1976—2021年纳木错和色林错湖泊面积变化及驱动因素分析

湖泊在水循环和水平衡中发挥着重要作用,对气候变化极其敏感。分析青藏高原湖泊面积变化及驱动因素,对揭示高原气候变化具有重要意义。文章通过解译1976—2021年Landsat系列遥感影像,获取纳木错和色林错湖泊水体面积,利用数理统计方法分析湖泊水体面积及气温、降水的变化特征,并探讨了气温和降水量对湖泊面积变化的影响。结果表明:1.纳木错和色林错湖泊面积总体均呈显著增长趋势(P<0.01),增幅分别为2.90%和36.30%,分别于2001年和2002年发生突变,其中,纳木错湖泊面积变化波动较小(CV=1.64%),色林错湖泊面积波动幅度较大(CV=12.65%)。2.纳木错和色林错流域多年平均降水量和气温均呈现显著增加趋势。3.纳木错湖泊面积变化与气温和降水量呈显著正相关,受降水与气温的共同影响;色林错湖泊面积变化与气温呈显著正相关,与降水量无显著相关性,气温增加引起的冰雪加速融化是色林错急剧扩张的主要原因。相关结果为高寒地区湖泊演变机制的研究及生态环境保护措施的制定提供理论依据。

14种喀斯特地区植物药提取物的体外抗氧化活性比较

目的 对14种喀斯特地区特色植物药抗氧化活性进行筛选,为氧化应激诱导的相关疾病药物干预提供基础数据。方法 构建抗氧化测定体系(清除羟自由基能力的测定、清除2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)自由基能力的测定、铁氰化钾还原能力的测定及抑制脂质过氧化能力测定),以维生素C作为阳性对照,检测14植物药醇提取物的体外抗氧化活性,采用隶属函数分析法进行结果的综合评价及排序。结果 植物药对羟自由基的清除能力强弱为仙桃草、瓜子金>凉粉柴>天冬>锦茵陈>维生素C>其余药物;植物药对DPPH自由基的清除能力强弱为维生素C>锁阳>吴茱萸>响铃草>皂角>薏苡仁>仙桃草>其余药物;植物药还原能力的强弱为吴茱萸、仙桃草、锁阳、锦茵陈和菟丝子的还原能力比阳性对照组强,响铃草和皂角的还原能力与对照组相近,其余药物弱于对照组;植物药抑制脂质过氧化能力强弱为凉粉柴>仙桃草>响铃草>吴茱萸>菟丝子>玉竹>瓜子金>天冬>维生素C>其余药物;最后通过隶属函数分析显示,14种植物药的抗氧化能力为仙桃草>吴茱萸>维生素C>凉粉柴>响铃草>锁阳>天冬>皂角>瓜子金>薏苡仁>菟丝子>锦茵陈>黄精>一朵云>玉竹。结论 所检测的植物药中,仙桃草可能作为潜在的抗氧化应激候选药物;采用抗氧化评价体系结合隶属函数分析,更加科学可靠地评价了药物的抗氧化能力。

利用生物信息学对缺血性脑卒中相关microRNA和mRNA的分析筛选与qRT-PCR验证

目的利用生物信息学分析筛选与缺血性脑卒中(IS)相关的microRNA(miRNA)和mRNA,通过实验鉴定关键基因、利用Cytoscape构建miRNA-mRNA相互作用网络,探讨其在IS中的作用及其主要调控的相关信号通路。方法从基因表达数据库(GEO)中下载微阵列数据集GSE58294(mRNA谱)、GSE16561(mRNA谱)和GSE43618(miRNA谱),对GEO2R鉴定差异基因和mRNA、DAVID数据库筛选得到的差异表达基因(DEGs)进行功能及通路富集分析,通过STRING构建差异基因的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络、MCODE插件从PPI中提取相互作用最密切的网络和关键基因,通过TargetScan预测差异表达miRNA(DEMs)的靶基因;利用氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)细胞模型、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证筛选得到的关键基因,利用蛋白免疫印迹(WB)检测铁死亡标志蛋白SLC2A3及GPX4的蛋白表达水平。结果共筛选到198个DEGs,基因本体(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)结果显示,198个基因主要参与Toll样受体信号通路、肌动蛋白细胞骨架调控及细胞凋亡;从PPI网络中鉴定出12个关键基因(CEACAM1、CKAP4、ITGAM、STOM、SLC2A3、ADAM8、DEGS3、MOSPD2、FPR2、MCEMP1、CLEC4D及ADGRG3)和26个DEMs;根据miRNA和mRNA的靶向关系构建miRNA-mRNA作用网络对12个关键基因进行了验证,除MCEMP1外,其余11个关键基因都随再灌注时间延长而上调;利用生物信息学分析人外周血样本发现,SLC2A3与GPX4呈负相关;WB结果显示,当SLC2A3表达上调时、GPX4表达下调(P<0.05)。结论IS发生后DGEs和DEMs表达上调,本研究共筛选到198个DEGs,确定了12个关键DEGs和26个DEMs,构建了12个miRNA-mRNA调控网络,这些基因可能是IS的发病的潜在调控机制,在炎症过程的发生中起着重要作用。

