丹皮酚对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体自噬和死亡的保护作用

目的研究线粒体自噬在MPP^+损伤SH-SY5Y细胞中的发生及丹皮酚的干预作用。方法以1 mmol·L^(-1) MPP^+诱导SH-SY5Y细胞损伤建立帕金森病模型。采用MTT和LDH法分别检测不同浓度的丹皮酚对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞存活率和损伤度的影响;MDC染色荧光显微镜下检测自噬空泡聚集;流式细胞术定量分析细胞内酸性自噬泡的形成;透射电镜观察线粒体自噬现象;激光共聚焦检测溶酶体和线粒体共定位;Western blot检测线粒体自噬相关蛋白parkin、LC3和Beclin-1的表达变化。结果在1～100μmol·L^(-1)浓度范围内,预先加入丹皮酚能拮抗MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞损伤,并呈一定的量效关系;SH-SY5Y细胞经MPP^+处理24 h,观察到自噬现象,出现自噬空泡增多,自噬水平增加,并存在较多的线粒体与溶酶体共定位的现象,LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达增加,parkin表达降低。预先加入丹皮酚后能逆转这些现象。结论丹皮酚抑制MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体自噬的发生,阻止神经细胞的死亡。

盐酸阿霉素通过DRP1/FUNDC1信号通路调节线粒体动力学诱导大鼠慢性心力衰竭

目的探讨盐酸阿霉素(doxorubicin hydrochloride,DOX)对大鼠心功能的损害程度,并初步探讨其可能机制。方法实验一:SD大鼠(n=48)随机分为Control组(生理盐水)、DOX 1组(DOX腹腔注射累积剂量12 mg·kg^(-1))、DOX 2组(15 mg·kg^(-1))、DOX 3组(18 mg·kg^(-1))。采用超声心动图检测各组大鼠心脏结构和心功能;ELISA法检测B型脑钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP);HE染色观察心肌组织形态学变化。综合选出最优剂量组(DOX 2组)。实验二:SD大鼠(n=36)随机分为Control组(生理盐水)、DOX 2组(15 mg·kg^(-1))、DOX 2+Mdivi-1组(15 mg·kg^(-1)+每日腹注Mdivi-1(1 mg·kg^(-1))。Western blot法检测心肌线粒体动力学相关蛋白表达。结果与Control组相比,DOX各组心脏扩大,心功能下降;DOX组镜下见心肌细胞肥大、心肌纤维排列松散,且大鼠DOX体内累积剂量越高,大鼠心衰程度越重,死亡率越高。与Control组相比,DOX 2组线粒体分裂蛋白1(dynamin-related protein 1,DRP1)及相关信号通路蛋白(FUN14 domain containing 1,FUNDC1)表达增强,视神经萎缩1(optic atrophy 1,OPA1)表达降低,使用了线粒体动力学抑制剂(Mdivi-1)后,FUNDC1、DRP1蛋白表达量降低,OPA1蛋白表达增强。结论DOX可以导致慢性心衰,其机制可能与DRP1/FUNDC1介导的线粒体分裂、融合相关。

PVA/PF复合凝胶磨具精密磨削碳化硅陶瓷工艺实验研究

目的针对传统粉末热压成形细粒度金刚石磨具存在颗粒团聚、磨削碳化硅陶瓷容易在表面产生较深划痕的问题,提出一种基于冷冻-解冻凝胶成形的细粒度金刚石磨具,用于精密磨削碳化硅陶瓷,并研究其加工工艺。方法制备聚乙烯醇-酚醛树脂复合凝胶胶水,将金刚石和填料在凝胶胶水中剪切分散,得到的浆料浇筑在模具中,在–20℃低温条件下反复冷冻,形成胶体,再经干燥、烧结,得到粒度为2.5µm的细粒度金刚石磨削磨具。采用制备的金刚石凝胶磨具磨削碳化硅平面反射镜,对比不同磨具转速、进给速度、磨削深度工艺条件下的表面磨削质量。结果在低温条件下,聚乙烯醇-酚醛树脂分子链发生了物理交联,形成凝胶体,凝胶结合剂结合强度高,且分布均匀,所制备的凝胶磨具强度高于热压磨具,该方法可以解决传统粉料压制成形方法容易出现物相团聚、微观结构不一致的问题。磨削结果显示,当磨削进给速度为0.008 mm/min、磨具转速为1450 r/min、磨削深度为0.016 mm、转台转速为60 r/min时,获得了表面粗糙度Ra低于3.5 nm的镜面磨削效果,表面质量好于热压磨具磨削效果,3个ϕ100 mm区域平面度PV值均小于0.5µm。结论采用聚乙烯醇-酚醛树脂复合凝胶成功制备了细粒度金刚石磨削磨具,通过优化磨削工艺参数,为碳化硅平面反射镜镜面加工提供了一种新的加工工艺。

