载脂蛋白E及其基因变异在脂蛋白肾病发病中的作用

目的 :研究载脂蛋白E(apoE)及其遗传变异在中国人脂蛋白肾病 (LPG)发病中的作用。 方法 :收集本研究所收治的 5例肾活检病理明确诊断的LPG患者 ,对临床资料进行分析 ;免疫比浊法检测血浆apoE水平 ,PCR RFLP法研究apoE基因的遗传变异。 结果 :5例患者均以浮肿、尿检异常起病 ,肾功能正常 ;所有患者均伴有不同程度的贫血、低蛋白血症和肾脏体积增大 ;血清甘油三酯水平显著增高 ,而总胆固醇正常或轻度增高 ;apoB、apoE水平也明显增高 ,而apoA 1正常 ;血清蛋白电泳显示α2、β 球蛋白增高。ApoE基因型分别为ε2 /3、ε3/3、ε3/4 ;另两患者为母子 ,RFLP图谱中均显示相同的异常条带 ,与apoETokyo型变异条带相似。 结论 :中国人LPG患者血清apoE水平明显升高 。

IgA肾病患者甘露糖结合蛋白基因多态性的功能研究

探讨IgA肾病 (IgAN)患者甘露糖结合蛋白 (MBP)基因第 5 4号密码子基因多态性对其功能的影响 ,阐明MBP基因多态性与IgAN免疫病理多样性之间联系的本质 .按照MBP基因型分别选取 5 8例IgAN患者 ,其中 30例为单纯IgA伴C3沉积 (A组 ) ,2 8例为IgA、IgG、IgM伴C3、C1q沉积 (AGM组 ) ;另选取 32名健康成人作为正常对照组 .用PCR RFLP方法对所有个体MBP基因型进行分析 ,同时从各个体获得外周血清 ,应用ELISA双抗夹心法测定血清MBP浓度 ,分析比较MBP基因多态性与MBP血清浓度的关系 .①正常对照组中 ,MBP基因GGC/GGC型和GGC/GAC型群体血清MBP浓度分别为 (1711± 177)ng/mL (n =19)、(2 93± 6 3)ng/mL (n =11) ;IgAN患者A组和AGM组GGC/GGC型、GGC/GAC型血清MBP浓度分别为(16 2 2± 194 )ng/mL (n =16 )、(2 71± 4 6 )ng/mL (n =12 )和 (15 12± 2 11)ng/mL (n =17)、(2 10± 4 2 )ng/mL (n =10 ) .上述各人群中 ,GGC/GGC型与GGC/GAC型血清MBP水平存在显著性差异 (P <0 .0 0 0 1) ,GGC/GAC型MBP水平约为GGC/GGC型的 1/6～ 1/8.各人群中由于GAC/GAC型极罕见 ,因此MBP水平无统计学意义 ,但该基因型个体血清MBP水平极低且均相互接近 (<10ng/mL) ,远低于另两种基因型血清MBP的平均水平 .②正常对照组。

纤溶酶原激活剂抑制物的基因多态性与狼疮性肾炎肾小球的微血栓

目的 :探讨纤溶酶原激活剂抑制物 1(PAI 1)基因启动子区 - 6 75bp4G/ 5G多态性与狼疮性肾炎 (LN)肾小球微血栓形成的关系。 方法 :选取 10 1例LN患者 ,所有患者均行经皮肾活检。其中 46例患者伴有肾小球毛细血管袢内微血栓 (T组 ) ,5 5例患者不伴血栓 (non T组 )。应用PCR SLP法分析基因型。同时收集肾活检时各患者的临床资料。正常对照组包括 12 8名健康成人。 结果 :①T组血清肌酐 (SCr)水平显著高于non T组 ,蛋白尿和血尿也较non T组严重 ;但两组间血清抗心磷脂抗体阳性率无差异 ;②PAI I基因 4G/ 4G基因型及 4G型等位基因与T组显著相关 ;LN中 4G/ 4G型患者形成袢内血栓的相对风险率为OR =2 96 ,95 %CI:1 2 6～ 6 92。 结论 :LN肾小球微血栓的形成与PAI I基因 4G/ 5G多态性密切相关。

