促进先天性心脏病婴儿术后直接母乳喂养的证据应用

目的:将促进先天性心脏病婴儿术后直接母乳喂养的证据应用于临床并评价其应用效果,为护理人员开展循证实践及证据应用与临床转化提供思路。方法:遵循复旦大学循证护理中心的“证据临床转化模式”,总结促进先天性心脏病婴儿术后直接母乳喂养的相关证据,制定相应的临床审查指标,逐条审查并分析障碍因素,构建实施策略并进行实践变革。结果:与基线审查相比,护士对审查指标的执行率及证据相关知识的知晓度、直接母乳喂养维持率、纯母乳喂养及母乳喂养(包括纯母乳喂养和混合喂养)的维持率、母亲母乳喂养自信心评分得到显著提高(P<0.01)。结论:促进先天性心脏病婴儿术后直接母乳喂养的证据应用在规范护士行为,提高护士对证据相关知识的掌握度、提高先天性心脏病婴儿术后直接母乳喂养维持率、纯母乳喂养及母乳喂养的维持率、母亲母乳喂养自信心等方面存在临床意义。

器官系统课程与传统教学体系的融合在省属医学院校的实践

扬州大学针对5年制临床医学本科专业,将器官系统课程融入传统课程体系,在整合式教学中培养医学生的专业知识、临床技能、人文关怀及创新能力。学校在课程设置、教学组织、效果评价、质量保障方面建立了一套教学运行机制,对提高医学生的培养质量具有重要意义。

重组可溶性MHCI类相关蛋白A对NK细胞生物学活性的影响

目的:研究体外重组可溶性MHCI类相关蛋白A(sMICA)对NK细胞杀伤靶细胞活性、分泌IFN-γ、增殖和凋亡的影响。方法:将重组sMICA蛋白与人外周血NK细胞相互作用过夜后,流式细胞仪检测NK细胞杀伤K562靶细胞的能力;ELISA检测培养上清IFN-γ浓度;MTS/PMS法检测sMICA对NK细胞增殖的影响;给NK细胞标记Annexin V和碘化丙啶检测凋亡情况。结果:可溶性MICA抑制NK细胞杀伤K562细胞的活性,下调IFN-γ的分泌,却对NK细胞的增殖和凋亡没有影响。结论:肿瘤细胞表面脱落的sMICA抗原可通过抑制NK细胞活性而逃逸机体的免疫监视功能。

省属综合性大学卓越医师培养的探索

医学院校结合自身办学资源和特色,提出相应的卓越医师培养目标及实施模式,为培养具有行业适应能力的医生提供重要平台。文章就扬州大学卓越医师的培养目标、实施模式、保障措施进行阐述,总结并分析实践过程中遇到的问题,对进一步落实卓越医师培养计划具有重要意义。

树突状细胞上调MHCI类相关抗原A表达对NK细胞活性的影响

目的:观察单核细胞、未成熟和成熟树突状细胞(DCs)表达MHCI类相关抗原A(MICA)的情况,以及DCs表达MICA后对NK细胞活性的影响。方法:用流式细胞术分别检测单核细胞、未成熟DC(iDCs)以及LPS、TNF-α、CD40L、IL-15和IFN-α分别刺激的成熟DCs表面MICA的表达,并观察DCs表达MICA后对NK细胞表达CD69、细胞毒活性和分泌IFN-γ的影响。最后用流式细胞术检测重组NKG2D/Fc蛋白和抗IL-12单克隆抗体(mAb)对DCs激活NK细胞的影响。结果:单核细胞不表达MICA,iDCs低表达MI-CA。LPS、TNF-α和CD40L对DCs表达MICA无影响;但IFN-α和IL-15可促进DC上调MICA表达。DCs表达MICA后可促进NK细胞表达CD69、分泌IFN-γ、杀伤K562细胞。NKG2D/Fc蛋白可抑制NK细胞的杀伤活性和分泌IFN-γ;而抗IL-12mAb仅抑制IFN-γ分泌。结论:MICA在DCs表面的表达受局部微环境影响,且DCs表达MICA后可增强NK细胞的活性。