退耕还林前后渭河流域土壤保持功能变化

基于InVEST模型的土壤保持模块,定量评估退耕还林前后渭河流域土壤保持功能的变化,并统计不同土地利用类型及坡度下的土壤保持量。结果表明:1)相较于1980年,2020年实际土壤侵蚀量减少1.40亿t,平均土壤侵蚀模数减少1033.51 t/(km^(2)·a),微度侵蚀的比例由60.75%增加至77.43%,土壤保持总量由48.60亿t增加到53.73亿t;2)不同土地利用类型中,草地的土壤保持量最大,占土壤保持总量的40%以上;而单位面积土壤保持量最大的是林地;3)0~5°的微坡地区土壤保持量最小,单位面积的土壤保持量也最低;>15°~25°的较陡坡地区土壤保持量最大,占土壤保持总量的1/3以上。退耕还林工程主要通过减少土壤侵蚀量来提高土壤保持功能,随着植被恢复,不同土地利用类型及坡度的土壤保持功能增强。研究结果可为流域植被恢复效果和土壤保持功能的定量评估提供参考。

黄连素对人耐紫杉醇去势性前列腺癌细胞凋亡和IL-6/STAT3表达的影响

目的研究黄连素(BBR)对人耐紫杉醇(PTX)去势性前列腺癌细胞凋亡和白细胞介素-6(IL-6)/信号转导与转录因子3(STAT3)表达的影响。方法选取对数生长期人耐PTX前列腺癌细胞株DU145 R,用DMSO、10及20μmol/L BBR处理72 h,采用流式细胞术检测DU145 R细胞凋亡;取0、10及20μmol/L BBR处理24 h的DU145 R细胞,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)与蛋白印迹(Western blot)分别检测DU145 R细胞中IL-6、STAT3 mRNA及蛋白表达。结果与DMSO组相比,10和20μmol/L BBR组DU145 R细胞凋亡数量增加(P<0.05);与0μmol/L组比较,10和20μmol/L BBR组DU145 R细胞中IL-6与STAT3 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05)。结论BBR可能通过下调IL-6/STAT3表达诱导DU145 R细胞的凋亡。

黄连素对人耐紫杉醇去势性前列腺癌细胞活力、增殖及HMGB1表达的影响

目的探讨黄连素(BBR)对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)紫杉醇(PTX)耐药细胞活力、增殖及高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达的影响。方法取对数生长期的PTX耐药前列腺癌细胞株DU145 R,用0、5、10、20、30及50μmol/LBBR处理,采用细胞计数试剂盒8(CCK8)分别于48和72 h评估6组DU145 R细胞的细胞活力;分别用二甲基亚砜(DMSO)、10及20μmol/L BBR处理对数生长期的DU145 R细胞,采用细胞克隆形成实验检测3组DU145 R细胞的克隆形成数;利用Oncomine数据库与人类蛋白质图谱数据库(HPA)分别分析HMGB1 mRNA及蛋白在前列腺癌和正常组织中的表达,利用TIMER2.0数据库分析HMGB1表达与前列腺癌患者生存的相关性;取对数生长期细胞DU145及DU145 R(分为0、10及20μmol/L BBR处理组),采用蛋白印迹法检测2组细胞中HMGB1蛋白表达。结果与0μmol/L BBR组相比,各浓度组DU145 R细胞的细胞活力降低(P<0.05);与DMSO组相比,5和10μmol/L BBR组DU145 R细胞的克隆形成数量减少(P<0.05);与正常组织相比,前列腺癌组织中HMGB1 mRNA及蛋白表达增加(P<0.001),且HMGB1高表达与前列腺癌患者不良预后相关(P=0.0193);与DU145组相比,DU145 R各组细胞HMGB1的表达明显增高(P<0.001);与0μmol/L BBR组相比,10和20μmol/L BBR组DU145 R细胞HMGB1蛋白表达下调(P<0.05)。结论BBR可抑制CRPC PTX耐药细胞增殖、细胞活力及HMGB1的表达。

