基于TGF-β1/Smads信号通路探讨2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-环己二酮抗肝纤维化的作用机制

目的探讨2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-环己二酮(2-dodecyl-6-methoxycyclohexa-2,5-diene-1,4-dione,DMDD)对CCl_(4)致大鼠肝纤维化的影响及潜在作用机制。方法采用50%CCl_(4)复制肝纤维化模型,检测血液中门冬氨酸转移酶(aspartate transferase,AST)、丙氨酸转移酶(alanine transferase,ALT)、白蛋白/球蛋白(albumin/globulin,A/G)、总蛋白(total protein,TP)、总胆红素(total bilirubin,T-BIL)、大鼠透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型胶原(collagen typeⅢ,ColⅢ)和Ⅳ型胶原(collagen typeⅣ,ColⅣ)。HE和Masson染色观察肝脏组织病变和纤维形成情况。免疫组织化学法检测肝脏组织中α平滑肌肌动蛋白(αsmooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,ColI)、转化生长因子β1(transformed growth factor-β1,TGF-β1)、Smad2、Smad7蛋白表达水平。RT-PCR法检测肝脏组织中α-SMA、ColI、TGF-β1、Smad7mRNA水平。Western blot法检测肝脏组织中TGF-β1、Smad4、Smad7蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,模型组血清AST、ALT、TP、T-BIL、HA、LN、ColⅢ、ColⅣ水平明显升高,A/G水平明显降低,肝脏HE和Masson染色显示有大量纤维形成,说明造模成功。与模型组相比,DMDD给药组大鼠AST、ALT、TP、T-BIL、HA、LN、ColⅢ、ColⅣ含量和α-SMA、ColI、TGF-β1、Smad2、Smad4mRNA及蛋白水平显著下调,A/G、Smad7水平上调。肝脏HE和Masson染色结果显示纤维增生明显减少。结论DMDD对CCl_(4)诱导的肝纤维化具有保护作用,其机制可能与TGF-β1/Smads信号通路有关。

习近平家国情怀对当代青年的成长化育

习近平家国情怀蕴含着丰富的教育资源,对引领当代青年成长成才具有重要的现实意义。新时代中国青年既是家庭的中坚力量,亦是国家富强民族复兴伟大使命的担当者。要引导青年深入学习和感悟习近平家国情怀,挖掘习近平家国情怀的形成基础,把握其对青年一代给予的成长指引和精神力量,通过以学促思、以思促行、以行促实,激励青年厚植家国情怀,为实现中华民族伟大复兴贡献青春力量。

SDC1基因单核苷酸多态性与汉族孕产妇伴有严重特征的子痫前期易感性相关性研究

目的:探讨SDC1基因家族单核苷酸多态性(SNPs)与汉族孕妇伴有严重特征的子痫前期(PE-sf)易感性的相关性。方法:选取2020年5月至2022年4月中山市博爱医院收治的PE-sf孕产妇201例和健康孕产妇171例,利用飞行时间质谱检测系统对SDC1基因的4个SNPs位点(rs1131351、rs11899121、rs2230924和rs11544860)进行基因分型,探讨SDC1的SNPs对其编码产物血清syndecan-1浓度的影响。结果:与对照组相比,PE-sf组的血清syndecan-1水平明显降低,差异有统计学意义(P=0.006)。基因分型成功率为100%,其中rs11544860全部为GG基因型,未见AA、GA基因型,不符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。与对照组相比,PE-sf组rs1131351的等位基因分布差异有统计学意义(χ^(2)=5.342,P=0.021),rs2230924和rs11899121均无差异(χ^(2)=0.025,P=0.873;χ^(2)=0.053,P=0.818)。与对照组相比,PE-sf组rs1131351和rs2230924的基因型分布差异均有统计学意义(χ^(2)=14.581,P=0.001;χ^(2)=6.788,P=0.034),rs11899121则无差异(χ^(2)=0.155,P=0.926)。进行Bonferroni校正后rs1131351的基因型分布差异有统计学意义(P<0.05),rs2230924则无差异(P>0.05)。与CC基因型相比,rs1131351的CG和GG基因型均显著增加PE-sf发生的危险性,OR分别为2.731(1.616~4.617)和2.118(1.171~3.833)。经Spearman相关性检验,发现SDC1基因的rs1131351位点SNPs与血清syndecan-1水平具有相关性(r=-0.352,P=0.022)。与CC、GG基因型组相比,PE-sf患者CG基因型组的血清syndecan-1水平明显降低(均P<0.05)。结论:SDC1基因的SNPs可能与PE-sf易感性有关,CG基因型对血清syndecan-1浓度有一定影响。

