中药香囊的历史渊源和研究进展

通过古今文献研究,总结中药香囊的历史渊源、常用中药及其功效,阐述中药香囊的临床应用情况,认为古代医学家使用中药香囊治疗疾病取得了良好疗效;在近现代研究中,亦表明中药香囊具有抑菌、抗病毒、提高免疫力等疗效,可以用来预防治疗流感、改善睡眠质量,具有一定的缓和抑郁焦虑的作用。

不同产地罗汉果总皂苷、甜苷V和硒含量及指纹图谱研究

对不同产地同一品种收获期罗汉果总皂苷、甜苷V和硒的含量进行比较,了解罗汉果的品质特点与产地的相关性,科学指导种植区域的生产规划,明确不同区域罗汉果的品质特点和开发等直接关系到罗汉果深加工产业的质量与发展。采用香草醛-浓硫酸试剂分光光度比色法分别测量各罗汉果果实样品中总皂苷的含量,采用高效液相色谱法测量甜苷V的含量,采用氢化物原子荧光光谱法测量其中硒的含量,并对各指标进行方差分析和差异显著性的多重比较。结果表明,各样品总皂苷含量在2.42%~3.34%之间,甜苷V含量在0.68%~1.41%之间,硒含量在5.634~41.462μg/kg之间;来源于不同产地的罗汉果样品,其总皂苷含量差异并不显著,但甜苷V和硒含量分别表现出显著差异;广西、湖南和四川,罗汉果果实总皂苷和甜苷V含量均可达到药典指标要求。因此,罗汉果具有较广的种植区域,但不同产地甜苷V含量差异相对显著,暗示果实甜苷V的转化效率或成熟度具有一定差异,宜根据产地及年度气候条件适当调整收获期,以满足不同加工利用的需要。

达氏鲟自噬基因MAP1LC3B克隆及其组织表达分析

【目的】掌握达氏鲟微管相关蛋白1A/1B轻链3B基因(MAP1LC3B)的表达模式,为后续研究MAP1LC3B基因功能及揭示达氏鲟的抗病分子机制提供理论依据。【方法】采用RACE技术从达氏鲟组织中克隆MAP1LC3B基因,通过ProtParam、TMpred、Phyre2及Singal 4.1等在线软件进行生物信息学分析,同时借助实时荧光定量PCR检测MAP1LC3B基因在达氏鲟不同组织中的表达情况。【结果】达氏鲟MAP1LC3B基因cDNA序列全长2208 bp,包含378bp的开放阅读框(ORF)、202 bp的5’端非编码区(5’-UTR)和1628 bp的3’端非编码区(3’-UTR),编码125个氨基酸。MAP1LC3B氨基酸序列含有GABARAP泛素结构域、Agt7结合位点、脂化位点和维管束蛋白结合位点。达氏鲟MAP1LC3B蛋白由18种氨基酸组成,其中谷氨酸(Glu)含量最高(占9.6%)、丙氨酸(Ala)含量最低(占1.6%);蛋白分子量为14743.01 Da,理论等电点(pI)为8.92,不稳定系数为65.12,总平均亲水性为-0.484,是一种不稳定的疏水性蛋白,且不存在跨膜结构,也无信号肽序列。MAP1LC3B基因在达氏鲟鳃、脑、皮肤、头肾、前肾、脾脏、中肾、心脏和肠道等组织中均有表达,以在鳃和肠道组织中的相对表达量较高,显著高于在其他组织中的相对表达量(P<0.05)。【结论】达氏鲟MAP1LC3B基因具有较高的保守性,在鳃和肠道黏膜免疫组织中高表达,表明自噬参与达氏鲟黏膜免疫过程,调节机体免疫反应。