针灸戒毒的神经生物学机制研究进展

近年来有关戒毒的观察研究屡见报道,其中运用中医针灸疗法在治疗毒品成瘾领域显示出较大优越性。研究表明,针灸戒毒的作用机理可能与神经系统、内分泌系统及免疫系统的多个系统效应作用有关。笔者查阅涉及针灸戒毒的作用机制文献,并在此基础上对针灸治疗毒品成瘾的神经生物学机制研究进行总结。

增苗节氮对晚稻生物学特性及产量的影响

针对目前湖南部分地区水稻生产中氮肥施用过量的问题,以湘晚籼12号为试验材料,设置以施氮量为主区、抛栽密度为副区的裂区试验,分析两因素及其互作对晚稻生产的影响。结果表明:施氮量与抛栽密度的交互作用不显著,但对水稻产量有较大影响;在施氮量9 kg/667m^2、抛栽密度2.6万株/667m^2模式下,晚稻理论产量最高,为572.29 kg/667m^2;通过二次多项式回归分析施氮量、抛栽密度密度与产量间的关系可知,产量最高为562.26 kg/667m^2时,对应的施氮量为10.33 kg/667m^2、抛栽密度为2.6万株/667m^2,比常规施氮量节省13.92%。这说明合理减少氮肥用量、提高抛秧密度可实现水稻稳产、氮肥高效利用。

南县稻田养虾产业发展现状、存在的问题与建议

为了进一步挖掘南县稻田养虾的生产潜力与推动南县稻田养虾产业的发展,对南县稻田养虾的发展现状以及稻虾共生、稻虾轮作和一稻三虾等主要种养模式进行了综述;从经济效益、生态效益和社会效益3个方面对稻田养虾的效益进行了分析;针对南县稻田养虾存在的种养主体参差不齐、轻视水稻种植、种苗供应不足、产业体系薄弱和种养风险较大的问题,提出了制订稻虾种养技术标准、建立虾苗繁育基地、完善稻虾产业体系和强化政府引导以抵御种养风险的建议。

众包视角下救灾减灾的社会参与系统运行机制研究

我国地域辽阔,灾害频发,对自然灾害的防治面临着严峻的局面。近年,社会公众参与救灾的热情不断高涨,但是很难有效发挥其积极作用。本文通过国内公众救灾减灾经验总结和国外众包救灾模式应用的成果研究,结合我国基本国情,提出科学有效的众包模式救灾减灾方法,以引导社会公众在参与救灾减灾期间的规范行为。

湖南省水稻种植从业人员基本状况调研

为了了解当前湖南省水稻种植从业人员的基本情况,提高水稻生产相关政策制定和技术研发推广的针对性和落实效果,对全省14个市州29个县区的435名水稻种植从业人员进行问卷调查。结果表明:当前湖南省水稻种植从业人员的年轻化程度、文化水平、万元以上收入人员比例和主营种植人员比例均随种植规模增大而有所提高,但是群体出现老龄化,且文化水平偏低。针对这一现状,提出要重视不同水稻种植规模农户群体的特征差异,并对其进行精准施策和技术推广,重视农业社会化服务机构在农业新技术新产品推广应用中的作用,最大限度保障粮食生产;同时,要从多方入手,提高种稻经济效益,吸引更多青年人才从事水稻生产,最大限度降低稻农老龄化的不利影响。

