日本落叶松胚状体干化处理对萌发的影响

[目的]提高日本落叶松胚状体的萌发能力,优化日本落叶松良种繁育技术。[方法]本研究根据子叶数量和胚轴形态,对胚状体进行分类,并分别统计其萌发率;利用“滤纸容器法”对类型Ⅰ胚状体进行干化处理,统计其萌发情况。[结果]胚状体分为10种类型。类型Ⅰ胚状体萌发率为4.48%,其余类型胚状体难以萌发。干化处理14 d后,类型Ⅰ胚状体萌发率提高到69.43%,且具有干化响应的胚状体更易萌发。[结论]本研究表明日本落叶松胚状体干化处理后萌发率明显提高,为该物种良种繁育提供依据。

日本落叶松瞬时转化体系的优化及初步应用

[目的]优化农杆菌介导的日本落叶松胚性愈伤组织瞬时转化体系。[方法]以液体增殖培养7 d的日本落叶松胚性愈伤组织为受体材料,利用携带β-葡糖醛酸酶基因(GUS)的pCAMBIA1305.1载体进行瞬时转化,根据GUS的表达量及酶活性,筛选最佳侵染液浓度、侵染时间和共培养时间。并利用筛选出的转化体系,分析落叶松scarecrow-like 6(LaSCL6)启动子的活性。[结果]瞬时转化后,GUS表达明显。当侵染液浓度OD600为0.2,侵染5 min,共培养72 h时,GUS的表达量最高,△CT值为-2.274 2;当侵染液浓度OD600为0.05,侵染5 min,共培养72 h时,GUS酶活性最高,为25.728 6 U·L^(-1)。LaSCL6启动子的活性是CaMV35S启动子的1.55倍。[结论]综合考虑GUS的表达量和酶活性,当侵染液浓度OD600为0.05,侵染5 min,共培养24 h时,GUS的表达量和酶活性较高,这一条件可以用来进行日本落叶松胚性愈伤组织的高效转化。

麦芽糖、NAA及ABA对华北落叶松体细胞胚成熟及生根的影响

研究了麦芽糖、NAA、ABA对华北落叶松体细胞胚发生及体细胞胚根发生和再生完整植株的影响。结果表明 :在胚性愈伤组织继代、增殖过程中 ,以 0 5mg·L- 1 的NAA代替 2 ,4 -D后 ,有利于体细胞胚的成熟和根发生。在ABA 16mg·L- 1 时 ,产生的华北落叶松体细胞胚 ,能够再生良好植株 ,ABA大于 2 0mg·L- 1 时对体细胞胚根的发育不利。在含 3%麦芽糖、4 %PEG4 0 0 0活性炭 1g·L- 1 的成熟培养基上 ,华北落叶松每克愈伤组织子叶胚达 10 6 7个 ,生根率达 5 7 89% ;显著地提高了成熟体细胞胚及其根的质量。

落叶松不同类型胚性和非胚性愈伤组织的生理生化差异

以华北落叶松继代、增殖培养的不同类型的胚性及非胚性愈伤组织为材料 ,测定其氨基酸、糖类、酚酸、激素以及离子的含量 ,结果表明 :氨基酸含量的差异十分明显 ,质地硬的非胚性愈伤组织中 18种游离氨基酸含量为胚性愈伤组织的 2倍以上 ,经ABA处理后 ,胚性愈伤组织中多糖及邻苯二酚含量急剧升高 ;三糖含量与不同基因型密切相关 ;乙烯释放量在非胚性愈伤组织中高于胚性愈伤组织 ;金属离子CO+ + 的含量 ,胚性愈伤组织是非胚性愈伤组织的 12倍 ,胚性愈伤组织中铵态氮 (NH+4)与硝态氮 (NO-3)的比值是非胚性愈伤组织中的 10倍以上 ;实验结果为进一步探讨针叶树体细胞胚胎发生的生理生化机理提供依据。