一株黄颡鱼源迟缓爱德华氏菌弱毒株的分离鉴定及特性分析

为探明湖北荆州市某养殖基地患病黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)以烂身、腹水为主要症状且持续性死亡的确切病因,本研究对患病黄颡鱼进行了病原筛查,从患病黄颡鱼组织中分离到一株优势菌,经过形态特征、生理生化鉴定、16S rRNA测序和系统进化分析确定分离菌株为迟缓爱德华氏菌,命名为Et-4。结果显示:分离菌株Et-4具有较强的生物被膜形成能力,不携带esaV、fimA、gadB和katB四种主要的毒力基因。分离菌株Et-4人工感染健康黄颡鱼出现与自然发病类似的症状,并能从病鱼中再次分离出该菌,证实迟缓爱德华氏菌是引起此次黄颡鱼持续性死亡的致病原;分离菌株Et-4对黄颡鱼的LD_(50)为3.9×10^(6)CFU/g,结合毒力基因谱判定其为弱毒株。分离株Et-4携带耐药基因tet A、sulⅠ和add A1,对头孢类药物、庆大霉素、新霉素等敏感;对四环素类、青霉素类、万古菌素等耐药;中药抑菌实验表明乌梅和丁香对迟缓爱德华氏菌Et-4有明显的抑制效果。

采用ICP-MS法评估土家族药物白三七中重金属污染风险

目的:为评估土家族药物白三七的重金属污染风险,建立合理的质量控制方法。方法:采用微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS),测定白三七中铜(Cu)、砷(As)、镉(Cd)、汞(Hg)、铅(Pb)5种重金属残留;根据中药中外源性有害残留物安全风险评估技术指导原则对重金属污染风险进行评估。结果:建立了测定白三七中重金属和有害元素含量的方法。主成分分析发现,不同产地样品中Cd和Pb的含量有明显差别。Cd和Pb是白三七中具有高风险的元素。结论:该方法准确、灵敏,可用于白三七金属元素残留的风险评估和质量控制。

几丁聚糖对黄鳝生长性能和非特异性免疫的影响

为探讨在饲料中添加不同浓度几丁聚糖对黄鳝(Monopterus albus)生长性能及非特异性免疫的影响,本实验以初始体重(15.0±0.5)g的黄鳝为研究对象,随机分成5组,每组3个重复,每个重复60尾鱼。5组试验鱼分别饲喂在基础饲料中添加0(对照)、1%、2%、3%和4%几丁聚糖溶液(几丁聚糖的有效浓度为0.6%)的试验饲料,饲喂60 d。结果显示:与对照组相比,在饲料中添加几丁聚糖能显著提高黄鳝增重率、特定生长率,降低饵料系数。当添加量为3%时,黄鳝血清中的总蛋白含量,碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶的活性显著高于其余各组,且总胆固醇和甘油三酯的含量显著低于其余各组。在添加量为4%时酸性磷酸酶的活性显著最高。上述实验结果表明,在黄鳝饲料中添加适量的几丁聚糖能够提高其生长性能和非特异性免疫功能,黄鳝饲料中几丁聚糖的适宜添加量为3%。

斑点叉尾鮰致病性类志贺邻单胞菌的分离鉴定及药物敏感性

为探究某斑点叉尾鮰养殖场鱼类发病死亡原因,从患病的斑点叉尾鮰(Ietalurus Punetaus)鱼体分离得到一种病原菌,通过形态学观察以及16S rRNA基因序列测定与系统发育树构建分析,确定该菌为类志贺邻单胞菌(Plesiomonas shigelloides)。用Kirby-Bauer纸片扩散法检测病原菌的敏感性,进行药敏试验。类志贺邻单胞菌为革兰氏阴性菌,且对呋喃唑酮、头孢拉定、头孢曲松、头孢唑林及头孢呋辛5种药物产生高度敏感,对氧氟沙星、头孢氨苄、哌拉西林等11种药物中度敏感。通过回归感染试验进行验证,注射类志贺邻单胞菌菌株后,斑点叉尾鮰感染后出现的症状与自然发病个体的症状基本相同。从患病鱼体分离出的即为类志贺邻单胞菌,也正是该致病菌导致斑点叉尾鮰死亡,可利用头孢类高度敏感药物防治。