两种不同HLA-B分子对NK细胞表面受体表达的研究

目的 :探讨两种HLA B分子 (HLA B5 1和HLA B39)对NK细胞表面活化性受体CD16和抑制性受体KIR3DL1表达的调节。方法 :采用流式细胞仪检测NK细胞分别与转染HLA B5 1和HLA B39分子的K5 6 2细胞相互作用后 ,CD16和KIR3DL1的表达情况。结果 :外周血淋巴细胞与K5 6 2细胞作用 2 4小时后 ,CD5 6 +CD16 +细胞数、KIR3DL1+细胞数均明显增加。与表达HLA B39的K5 6 2细胞相比 ,表达HLA B5 1的K5 6 2细胞与外周血淋巴细胞作用后 ,CD5 6 +CD16 +细胞数、KIR3DL1+细胞数均明显下降。结论 :NK细胞杀伤靶细胞时 ,活化性受体CD16表达上调后会伴有抑制性受体KIR3DL1的上调 ;HLA B5 1分子表达在K5 6 2细胞后 ,表达外源性HLA B5 1分子的K5 6 2细胞与NK细胞作用 ,NK细胞表面受体KIR3DL1的表达可下调 。

用PCR-SSP方法分析南方汉族人群MICA基因多态性

目的 调查南方汉族人群MICA基因外显子2-6的多态性。方法 采用聚合酶链反应／序列特异性引物（PCR-SSP）方法，调查113例江苏省扬州地区汉族正常人群MICA等位基因的分布情况。结果 共检测出18个MICA等位基因，最常见的3种等位基因分别是MICA＊008（23．0％），MICA＊010（17．6％）和MICA＊002／020（11．2％），最罕见的3种等位基因是MICA＊042（0．4％）。MICA＊045（1．3％）和MICA044（1．3％）。结论 中国南方汉族人群MICA等位基因分布频率具有自己的种族特异性。

结肠癌患者单核或树突状细胞MICA的表达及其与NK细胞活性的关联

目的:观察结肠癌患者单核或树突状细胞是否表达MHCⅠ类相关抗原A(MICA),并分析MICA+单核细胞的频率是否与患者体内NK细胞的活性相关联。方法:首先利用流式细胞仪检测MICA在外周血单核细胞和由单核细胞诱导而来树突状细胞(DCs)上的表达;并用IL-15和IFNα-刺激树突状细胞,观察MICA表达的变化;然后检测患者外周血NKG2D+、CD16+、CD69+NK细胞的频率及NK细胞的杀伤活性;最后分析MICA+单核细胞的频率是否与NK细胞表达NKG2D及其杀伤活性关联。结果:与健康个体相比,结肠癌患者MICA+单核细胞的频率无显著变化。未成熟DCs表达MICA,但受IL-15和IFNα-刺激后,结肠癌来源的DCs表面MICA的表达无显著上调。结肠癌患者外周血NKG2D+、CD69+NK细胞的频率显著降低,NK细胞的杀伤活性显著降低,而CD16+NK细胞的频率无明显变化。结肠癌患者MICA+单核细胞的频率与NK细胞表达NKG2D无明显关联,但与NK细胞杀伤靶细胞时CD107a的表达正相关。结论:结肠癌患者体内单核细胞表达MICA与NK细胞表达NKG2D无关,但高频率MICA阳性的单核细胞与NK细胞的抗肿瘤活性正相关。

医学本科生导师制在省属综合性大学的实践与思考

本科生导师制是辅助卓越医学人才培养、改革人才教育模式及促进教师素质提高的一种重要手段。文章就扬州大学临床医学专业本科生导师制的实施模式及成效进行阐述,总结和分析影响导师制效果的因素,对进一步完善导师制具有重要意义。

课程思政融入机能实验学教学的思考和探索

机能实验学教学改革在目前的医学教育中倍受重视,其改革成效在一定意义上直接影响着高校医学生的职业素质和医学教育发展。课程思政是医学生开展思想政治教育的有益补充,贯穿教育教学的全过程。针对机能实验学课程的目的和教学特色,将课程思政融入机能实验课教学是一种相辅相成的教学方式。文章总结了课程思政与机能实验学教学整合的重要性,思考并探索了将课程思政融入机能实验学教学的内容和方式,以实现全过程育人和全方位育人的目标,培养卓越的综合性医学人才。

基础医学实验教学示范中心的建设成效与思考

基础医学实验教学示范中心的建设是教育部实施"高等学校本科教学质量与教学改革工程"的重要内容之一。对基础医学实验教学示范中心的建设内容和建设成效进行归纳和总结,并就建设过程中出现的问题进行分析,从而优化实验示范中心内涵建设,最终提高基础医学的实践教学质量,为培养高素质的医学人才奠定基础。

