空肠弯曲菌双分子荧光互补系统构建及其在蛋白质互作研究中的应用

为研究空肠弯曲菌中蛋白质的相互作用,建立适合于该菌稳定高效表达的双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)系统,通过构建基于基因启动子、荧光蛋白以及基因回补方式等不同条件的重组载体,分别导入空肠弯曲菌进行荧光数值比较分析,确定荧光表达最优的参数,建立以porA启动子和Venus荧光蛋白的质粒回补的BiFC体系。用该体系探究空肠弯曲菌鞭毛表达蛋白的互作。结果表明:已知flhF与flhG互作的BiFC-flhF-flhG载体在菌体内表达的荧光值显著高于阴性对照载体,而BiFC-flhF-fliM和BiFC-flhF-fliG与阴性对照无差异,说明BiFC体系建立成功,且flhF与fliG、fliM不存在互作关系。综上,本研究建立了适用于空肠弯曲菌的BiFC体系,可为该菌蛋白质互作研究提供高效便捷的方法。

应用聚合酶链反应快速检测沙门氏菌

根据沙门氏菌组氨酸转运操纵子基因序列设计引物 ,对沙门氏菌属 A～F各群中共 1 5株沙门氏菌标准菌株、2 7株沙门氏菌现场分离菌株和其他 1 0株非沙门氏菌菌株进行聚合酶链反应 (PCR)扩增 ,结果沙门氏菌均出现 495 bp特异性 DNA扩增条带 ,所有对照均未出现特异条带 ,提示这对引物具有很强的沙门氏菌属特异性。PCR敏感性试验显示 ,该体系能检出 1 4pg以上的沙门氏菌 DNA。通过对 5种不同的 DNA模板提取方法的比较 ,选择操作简便、快速、成本低廉的热裂解法。采用该方法 ,对生鲜奶样进行检测 ,经与国家标准卫生检验方法相比较 ,两者符合率达 1 0 0 %。

江苏奶牛空肠弯曲菌和结肠弯曲菌流行状况及耐药性分析

目的了解江苏省奶牛空肠、结肠弯曲菌流行及耐药状况。方法采用多重PCR方法对10个奶牛场的产奶牛、育成牛和饲养环境进行空肠弯曲菌和结肠弯曲菌流行状况调查,采用琼脂扩散法测定分离株的耐药性。结果1531份样品中,119份空肠弯曲菌阳性,平均阳性率7.77%;3份结肠弯曲菌阳性,平均阳性率0.20%;空肠弯曲菌、结肠弯曲菌阳性率最高分别为30.91%、3.57%。在三类样品中,产奶牛空肠弯曲菌、结肠弯曲菌阳性率分别为5.02%、0.32%,育成牛空肠弯曲菌阳性率为8.70%、未检出结肠弯曲菌,环境样品空肠弯曲菌、结肠弯曲菌阳性率为10.28%、0.18%。35株奶牛空肠弯曲菌分离株对8大类21种抗生素高度敏感率的是:阿莫西林100%、阿齐红霉100%、链霉素97.14%、庆大霉素94.29%、红霉素91.43%、头孢噻肟82.86%、克林霉素82.86%;高度耐药率的是:头孢哌酮100%、恩诺沙星100%、环丙沙星97.14%、复方新诺明97.14%、左旋氧氟沙星94.29%、萘啶酸94.29%、头孢拉定94.29%、诺氟沙星91.43%、头孢克罗88.57%。菌株耐药谱显示,35株分离株的耐药主要集中在9耐到12耐,占88.57%,产奶牛分离株的多重耐药性较其它分离株更严重。结论我国奶牛群中空肠弯曲菌、结肠弯曲菌的流行和耐药状况呈现多样化和复杂化,研究结果为正确评价我国奶牛群弯曲菌的流行状况和制定切实可行的防控措施提供科学依据。

部分省市鸡群空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的流行状况分析

本研究采用多重PCR方法对我国部分省市不同品种、不同类型的鸡群进行空肠弯曲菌和结肠弯曲菌流行病学调查。结果发现,在3132份鸡肛门棉拭样品中,检测出583份空肠弯曲菌阳性样品,平均阳性率18.61%;48份结肠弯曲菌阳性,平均阳性率1.53%。鸡饲养环境样品217份,6份空肠弯曲菌阳性,阳性率2.76%。不同鸡群感染率悬殊较大,空肠弯曲菌阳性率从0%～73.3%、结肠弯曲菌阳性率从0%～7.4%。30个鸡群中空肠弯曲菌阳性率为86.67%,结肠弯曲菌阳性率43.33%。本调查结果表明我国鸡群中空肠弯曲菌、结肠弯曲菌的流行呈现多样化。

