麦芽糖、NAA及ABA对华北落叶松体细胞胚成熟及生根的影响

研究了麦芽糖、NAA、ABA对华北落叶松体细胞胚发生及体细胞胚根发生和再生完整植株的影响。结果表明 :在胚性愈伤组织继代、增殖过程中 ,以 0 5mg·L- 1 的NAA代替 2 ,4 -D后 ,有利于体细胞胚的成熟和根发生。在ABA 16mg·L- 1 时 ,产生的华北落叶松体细胞胚 ,能够再生良好植株 ,ABA大于 2 0mg·L- 1 时对体细胞胚根的发育不利。在含 3%麦芽糖、4 %PEG4 0 0 0活性炭 1g·L- 1 的成熟培养基上 ,华北落叶松每克愈伤组织子叶胚达 10 6 7个 ,生根率达 5 7 89% ;显著地提高了成熟体细胞胚及其根的质量。

落叶松不同类型胚性和非胚性愈伤组织的生理生化差异

以华北落叶松继代、增殖培养的不同类型的胚性及非胚性愈伤组织为材料 ,测定其氨基酸、糖类、酚酸、激素以及离子的含量 ,结果表明 :氨基酸含量的差异十分明显 ,质地硬的非胚性愈伤组织中 18种游离氨基酸含量为胚性愈伤组织的 2倍以上 ,经ABA处理后 ,胚性愈伤组织中多糖及邻苯二酚含量急剧升高 ;三糖含量与不同基因型密切相关 ;乙烯释放量在非胚性愈伤组织中高于胚性愈伤组织 ;金属离子CO+ + 的含量 ,胚性愈伤组织是非胚性愈伤组织的 12倍 ,胚性愈伤组织中铵态氮 (NH+4)与硝态氮 (NO-3)的比值是非胚性愈伤组织中的 10倍以上 ;实验结果为进一步探讨针叶树体细胞胚胎发生的生理生化机理提供依据。

应用311-A最优回归设计研究ABA、PEG4000及AgNO_3对落叶松体细胞胚发生数量的影响

采用三因素多项式回归 311 A最优设计方法对影响落叶松体细胞胚发生数量的ABA、PEG40 0 0和AgNO3的用量进行了研究 ,建立了华北落叶松正常体细胞胚发生数量与ABA、PEG40 0 0和AgNO3 的数学模型 ,分析了落叶松体细胞胚发生数量试验因子的主效应和互作效应 ,优选了落叶松体细胞胚发生数量最佳结果的最佳技术组合方案为ABA18 9138mg/L ,PEG40 0 0 88 80 0 7g/L与AgNO310 .75 13mg/L时 ,最佳体细胞胚数量应为 10 7 5 2 78个子叶胚 /g .callus。实验结果表明 :该方法是针叶树体细胞胚胎发生过程中 ,主要激素种类与浓度配比、处理组合 ,科学、合理的培养基优化途径。

落叶松胚性愈伤组织诱导培养基中激素的311-A最优回归设计筛选

采用 311- A最优回归设计 ,对落叶松胚性细胞诱导中激素种类与浓度优化筛选 ,建立胚性愈伤组织量依 2 ,4 - D、BA、KT的多项式回归方程。分析了试验因子的主效应和互作效应 ,借助此方程获得了 3因子的最佳配比组合以及最佳胚性愈伤组织发生量。 2 ,4 - D为 1.2 9mg· L-1、BA为0 .39mg· L-1和 KT为 0 .58mg· L-1时 ,落叶松胚性愈伤组织的诱导量可达到 13.9317mg·个 -1(外植体 )。结果表明 ,这是一种简便、实用。

华北落叶松体细胞胚胎发生及遗传转化实验系统的建立(简报)

华北落叶松(Larix principis-Rupprechtii)是我国北方中高山地区重要的针叶速生用材树种,进行其体细胞胚胎发生和植株再生的研究,在针叶树无性快速繁殖及基因工程育种上有其特殊的用途,既可为针叶树无性系林业提供产业化途径,也可作为目的基因遗传转化实验系统。针叶树的基因转化相对较难,再生更属不易,Lelu等报道过杂种落叶松与欧洲落叶松体细胞胚胎发生方面的研究;而我国尚未见有落叶松体细胞胚胎发生的研究报道。