为什么人人都想要创造力

近年来,“小镇做题家”成为中国社会的流行词。这个带有贬义的词,指的是出身小城、埋头苦读、擅长应试、缺乏视野和资源的年轻人,他们通过刷题在高考中取得高分,试图以此实现社会阶层的向上流动。

塔里木河中下游柽柳群落土壤碳通量及其影响因子分析

利用LI-8100监测塔里木河中下游柽柳群落土壤呼吸的日变化，分析了塔里木河中下游干旱荒漠区的温度、地下水和土壤水分对土壤呼吸的影响．结果表明：土壤呼吸的日变化是不规律的单峰值曲线，碳通量的最大值出现在正午12：00～16：00不等，由于受当日云量、风速等气象因子的影响，因此各个断面差异较明显．土壤呼吸与地下水位、各层温度、各层土壤含水量的关系都很显著：地下水位与柽柳根系关系密切，因此土壤碳通量与地下水之间的关系极显著，适合三次曲线模型；气温、近地表气温、地表温度与土壤碳通量成正相关关系，适合指数模型，但是15cm、20cm、25cm、30cm土层温度与土壤碳通量成负相关关系，适合三次曲线模型；土壤含水量与土壤呼吸之间存在极显著关系，适合三次曲线模型；经过多元回归分析得到土壤呼吸与温度、土壤含水量之间的关系模型可以解释67％的土壤呼吸的变化情况．

塔里木河下游荒漠河岸林群落土壤呼吸及其影响因子

利用LI-8100土壤碳通量自动测定仪监测塔里木河下游荒漠河岸林群落土壤呼吸的日变化动态,分析其土壤呼吸与环境因子的关系,比较二者的差异。结果表明:(1)胡杨和柽柳群落土壤呼吸的日变化过程相同,最大值出现时间一致,呈单峰值曲线,但是不同月份最大值出现时间不同;(2)胡杨群落的土壤呼吸速率大于柽柳群落的;(3)胡杨和柽柳群落的土壤呼吸速率与距地表2cm处气温之间存在显著的指数关系,但是不同植物类型的土壤呼吸对温度的敏感性有所不同;(4)胡杨和柽柳群落的土壤呼吸速率与土壤水分都存在显著的线性关系;(5)通过多元回归分析表明,塔里木河下游76%～93%左右的荒漠河岸林群落土壤呼吸速率受温度和水分的共同控制。

旴江医家脾胃学术思想古籍整理研究

旴江医学是我国古代四大地方医学流派之一,分布于江西省抚河流域,对中医学影响深远。古往今来,该地名医辈出,医著宏富,孕育出了以危亦林、龚廷贤、李梴、喻嘉言等为代表的众多旴江名家,其学术思想皆重脾胃。本研究通过对危亦林、龚廷贤、喻嘉言、李梴、陈自明、易思兰、黎民寿、徐文弼等8位旴江医家文献古籍中涉及的脾胃学术思想进行整理,挖掘其对脾胃学术的思想价值,以期指导临床。

过表达HSPC238对Bel7402细胞周期的影响

目的:构建pcDNA3.1(-)/HSPC238真核表达载体,研究过表达HSPC238基因对人肝癌细胞株Bel7402细胞周期的影响。方法:采用PCR法从pET28b/HSPC238重组质粒中克隆得到HSPC238 cDNA全长序列,并将该片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)中,构建pcDNA3.1(-)/HSPC238真核表达质粒。经酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染Bel7402细胞,随后经G418筛选4周,得到阳性克隆细胞株。用RT-PCR和Western blot技术分别检测HSPC238基因在Bel7402中的mRNA和蛋白水平的表达。随后用饥饿法使各组细胞周期同步化,再用流式细胞仪分析HSPC238过表达对细胞周期的影响。结果:pcDNA3.1(-)/HSPC238经酶切鉴定及DNA测序证实,目的基因HSPC238的序列完全正确;RT-PCR和Western blot检测显示,与转染pcDNA3.1(-)组和未转染组相比较,转染pcDNA3.1(-)/HSPC238组的mRNA和蛋白表达水平均明显增高,但前两者间没有差异。用饥饿法同步化后,流式细胞仪检测显示过表达HSPC238可延缓Bel7402细胞株从G1期进入S期。结论:成功构建了pcDNA3.1(-)/HSPC238真核表达载体,并在Bel7402中表达。初步发现过表达HSPC238可延缓肝癌细胞的细胞周期,为更进一步研究HSPC238蛋白的功能奠定了基础。