Main Rice Pests Control with Trichogramma japonicum

This study used Trichogramma japonicumto to control Chilo suppressalis （Walker） and Cnaphalocrocis medinalis（Guenée）, and tested the effects of different control methods on main rice pests, natural enemies and rice yield. The results revealed that the parasitism of Trichogramma japonicum in the eggs of Chilo suppressalis （Walker） and Cnaphalocrocis medinalis （Guenée） reached 60.3% and 57.1%, and the control efficacy was up to 70.8 % and 91.99%, respectively. The control efficacy for Cnaphalocrocis medinalis （Guenée） was much better. This biological control method could be equivalent to chemical control method in the control effects on main pests in rice. The yield under the biological control was 26.5% higher than that of the control group, and the biological control had a signifcant increase in the number of natural enemies such as spider, up to 400 per 100 plants. Therefore, the sustainable prevention and control were achieved in the presentence with natural enemy organism.

安神定志方对D-半乳糖协同AβO诱导的小鼠阿尔茨海默病样行为的改善作用及机制研究

本研究旨在探讨安神定志方(ADP)对小鼠阿尔茨海默病(AD)样行为的改善作用及机制。采用超高效液相色谱-飞行时间质谱技术标定ADP的主要成分。以D-半乳糖(D-gal)协同Aβ1-42寡聚体(AβO)诱导小鼠AD样行为,运用多种行为学方法评估ADP对小鼠AD样行为的影响;Nissl染色与透射电镜观察海马组织的病理形态改变;ELISA检测氧化应激和炎症相关因子水平;Western blot检测Aβ、Tau和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。根据TCMSP和HERB数据库筛选ADP的活性成分,利用Swiss Target Prediction平台预测活性成分的作用靶点;通过TTD、OMIM、GeneCards和DisGeNET数据库预测AD的疾病靶点;运用Metascape数据库对共有靶点进行GO、KEGG富集分析。结合GO和KEGG分析结果进行体内实验验证,从PI3K/Akt、钙信号通路以及突触功能角度探究ADP改善小鼠AD样行为的潜在机制。最后使用Autodock Vina对ADP的核心成分与已验证靶点进行分子对接。动物实验经安徽中医药大学动物伦理委员会批准(批准号:AHUCM-mouse-2021080)。结果表明,ADP中含有ginsenoside Rg1、ginsenoside Rb1、tenuifolin、poricoic acid B、α-asarone等主要化学成分。ADP显著改善D-gal协同AβO诱导的AD小鼠焦虑样行为和记忆损伤,保护海马神经元,降低氧化应激和炎症水平,抑制Aβ、磷酸化Tau表达。网络药理学结果提示PI3K/Akt、钙信号通路以及与突触后膜相关的细胞组分可能是ADP改善AD的关键因素。动物实验进一步确证ADP作用可以上调小鼠海马N-甲基-D-天氡氨酸离子型谷氨酸受体2A(GluN2A)、突触后致密蛋白95(PSD95)、钙蛋白酶1(calpain-1)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(p-CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达,抑制p-GluN2B和calpain-2表达。分子对接结果表明,ADP的核心成分panaxacol、dehydroeburicoic acid、deoxyharringtonine等与已验证靶点GRIN2A、GRIN2B、PSD95等均具有较强结合力。综上表明,ADP能够改善D-gal协同AβO诱导的小鼠AD样病理变化和行为改变,其调控机制可能和NMDAR/calpain、Akt/CREB/BDNF通路有一定的关联性。