杨树内生细菌P22、S16对近缘种植物生根和生长的影响

以从白杨杂种741杨内生菌中提取得到的菌株P22和S16为研究对象,通过16S rDNA分子检测证明它们分别属于类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)和寡养食单胞菌(Stenotrophomonas sp.)。研究了菌株P22和S16对促进近缘种植物生根及生长的能力。结果表明:菌株P22和S16对三倍体毛白杨组培苗、欧美杨107和旱柳硬枝插条生根和生长促进作用显著。证明这2株菌株为植物促生菌,可能具有固氮和诱导产生植物激素的作用,菌株P22的促进生长能力更加显著。

挪威云杉及杂种落叶松稳定胚性细胞系及体胚再生系统的建立(英文)

本文报道了挪威云杉 (Piceaabies)和杂种落叶松 (Larixdeciduas×L .kaempferi)人工授粉种子诱导胚性细胞系及植株的再生。挪威云杉在德国SaxonOre山区被选为对空气污染有抗性的树种并种植在位于Waldsieversdorf的林木遗传育种研究所的种植园中。对挪威云杉测试了几个不同亲本组合的种子形成胚性细胞系的能力。这些云杉种子于 1992 0 1采收 ,含有干燥的成熟合子胚。作为对照 ,相同的亲本组合云杉种子于1993 0 8和 1998 0 8采收 ,合子胚处于成熟中。杂种落叶松则只有一个人工授粉组合 ,大田试验证实幼苗生长良好。分别于 1995和 1996年采收含有未成熟合子胚的未成熟种子。诱导愈伤形成用附加细胞分裂素 (激动素和 或BAP)和生长素 (NAA ,2 ,4 D)及有机氮源 (水解酪蛋白和谷氨酰胺 )的标准培养基 (SPE和MSG) ,于黑暗下培养。尽管在建立培养体系后 5～ 12周产生了大量胚性愈伤组织 ,诱导率超过 2 5 % ,但 1a后只有超过1%的胚性愈伤组织稳定生长。挪威云杉稳定胚性细胞系的数量与成熟合子胚的采收季节及建立细胞系的时间 (8月或 1月 )无关 ,但在 8月收获的合子胚在挪威云杉 5～ 12周后胚性愈伤组织诱导率要高些 ,然而能在悬浮培养中生长及随后成熟体胚能顺利再生植株的稳定胚性细胞系的数量有限。

细胞分裂素和硝酸铵对欧洲云杉不定芽伸长的影响(英文)

报道细胞分裂素和硝酸铵对欧洲云杉不定芽伸长过程的影响。采用5年生的欧洲云杉1个无性系不定芽丛来研究玉米素和硝酸铵对不定芽生长的影响。试验3种诱导类型(玉米素浓度分别为6·84、13·68、20·52μmol·L-1,激动素浓度0·69μmol·L-1,培养4周),玉米素最高浓度处理诱导的伸长芽数量最多,在4个无生长调节剂继代培养过程中,加入了1个硝酸铵浓度逐渐增加的继代培养过程。经不含生长调节剂的低浓度的硝酸铵(2·5mmol·L-1)培养基的继代培养后转入含有细胞分裂素的诱导培养基,下一个继代培养基补充的硝酸铵浓度分别为2·5、7·5、12·5、17·5mmol·L-1,8周(2个继代培养)后转入含有硝酸铵浓度为2·5mmol·L-1的培养基培养。硝酸铵浓度为7·5mmol·L-1的处理可形成数量最多的不定芽,这对于采用不同浓度的玉米素进行诱导的处理结果是一致的,但随着硝酸铵的浓度增至12·5mmol·L-1和17·5mmol·L-1时则不定芽的数量减少。欧洲云杉的胚轴外植体经1次或多次诱导后,细胞分裂素(BA、激动素、玉米素、2iP)促进了不定芽的分化和发育,其中BA由于可诱导产生大量的不定芽而成为最有效的细胞分裂素。玉米素虽然诱导不定芽相对弱一些,却在BA多次诱导后可促进芽的伸长。这对获得具有形成不定芽能力并可扩繁的芽丛非常重要。