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支原体营养代谢特征的研究进展 被引量:6
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作者 张晓亮 郝华芳 +2 位作者 陈胜利 颜新敏 储岳峰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1029-1036,共8页
支原体(Mycoplasma)是一类可在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞微生物,是理想的最小生命体研究模型。支原体还可引起人、动物和植物的多种疾病,影响农业经济和公共卫生健康。但支原体对营养要求较高,体外培养困难,增加了对其开展... 支原体(Mycoplasma)是一类可在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞微生物,是理想的最小生命体研究模型。支原体还可引起人、动物和植物的多种疾病,影响农业经济和公共卫生健康。但支原体对营养要求较高,体外培养困难,增加了对其开展生命科学基础、病原致病机制和疫苗等研究的难度。本综述概括了国内外对支原体营养代谢方面的研究进展,以期为理解支原体这一最小原核细胞的生长代谢特征,为今后改进培养基或培养方法、解决支原体培养困难等问题提供资料参考。 展开更多
关键词 支原体 营养需求 代谢途径
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Effect of Chinese Herbal Medicinal Ingredients on IL-2 mRNA Levels of T Lymphocytes in Mice Measured Using Semiquantification RT-PCR 被引量:11
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作者 CHU Yue-feng yan xin-min +1 位作者 LI Xiang-rui HU Yuan-liang 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2006年第11期873-878,共6页
In this study, the IL-2 mRNA levels of T lymphocytes in normal mice stimulated by nine Chinese herbal medicinal ingredients (CHMIs) were measured using semiquantification reverse transcription polymerase chain react... In this study, the IL-2 mRNA levels of T lymphocytes in normal mice stimulated by nine Chinese herbal medicinal ingredients (CHMIs) were measured using semiquantification reverse transcription polymerase chain reaction. The results showed that astragalus polysaccharide (APS), epimedium polysaccharide (EPS), Chinese angelica polysaccharide (CAPS), propolis flavone (PF), and astrogalosides (AS) promoted IL-2 mRNA levels in T lymphocytes in vitro and in vivo to differing degrees, and the level of IL-2 mRNA induced by propolis polysaccharide (PPS) in vitro was higher than that induced by the control, which differed from that of PPS in vivo. 展开更多
关键词 Chinese herbal medicinal ingredients semiquantification RT-PCR IL-2 mRNA T Lymphocytes MICE
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Discrimination of Goatpoxvirus and Sheeppoxvirus by Digestion of p32 Gene with Hinf I and Sequence Alignment of GpCR Gene
3
作者 yan xin-min ZHANG Qiang +2 位作者 WU Guo-hua LI Jian ZHU Hai-xia 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2010年第3期32-34,38,共4页
