透明化三维成像研究艾灸对结肠炎大鼠肠道血管生成的作用

目的应用组织透明化技术观察隔药灸对2-4-6三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的实验性结肠炎大鼠肠道血管生成的影响,从三维水平探讨隔药灸治疗结肠炎的潜在机制。方法采用TNBS灌肠法制备结肠炎大鼠模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸组和抑制剂组,每组8只。隔药灸组采用隔药灸天枢、气海穴治疗;抑制剂组采用10 mg/mL的血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)抑制剂溶液按1 mL/kg体质量进行腹腔注射治疗。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组结肠组织病理学改变;采用CUBIC组织透明化技术对各组大鼠结肠组织进行透明化处理,通过血小板内皮细胞黏附分子1(PECAM-1/CD31)染色标记血小板内皮细胞,采用Imaris三维图像处理软件对结肠血管网络进行三维测量和分析。结果 HE染色结果显示,模型组大鼠结肠形态结构紊乱,黏膜固有层有明显裂隙样溃疡,并有大量炎性细胞浸润;隔药灸组和抑制剂组上述病理改变均减轻,可见新生的黏膜上皮修复。结肠血管网络三维测量和分析结果显示,与正常组比较,模型组结肠组织病理学评分显著升高,结肠平均血管密度增加,分支等级增加,血管直径降低;与模型组比较,隔药灸组和抑制剂组结肠组织病理学评分均显著降低,结肠平均血管密度降低,分支等级降低,血管直径增加,而隔药灸组和抑制剂组无明显差异。结论隔药灸能有效减轻结肠炎大鼠结肠炎症和组织损伤,抑制结肠炎大鼠结肠血管生成,从而发挥对结肠炎的治疗作用。

人口腔鳞状细胞癌发病节点lncRNA的筛选、验证及意义

目的应用微阵列芯片技术检测长链非编码RNA(long non-codingRNA,lncRNA)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中的表达谱,筛选OSCC发病过程中节点lncRNA,研究其表达和临床意义。方法利用lncRNA表达谱芯片,对3例OSCC及对应正常组织的转录本进行高通量筛查,确定OSCC中的lncRNAs和mRNAs差异表达谱。利用lncRNA与mRNA特异性表达的标准化信号强度,构建差异基因共表达网络,挖掘节点基因,分析其表达水平与临床病理特征及患者预后之间的关系。选取部分差异表达的lncRNA,借助qRT-PCR技术对芯片结果进行验证。结果实验共筛选出差异表达lncRNAs2 294条和mRNAs 1 938条。LncRNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1是共表达网络的节点基因,在OSCC组织中低表达,并与患者临床分期、淋巴结转移、远处转移和生存状态有关,低表达lncRNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1 OSCC患者有着较短的无进展生存时间和总生存时间。qRT-PCR验证结果与芯片结果相一致。结论LncRNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10:1有望成为成为OSCC早期诊断、治疗及预后评估的分子标志物。

电针配合药物治疗帕金森病的临床研究

目的观察电针配合药物治疗帕金森病的临床疗效。方法将60例帕金森病患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。对照组采用常规药物治疗,治疗组在对照组基础上采用电针治疗。治疗12周后,观察两组治疗前后统一帕金森病评分量表(UPDRS)评分、帕金森病生活质量调查(PDQ-39)量表评分及步行20 m所需时间和平均步距的变化情况。结果治疗组治疗8、12周后UPDRS评分逐渐下降,步行20 m所需时间逐渐缩短,与同组治疗前比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。对照组治疗4、8、12周后UPDRS评分逐渐升高,与同组治疗前比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗12周后步行20 m平均步距增加,与同组治疗前比较差异具有统计学意义(P<0.05)。对照组治疗12周后步行20 m所需时间明显增加,平均步距明显缩短,与同组治疗前比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。两组治疗8、12周后UPDRS评分、步行20 m所需时间及PDQ-39量表评分比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论电针配合药物是一种治疗帕金森病的有效方法,能改善患者运动症状及生活质量。