“发酵工程”课程教学的思考与探索

发酵工程是微生物工程、生物制药、生物工程、生物技术等专业的重要专业课,课程内容丰富、涉及面宽。我们通过对教学内容、教学方式与手段以及考试方式等方面的改革和探索,取得了较好效果。

沙门菌、产单核细胞李斯特菌多重PCR检测方法的建立及应用

目的建立沙门菌、产单核细胞李斯特菌多重PCR检测方法,提高检测效率和敏感性。方法选择沙门菌组氨酸转运操纵子基因、产单核细胞李斯特菌溶血素基因序列设计引物,在单一PCR方法基础上,建立检测两种病原菌的多重PCR技术。结果在495bp和850bp处分别出现预期的特异性DNA扩增条带,敏感性试验显示该体系能检测出32pg的沙门菌DNA和274pg的李斯特菌DNA,样品检测表明该方法与单一PCR和国标方法的符合率达100%。结论本研究建立了能同时检测沙门菌和产单核细胞李斯特菌的多重PCR技术,为主要食源性病原菌快速检测提供了新方法。

地下储水空间雨洪资源调蓄技术研究进展

根据国内外雨洪资源利用发展现状分析,采用地下储水空间调蓄雨洪资源具有很好的发展前景及应用价值。但是,在具体工程实施上,仍存在一些亟待解决的关键技术问题,包括高效的入渗工程设计、防治堵塞技术以及水质控制技术等。进一步深入理论研究,将理论研究与具体工程设计相结合,并实现工艺的优化控制是地下储水空间雨洪水资源调蓄领域在目前以及今后一段时间内的主要发展方向。

预应力碳纤维板加固钢筋混凝土梁疲劳主裂纹扩展试验研究

运用理论分析和试验,研究预应力碳纤维板（CFRP）加固的钢筋混凝土（RC）梁在疲劳荷载作用下主裂纹的扩展规律。基于I型裂纹尖端的力学分析模型,推导加固梁的应力强度因子计算式,结合裂纹扩展的试验数据,拟合得到加固梁疲劳裂纹在稳定扩展阶段的扩展速率Paris半经验表达式。结果表明：加固梁的疲劳主裂纹扩展可分为快速发展、稳定扩展和失稳扩展3个阶段,其中稳定扩展阶段占加固梁疲劳寿命的92%-96%左右;适当提高预应力水平对加固梁的疲劳寿命有利;在相同试验条件下,预应力水平为20%的加固梁与预应力水平为30%的加固梁相比,其疲劳裂纹的扩展速率大1.28%-3.84%;给出的主裂纹疲劳扩展速率半经验公式可方便、较准确地预测该类加固构件的疲劳寿命,相对误差为11.72%-20.33%。

岔路河流域水资源合理配置研究

水资源合理配置是实现水资源可持续利用的有效调控措施之一。以岔路河流域为研究对象,对该流域的水资源特征进行了分析,采用多目标规划建立流域水资源配置模型,以2007年为规划水平年,以经济效益最大和用水量最小为规划目标,对水资源进行配置。结果表明:在保证生活及生态用水的前提下,节约农业灌溉用水,以发展乡镇工业,从而实觋可利用水资源量效益的最大化。

大力提升生物工程专业实践能力的做法和思考

生物工程是以生物学的理论和技术为基础,并结合化工、机械、电子计算机等学科的新兴综合性应用学科和工程技术领域。如何培养学生的实践能力是生物工程专业人才培养中的关键点,应该结合生物工程专业的实践教学,从专业基础实验、专业综合实验、"3+1"卓越人才培养模式和全程实践教学理念等方面进行人才培养的改革与探索。

盾构法隧道施工的横向沉降槽分析

地下开挖引起的地表沉降是地铁修建过程中的关键问题。以盾构法施工的广州市某地铁隧道的现场实测资料为依据,对盾构法施工引起的沉降进行了深入研究,并在经典Peck公式中引入沉降槽偏移参数。在绘出不同埋深的沉降槽实测形状的基础上,利用数学方法对沉降槽的形状、影响范围、宽度系数进行了研究。

探讨复方氯己定含漱液在口腔溃疡治疗中的临床效果

目的:研究复方氯己定含漱液治疗口腔溃疡的效果。方法:选择110例口腔溃疡患者,分为治疗组与对照组,每组55例。治疗组使用复方氯己定含漱液治疗,对照组使用西瓜霜涂抹口腔溃疡处。结果:治疗组治疗效果明显高于对照组,而且患者没有出现过敏现象。结论:复方氯己定含漱液治疗口腔溃疡效果相助值得临床推广。