To discriminate goatpoxvirus (GPV) and sheeppoxvirus (SPV), the p32 genes and G-protein-coupled chemokine receptor (GpCR) genes amplified from three SPV field isolates and two GPV field isolates were sequenced and com... To discriminate goatpoxvirus (GPV) and sheeppoxvirus (SPV), the p32 genes and G-protein-coupled chemokine receptor (GpCR) genes amplified from three SPV field isolates and two GPV field isolates were sequenced and compared with the corresponding sequences deposited in GenBank. Comparison of Hinf I restriction enzyme sites of p32 genes showed that there were two sites located at 391 and 691 bp, respectively, among all the SPV strains, and one site at 688 bp among GPV strains. Cladogram generated by sequence alignment of GpCR genes showed that the SPV and GPV belonged to two different branches. These results indicate that p32. and GpCR genes can be candidates used for discrimination of GPV and SPV. 展开更多
关键词 pG2 gene GpCRgene Goatpoxvirus Sheeppoxvirus DISCRIMINATION
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山羊传染性胸膜肺炎免疫学诊断方法的研究进展 被引量:8
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作者 吴娅琴 颜新敏 +3 位作者 郝华芳 陈胜利 马丽娜 储岳峰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1876-1880,共5页
山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)引起的山羊一种严重的呼吸道疾病,被世界动物卫生组织(OIE)列为法定报告疫病之一。CCPP... 山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)引起的山羊一种严重的呼吸道疾病,被世界动物卫生组织(OIE)列为法定报告疫病之一。CCPP流行区域横跨亚洲、中东和非洲40多个国家,目前已经报道数种可用于诊断该病的方法,其中涉及的免疫学诊断方法达10多种,但大多数方法存在敏感性差或特异性低的问题。本文对常用于CCPP诊断的免疫学方法以及有关诊断靶标挖掘工作做概述,总结各方法的优缺点和适用范围,以期为免疫学诊断方法的更好应用和改进提供参考。 展开更多
关键词 山羊传染性胸膜肺炎 山羊支原体山羊肺炎亚种 免疫学诊断方法 单抗
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山羊支原体山羊肺炎亚种可视化实时荧光LAMP检测方法的建立及应用 被引量:3
5
作者 宋相阳 颜新敏 +5 位作者 付磊 陈胜利 郝华芳 高鹏程 刘永生 储岳峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期671-678,共8页
为建立快速简便、灵敏度高、特异性强的山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)核酸快速检测方法,选择Mccp的92.1基因序列为靶序列,设计2条外引物、2条内引物和2条环引物,并向反应体系中添加可视化染料羟基溴酚蓝(HNB)或荧光染料(Eva green),分... 为建立快速简便、灵敏度高、特异性强的山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)核酸快速检测方法,选择Mccp的92.1基因序列为靶序列,设计2条外引物、2条内引物和2条环引物,并向反应体系中添加可视化染料羟基溴酚蓝(HNB)或荧光染料(Eva green),分别建立Mccp可视化环介导恒温扩增(V-LAMP)和实时荧光环介导恒温扩增(RF-LAMP)检测方法,并对比两种方法的敏感性、特异性、重复性以及两种方法在山羊组织样品中的检测效果。结果显示,两种方法均可检出1.0×10 copies/μL的核酸标准品,灵敏度高;与其他支原体及细菌,如丝状支原体山羊亚种、绵羊肺炎支原体、多杀性巴氏杆菌、肺炎克雷伯菌等类症病原体,均无交叉反应;V-LAMP、RF-LAMP的变异系数均小于1%;对人工感染的试验样品和临床样品进行检测,两种检测方法结果一致,阳性率为9.09%,并且与实时定量PCR检测结果一致。本试验建立的V-LAMP和RF-LAMP为Mccp流行病学调查和疾病诊断提供了新的临床快速检测方法。 展开更多
关键词 山羊支原体山羊肺炎亚种 可视化环介导恒温扩增 实时荧光环介导恒温扩增 核酸检测
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免疫途径对绵羊支原体肺炎灭活疫苗安全性和抗体水平的影响 被引量:2
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作者 袁婷 吴娅琴 +6 位作者 郝华芳 陈胜利 颜新敏 史耀旭 赵天荣 储岳峰 孙延鸣 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1422-1426,共5页