基于WOS核心合集数据库探讨中医针灸调节瞬时受体电位通道的研究现状与展望

目的:梳理、探讨中医针灸调节瞬时受体电位(Transient Receptor Potential,TRP)通道的研究现状与发展趋势,并对未来中医针灸调节TRP通道研究进行展望与思考。方法:以《科学引文索引》(Science Citation Index,SCI)数据库网络版(Web of Science,WOS)核心合集数据库为数据源,从文献的国家/地区、文献类型、作者、资金资助机构、研究方向、来源出版物、影响因子、被引频次,以及文献内容中涉及的疾病类型、TRP亚型、穴位、检测方法、动物品系等方面,对WOS核心合集数据库收录中医针灸调节TRP通道研究的文献进行分析与探讨。结果:共检索到96篇文献,57篇纳入分析,主要文献类型是研究论文(article)。中国(包括台湾地区)发表论文数量最多,总IF、总被引频次最高,且发表论文数量最多的作者、资金资助机构均来自中国(包括台湾地区);《循证补充和替代医学》是刊载文献数量最多的期刊;综合补充医学是最主要的研究方向;疼痛是研究的主要疾病类型;TRPV1是最主要的TRP研究亚型;足三里穴、WB,分别是使用频率最高的穴位、检测方法。结论:中国是中医针灸调节TRP通道研究的主要科研力量;中医针灸调节TRP通道的研究主要聚焦于TRPV1与疼痛的研究;相关研究尚处于起步阶段,未来需进一步拓展、完善研究的设计思路与方法,提高研究成果的科技影响力。

论Suppose一词语法化现象的认知理据——基于历时和共时语料库研究

语法化是开放词类向封闭词类转换的过程,本文基于语料库技术,对suppose一词的语法化现象进行共时和历时分析,得出suppose存在实义动词转情态动词和实义动词转话语标记两条语法化路径。通过共时性分析,得出suppose的情态意义主要以认识情态和道义情态为主,而话语标记则多表示虚拟语气意义。基于以上发现,本文利用认知语言学的概念隐喻、转喻角度和注意力视窗理论,进一步对suppose语法化路径进行认知语言学的理据性阐释。

Effects of moxibustion on the P2X7R/STAT3/VEGF pathway in rats with colitis-associated colon cancer

Objective:To observe the effects of herb-partitioned moxibustion and ginger-partitioned moxibustion on the growth of colon tumors in rats with colitis-associated colon cancer(CACC),and explore the mechanism of moxibustion intervening CACC through the purinergic receptor P2X ligand-gated ion channel 7(P2X7R)/signal transducer and activator of transcription 3(STAT3)/vascular endothelial growth factor(VEGF)pathway.Methods:A total of 26 male Sprague-Dawley rats were selected.According to the random number table method,6 rats were selected as the normal group.The remaining 20 rats were injected intraperitoneally with azoxymethane(AOM)combined with oral dextran sodium sulfate(DSS)to prepare the CACC model.After the model was successfully established,2 rats were randomly selected for model identification.The remaining 18 rats which were successfully modeled were randomly divided into a model group,a herb-partitioned moxibustion group and a ginger-partitioned moxibustion group,with 6 rats in each group.Moxibustion intervention was performed in the herb-partitioned moxibustion group and the ginger-partitioned moxibustion group at Qihai(CV 6)and bilateral Tianshu(ST 25).Moxibustion was performed twice at each point each time,once a day,at a 1-day interval after 6 consecutive interventions,for a total of 30 interventions.After intervention,the colon tumor load,pathological change and histopathological score were observed.Immunohistochemistry was used to detect the expressions of VEGF,P2X7R,phospho-STAT3(p-STAT3),and nuclear factor-kappa B p65(NF-κB p65)proteins in rat colon tissue.Western blot was used to detect the levels of p-STAT3 and NF-κB p65 proteins in rat colon tissue.Results:Compared with the normal group,the colon tumor load and histopathological score in the model group were significantly increased(both P<0.001),and different grades of dysplasia were observed in colon tissue from the model group,reaching the degree of adenocarcinoma;the expression level of P2X7R protein in colon tissue was significantly decreased(P<0.001),and the expression levels of p-STAT3,NF-κB p65 and VEGF proteins were significantly increased(all P<0.001)in the model group.Compared with the model group,the colon tumor load,colon histopathological score and the levels of p-STAT3,NF-κB p65 and VEGF proteins in colon tissue were significantly decreased(all P<0.05)in the herb-partitioned moxibustion group and the ginger-partitioned moxibustion group while the expression levels of P2X7R protein in colon tissue were significantly increased(both P<0.05).Conclusion:Both herb-partitioned moxibustion and ginger-partitioned moxibustion can reduce the colon tumor load in CACC rats and delay the progression of colon adenomas.The mechanism may be mediated by the P2X7R/STAT3 pathway to inhibit STAT3 phosphorylation,thereby reducing VEGF protein expression.