强直性脊柱炎发病的遗传因素研究进展

强直性脊柱炎是以遗传因素占主导地位的疾病 ,由 B2 7和其他相关基因参与。本文就其在遗传因素上的病因综述了 HL A- B2 7与强直性脊柱炎的关联、家系研究、动物模型、全基因组扫描和其他相关基因方面的研究进展。

MICA基因研究进展

MICA基因是非经典的 HL A- I类基因 ,位于 HL A - B位点着丝粒端的 46 kb左右。由 6个外显子构成 ,具有高度的多态性。分子结构与经典的 I类分子重链相似 ,包括 3个胞外结构域 :α1、α2和α3,加上跨膜区和胞质尾 ,但它不与β2 m结合。MI-CA大量表达在上皮细胞和纤维母细胞的表面 ,却在 T、B细胞表面不表达。受到热应激后表达量大大增强 ,但受 IFN-γ刺激后不能上调表达。其功能主要激活 Vδ1γδT细胞 ,在机体的免疫监视中发挥作用。并且发现 MICA存在与某些自身免疫性疾病(如白塞氏病、强直性脊柱炎 )

KIR研究进展

NK细胞能够识别“自己”和“非己”的特性 ,主要通过其表面的激活性受体和抑制性受体来执行。杀伤细胞免疫球蛋白样受体是表达在NK细胞和部分T细胞的表面的一类受体 ,本文拟从KIR的基因结构、多态性、KIR与MHCⅠ类分子的相互作用、胞内信号传导及其功能等方面作一综述。

两种HLA-B分子对外周血单个核细胞分泌细胞因子的影响

为了解HLA B2 7和B39分子对外周血单个核细胞 (PBMC )分泌IFN γ和TNF α的影响。我们将外源HLA B 2 70 4和B 390 5 2基因分别表达在HLAI类分子缺陷的K5 6 2细胞表面 ,与PBMC作用 12h后 ,用ELISA法检测IFN γ和TNF α的含量。结果显示 :HLA B2 7分子能显著抑制PBMC分泌IFN γ ,而对TNF α分泌的影响不显著 ;而HLA B39表达于K5 6 2细胞后 ,均不能影响IFN γ、TNF α分泌。提示HLA B2 7分子与HLA

固相MHC Ⅰ类相关抗原A刺激的NK细胞对树突状细胞活性的影响

目的:观察固相MHC I类相关抗原A(iMICA)刺激的NK细胞对树突状细胞(DCs)活性的影响。方法:首先取新鲜分离及受固相MICA刺激的异体NK细胞,或IL-2、及IL-2联合iMICA刺激的自体NK细胞与未成熟DCs(iDCs)按5∶1比例孵育24 h后,用流式细胞术(FCM)分析HLA-DR+或CD86+频率的DCs。然后取自体NK细胞以iMICA刺激后,按1∶5的比例与iDCs孵育24 h后,FCM检测DCs上HLA-DR、CD86的表达。最后在NK细胞与DCs的共培养体系中加入抗IFN-γ抗体,观察DCs上HLA-DR、CD86表达的变化。结果:当NK细胞与iDCs孵育比例为5∶1时,异体新鲜分离的与自体活化的NK细胞均能杀伤iDCs;而iMICA无协同作用。当NK细胞与iDCs孵育的比例为1∶5时,iMICA刺激的NK细胞可促进DCs表达HLA-DR和CD86;而加入抗IFN-γ抗体可抑制NK细胞诱导DCs表面HLA-DR和CD86表达的上调。结论:异体新鲜分离的或自体活化的NK细胞杀伤iDCs时,无需iMICA的刺激;但当NK细胞的数目明显低于iDCs时,iMICA可刺激NK细胞分泌IFN-γ促进DCs成熟。

脂多糖对B细胞的活化作用及机制的初步研究

目的观察TLR4配体脂多糖(LPS)对B细胞功能影响及相关的信号转导通路。方法利用免疫磁珠法分选小鼠脾脏CD19+B细胞,体外用LPS刺激后,CBA(cytometric bead array)法检测B细胞分泌的Ig(immunoglobulin)亚型;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测B细胞表型;CBA法检测培养上清中细胞因子IL-6、IL-10、IL-12p70、TNF浓度。利用ERK、JNK、p38MAPK和NF-κB信号转导抑制剂检测B细胞内细胞因子分泌的信号转导通路。结果 LPS可以诱导B细胞产生IgG1-κ和IgM-κ抗体,上调B细胞表面CD40、CD80、CD86和MHCⅡ类分子的表达,促进IL-6、IL-10和TNF的高分泌。JNK、p38MAPK和NF-κB信号转导通路调控B细胞IL-6、IL-10和TNF的分泌。结论 LPS可以通过诱导抗体产生、上调共刺激分子表达和促进细胞因子分泌等多方面调节B细胞功能。