甘露糖结合蛋白基因多态性与IgA肾病免疫病理类型的关联

目的 :根据甘露糖结合蛋白 (MBP)基因多态性对其功能的影响 ,探讨MBP基因多态性与IgA肾病免疫病理间的联系。 方法 :选取 1 4 7例IgA肾病 (IgAN)患者 ,其中 77例为肾小球单纯IgA伴C3沉积 ,70例为肾小球IgA ,IgG ,IgM伴C3,C1q沉积。使用PCR RFLP方法对MBP基因多态性与IgAN免疫沉积的关系进行了观察。 结果 :①本研究中正常人群MBP基因多态性分布与文献报道的华人及高加索人种接近并无显著差异。②IgAN中大量免疫沉积 (IgA ,IgG ,IgM ,C3,C1q)患者MBP基因GGC/GAC基因型的发生频率明显高于单纯IgA沉积 (IgA ,C3)患者 (41 4 %vs 1 9 5 % ,P <0 0 1 ) ,而GGC/GGC基因型的发生频率明显低于单纯IgA沉积患者 (5 5 7%vs 76 6 % ,P<0 0 1 )。IgAN的大量免疫沉积患者GAC等位基因的发生频率明显高于单纯IgA沉积患者 (0 2 36vs 0 1 36 ,P <0 0 5 ) ,而GGC等位基因的发生频率明显低于单纯IgA沉积患者 (0 76 4vs0 86 4,P <0 0 5 ) ,GAC等位基因与IgAN的大量免疫沉积明显相关 (OR =1 95 ,95 %CI:1 0 6～ 3 5 8) 结论 :IgAN免疫病理表现多样性受基因背景的影响 。

组织切片肾小球微分离技术在肾脏病研究中的应用

目的 :建立组织切片肾小球微分离技术 ,并将其应用于肾脏病分子病因学的研究。 方法 :选取肾脏病患者的肾活检组织石蜡切片。选取结构正常的肾小球、节段硬化肾小球和球性硬化肾小球分别进行肾小球微分离。一步法提取微分离肾小球DNA。PCR 微型凝胶电泳检验DNA质量。质量合格DNA应用于高保真PCR扩增TGF βⅡ型受体基因片段和聚丙烯酰胺凝胶电泳。 结果 :在成功获取肾小球丝球体的同时 ,相邻组织肾小囊壁保留完好 ;微分离小球一步法提取的DNA合格率 87 5 % ;各样本经高保真PCR扩增后 ,杂带少 ,目的条带清晰。密度随肾小球硬化程度递减。 结论 :本研究利用常规肾活检组织石蜡切片建立了肾小球微分离技术 ,进而用微分离肾小球提取DNA成功地进行了DNA扩增 。

人类免疫缺陷病毒相关性肾病的发病机制

大量流行病学资料表明，人类免疫缺陷病毒相关性肾病（ｈｕｍａｎｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓａｓｏｃｉａｔｅｄｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ，ＨＩＶＡＮ）是ＨＩＶ１感染常见的并发症之一［１］。在黑人中，约有１０％的ＨＩＶ感染者伴有ＨＩＶＡＮ，ＨＩ...

促肾上腺皮质激素治疗肾性蛋白尿的研究

促肾上腺皮质激素(ACTH)是脑垂体前叶分泌的神经内分泌多肽。它是体内下丘脑-垂体-肾上腺轴和黑素皮质素系统的重要组成部分。ACTH具有促进肾上腺皮质激素分泌和皮质增生、降低血脂、刺激胰岛素分泌、调节免疫和神经系统功能等作用,曾被广泛用于治疗小儿肾病综合征(NS)。近来越来越多的临床证据显示,ACTH能够有效缓解难治性NS患者蛋白尿,但迄今大多是单中心非随机临床研究。ACTH疗效可能与其促进糖皮质激素分泌、降低血脂、调节免疫、保护足细胞以及调节胆碱能抗炎通路有关,但迄今尚不明确;需要综合多种研究手段进一步研究阐述。

