基于显色体系和破壁条件的优化,构建了酶解破壁与显色反应相结合的氨基酸脱氢酶突变体高通量筛选方法。以颜色和吸光度表征内消旋-2,6-二氨基庚二酸脱氢酶(StDAPDH)酶活,以碘硝基四唑紫(INT)-吩嗪硫酸甲酯(PMS)为显色剂,通过其与StDAPD...基于显色体系和破壁条件的优化,构建了酶解破壁与显色反应相结合的氨基酸脱氢酶突变体高通量筛选方法。以颜色和吸光度表征内消旋-2,6-二氨基庚二酸脱氢酶(StDAPDH)酶活,以碘硝基四唑紫(INT)-吩嗪硫酸甲酯(PMS)为显色剂,通过其与StDAPDH的偶联反应优化了显色体系;以StDAPDH酶活为评价指标,在单因素实验的基础上,采用响应面法探究了菌体量、破壁时间、溶菌酶加量对菌体破壁效果的影响。确定最优显色体系为:INT浓度0.1 mg·mL^(-1)、PMS浓度0.5μg·mL^(-1)、检测波长510 nm;确定最优菌体破壁条件为:30 mL OD 600值为1.5的菌悬液,离心后用10 mL PBS缓冲液重悬菌体沉淀,加入0.2 mg·mL^(-1)的溶菌酶,在37℃下破壁50 min。该方法简单高效,为氨基酸脱氢酶突变体的高通量筛选提供了一定参考。展开更多
目的分析北京市某妇幼保健院产妇早产分娩时机及分娩方式的影响因素。方法回顾性分析2017年1月至2019年12月该院早产孕产妇的一般临床资料,根据分娩孕周分为早中期早产组和晚期早产组,同时根据分娩方式将其分为自然分娩组和剖宫产组,比...目的分析北京市某妇幼保健院产妇早产分娩时机及分娩方式的影响因素。方法回顾性分析2017年1月至2019年12月该院早产孕产妇的一般临床资料,根据分娩孕周分为早中期早产组和晚期早产组,同时根据分娩方式将其分为自然分娩组和剖宫产组,比较不同组间孕产妇的一般临床特征,采用多因素Logistic回归分析早产分娩时机和分娩方式的影响因素。结果639例(5.42%)孕产妇发生早产,其中早中期早产132例(20.66%),晚期早产507例(79.34%);剖宫产328例(51.33%),自然分娩311例(48.67%)。年龄、不良产史、瘢痕子宫、孕期服用叶酸及妊娠合并症是早中期早产发生的独立影响因素,而年龄、BMI、多胎、瘢痕子宫及妊娠合并症是早产时选择剖宫产的独立影响因素。早中期早产儿1 min和10 min Apgar评分均显著低于晚期早产儿,1岁内死亡率显著高于晚期早产儿(P<0.05)。结论早产分娩时机及分娩方式主要受年龄、不良产史、瘢痕子宫和妊娠合并症等因素的影响,且早产的分娩时机影响早产儿结局。展开更多
文摘基于显色体系和破壁条件的优化,构建了酶解破壁与显色反应相结合的氨基酸脱氢酶突变体高通量筛选方法。以颜色和吸光度表征内消旋-2,6-二氨基庚二酸脱氢酶(StDAPDH)酶活,以碘硝基四唑紫(INT)-吩嗪硫酸甲酯(PMS)为显色剂,通过其与StDAPDH的偶联反应优化了显色体系;以StDAPDH酶活为评价指标,在单因素实验的基础上,采用响应面法探究了菌体量、破壁时间、溶菌酶加量对菌体破壁效果的影响。确定最优显色体系为:INT浓度0.1 mg·mL^(-1)、PMS浓度0.5μg·mL^(-1)、检测波长510 nm;确定最优菌体破壁条件为:30 mL OD 600值为1.5的菌悬液,离心后用10 mL PBS缓冲液重悬菌体沉淀,加入0.2 mg·mL^(-1)的溶菌酶,在37℃下破壁50 min。该方法简单高效,为氨基酸脱氢酶突变体的高通量筛选提供了一定参考。
文摘目的分析北京市某妇幼保健院产妇早产分娩时机及分娩方式的影响因素。方法回顾性分析2017年1月至2019年12月该院早产孕产妇的一般临床资料,根据分娩孕周分为早中期早产组和晚期早产组,同时根据分娩方式将其分为自然分娩组和剖宫产组,比较不同组间孕产妇的一般临床特征,采用多因素Logistic回归分析早产分娩时机和分娩方式的影响因素。结果639例(5.42%)孕产妇发生早产,其中早中期早产132例(20.66%),晚期早产507例(79.34%);剖宫产328例(51.33%),自然分娩311例(48.67%)。年龄、不良产史、瘢痕子宫、孕期服用叶酸及妊娠合并症是早中期早产发生的独立影响因素,而年龄、BMI、多胎、瘢痕子宫及妊娠合并症是早产时选择剖宫产的独立影响因素。早中期早产儿1 min和10 min Apgar评分均显著低于晚期早产儿,1岁内死亡率显著高于晚期早产儿(P<0.05)。结论早产分娩时机及分娩方式主要受年龄、不良产史、瘢痕子宫和妊娠合并症等因素的影响,且早产的分娩时机影响早产儿结局。