分子标记技术在黄鳝育种中的应用

通过对几种分子标记技术的介绍,总结了分子标记技术在黄鳝(Monopterus albus)的遗传多样性分析、亲缘关系研究、性别鉴定等方面的研究应用成果。

框镜鲤邻单胞菌的分离鉴定与抗菌药物筛选

为了确定引起湖北荆州某养殖场框镜鲤患病的病原,筛选出用于控制病原感染的抗菌药物和中药。从患病框镜鲤中分离到1株优势菌QPB1,通过生理生化和分子特征进行鉴定,结合药敏试验和耐药基因检测分析菌株的抗菌药物敏感性,并从39种中药中筛选有抑菌效果的药物。结果显示,分离菌株QPB1为革兰氏阴性杆菌,其16S rRNA基因序列与类志贺邻单胞菌(MK397781.1)的序列同源性达到99.79%;药敏试验表明QPB1对庆大霉素、环丙沙星等13种抗菌药物敏感,对红霉素、哌拉西林等7种抗菌药物耐药,并携带耐药基因tetA、tetM、sulⅠ、sulⅡ;中药抑菌试验表明,丁香、连翘、黄连等9种中药对QPB1表现出明显的抑制作用。试验表明,从患病框镜鲤中分离的优势菌株QPB1为类志贺邻单胞菌,其生物学特性、耐药基因型及抗菌药物的筛选为类志贺邻单胞菌的临床诊断和精准施治提供理论依据和实践参考。

Qualitative and Quantitative Analysis of Linoleic Acid in Polygonati Rhizoma

Objective To explore the major compound in Polygonati Rhizoma(Huang Jing,黄精)for quality control.Methods The major compound was isolated and analyzed by liquid chromatography-mass spectrometry(LC-MS),and subsequently further identified by nuclear magnetic resonance(NMR).Thin layer chromatography(TLC)was optimized based on the previous methods reported in the Chinese Pharmacopeia(2015 edition).Results The major compound was isolated from the natural material and identified as linoleic acid.A high performance liquid chromatography(HPLC)method with robust linearity(R2=0.9997),specificity,precision,stability,repeatability and recovery was developed for linoleic acid determination.TLC chromatogram was improved significantly after optimization for qualitative analysis.Conclusions The optimized TLC method is practical and can be adopted for quality control of Polygonati Rhizoma(Huang Jing,黄精).The levels of linoleic acid vary between species of Polygonati Rhizoma(Huang Jing,黄精),with Polygonatum cyrtonema Hua(Jiang Xing Huang Jing,姜型黄精)showing the highest contents.This study provides valuable information for quality control of Polygonati Rhizoma(Huang Jing,黄精).

异型南五味子根的化学成分研究

运用硅胶柱色谱、Sephadex LH⁃20、ODS、MCI和半制备高效液相等多种色谱技术对异型南五味子Kadsura heteroclita根二氯甲烷部位的化学成分进行研究。运用NMR、MS、UV、X⁃ray单晶衍射等技术对化合物进行结构鉴定,共分离得到20个化合物,分别鉴定为血筒内酯G(1)、mallomacrostin C(2)、3,4⁃seco(24Z)⁃cychmrt⁃4(28),24⁃diene⁃3,26⁃dioic acid 3⁃methyl ester(3)、黑五味子酸(4)、五内酯E甲酯(5)、五味子酸(6)、heteroclic acid(7)、汉黄芩素(8)、(2R,3R)⁃4′⁃甲氧基二氢槲皮素(9)、15,16⁃bisnor⁃13⁃oxo⁃8(17),11E⁃labdadien⁃19⁃oic acid(10)、stigmast⁃4⁃ene⁃6β⁃ol⁃3⁃one(11)、补骨脂素(12)、(1R,2R,4R)⁃trihy⁃droxy⁃p⁃menthane(13)、香草醇(14)、2⁃(4⁃hydroxyphenyl)⁃ethanol(15)、松柏醛(16)、(E)⁃7⁃(4⁃hydroxy⁃3⁃methoxyphenyl)⁃7⁃methylbut⁃8⁃en⁃9⁃one(17)、香草乙酮(18)、香草酸(19)、香草醛(20)。其中化合物1为新的三萜,命名为血筒内酯G,化合物2~3、8~20均为首次从异型南五味子中分离得到。