GSK3β促进TGF-β1诱导的肾小管上皮HK-2细胞纤维化

目的阐明GSK3β对于肾脏小管间质纤维化的作用。方法以TGF-β1诱导的体外肾小管间质纤维化模型为研究对象,以GSK3β特异抑制剂LiCl处理细胞和不同GSK3β表达质粒(野生型GSK3β表达质粒GSK3β-WT;第9位点上丝氨酸突变为丙氨酸,由此不能再被磷酸化失活而具有固有活性的GSK3β突变质粒GSK3β-S9A;第85、86位点上赖氨酸突变为丙氨酸、失去激酶活性的GSK3β突变质粒GSK3β-KD)转染细胞,观察肾脏纤维化的标志性分子纤维连接素蛋白(fibronectin,FN)表达水平的改变,以及对TGF-β/Smad信号通路的作用。结果 LiCl增加HK-2细胞GSK3β的磷酸化,抑制GSK3β的活性,同时降低了细胞基础水平和TGF-β1诱导的FN表达。过表达的GSK3β-WT增强TGF-β1诱导的FN表达,而这种效应在GSK3β-S9A转染细胞更为显著。过表达GSK3β-KD抑制TGF-β1诱导的FN表达。分析对TGF-β/Smad信号通路的作用,LiCl可以抑制TGF-β1诱导的Smad3磷酸化,而对Smad2磷酸化水平无影响。同时,LiCl也不改变Smad3的总蛋白表达。结论 GSK3β通过TGF-β1/Smad3信号通路促HK-2细胞纤维化,抑制GSK3β可以抗纤维化。

重视班级管理培养学生生命自觉意识探析

新的教育理念越来越强调提升学生的生命自觉意识,提高学生的自我学习和自我管理意识,使学生真正成为班级的主人。文章分析什么是生命自觉意识,探讨在班级管理中如何培养学生的生命自觉意识。

“四问”直击“常见的量”教学底线

数学教师都要知道一个道理,即学生对数学问题的研究和学习都是以问题为开端的。问题的技术含量与巧妙性决定教学效果,也对学生思维品质的提升起着至关重要的作用。

基于新课标的数学教学生活化研究

数学教学生活化可以使学生认识到学习数学的意义,对数学有更深刻的了解。具体策略上,教师要转变教学观念,让教学更贴近生活,要引导学生从数学角度观察事物,要注重自身素质的提高,要增强学生的学习自信。

甘露糖结合蛋白基因多态性在IgA肾病肾组织免疫沉积多样性形成中的作用

目的 探讨甘露糖结合蛋白 (mannose- binding protein,MBP)基因第 5 4号密码子 GGC→GAC变异在 Ig A肾病 (Ig A nephropathy,Ig AN)患者肾小球免疫沉积多样性形成中的作用。方法 选取140名正常健康成人 ;147例 Ig AN患者 ,其中 77例为单纯 Ig A伴 C3沉积 (A组 ) ,70例为 Ig A、Ig G、Ig M伴 C3、C1q沉积 (AGM组 )。使用 PCR- RFL P法分析 MBP基因型 ;同时应用 EL ISA法对 5 8例 Ig AN患者和 32名正常人血清 MBP浓度进行了测定 ,分析比较 MBP不同基因型与其血清浓度之间的关系。结果(1) MBP基因 GAC型等位基因与 Ig AN的大量免疫沉积明显相关 (OR=1.95 ,95 % CI:1.0 6～ 3.5 8)。 (2 )无论在 A组还是在 AGM组 ,GAC等位基因携带者中起病时有前驱感染史者均显著多于 GGC纯合子(P<0 .0 5 )。 (3)不同人群中 ,GGC/ GGC型血清 MBP水平均明显高于 GGC/ GAC型 (P<0 .0 0 0 1) ,GAC/GAC型血清 MBP水平接近于 0。结论 Ig AN患者肾小球免疫沉积物的类型与 MBP基因多态性密切相关 ,不同个体先天性防御屏障功能的差异在 Ig AN肾小球免疫沉积多样性的形成中发挥了重要作用。