为了评价免疫途径对绵羊支原体肺炎灭活疫苗安全性和免疫效果的影响,将该疫苗分别于颈部皮下和肌肉各接种205只绵羊,对全身性反应和注射局部进行安全性观察,并于免疫当天和免疫后第21天各采集50只绵羊血分离血清,用绵羊肺炎支原体ELISA... 为了评价免疫途径对绵羊支原体肺炎灭活疫苗安全性和免疫效果的影响,将该疫苗分别于颈部皮下和肌肉各接种205只绵羊,对全身性反应和注射局部进行安全性观察,并于免疫当天和免疫后第21天各采集50只绵羊血分离血清,用绵羊肺炎支原体ELISA试剂盒检测血清抗体阳转率和抗体水平。结果,皮下注射组(19.5%)与肌肉注射组(17.6%)全身性不良反应均较高,差异不显著;但皮下注射组(36.6%)的局部不良反应显著高于肌肉注射组(2.4%);肌肉注射组抗体阳转率(89.8%)和平均D450值升高水平(免疫后比免疫前升高0.89)均显著高于皮下注射组(77.1%,0.45)。上述结果表明,肌肉注射绵羊支原体肺炎灭活疫苗的安全性和免疫效果优于皮下注射。 展开更多
关键词 绵羊支原体肺炎灭活疫苗 肌肉注射 皮下注射 安全性 抗体水平
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山羊支原体山羊肺炎亚种特异性分子检测靶标的鉴定和应用 被引量:2
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作者 吴娅琴 刘保红 +8 位作者 袁婷 陈芙 蔡亚婷 郝华芳 陈胜利 马丽娜 刘永生 颜新敏 储岳峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1257-1262,共6页
本文旨在筛选出新的山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)特异性分子诊断靶标。首先通过全基因组本地BLASTp方法筛选得到Mccp理论上特异的蛋白基因序列,经BLASTn验证、优选特异性基因92.1作为候... 本文旨在筛选出新的山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)特异性分子诊断靶标。首先通过全基因组本地BLASTp方法筛选得到Mccp理论上特异的蛋白基因序列,经BLASTn验证、优选特异性基因92.1作为候选靶标,设计引物92.1F/R,采用普通PCR体系检测4株Mccp(1801、1601、1309F、Zly-14)和7种其他支原体基因组DNA,包括无乳支原体(Ma)PG2、丝状支原体山羊亚种(Mmc)PG3、Mmc YG(前称丝状支原体丝状亚种大菌落型,MmmLC)、绵羊肺炎支原体(Mo)Y98、山羊支原体山羊亚种(Mcc)Ckid、牛支原体(Mb)08M、李奇氏支原体(Ml)PG50,并检测Mccp、Mo、Mmc人工感染羊试验样本DNA,评估该体系的特异性。结果表明92.1F/R引物只能从Mccp菌株及其感染试验样本中扩增出509 bp目的条带,证实该引物可用于检测Mccp,92.1序列可作为CCPP新的核酸诊断靶标,为CCPP诊断和实验室研究提供了一种新的分子标记。 展开更多
关键词 山羊支原体山羊肺炎亚种 分子诊断靶标 引物 诊断
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山羊支原体山羊肺炎亚种M17基因的原核表达及细胞定位研究 被引量:1
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作者 赵国强 郝华芳 +7 位作者 陈胜利 颜新敏 马丽娜 邹璐 史耀旭 刘永生 曾巧英 储岳峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1023-1028,共6页
为分析山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)氨基肽酶M17的特征及细胞定位。参照GenBank中Mccp M1601株的M17基因序列,优化密码子,合成原核表达载体pET30a-M17,将鉴定正确的表达载体转化大肠杆菌B... 为分析山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)氨基肽酶M17的特征及细胞定位。参照GenBank中Mccp M1601株的M17基因序列,优化密码子,合成原核表达载体pET30a-M17,将鉴定正确的表达载体转化大肠杆菌BL21 (DE3),经IPTG诱导后获得融合表达蛋白;用其免疫新西兰兔,制备超免疫血清,并测定其效价和代谢抑制效果;通过Western-blot和i ELISA两种方法对M17在Mccp细胞内的分布进行了初步研究。结果显示,pET30a-M17重组蛋白在大肠杆菌中获得成功表达,大小约50 ku,与预期相符,密码子优化后的表达产物以可溶性和包涵体两种形式存在;免疫后的兔血清抗体效价达1∶80 000以上,说明M17重组蛋白具有较好的免疫原性和反应活性;M17多抗血清对Mccp无代谢抑制作用,但能够与Mccp的膜蛋白、胞浆蛋白及全菌蛋白发生特异性反应,表明M17蛋白在Mccp的细胞膜和细胞质中均有分布,但细胞膜中含量略高于细胞浆。M17的成功表达以及在Mccp中的细胞定位为其生物学功能研究奠定了基础,也为山羊传染性胸膜肺炎的诊断和疫苗研制提供了参考。 展开更多
关键词 山羊支原体山羊肺炎亚种 M17基因 原核表达 代谢抑制 细胞定位
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山羊支原体山羊肺炎亚种黏附山羊气管上皮细胞间接免疫荧光检测方法的建立 被引量:1
9
作者 蔡亚婷 郝华芳 +6 位作者 张晓亮 袁婷 陈胜利 颜新敏 马丽娜 储岳峰 孙延鸣 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1090-1096,共7页