紫外-可见分光光度法测定多花黄精多糖含量

目的:测定湖南洪江国家黄精标准化基地多花黄精中的多糖含量,为多花黄精的进一步开发利用及药材质量标准研究奠定基础。方法:以葡萄糖为标准品,采用硫酸-蒽酮试剂显色,应用紫外-可见分光光度法测定多花黄精多糖含量。结果:葡萄糖在3.28~19.68μg/m L范围内线性良好(r=0.9992),多花黄精多糖平均含量为8.05%。结论:洪江种植基地的多花黄精品质优良,洪江是道地黄精药材种植理想基地。

基于特征图谱和一测多评法的黄柏质量控制研究

目的 建立能有效区分黄柏Phellodendri Chinensis Cortex与其易混淆品种关黄柏Phellodendri Amurense Cortex的特征图谱及一测多评方法,促进黄柏临床用药的安全性与有效性。方法 利用HPLC对黄柏中化学成分进行分析,对色谱条件进行优化,确定最佳色谱条件,建立特征图谱,利用主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)对特征图谱数据进行分析,筛选和确认差异性化合物,以盐酸小檗碱为参照物,建立一测多评方法测定黄柏主要有效成分含量。结果 所建立的特征图谱及一测多评方法能鉴别黄柏与关黄柏,以木兰花碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱以及一未知化合物(7号峰)为差异性化合物,黄柏中盐酸小檗碱含量明显高于关黄柏,黄柏中盐酸巴马汀峰面积极低而关黄柏中其峰面积较高。黄柏中木兰花碱的含量较低而未知化合物(7号峰)峰面积较高。结论 所建立的特征图谱和一测多评方法简便,可作为《中国药典》修改标准的参考,用于黄柏的质量控制。

天然来源的降木脂素类化合物及其生物活性研究进展

天然来源的降木脂素类化合物,结构类型复杂多样,分布广泛,根据2个苯丙素分子连接方式和连接位置的不同可将降木脂素分为降木脂素和降新木脂素。降木脂素类化合物具有抗肿瘤、抗过敏、抗炎、抗氧化和抗HIV及激素样作用等多种生物活性。主要对天然来源的降木脂素类化合物的结构类型及生物活性进行综述,为降木脂素类化合物的研究开发和应用提供依据。

黄鳝免疫球蛋白M和D基因的表达分析

[目的]探究雌雄黄鳝IgM、IgD基因在健康状态下的本底表达。[方法]从NCBI数据库和实验室黄鳝转录本下载基因的cDNA序列,利用MEGA 7.0构建系统进化树。使用Trizol法提取黄鳝总RNA并用试剂盒反转录为cDNA,进行荧光定量分析。[结果]黄鳝IgM基因在肠道、脾脏、头肾中表达量显著高于其他各组织(P<0.05)。在中肾中雄鱼IgM基因表达量显著高于雌鱼,脾脏中雄鱼IgM基因表达量极显著高于雌鱼(P<0.01)。黄鳝IgD基因在脾脏、头肾、中肾及血液组织表达量显著高于其他组织(P<0.05)。在中肾中雄鱼IgD基因表达量极显著高于雌鱼(P<0.01)。[结论]成功得出黄鳝IgM、IgD在各器官的本底表达水平。暗示了黄鳝在未受外来病原刺激下脾脏、肾脏和肠道是产生天然抗体的场所。而不同性别的黄鳝并不会差异性地表达IgM和IgD,表明IgM、IgD表达与性别无关。