老年急性心肌梗死与氧化应激的关系研究

目的:通过检测血清晚期氧化蛋白产物(AOPP)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平,探讨老年急性心肌梗死(AM I)发病与氧化应激的关系。方法:选择老年AM I 30例和不稳定心绞痛(UA)23例作为研究对象,老年健康自愿者36例作为对照。采用分光光度计法检测AOPP水平,硫代巴比妥酸法检测MDA含量,黄嘌岭氧化酶法测定SOD活力和ELISA双抗体夹心法检测ox-LDL水平。结果:老年AM I组和UA组的AOPP、MDA、SOD和ox-LDL水平均明显高于对照组(P<0.01或<0.05)。AM I组AOPP和ox-LDL水平均高于UA组(P<0.05),而MDA、SOD水平两组间无明显差异(P>0.05)。AM I组中冠状动脉单支病变亚组与多支病变亚组相比,各项指标均明显增高(P<0.05)。结论:老年AM I发生时具有明显的氧化应激反应,并与病情的严重程度有关。

塔里木河中下游胡杨群落土壤碳通量日变化研究

为了探讨塔里木河中下游胡杨群落土壤呼吸的日变化特征,分析其与环境因子的关系,采用LI—8100对乌斯满、阿其河、英苏和喀尔达依断面的胡杨群落土壤碳通量和距地表10 cm气温进行连续的日变化野外监测,比较土壤碳通量与土壤含水量的关系,采用SPSS13．0进行非线性回归分析．研究结果表明：(1)当距地表10 cm气温达到30℃时,土壤呼吸受到抑制；(2)各个断面胡杨群落的土壤呼吸速率的差异显著程度不一致,总体来说,土壤水分状况较好的乌斯满断面土壤碳通量较大,而阿其河、英苏和喀尔达依断面的土壤碳通量较小；(3)土壤碳通量与距地表10 cm气温之间也适合指数模型,乌斯满、阿其河、英苏和喀尔达依4个断面的Q_(10)值分别为0．61,0．16,0．22,0．35,远低于世界平均水平；(4)土壤碳通量与土壤含水量之间呈显著的正相关关系,适合指数模型．

杨桃根提取物对CCl_4致小鼠急性肝损伤的预防作用

目的探讨杨桃根提物(EACR)对CCl_4致小鼠急性肝损伤的影响。方法预防性给予相应药物7 d后,复制急性肝损伤模型。检测血清中的谷草转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)的水平,以及肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;Western blot检测肝脏组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核转录因子-κB(NF-κB)、caspase-3的蛋白表达水平;HE染色观察小鼠肝脏的病变情况。结果与模型组相比,给药组小鼠血清中AST、ALT、IL-1、IL-6及肝脏中MDA水平明显降低;肝脏组织中SOD、GSH、GSH-Px明显升高;肝脏组织TNF-α、NF-κB、caspase-3蛋白表达明显减少;HE染色显示肝脏组织病变减轻。结论 EACR通过降低酶活性,抑制脂质过氧化及炎症因子释放,达到保护小鼠肝脏的作用。

抗人LOC51255单克隆抗体的制备及亚细胞定位

目的:制备抗人LOC51255单克隆抗体,并构建pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒,了解LOC51255在人肝癌细胞株HepG2中的亚细胞定位情况,为进一步研究其功能提供实验工具和基础。方法:以纯化的重组蛋白pET28b/LOC51255为抗原,免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备LOC51255单克隆抗体,并用间接ELISA法和Western blot法对单克隆抗体的特性进行鉴定;通过构建含红色荧光蛋白(pDsRed1)的pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒,转入人肝癌细胞株HepG2表达重组蛋白,并对LOC51255进行亚细胞定位。结果:成功建立2株稳定分泌抗LOC51255单克隆抗体的杂交瘤细胞株;ELISA检测抗LOC51255单克隆抗体的腹水效价分别为1∶12 800和1∶25 600。2株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为IgG1。通过Western blot实验证实,2株单克隆抗体均能特异性结合真核细胞内源性LOC51255蛋白。荧光显微镜观察发现LOC51255主要定位于HepG2细胞的细胞浆。结论:成功制备了2株效价高、特异性好的抗LOC51255单克隆抗体,制备的单克隆抗体可用于LOC51255蛋白的鉴定;亚细胞定位分析证实LOC51255主要表达于HepG2细胞的胞浆,为LOC51255的生物学功能研究奠定了基础。

pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒的构建及在HePG_2细胞的表达定位

目的:构建pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒并检测其在人肝癌细胞株HePG2中的表达和亚细胞定位。方法:采用PCR法从pET28b/LOC51255重组质粒中克隆得到LOC51255cDNA全长序列,并将该片段亚克隆到真核表达载体pDsRed1-C3中。构建好的pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒经双酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染人肝癌细胞株HePG2,再用荧光显微镜直接观察LOC51255在其中的表达及定位情况。结果:经双酶切及DNA测序结果证实成功构建重组质粒pDsRed1-C3/LOC51255;荧光显微镜观察证实该重组质粒能在HePG2细胞中表达,且LOC51255蛋白主要定位于HePG2细胞的细胞质。结论:成功构建pDsRed1-C3/LOC51255真核表达质粒,并在HePG2细胞中得到表达,同时证实LOC51255定位于HePG2细胞的胞质,为进一步研究人类LOC51255基因的功能奠定了基础。

抗PSMA7单克隆抗体的制备和初步鉴定

目的制备抗蛋白酶体α7亚基(PSMA7)的单克隆抗体,为PSMA7的功能研究奠定基础。方法以纯化的重组蛋白PSMA7为抗原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备PSMA7单克隆抗体,并用间接ELISA法和Western blot法对单克隆抗体的特性进行鉴定。结果成功建立两株稳定分泌抗PSMA7蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为B013和B001。检测杂交瘤细胞培养上清抗体效价为1∶128和1∶256,腹水效价为1∶25600和1∶32000。两株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为IgG1。Westernblot及免疫组化实验证实,两株单克隆抗体均能特异性结合真核细胞内源性PSMA7蛋白。结论成功建立了两株效价高、特异性好的抗PSMA7单克隆抗体杂交瘤细胞,制备的单克隆抗体可用于PSMA7蛋白的鉴定,为其生物学功能研究奠定了基础。

人蛋白酶体α7亚基在原发性肝细胞肝癌中的表达及临床意义

目的:探讨人蛋白酶体α7亚基(PSMA7)与原发性肝细胞肝癌(HCC)发生发展的关系。方法:采用免疫组织化学法检测254例HCC中PSMA7蛋白的表达。结果:在癌组织细胞质中,发现不同临床分期和病理分级之间,PSMA7的表达均无明显差异(P>0.05),但不同肝硬化程度间具有显著性差异(P<0.01),以早期肝硬化患者肝细胞表达量最高。在癌组织细胞核中,不同临床分期之间PSMA7的表达无明显差异(P>0.05),但不同病理分级之间具有显著性差异(P<0.05),同时与肝硬化的程度有一定关系(P<0.05),亦以早期肝硬化患者肝细胞表达量最高。另外,PSMA7的表达在癌组织和癌旁组织的细胞质中无明显差异(P>0.05),而在细胞核中具有显著性差异,癌组织高于癌旁组织(P<0.01)。淋巴结转移组细胞核中的PSMA7表达高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论:PSMA7在HCC细胞核中表达增高,与病理分期有关。此外,PSMA7的表达与肝硬化程度和淋巴结转移有关。

CHIA和CHI3L1基因变异与汉族儿童哮喘发病的关系

目的:探讨CHIA和CHI3L1基因的变异与中山市汉族儿童哮喘发病的相关性。方法:采用病例对照研究,利用MassARRAY-IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平台(MALDI-TOF-MS)对CHIA基因的rs10494132和CHI3L1的rs946263位点进行基因分型。结果:在中山市汉族儿童中rs10494132检出CC、CT和TT基因型,rs946263检出AA、AG和GG三种基因型。与正常对照相比,哮喘组rs10494132的基因型分布(χ2=8.767,P=0.012)和等位基因分布(χ2=9.749,P=0.002)均具有明显差异,而rs946263基因型分布(χ2=0.472,P=0.790)和等位基因分布(χ2=0.013,P=0.910)均无显著性差异。与CC+CT基因型相比,rs10494132的TT基因型能显著增加哮喘发生的危险性,OR值(95%可信区间)分别为2.093(1.252～3.498)。在哮喘组中,与CC+CT基因型亚组相比,rs10494132的TT基因型亚组IgE浓度(Z=-2.013,P=0.044)明显增高,而嗜酸性粒细胞计数(Z=-0.704,P=0.482)和CRP(Z=-0.488,P=0.626)无明显变化。rs10494132位点的基因型分布在哮喘初次确诊规则治疗前不同病情严重程度分级之间未见明显差异(χ2=0.719,P=0.397)。结论:CHIA基因的rs10494132可能与中山市汉族儿童哮喘的发病有关,TT基因型可能增加血清IgE浓度。