以山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)M1801株和山羊气管上皮细胞(GTC)为研究对象,通过优化Mccp接种滴度、孵育时间及一抗、二抗工作浓度,建立Mccp黏附宿主细胞的间接免疫荧光检测方法。确定Mccp的最适黏附滴度为1.5×10^(7)~7.0×10... 以山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)M1801株和山羊气管上皮细胞(GTC)为研究对象,通过优化Mccp接种滴度、孵育时间及一抗、二抗工作浓度,建立Mccp黏附宿主细胞的间接免疫荧光检测方法。确定Mccp的最适黏附滴度为1.5×10^(7)~7.0×10^(7)copies/μL,黏附时间为2 h,一抗最适稀释度为1∶100,二抗最适稀释度为1∶100。用本试验建立的间接免疫荧光方法证实Mccp人工感染山羊血清可阻断其黏附GTC的作用,为Mccp感染的检测、黏附因子的鉴定及黏附机制的研究提供了有效技术手段。 展开更多
关键词 山羊支原体山羊肺炎亚种 黏附 间接免疫荧光 山羊气管上皮细胞
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牛支原体诱导宿主免疫应答的研究进展 被引量:6
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作者 季文恒 陈胜利 +6 位作者 郝华芳 颜新敏 吴娅琴 翟肖辉 Hussam Askar Hamad 马丽娜 储岳峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期512-518,共7页
牛支原体(Mycoplasma bovis)是一种重要的兽医病原体,牛支原体感染给当前世界养牛业造成了重大的经济损失。本文从天然免疫、体液免疫和细胞免疫三个方面,对宿主感染牛支原体后的免疫应答特点进行了概括和讨论,可帮助我们更好地了解牛... 牛支原体(Mycoplasma bovis)是一种重要的兽医病原体,牛支原体感染给当前世界养牛业造成了重大的经济损失。本文从天然免疫、体液免疫和细胞免疫三个方面,对宿主感染牛支原体后的免疫应答特点进行了概括和讨论,可帮助我们更好地了解牛支原体与宿主的相互作用,也为合理地设计和研发有效的牛支原体感染防控技术提供参考。 展开更多
关键词 牛支原体 天然免疫 细胞免疫 体液免疫
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Motif Discovery and Phylogenetic Analysis of Hepatitis B Virus Sequences
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作者 ZHANG Qi ZHANG Jun-peng +4 位作者 GAO Jian-mei HE Jian-feng yan xin-min MA Lei LI Jiu-yong 《Chinese Journal of Biomedical Engineering(English Edition)》 CSCD 2016年第3期121-126,共6页
Hepatitis B virus(HBV) infection is a severe global health problem. In recent years, mutations as an essential element in the HBV evolution have been extensively studied. However, the study of the conserved sequence f... Hepatitis B virus(HBV) infection is a severe global health problem. In recent years, mutations as an essential element in the HBV evolution have been extensively studied. However, the study of the conserved sequence for the evolution of HBV is still in its infancy. In this paper, we applied MEME(multiple EM for motif elicitation) algorithm for motif discovery and proposed a new metric CI(conserved index) to make phylogenetic analysis of HBV sequences. Our results indicate that MEME can efficiently discover multiple motifs from HBV sequences and the new measurement CI for the conservative of sequences can effectively help us to build the phylogenetic tree.Thus, we can get evolutionary relationship of HBV sequence through the phylogenetic tree. 展开更多
关键词 motif discovery HBV phylogenetic tree conserved index evolution-ary relationship
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