胃癌组织中EGFR和COX-2表达的意义及其相关性

目的：探讨表皮生长因子受体（EGFR）和环氧化酶-2（COX-2）的表达与胃癌侵袭、转移因素的关系以及EGFR与COX-2在胃癌组织中表达的相关性．方法：用免疫组化的方法检测61例胃癌组织和相应的20例癌旁组织石蜡切片中EGFR、COX-2表达情况；用Western blot方法检测10例胃癌组织和相应的癌旁组织中EGFR、COX-2蛋白的表达．结果：免疫组化检测胃癌组织中EGFR及COX-2的阳性表达率分别为36．07％、59．02％均明显高于癌旁组织的0％、25％（x^2=9．903，P〈0．01：x^2=6．972，P〈0．01）；COX-2表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和病理分化程度有关（x^2=6．333，P〈O．05；x^2=5．588，P〈0．05；x^2=8．826，P〈0．01；x^2=5．653，P〈0．05）．EGFR表达与淋巴结转移和TNM分期有关（f=10．648，P〈0．01;x^2=4．150，P〈0．05）．EGFR与COX-2表达呈明显相关（r=0．316，P〈0．05）．Western blot方法检测胃癌组织中EGFR及COX-2的蛋白表达高于癌旁组织（35．89±12．50vs15．14±2．15，P〈0．01：51．29±23．42vs27．65±7．42．P〈0．05）．结论：EGFR、COX-2在胃癌组织中高表达，EGFR、COX-2的表达与胃癌的侵袭、转移密切有关，COX-2表达与EGFR显著相关．

慢性粒细胞白血病bcr-abl融合基因克隆与真核细胞表达的研究

目的 为研究慢性粒细胞白血病 (CML)的肿瘤基因疫苗 ,克隆和表达CML的bcr abl融合基因片段。方法 根据bcr abl(b3a2 )融合基因序列自行设计一对寡核苷酸引物 ,以CMLK5 6 2细胞株的总RNA为模板 ,通过RT PCR扩增包含bcr abl融合位点周围 4 5 0bp的基因片段 ,并将其克隆进pGEM Teasy载体。经序列测定证实其阅读框架正确后 ,将bcr abl融合基因片段正向插入真核细胞表达载体 pcDNA3 1。以脂质体介导重组质粒pcDNAbcr abl转染中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞 ,用间接免疫荧光法 (IFA)检测基因表达情况。结果 成功构建了包含融合位点基因片段的bcr abl融合基因真核细胞表达载体 pcDNAbcr abl,pcDNAbcr abl转染的CHO细胞的免疫荧光强度高于K5 6 2阳性对照细胞。结论 bcr abl融合基因片段在真核细胞中能高效表达 ,pcDNAbcr abl真核细胞表达载体的构建为进一步研究bcr abl融合基因在CML防治中的作用奠定了基础。

胃癌组织VEGF表达及血清VEGF浓度与DCs浸润及其活性的关联分析

目的:观察胃癌患者肿瘤组织VEGF表达和血清VEGF水平与肿瘤浸润DCs密度的关联,胃癌组织VEGF阳性DCs频率与临床病期的关联,以及胃癌患者外周血单核细胞来源DCs表面HLA-DR和CD86表达情况。方法:首先利用免疫荧光法检测胃癌组织和癌旁组织内CD11c和VEGF的表达,以及酶联免疫吸附实验测定血清VEGF的浓度。其次分离胃癌患者和健康个体外周血单个核细胞,利用GM-CSF和IL-4体外诱导为DCs,流式细胞仪检测DCs表面HLA-DR和CD86的表达。最后用重组VEGF蛋白体外刺激DCs,观察VEGF对DCs表达CD86的影响。结果:胃癌细胞VEGF表达强度与肿瘤内DCs浸润密度呈负相关,血清VEGF浓度与肿瘤内DCs浸润密度无关,胃癌组织内VEGF阳性DCs频率与胃癌进展正相关,胃癌患者外周血单核细胞诱导DCs表达HLA-DR和CD86降低,VEGF可降低DCs表面CD86的表达。结论:胃癌组织可通过分泌VEGF抑制DCs活性而介导免疫逃逸,胃癌组织内浸润的DCs可分泌VEGF参与病情进展。