艾灸“天枢穴”对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织circRNA表达谱的影响

目的:探讨艾灸“天枢穴”对溃疡性结肠炎大鼠环状RNA(circRNA)表达谱的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、隔药灸组、西药组,每组8只,通过观察各组大鼠疾病活动度(DAI)、结肠宏观损伤评分、结肠组织病理学变化及评分(CMDI)明确艾灸对溃疡性结肠炎的效应。每组取3只大鼠结肠组织进行高通量测序,获取差异表达的circRNAs,并进行生物信息学分析。结果:与正常组比较,模型组溃疡形成,结肠黏膜上皮不完整,腺体异常,杯状细胞显著减少,可见大量炎性细胞浸润,DAI、结肠宏观损伤评分及CMDI评分均显著增高(P<0.01);结肠组织差异表达的circRNAs有99个。与模型组比较,隔药灸组和西药组大鼠DAI指数、结肠宏观损伤评分及CMDI评分均显著降低(P<0.01),差异表达的circRNAs分别有99、76个。艾灸干预前后差异表达的circRNAs亲本基因与免疫炎症密切相关。结论:艾灸“天枢穴”可能通过影响结肠组织circRNA表达谱,作用其亲本基因而调节免疫相关通路,达到减轻DSS诱导UC大鼠结肠炎症反应之目的。

针刺对帕金森病模型小鼠肠道菌群多样性的调节作用

目的:分析针刺对帕金森病(PD)模型小鼠肠道菌群多样性的影响,从对肠道菌群调节作用角度探讨针刺治疗PD的可能性机制。方法:采用MPTP腹腔注射的方法建立慢性PD小鼠模型,针刺组选取百会、阳陵泉进行干预,采用Miseq平台对各组小鼠粪便V3~V4区肠道菌群进行双端测序,对结果进行OTU聚类、Alpha多样性分析、LEfSe差异分析、不同组差异菌群显著性分析等。结果:针刺对于PD模型小鼠运动功能具有显著改善作用,且可以保护其中脑黑质神经元。针刺可以显著调节肠道菌群丰度,并可改善模型小鼠肠道微生物的多样性,上调拟杆菌、普氏菌以及粪杆菌等抗炎、保护肠神经的菌群,下调艾克曼菌等破坏肠道屏障的菌群。结论:针刺可能通过调节PD模型小鼠肠道菌群而起到神经保护作用。

针灸对帕金森病小鼠外周血Th17/Treg平衡的调节作用

目的:研究Th17细胞和Treg细胞在帕金森病模型小鼠外周血的表达状况,并从Th17/Treg平衡角度探讨针灸治疗帕金森病的潜在机制。方法:8周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、针灸组和雷沙吉兰组。采用MPTP腹腔注射的方法建立帕金森病动物模型,模型组不做治疗,仅作抓取固定;针刺组针刺百会、双侧阳陵泉穴;针灸组在针刺组基础上艾灸关元穴;雷沙吉兰组予雷沙吉兰溶液灌胃。观测各组小鼠疲劳转棒实验评分(ORP),采用流式细胞术检测各组小鼠外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg、CD4^(+)RORγt^(+)Th17细胞数,采用ELISA法检测外周血肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-17、IL-22、IL-4、γ干扰素(IFN-γ)、IL-10、转化生长因子β(TGF-β)的表达情况。结果:模型组小鼠ORP评分显著低于空白组(P<0.05),针刺组和针灸组小鼠ORP评分显著高于模型组(P<0.05)。与空白组比较,模型组小鼠外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞数量显著减少(P<0.05),CD4^(+)RORγt^(+)Th17细胞数量显著升高(P<0.05);与模型组比较,雷沙吉兰组、针刺组、针灸组CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞数量均显著增加,CD4^(+)RORγt^(+)Th17细胞数量显著减少(P<0.05)。与正常组比较,模型组外周血TNF-α、IL-17、IL-22、IL-4、IFN-γ表达均显著升高(P<0.05),IL-10、TCF-β均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,针刺组、针灸组、雷沙吉兰组外周血TNF-α、IL-17、IL-22、IL-4、IFN-γ表达均显著降低(P<0.05),IL-10、TGF-β均显著升高(P<0.05)。结论:针灸能够改善MPTP诱导的PD模型小鼠运动表现,并可调节Th17和Treg细胞分化和相关细胞因子的表达。