人肠道来源样品中肺炎克雷伯菌的分离及特征研究

目的:了解重症监护病房(ICU)肠道来源样品(粪便)中肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,Kp)携带情况及其特征。方法:采用哥伦比亚培养基分离粪便样品中的肺炎克雷伯菌,对其进行16S rDNA测序并构建发育进化树;使用稀释平板法,参照CLSI(2017)标准测定分离的肺炎克雷伯菌对肠道感染常用抗生素耐药性。结果:共收集粪便样本54份,从中分离到14株肺炎克雷伯菌(携带率为26%);14株肺炎克雷伯菌与欧、美菌株亲缘关系较远,与亚洲肺炎克雷伯菌(Klebsiella singaporensis strain LX3)亲缘关系较近,14株肺炎克雷伯菌聚为2个分支;抗生素耐药性检测结果表明,14株菌株对红霉素、克拉霉素、链霉素、四环素、氯霉素、阿莫西林、甲砜霉素、甲硝唑和克林霉素耐药率为100%,仅对诺氟沙星不耐药(耐药率为0%)。结论:贵州ICU病人粪便分离的14株肺炎克雷伯菌与亚洲株亲缘关系较近,且对肠道感染常用抗生素具有较强耐药性,仅对诺氟沙星不耐药。

PEG介导黄曲霉菌的遗传转化体系

目的:以吡啶硫胺抗性基因(ptrA)为筛选标记基因,建立黄曲菌遗传转化体系。方法:通过黄曲霉菌对潮霉素B(Hyg)、新霉素(G418)和嘧啶磺胺素(PT)的敏感性实验获得适合黄曲霉菌遗传转化筛选抗生素,用酶解的方法获得黄曲霉菌的原生质体;采用聚乙二醇(PEG)介导黄曲霉菌原生质体转化法,将携带ptrA的质粒pPTRI整合到黄曲菌株LD-F基因组DNA中,随机挑选7个转化子,通过聚合酶链反应(PCR)方法进行检测,验证ptrA是否整合到黄曲菌基因组DNA中。结果:0.2 mg/L PT可以完全抑制黄曲霉菌的菌丝生长,1%溶壁酶+1%纤维素酶+1%蜗牛酶处理黄曲霉菌丝2 h可得到大量的原生质体;PCR检测结果显示,质粒pPTRI能够成功整合到黄曲菌基因组。结论:以PT为抗性筛选,建立PEG介导黄曲霉菌的遗传转化体系。

人肠道来源大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因突变株的构建

目的:使用嗜热二型内含子基因失活系统(Thermotargetron)失活人肠道来源大肠杆菌(HSM174 DE3)β-半乳糖苷酶基因(LacZ),构建lacZ失活突变株。方法:使用分子克隆方法,构建lacZ基因失活质粒pHK-TT1A-lacZ426a、pHK-TT1A-lacZ1879a、pHK-TT1A-lacZ1880a及pHK-TT1A-lacZ1155s,将基因失活质粒转化大肠杆菌HSM174菌株(E.coli HSM174),转化子培养时提高温度至48℃,诱导TeI3c/4c二型内含子“归巢”活性,采用蓝白斑及PCR筛选lacZ基因失活突变株。结果:随机挑选20株克隆菌株的PCR结果显示,lacZ426a、lacZ1879a、lacZ1880a及lacZ1155s基因失活效率分别为60%、75%、60%及75%;白斑克隆基因失活效率为100%。结论:Thermotargetron系统可高效的实现E.coli HSM 174菌株lacZ基因失活,并可能具有在中温菌中广泛应用的潜力。