ORMDL3基因多态性与儿童哮喘发病的关系

目的探讨ORMDL3基因的单核苷酸多态性（SNPs）与汉族儿童哮喘发病的相关性。方法选取儿童哮喘患者168例和同期健康查体者188例为研究对象,利用MassARRAY-IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平台（MALDI-TOF-MS）对ORMDL3基因的7个SNPs位点进行基因分型。结果与对照组相比,哮喘组嗜酸性粒细胞计数（Z=26.581,P=0.000）和IgE明显升高（Z=73.208,P=0.000）,CRP水平差异无统计学意义（Z=2.938,P=0.066）,吸入性过敏原（χ2=44.638,P=0.000）和食物过敏原（χ2=14.347,P=0.000）检出率明显增高。总的基因型分型成功率为99.34%。与对照相比,哮喘组rs4795400的等位基因分布（χ2=4.166,P=0.041）有差异,但基因型分布（χ2=3.732,P=0.155）无明显差异。与对照相比,哮喘组rs2305480和rs3859192的等位基因分布（χ2=5.294,P=0.021;χ2=6.804,P=0.009）有差异,基因型分布（χ2=5.538,P=0.019;χ2=7.618,P=0.022）也均具有显著性差异,但进行Bonferroni校正后两组间基因型分布均无显著性差异（Pc=0.114;Pc=0.132）。与对照相比,哮喘组rs7216389、rs8069176和rs12603332的等位基因分布（χ2=13.800,P=0.000;χ2=13.066,P=0.000;χ2=10.872,P=0.001）均具有显著差异,基因型分布（χ2=12.162,P=0.002;χ2=11.574,P=0.003;χ2=10.500,P=0.005）同样均具有显著性差异,进行Bonferroni校正后两组间仍均具有显著性差异（Pc=0.012;Pc=0.018;Pc=0.030）。与CC基因型相比,rs7216389的TT基因型显著增加哮喘发生的危险性（P=0.003）,OR值（95%可信区间）为3.846（1.488~9.939）。与AA基因型相比,rs8069176的GG基因型显著增加哮喘发生的危险性（P=0.008）,OR值（95%可信区间）为3.453（1.322~9.017）。与TT＋TC基因型相比,rs12603332的CC基因型显著增加哮喘发生的危险性（P=0.001）,OR值（95%可信区间）为2.057（1.316~3.214）。结论 ORMDL3基因的rs7216389、rs8069176和rs12603332位点与汉族儿童哮喘的发病有关。

抗HSPC238单克隆抗体的制备和初步鉴定

目的制备抗HSPC238的单克隆抗体,为HSPC238的功能研究奠定基础。方法以纯化的重组蛋白HSPC238为抗原,免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备HSPC238单克隆抗体,并用间接ELISA法和Western-blot法对单克隆抗体的特性进行鉴定。结果成功建立两株稳定分泌抗HSPC238的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为E001和E002。ELISA检测抗HSPC238单克隆抗体的腹水效价为1∶12800和1∶25600。两株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为IgG1。通过Western-blot实验证实,两株单克隆抗体均能特异性结合真核细胞内源性HSPC238蛋白。结论成功制备了两株效价高、特异性好的抗HSPC238单克隆抗体,制备的抗HSPC238单克隆抗体可用于HSPC238蛋白的鉴定,为HSPC238蛋白的生物学功能研究奠定了基础。

过表达泛素偶联酶E2C对293T细胞增殖的影响

目的:构建稳定过表达人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)的293T人胚肾细胞株,初步探讨其对293T细胞增殖的影响。方法:采用脂质体法将已成功构建的pcDNA3.1(-)/UBE2C真核表达质粒转入293T人胚肾细胞株中,随后经G418筛选4周,得到阳性克隆细胞株;用Western blot技术检测并鉴定UBE2C基因在293T细胞中的表达情况;用MTT法检测UBE2C对293T细胞增殖的影响。结果:Western blot检测显示,转pcDNA3.1(-)/UBE2C组293T细胞的UBE2C蛋白表达水平明显高于转pcDNA3.1(-)组(P<0.01)。MTT法检测结果显示转pcDNA3.1(-)/UBE2C组293T细胞的增殖速度明显快于转pcDNA3.1(-)组(P<0.01)。结论:成功建立稳定过表达UBE2C的293T细胞株,过表达UBE2C可促进293T细胞的增殖。

九江市区域医疗联合体建设的实践与思考

介绍了九江市区域医疗联合体建设的基本情况、联合模式、主要做法以及主要成效,分析了医疗联合体运行过程中存在的一些共性问题。可借鉴国内医疗联合体建设的成功经验,进一步完善运作模式,推动医疗联合体健康发展。