤为试样，以相似立地条件杨树育苗样地，以及山杏×柠条混交育苗样地作为比较和对照，研究了3种不同样地的头茬与重茬以及重茬不同发育时间土壤氨基酸种类和含量的变化，以探索山杏重茬栽培与土壤氨基酸变化的关系。结果表明：（1）重茬土壤可检出的氨基酸种类减少，游离氨基酸可检出的种类较酸解氨基酸少；重茬土壤氨基酸含量总体上在减少，酸解的含量远比游离的大，酸解和游离氨基酸中均含有较多的谷氨酸、缬氨酸、天冬氨酸、甲硫氨酸和苯丙氨酸，游离氨基酸中还含有较多的酪氨酸，样地土壤中生氰前体氨基酸含量较高；头茬和重茬土壤中含硫氨基酸的比例较高，在酸解氨基酸中占各自样地土壤中酸解氨基酸总量的7％～22％，在游离氨基酸中占各自样地土壤中游离氨基酸总量的8％～28％。（2）3种不同育苗地之间的氨基酸变化存在一定差异，山杏育苗地氨基酸含量的变化程度较其它2个育苗地的大；山杏×柠条混交育苗地氨基酸的种类和含量比山杏育苗地稍多，杨树育苗地又稍多于山杏×柠条混交育苗地。

当归水溶性多糖级分As—Ⅲa和As—Ⅲb的纯化鉴定与结构研究

当归热水抽提得到的粗多糖，经乙醇分级沉淀，ＤＥＡＥ纤维素分离和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１５０柱层析纯化，得到水洗脱级分Ａｓ—Ⅲａ和碱洗脱级分Ａｓ—Ⅲｂ两个多糖级分。经测定这两级分为均一组分。红外光谱呈现出典型的多糖吸收峰。气相色谱分析表明Ａｓ—Ⅲａ由葡萄糖组成，Ａｓ—Ⅲｂ由葡萄糖、甘露糖和阿拉伯糖组成。高碘酸氧化及Ｓｍｉｔｈ降解分析表明Ａｓ—Ⅲａ的单体通过α（１→３）糖苷键相连，Ａｓ—Ⅲｂ主要通过（１→４）和（１→６）糖苷键相连。

用废啤酒酵母残渣酿造酱油的研究

以啤酒厂废弃的啤酒酵母提取甘露聚糖后的残渣为主要原料 ,以米曲霉沪酿3.0 4 2为菌种 ,按常规方法 ,固态低盐发酵生产酱油 ,具有成本低廉 ,工艺简便等优点。酱油的全氮利用率可达 70 % ,氨基酸生成率达 50 %以上。为开发新的蛋白质资源 ,为废啤酒酵母的综合利用 ,减少环境污染开辟了一条途径。

He—Ne激光对多刺裸腹蚤心脏搏动影响的初步研究

用He—Ne激光(30mw,10分钟,室温)辐照多刺裸腹蚤的心脏或脑神经节,发现多刺裸腹蚤的心跳频率发生降低或增高的变化。停止辐照同一样品在自然培养液中培养24小时后,两处理组的心跳频率都大大增加。本文对这些现象进行了探讨。