电针对血管性痴呆大鼠海马微血管结构和相关蛋白表达的影响

目的:观察电针“百会”“神庭”对血管性痴呆(VD)大鼠海马微血管结构及相关蛋白表达的影响,探讨电针治疗血管性痴呆的作用机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、奥拉西坦组,每组6只。采用多发性脑梗死法复制VD模型。电针组电针“百会”“神庭”,每次30 min;奥拉西坦组予以奥拉西坦(50 mg/kg)腹腔注射,两组均1次/d,持续14 d。采用Morris水迷宫实验、新物体识别实验评价各组大鼠学习和记忆功能;电子天平测量大脑质量;激光多普勒血流监测仪检测各组大鼠脑血流变化;透射电子显微镜观察各组大鼠海马CA1区微血管结构;Western blot法检测各组大鼠海马微血管结构相关蛋白血小板衍生生长因子受体β(PDGFR-β)、血小板内皮细胞黏附分子-1(CD31)、神经钙黏附蛋白(N-Cadherin)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)蛋白表达情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠第1次穿越平台时间延长(P<0.05),跨越平台次数减少(P<0.05),新物体认知指数(RI)降低(P<0.05),脑血流量降低(P<0.05),大脑质量增加(P<0.05),海马CA1区微血管周细胞、内皮细胞结构边界模糊,血管周围有明显水肿,紧密连接明显减少,海马组织PDGFR-β、CD31、N-Cadherin、ZO-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,电针组和奥拉西坦组大鼠第1次穿越平台时间缩短(P<0.05),跨越平台次数增加(P<0.05),脑血流量显著增加(P<0.05),大脑质量减少(P<0.05),海马CA1区微血管中周细胞、内皮细胞形态结构完整,紧密连接明显增多,海马组织PDGFR-β、ZO-1蛋白表达水平上调(P<0.05);电针组RI升高(P<0.05),海马组织CD31蛋白表达水平上调(P<0.05);奥拉西坦组海马组织N-Cadherin蛋白表达水平上调(P<0.05)。结论:电针“百会”“神庭”能改善VD大鼠学习记忆功能,其机制可能与修复微血管结构、改善脑血流相关。

艾灸对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞自噬功能的影响

目的:观察艾灸对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能及自噬相关蛋白LC3、p62表达的影响,探讨艾灸防治CHF的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常组12只与造模组48只,采用腹腔注射盐酸多柔比星复制CHF模型,将建模成功的大鼠随机均分为模型组、艾灸组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、自噬激动剂雷帕霉素(RAPA)组。艾灸组用艾条温和灸双侧"肺俞""心俞"穴,每日1次,每次20min,治疗3周。3-MA组按15 mg/kg给予3-MA混悬液腹腔注射,每日1次,共3周。RAPA组按2mg/kg给予RAPA混悬液灌胃,每日1次,共3周。观察大鼠的一般情况及行为体征;心功能测量仪检测大鼠心率(HR)、心输出量(CO)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升或下降速率(±dp/dtmax);HE染色法观察心肌病理变化;Western blot法检测心肌细胞自噬相关蛋白LC3及p62表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌细胞出现肿胀、空泡,肌纤维断裂、溶解,排列紊乱;与模型组比较,艾灸组和3-MA组大鼠心肌细胞的数量正常,心肌纤维排列相对整齐,RAPA组心肌细胞出现肿胀、空泡,心肌纤维断裂、溶解,排列紊乱等状况。与正常组比较,模型组HR和LVEDP明显升高(P<0.01),CO、LVSP及±dp/dtmax明显下降(P<0.01),LC3-Ⅱ表达、LC3-Ⅱ/Ⅰ明显升高(P<0.01),而p62表达明显下降(P<0.01)。与模型组比较,艾灸组和3-MA组HR和LVEDP明显下降(P<0.05),CO、LVSP及±dp/dtmax明显升高(P<0.05),LC3-Ⅱ表达、LC3-Ⅱ/Ⅰ明显降低(P<0.01),p62表达明显升高(P<0.01),而RAPA组LC3-Ⅱ/Ⅰ明显升高(P<0.01),p62表达明显降低(P<0.01)。结论:艾灸可以改善CHF大鼠心肌损伤,其作用可能与降低心肌细胞LC3-Ⅱ/Ⅰ、升高p62蛋白表达水平,发挥类似于3-MA的自噬抑制作用,抑制心肌细胞过度自噬、减轻心肌损伤有关。