初诊白细胞计数与儿童高白细胞急性淋巴细胞白血病预后的关系

目的:研究初诊外周血白细胞(WBC)计数与儿童高白细胞急性淋巴细胞白血病(HALL)预后的关系。方法:HALL患儿121例,按照WBC计数分为WBC≥300×109/L组和<300×109/L组,比较两组患儿的总生存率、无事件生存率及复发率。结果:初诊时WBC≥300×109/L组HALL患儿无事件生存率低于WBC <300×109/L组(P=0. 034),复发率高于WBC <300×109/L组(P=0. 026),但两组总生存率比较,差异无统计学意义(P=0. 147)。结论:初诊时外周血WBC≥300×109/L的HALL患儿无事件生存率低、复发率高。

尼古丁通过PI3K/AKT信号通路上调星形胶质细胞HSF1的表达

目的:研究尼古丁对星形胶质细胞热休克转录因子1(HSF1)的表达的影响,并探讨其机制。方法:分离新出生24 h内乳鼠大脑皮质,进行原代培养并鉴定为星形胶质细胞,待细胞成熟后分为正常对照组、尼古丁处理组,PI3K/AKT信号通路阻断剂LY294002处理组和尼古丁+LY294002处理组,正常对照组不做任何处理;尼古丁处理组用5μmol/L尼古丁分别处理星形胶质细胞6、12、18、24 h; LY294002处理组只加10μmol/L LY294002处理;尼古丁+LY294002处理组是先加10μmol/L LY294002处理2 h后,再加入5μmol/L尼古丁共同处理18 h,免疫印迹法观察各组HSF1蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,尼古丁处理组星形胶质细胞内HSF 1蛋白的表达上调(P <0. 05);与尼古丁处理组比较,LY294002+尼古丁处理组星形胶质细胞内HSF1表达明显受到抑制(P <0. 05)。结论:尼古丁通过PI3K/AKT信号通路上调星形胶质细胞HSF1蛋白表达。

Stattic增强三氧化二砷诱导急性髓样白血病THP1细胞生存和凋亡的机制

目的探讨STAT3抑制剂Stattic联合三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)THP1细胞生存和凋亡的影响及其作用机制。方法以THP1细胞株为研究对象,用CCK8法检测Stattic联合ATO对THP1细胞生存的影响,用流式细胞术检测细胞凋亡、ROS水平,用Caspase 3/7 Glo assay试剂盒检测细胞Caspase 3/7活性,用qPCR检测mRNA表达,Western blotting检测蛋白表达。结果Stattic可明显抑制磷酸化STAT3的水平,显著加剧ATO对AML细胞生存抑制,增强ATO诱导的细胞凋亡和氧化应激产物。Stattic显著抑制ATO上调的Nrf2的表达以及下游基因的表达。结论Stattic可增强ATO对AML细胞生存抑制和凋亡诱导作用,其机制可能与抑制Nrf2和Nrf2下游基因表达引起ROS增多有关。

人耐紫杉醇去势性前列腺癌细胞系的构建

目的构建人耐紫杉醇(PTX)去势性前列腺癌细胞模型。方法培养人细胞株DU145细胞,逐渐增加PTX的浓度(1、4、6、8、10及12 nmol/L)处理细胞;以12 nmol/L浓度处理后存活的DU145细胞作为PTX耐药细胞株(命名为DU145 R)、DU145细胞作为对照,采用细胞增殖检测(CCK8)法检测DU145和DU145 R细胞的细胞活力、光学显微镜下观察细胞核形态、实时荧光定量PCR(qPCR)法检测细胞多药耐药基因1(MDR 1)和c-Myc mRNA表达水平、Western blot法检测细胞MDR1和c-Myc蛋白表达水平。结果与DU145细胞比较,显微镜下观察发现DU145 R细胞核里有多核化现象,DU145 R细胞活力明显高于DU145细胞(P<0.01),MDR1及c-Myc mRNA和蛋白表达水平明显高于DU145细胞(P<0.01)。结论成功构建DU145 R细胞,该细胞MDR 1及c-Myc表达水平上调,对PTX耐药。