应用311-A最优回归设计研究ABA、PEG4000及AgNO_3对落叶松体细胞胚发生数量的影响

采用三因素多项式回归 311 A最优设计方法对影响落叶松体细胞胚发生数量的ABA、PEG40 0 0和AgNO3的用量进行了研究 ,建立了华北落叶松正常体细胞胚发生数量与ABA、PEG40 0 0和AgNO3 的数学模型 ,分析了落叶松体细胞胚发生数量试验因子的主效应和互作效应 ,优选了落叶松体细胞胚发生数量最佳结果的最佳技术组合方案为ABA18 9138mg/L ,PEG40 0 0 88 80 0 7g/L与AgNO310 .75 13mg/L时 ,最佳体细胞胚数量应为 10 7 5 2 78个子叶胚 /g .callus。实验结果表明 :该方法是针叶树体细胞胚胎发生过程中 ,主要激素种类与浓度配比、处理组合 ,科学、合理的培养基优化途径。

落叶松胚性愈伤组织诱导培养基中激素的311-A最优回归设计筛选

采用 311- A最优回归设计 ,对落叶松胚性细胞诱导中激素种类与浓度优化筛选 ,建立胚性愈伤组织量依 2 ,4 - D、BA、KT的多项式回归方程。分析了试验因子的主效应和互作效应 ,借助此方程获得了 3因子的最佳配比组合以及最佳胚性愈伤组织发生量。 2 ,4 - D为 1.2 9mg· L-1、BA为0 .39mg· L-1和 KT为 0 .58mg· L-1时 ,落叶松胚性愈伤组织的诱导量可达到 13.9317mg·个 -1(外植体 )。结果表明 ,这是一种简便、实用。

杨属青杨组种(品种)间核型比较

对我国杨属 (Populus)青杨组 (Tacamahaca)的 10个种 (包括品种 )的核型进行了比较研究 ,结果如下 :小青杨P pseudo simoniiKitag .,2n =38=2 7m +6sm (1SAT ) +4st (2SAT )+1t (1SAT) ;毛果杨P trichocarpaTorr .,2n =38=2M +18m (1SAT ) +8sm +10st (1SAT) ;北京青杨P cathayanaRehd .var.Beijing ,2n =38=1M +2 4m +6sm +7st (2SAT) ;群众杨P בpopularis’ ,2n =38=3M +2 7m +2sm (1SAT ) +4st (2SAT ) +2t (1SAT) ;合作杨P ×xi aozhuanicaW .Y .HsuetLiangcv .Opera ,2n =38=1M +2 9m +4sm +5st;五台青杨P cath ayanaRehd .var .Wutai,2n =38=5M +2 2m +4sm +5st +2t (2SAT) ;甘肃青杨P cathayanaRehd .var.Gansulinxiaman ,2n =38=2M +2 8m +1sm +7st (1SAT) ;青海青杨P cathayanaRe hd .var.Qinghai,2n =38=1M +2 7m +3sm +6st (3SAT ) +1t (1SAT) ;中青 10号P cath .×Zhongqingnensis 10 ,2n =38=1M +2 6m +4sm +5st (2SAT ) +2t (2SAT) ;中青 4 8号P cath .×Zhongqingnensis 4 8,2n =38=16m +10sm (1SAT ) +10st (2SAT ) +2t (1SAT)。青杨组种间核型有一定区别 ,大部分种 (品种 )的核型均由中部和近中部着丝点染色体组成 ,少数种具端着丝点染色体 ,按Stebbins的核型分类 ,青杨组均属于

华北落叶松体细胞胚胎发生及遗传转化实验系统的建立(简报)

华北落叶松(Larix principis-Rupprechtii)是我国北方中高山地区重要的针叶速生用材树种,进行其体细胞胚胎发生和植株再生的研究,在针叶树无性快速繁殖及基因工程育种上有其特殊的用途,既可为针叶树无性系林业提供产业化途径,也可作为目的基因遗传转化实验系统。针叶树的基因转化相对较难,再生更属不易,Lelu等报道过杂种落叶松与欧洲落叶松体细胞胚胎发生方面的研究;而我国尚未见有落叶松体细胞胚胎发生的研究报道。