巴芪灵猫方及单味药材水煎浸膏的特征薄层色谱研究

目的 研究巴芪灵猫方全方及10个单味药材水煎浸膏的薄层特征图谱,用于药材和制剂的鉴别和质量控制。方法 采用优化后水煎提取工艺分别对3批全方、制巴戟天、炙淫羊藿、生地黄、黄芪、炒白术、猫爪草、灵芝、苦参、丹参和醋青皮药材及其对照药材进行提取,制备其水煎浸膏。采用HF_(254)高效薄层层析硅胶板,选用不同的展开剂分别对全方或单味药材水煎浸膏进行薄层色谱制备。经稀硫酸显色后,采用日光和紫外线(254 nm和365 nm)进行检视。结果 薄层色谱斑点清晰,分离度和重复性良好,具有良好的特征性。结论 可作为巴芪灵猫方全方及单味药材水煎浸膏的质量控制方法之一。

醋青皮水煎浸膏HPLC特征图谱及5个黄酮成分的含量测定

目的建立醋青皮水煎浸膏高效液相色谱(HPLC)特征图谱,同时测定其中5种黄酮成分含量。方法采用YMC-Pack ODS-A(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈和0.5%醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱。柱温:30℃,流速:1.0 ml/min,进样量20μl。检测波长:280 nm(特征图谱)、283 nm(芸香柚皮苷、柚皮苷和橙皮苷)、330 nm(川陈皮素)和322 nm(橘皮素)。结果建立了醋青皮水煎浸膏的HPLC特征图谱,标记出13个共有峰,确认了芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、川陈皮素和橘皮素5个指标性黄酮成分,它们分别在1.2~46.2、1.4~54.9、1.2~46.8、0.4~16.6和0.4~16.0μg/ml范围内呈良好的线性关系。3批醋青皮药材水煎浸膏中芸香柚皮苷含量为29.88~32.56 mg/g、柚皮苷3.04~3.55 mg/g、橙皮苷7.32~20.08 mg/g、川陈皮素0.36~1.38 mg/g和橘皮素0.16~0.39 mg/g。结论该方法的特征图谱分离效果良好,含量测定方法可靠,可为醋青皮水煎浸膏质量控制方法提供实验依据。

针刺改善大鼠功能性消化不良伴抑郁样行为的作用机制研究

目的:观察针刺对功能性消化不良(FD)伴抑郁样行为大鼠的胃肠动力、突触结构、脑肠肽和5-羟色胺(5-HT)系统的影响,探讨针刺改善FD伴抑郁样行为大鼠的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组和氟西汀组,每组10只。采用多因素应激干预法建立FD伴抑郁样行为大鼠模型。针刺组针刺“百会”“中脘”和双侧“足三里”,20 min/次,每天1次,持续7 d;氟西汀组予以氟西汀(20 mg/kg)腹腔注射,每天1次,持续7 d。检测大鼠悬尾不动时间、强迫游泳不动时间和糖水偏好率;检测大鼠胃排空率和小肠推进率;透射电镜观察大鼠海马髓鞘和突触超微形态的变化;ELISA法检测大鼠血清生长抑素(SS)、胃动素(MTL)和5-HT的含量;Western blot法检测大鼠海马色氨酸羟化酶1(TPH1)和5-羟色胺受体3(5-HT_(3)R)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠悬尾不动时间和强迫游泳不动时间增加(P<0.05),糖水偏好率降低(P<0.05),胃排空率和小肠推进率降低(P<0.05),髓鞘结构明显损伤,突触数量减少(P<0.05),血清SS、MTL和5-HT的含量降低(P<0.05),TPH1和5-HT_(3)R蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,针刺组大鼠悬尾不动时间和强迫游泳不动时间减少(P<0.05),糖水偏好率升高(P<0.05),胃排空率和小肠推进率升高(P<0.05),髓鞘结构正常,突触数量显著增加(P<0.05),血清SS、MTL和5-HT含量升高(P<0.05),TPH1和5-HT_(3)R蛋白表达水平升高(P<0.05);氟西汀组行为学指标、突触数量、血清5-HT含量、海马TPH1和5-HT_(3)R蛋白表达水平变化趋势与针刺组相同,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针刺能够改善FD伴抑郁样行为大鼠胃肠动力障碍和突触损伤,其机制可能与调节脑肠肽水平和5-HT系统有关。