人肠道来源艰难梭菌感染Caco-2细胞对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响

目的:研究人肠道来源艰难梭感染Caco-2细胞对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。方法:用艰难梭菌毒素A和毒素B感染Caco-2细胞24 h,以未感染艰难梭菌毒素A和毒素B的Caco-2细胞为对照组,蛋白质免疫印迹法检测真核细胞核因子(NF-κB)通路蛋白P-p65和p65的表达;Caco-2细胞用6孔板制作爬片,待细胞长满6孔板后,以感染复数(MOI)=100加入艰难梭菌,与Caco-2细胞共培养3、6、9、12及24 h,革兰染色后油镜观察,记录黏附细菌数与细胞数,计算共培养时间与细菌黏附数量之间的关系;艰难梭菌感染Caco-2细胞12 h,以Caco-2为对照组,蛋白质免疫印迹法检测NF-κB通路蛋白P-p65、p65、IKKα及IκBα的表达。结果:艰难梭菌与Caco-2细胞共培养12 h时黏附数最多,P-p65和IKKα蛋白表达增加(P<0.05),p65和IκBα蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人源艰难梭菌感染Caco-2细胞可激活NF-κB信号通路。

PNU通过PI3K/AKT信号通路上调星形胶质细胞HSP70的表达

目的:研究PNU对星形胶质细胞热休克蛋白70(HSF70)表达的影响,并探讨其机制。方法:分离新出生24 h内乳鼠大脑星形胶质细胞原代培养并鉴定,传1～3代待细胞成熟后分为正常对照组、PNU处理组,PI3K/AKT信号通路阻断剂(LY294002)处理组和PNU+LY294002处理组,正常对照组不做任何处理,PNU处理组用5μmol/L PNU分别处理6、12、18、24 h,LY294002处理组只加10μmol/L LY294002处理,PNU+LY294002处理组是先加10μmol/L LY294002处理2 h后、再加入5μmol/L PNU共同处理18 h,免疫印迹法观察各组星形胶质细胞内HSF70蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,PNU处理组星形胶质细胞内HSP70蛋白的表达上调(P <0. 05);与PNU处理组比较,LY294002+PNU处理组星形胶质细胞内HSP70表达明显受到抑制(P <0. 01)。结论:PNU通过PI3K/AKT信号通路调控星形胶质细胞HSP70蛋白表达。

近40年鄱阳湖枯水期水体面积变化特征及驱动因素分析

湖泊是维持生态平衡的重要因素,鄱阳湖作为我国最大的淡水湖,由于枯水期提前且持续时间延长导致水体面积发生变化。研究鄱阳湖枯水期水体面积的变化特征及其驱动因素对区域生态环境的稳定及经济发展具有重要意义。利用1973-2018年鄱阳湖枯水期遥感影像数据,采用Mann-Kendall趋势检验法、Mann-Kendall突变分析法及Pettitt突变检验对湖泊水体面积变化特征进行分析,并利用双累积曲线法量化出入湖流量之差和人类活动导致的土地利用的变化对鄱阳湖枯水期水体面积的影响。结果表明:(1)在研究时段内,鄱阳湖枯水期水体面积呈极显著下降趋势(P<0.01),突变点年份为2002年(P<0.01);(2)出入湖径流量之差多年来呈现不显著的增加趋势;1980-2015年鄱阳湖流域的土地利用情况表现为城乡工建用地增加,其余用地类型均呈现减小趋势;(3)以1977-2002年作为基准期,2003-2016年人类活动导致的土地利用的变化对鄱阳湖枯水期水体面积变化的贡献率为87.48%,是鄱阳湖枯水期水体面积显著减少的主要原因。研究成果为鄱阳湖水资源的合理利用及维持区域生态系统的平衡提供了科学依据。

长时间序列下鄱阳湖汛期水体面积变化特征及驱动因素分析

为了探究鄱阳湖汛期水体面积变化的影响因子,基于1977—2017年汛期鄱阳湖流域遥感影像数据、流域内同期6个控制水文站实测汛期月径流量及流域内1980—2015年土地利用资料,运用Mann-Kendall趋势与突变检验及突变检验方法分析了鄱阳湖流域汛期湖泊水体面积、湖区流失入江径流量变化趋势特征以及流域内土地利用结构变化特征。结果表明:鄱阳湖汛期水体面积呈减小趋势,且在2005年发生突变;汛期湖区净出湖径流量呈逐年显著增加趋势,发生突变年份为1990年;20世纪90年代城乡工建用地面积大幅增大,未利用土地面积大幅减少,导致流域耗水量增大。汛期净出湖径流量增加是造成汛期湖泊面积减小趋势的主要原因之一;流域内“退田还湖”等生态工程的实施有利于缓解汛期湖泊水体面积减少趋势;长江上游水利工程建设、流域内城镇化发展等人类活动是鄱阳湖汛期水体面积减少的主要驱动因素。