复发性口腔溃疡的分析及临床研究

目的:对复发性口腔溃疡进行探究分析,并观察其临床疗效。方法:回顾性分析复发性口腔溃疡患者的临床资料,选择采用常规西医治疗的患者50例作为对照组,采取中西医结合治疗的患者50例作为观察组,并对各组临床疗效作统计分析。结果:观察组临床有效率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:因复发性口腔溃疡发病机制复杂,故采取对症治疗的同时结合中医治疗,可明显提高临床治疗有效率,值得临床推广。

空肠弯曲菌cjaA基因表达蛋白单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

目的:原核表达空肠弯曲菌CjaA蛋白,并制备其单克隆抗体(mAb)。方法:克隆目的基因并将其构建到pGEX-6p-1和pET30a(+)表达载体,分别以变复性纯化后的rGST-cjaA、rHis-cjaA蛋白为免疫原和检测原进行杂交瘤细胞的筛选。采用间接ELISA法测定细胞上清和mAb腹水效价,Dot-ELISA、Western blot分析mAb特异性。结果:成功构建pET30a(+)-cjaA和pGEX-6p-1-cjaA重组原核表达质粒,并融合表达rHis-cjaA和rGST-cjaA蛋白,Western blot试验显示全菌多抗血清能与体外表达的蛋白呈现特异性反应,表明表达蛋白具有免疫原性。筛选获得3株稳定分泌抗CjaA的单克隆杂交瘤细胞株,分别命名为2B6、3C2、4F11,其Ig亚类均为IgG1,腹水效价分别为1∶1×105、1∶2×105和1∶4×105;Western blot试验显示,3株mAb均能与表达rHis-CjaA重组蛋白的细菌发生特异性反应;Dot-ELISA试验表明,3株mAb均能与不同来源的空肠弯曲菌分离株发生特异性反应。结论:本研究制备的mAb有较高特异性,具有良好的应用价值。为进一步研究空肠弯曲菌CjaA蛋白的生物学特性、致病机制,以及建立快速检测技术奠定基础。

优化整合生物工程专业课程实验 建立综合大实验课程体系

以强化培养生物工程专业学生的工程能力和创新能力为目标,以国家生物医药产业政策为背景,研究提出优化整合我校生物工程专业课程实验体系,建立综合大实验课程以适应当前社会发展的生物工程专业卓越工程师培养,形成科学的生物工程专业课程实验体系,并加以实施,培养出具有扎实工学科学基础和生物工程专业技术能力基础,较强生物工程开发、设计与实践能力,知识更新与自我完善能力、良好沟通与组织管理能力和国际视野的生物工程专业优秀人才。

惠州抽水蓄能电站黏土心墙坝黏土碾压试验研究

介绍了惠州抽水蓄能电站水库大坝土建工程填筑料的设计填筑标准和现场碾压试验内容,在总结试验成果的基础上,探讨如何选择黏性土料最优含水率、最佳铺料厚度和碾压遍数等施工参数。

高压引水隧洞斜井开挖施工技术

在所有隧洞施工中,高压隧洞斜井是施工技术含量最高、难度最大的。结合惠州抽水蓄能电站工程实例,介绍了高压隧洞斜井的工程设计概况,阐述了隧洞斜井的施工方法和一些合理的施工工序。

惠州抽水蓄能电站黏土心墙堆石坝碾压试验研究

介绍了惠州抽水蓄能电站水库大坝填筑料的设计填筑标准和现场碾压试验,了解分析其压实特性,核实设计填筑标准的合理性,总结并探讨了黏性土料最优含水率、最佳铺料厚度和碾压遍数等施工参数的选择。

蜂蜜酶值快速检测的研究——标准参考比色板法

蜂蜜中淀粉酶活性值 (酶值DN)是评定蜂蜜质量的一项重要指标 ,新鲜的蜂蜜其酶值较高 ,营养价值好。本文在传统检测方法 ,试管碘反应目测法和分光光度比色法的基础上 ,结合两者的优点 ,采用标准参考比色板法 ,该方法具有方便、易行、快速可靠等优点。

危重病应激性胃溃疡的防治

目的 :研究应用洛赛克针剂 (进口 )、奥美拉唑针剂 (国产 )和硫糖铝片防治危重症患者应激性溃疡的效果。方法 :15 6例患者分为 3组 :第 1组 (n =34)应用洛赛克针剂 (进口 ) 4 0mg ,2次 /d ,静脉点滴 ,3d天后改为洛赛克胶囊 10mg ,1次 /d ,连服 10d。第 2组 (n =6 4 )应用注射用奥美拉唑 (国产 ) 4 0mg ,2次 /d点滴 ,连续 14d。第 3组 (n =5 8)应用硫糖铝 0 .75 g ,3次 /d ,鼻饲 ,连续 14d。结果 :经统计学处理 ,3组治疗总有效率 80 .1% ,但 3组之间疗效有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :本组危重病应激性溃疡的总发生率 19.9% ,应用洛赛克针剂 (进口 )治疗效果较好。