金黄球柏离体培养及快速繁殖研究

用６年生金黄球柏鳞叶茎段为外植体，研究植物激素对试管苗的调控作用以及试管苗继代、生根培养和发育特性。结果表明：在ＭＳ＋ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ的培养基上，试管苗分化率为９５．８％，鳞叶正常；在ＷＰＭ＋ＢＡ０．７５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ＋２．４－Ｄ０．２ｍｇ／Ｌ的培养基上，继代、增殖培养效果较好，鳞叶发育为小针状叶；在１／２ＷＰＭ＋ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ的培养基上最易生根。运用浅层液体增殖培养法，对试管苗成本和增殖速度以及植株变异进行了探讨。

几种裸子植物胚乳愈伤组织的诱导

取裸子植物未成熟胚乳作为外植体，在改良MS、添加不同种类激素和不同浓度配比的培养基上．分别予以热激、光培养、暗培养和刻伤胚乳等多种处理进行培养．结果表明：刻伤胚乳和适时暗培养有利于愈伤组织发生；经过25～30d的培养，在ρ（NAA）＝0．5～0．75mg／L、ρ（2，4－D）＝0．2～0．5mg／L、蔗糖浓度5％的培养基上，油松、白皮松、青、华北落叶松以附加ρ（KT）1．0～2．0mg／L以及白、侧柏在BA与KT配合使用的培养基上，热激后暗培养，愈伤组织诱导频率可达86．4％．

杨属白杨组种间核型比较

对杨属(Populus)白杨组(SectionPopulus)9种核型进行了分析,结果如下:银白杨(P.albaL.),2n=28=1M+30m+4sm(1SAT)+1st(1SAT)+2t;新疆杨(P.albavar.pyramidalis),2n=38=1M+24m+6sm+5st(1SAT)+2t(1SAT);河北杨(P.hopeiensisHuetChow),2n=38=1M+25m+8sm+4st;毛白杨(P.tomentosaCarr),2n=38=1M+27m+2sm+6st+2st;欧洲山杨(P.tremulaL.),2n=38=27m(1SAT)+6sm+5st(2SAT);银新杨(P.albabolleana),2n=38=1M+24m+7sm(1SAT)+5st(1SAT)+1t;鄂西毛白杨(P.tomentosavar.Exi),2n=38=26m+5sm+4st+3t;喇叭1号(P.da-vidianaDodeCLalba-1),2n=38=3M+23m(1SAT)+6sm+6st(1SAT),B14杨(P·×ZhongbainensisB14),2n=38=22m+6sm(1SAT)+7st+3t。白杨组种间核型有显著差异,说明它们的起源各异,其核型特征为白杨组种间鉴定提供了参考依据。

晋西山区防护林体系林种结构优化方案的研究

本文运用数学分析的方法,对晋西山区的林种结构进行了优化选择、结果表明;调整西山地区生产结构以后,农、林、牧能合理、健康地发展,人民生活水平得到改善,并确定了适合于西山地区发展的林种结构为;防护林50%、用材林45%、经济林5%,充分发挥了生态效益、经济效益和社会效益,并根据不同目标、选用了不同的优化方案.