不同时间氧糖剥夺再灌注对SH-SY5Y细胞线粒体自噬及功能的影响

目的:探讨不同时点氧糖剥夺再灌注(OGD/R)后人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞线粒体自噬及功能改变。方法:利用无糖DMEM及三气培养箱对SH-SY5Y细胞进行OGD/R,根据OGD/R不同时间将细胞分为control组、3 h/12 h组、3 h/24 h组、6 h/12 h组及6 h/24 h组,OGD/R后采用流式细胞术检测细胞线粒体膜电位及活性氧(ROS)含量,采用Western blot法检测线粒体蛋白Beclin1及P62表达。结果:与control组比较,OGD/R后SH-SY5Y细胞线粒体膜电位发生去极化(P<0.01)、胞内ROS含量升高(P<0.01),3 h/24 h组、6 h/12 h组及6 h/24 h组线粒体Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.01),,3 h/12 h、6 h/24 h组线粒体P62蛋白表达升高(P<0.05); OGD/R各组间比较,3 h/24 h组线粒体去极化程度、细胞内ROS含量及线粒体Beclin1蛋白表达水平均较3 h/12 h组显著升高(P<0.01),且6 h/24 h组ROS含量最高(P<0.01)。结论:SH-SY5Y细胞OGD/R后线粒体功能受损且线粒体自噬活性升高,且随着缺血时间及再灌注时间增加线粒体受损加重,线粒体自噬也增加。

外源性H_2S对血管性痴呆大鼠海马MDA、SOD、Cyt C表达的影响

目的:探讨外源性硫化氢(H_2S)对血管性痴呆大鼠(VaD)学习记忆能力、脑组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及神经元细胞色素C(Cyt C)表达的影响。方法:60只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(VaD)、阳性对照组(Nimodipine)、NaSH低剂量组(Low-NaSH)及NaSH高剂量组(High-NaSH),除假手术组(仅分离双侧颈总动脉但不结扎)外,其余4组大鼠采用改良二血管法复制大鼠VaD模型,造模后阳性对照组给予尼莫地平10 mg/(kg·d)灌胃给药,NaSH低、高剂量组分别给予30μmoL/(kg·d)、100μmoL/(kg·d) NaSH灌胃给药,模型组及假手术组均给予等量生理盐水灌胃;给药30 d时,采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,水迷宫测试结束后采用BCA蛋白定量法测定样本蛋白浓度记为C_(样本),结合标准曲线计算组织中MDA含量;用BCA法测定样本蛋白浓度C_(样本),计算组织中SOD活力单位;Western blot法检测海马胞浆Cyt C表达。结果:与Sham组比较,VaD组大鼠的学习记忆能力显著下降,神经元胞浆蛋白中Cyt C表达显著升高,脑组织中MDA含量显著增多、SOD活性显著升高(P<0.01);与VaD组大鼠比较,加NaSH处理后,大鼠学习记忆能力显著提高,神经元胞浆蛋白中Cyt C表达显著降低、脑组织中MDA含量及SOD活性均显著降低(P<0.01),与阳性对照组结果相近。结论:NaSH可改善VaD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与NaSH降低大鼠海马的氧化应激水平、保护神经元细胞中线粒体功能有关。

敲除PaLoc毒力岛的无毒性艰难梭菌菌株的构建

目的:使用CRISPR-Cfp1系统敲除艰难梭菌毒性(PaLoc)毒力基因岛,构建无毒性艰难梭菌菌株。方法:使用分子克隆方法,构建针对PaLoc毒力岛的基因打靶质粒pWH53;将pWH53质粒转化艰难梭菌630菌株后,诱导Cpf1蛋白表达,PCR筛选发生双交换的PaLoc敲除突变株,测序验证设计位点是否发生等位双交换。结果:PCR结果显示,获得的16株转化子中有8株为敲除PaLoc突变株,阳性率为50%;测序结果显示,获得的8株敲除PaLoc突变株均在设计位点发生了等位双交换。结论:成功构建艰难梭菌毒性毒力岛敲除PaLoc突变株。