PAI-1基因和纤维蛋白原β链基因多态性与狼疮性肾炎肾小球微血栓的关系

目的 探讨纤溶酶原活化剂抑制物 - 1(plasminogen activator inhibitor- 1,PAI- 1)基因和纤维蛋白原β链基因多态性与狼疮性肾炎 (lupus nephritis,L N)肾小球微血栓形成之间的相关性。方法 选取10 1例 L N患者 ,依据肾活检组织肾小球微血栓的有无 ,将患者分为两组 :L N伴血栓 (L N+T)组 46例 ;不伴血栓 (L N- T)组 5 5例。应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性和聚合酶链反应 -序列长度多态性技术分别分析两候选基因的基因型。正常对照组为 12 8名健康成人。结果 (1) PAI- 1基因 4G/ 4G基因型和4G等位基因与 L N+T组显著相关 ;L N中 4G/ 4G型患者发生肾小球袢内血栓的相对风险率的比值比(odds ratio,OR)为 2 .96 ,95 %可信区间 (confidence interval,CI) :1.2 6～ 6 .92 ;(2 )纤维蛋白原 β链基因G/ A+A/ A基因型和 A型等位基因与 L N+T组显著相关 ;L N中 A型等位基因携带者发生肾小球袢内血栓的相对风险率为 OR=2 .44 ,95 % CI:0 .98～ 5 .5 9;(3) L N患者若同时兼有上述两基因的血栓易感基因型 ,其发生肾小球微血栓的相对风险率明显增加 ,OR=4.5 ,95 % CI:1.34～ 15 .12 ;血栓易感基因型的混合病因分值 (4 5 .98% )也高于各自单独的病因分值 (PAI- 1基因 4G/ 4G型为 31.6 7%、纤维蛋白原

Genetic variation of mannose-binding protein associated with glomerular immune deposition in IgA nephropathy

OBJECTIVE: To investigate the relationship between codon 54 gene polymorphism of the host defense molecule, mannose-binding protein (MBP), and the patterns of glomerular immune deposition in IgA nephropathy (IgAN). METHODS: IgAN patients with different patterns of glomerular immune deposition were selected and divided into two groups. Group A consisted of 77 patients with glomerular IgA and C3 deposits, and Group AGM consisted of 70 patients with glomerular IgA, IgG, IgM, C3 and Clq deposits. Clinical features and laboratory relevant data of all patients were collected. One-hundred and forty healthy adults were recruited as normal controls. The MBP gene codon 54 GGC/GAC polymorphism was investigated by using polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism. RESULTS: The genotype frequency of GGC/GAC heterozygotes was significantly higher in Group AGM as compared with that of Group A (41.4% vs 19.5%, P

脂蛋白肾病患者的临床表现及病理学特征

目的 进一步阐明脂蛋白肾病患者的临床特征及肾活检组织学、免疫组织化学和超微结构特点。方法 回顾性分析7例经肾活检病理及免疫病理证实为脂蛋白肾病患者的临床表现、肾脏损害的实验室检查特征及血脂检测结果,并对肾活检组织学免疫组织化学特点及超微结构改变进行分析。结果 全部患者都有大量蛋白尿及镜下血尿,均存在不同程度的贫血。血清甘油三酯及aooB、apoE水平显著升高,总胆固醇正常或轻度增高。B超检查全部患者双肾体积均增大。肾活检组织光镜下肾小球体积明显增大,襻高度扩张,襻内见层状改变的大小不同、多少不等的“栓子”。油红O染色阳性。本组7例患者中4例存在与肾小球病变不相符的小管-间质病变和血管病变。免疫荧光染色证实“栓子”富apoB、apoE,超微结构观察证实“栓子”内含颗粒状的嗜饿脂质空泡。结论 本组脂蛋白肾病患者除存在与文献报告相同的临床特征及组织学、超微结构特点外,尚发现既往文献末曾报道过的一些临床病理特点。