日本落叶松体细胞胚胎发生的研究

日本落叶松日永 10、日永 6 9和日草 34三个优株 ,将其未成熟种子和成熟种子的胚及成熟种子萌发的胚根、胚轴和绿色愈伤组织 5种外植体进行体细胞胚胎发生的试验 ,其中只有未成熟胚诱导出胚性愈伤组织 ,筛选出1)胚性愈伤组织诱导培养基 :S培养基 +6_BA 0 5mg·L- 1 +KT 0 5mg·L- 1 +2 ,4_D 1 0mg·L- 1 ;2 )胚性愈伤组织保持与增殖培养基 :S培养基 +6_BA 0 2 5mg·L- 1 +KT 0 2 5mg·L- 1 +2 ,4_D 0 1mg·L- 1 ;3)成熟体细胞胚诱导培养基 :S培养基 +ABA 15mg·L- 1 +PEG4 0 0 0 10 0g·L- 1 。以上 3种培养基均需附加蔗糖 30g·L- 1 ,谷氨酰胺 4 5 0mg·L- 1 ,水解酪蛋白 5 0 0mg·L- 1 ,凝胶 (Sigma#) 3g·L- 1 ,pH5 8。 4 )体细胞胚萌发培养基 :S培养基 ,不加任何激素 ,附加蔗糖 2 5g·L- 1 ,凝胶 (Sigma#) 3g·L- 1 ,pH5 8。

日本落叶松自由授粉家系纸浆材材性遗传变异的研究

对12年生日本落叶松自由授粉子代测定林纸浆材材质性状进行了遗传变异分析、遗传参数估计、相关分析及综合评价和选择。结果表明:家系间综纤维素含量、基本密度、早材和晚材纤维长度、早材和晚材壁腔比差异极显著或显著,10g·L-1NaOH抽出物差异也达10%水平显著。各性状受强度或中等强度的遗传控制,对日本落叶松进行家系水平的材性改良具有很大的潜力。木材密度与早、晚材壁腔比、10g·L-1NaOH抽出物呈显著正相关,与综纤维素含量呈显著负相关,与早、晚材纤维长度相互独立;晚材纤维长度与早材纤维长度存在紧密正相关,纤维长度与早材壁腔比存在显著负相关关系,与晚材壁腔比、综纤维素含量和10g·L-1NaOH抽出物相互独立;综纤维素含量与早材壁腔比呈显著负相关,与晚材壁腔比相关不显著;10g·L-1NaOH抽出物与综纤维素含量、早、晚材壁腔比均相互独立。根据对日本落叶松材质性状的综合评价结果,选出最适合作纸浆林培育的249、340、346、217和364号家系。

干旱胁迫下柠条锦鸡儿叶片SSH文库构建及CkWRKY1基因克隆

为研究柠条锦鸡儿抗旱的分子机制,挖掘干旱响应相关基因,成功构建干旱胁迫下柠条锦鸡儿叶片的抑制性差减杂交(SSH)文库,获得1286条高质量的EST序列,平均长度475bp,拼接得到Unigenes645条。对这些Unigenes进行Blast比对注释后发现很多抗旱相关基因,例如LEA蛋白、DHN蛋白编码基因,MYB、bZIP、WRKY、NAC和bHLH转录因子等。通过RACE技术克隆其中1个WRKY转录因子的cDNA全长,命名为CkWRKY1,GenBank登录号为JX987095。CkWRKY1编码330个氨基酸的蛋白质,氨基酸序列中有1个"WRKYGQK"的WRKY转录因子家族保守序列,属于第Ⅱ类WRKY转录因子。利用实时荧光定量PCR技术检测发现,CkWRKY1基因在干旱处理后mRNA的表达水平明显上升,预示该转录因子可能与柠条锦鸡儿抗旱的分子机制相关。

杨树——林木基因组学研究的模式物种

林木植物是大多数生态系统中的主要生命形式,在所有陆地生态系统中具有最大的生物量和生物生产力,因此它具有重要的经济及生态价值。林木植物特有的多年生习性使其生物学研究相对困难,因此需要寻找一种适用于遗传学及分子生物学方法做精细分析的模式植物。杨属(Populus)植物作为林业研究的模式植物,具有优良的实验特性:容易进行种间杂交和无性繁殖;生长迅速,并已建立完善的遗传转化系统;基因组相对较小,约450～550Mbp;易于进行遗传研究;适应性强,生长速度快,丰产性强。自2002年起,美国能源部与多家研究机构正式启动了杨属植物基因组计划,目前已接近完成。本文综述了模式植物杨树及其基因组学的研究进展。