广东鹅源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定、耐药表型和耐药基因的检测及相关性分析

为了解广东地区鹅源多杀性巴氏杆菌(Pm)的流行情况、药物敏感性、耐药基因的携带情况以及耐药表型与耐药基因的相关性,本实验对2019年~2022年从广东地区采集的193份疑似感染Pm病鹅的心脏血液和肝脏组织划线接种于不同的培养基分离细菌,对分离菌纯化后采用PCR扩增分离菌的KMT1基因并测序,采用多重PCR扩增分离菌的5个荚膜基因及8个脂多糖基因,分析分离菌的荚膜分型与脂多糖(LPS)分型。结果显示分离到83株鹅源Pm,其中82株为荚膜A型,1株无法通过荚膜定型;LPS分型为L1型。采用K-B纸片扩散法检测分离菌的药物敏感性;通过PCR检测分离菌7类药物的15种耐药基因,包括β-内酰胺类(bla_(CTX-M)、bla_(TEM)、bla_(OXA))、氨基糖苷类(aadA1、aph(3’)Ila)、喹诺酮类(qnrA、qnrB、qnrS)、酰胺醇类(floR)、四环素类(tetM、tetX)、大环内酯类(ermF、ereD)、磺胺类(sul1、sul3)耐药基因。采用统计学软件SPSS22中的完全随机设计两样本率的卡方检验分析分离菌的耐药表型和相应耐药基因的相关性。药敏试验结果显示,83株鹅源Pm对多种药物敏感性较高,其中对喹诺酮类的环丙沙星和氧氟沙星、氨基糖苷类的丁胺卡那和大观霉素、β-内酰胺类的头孢曲松、磺胺类的复方新诺明、大环内酯类的阿奇霉素敏感的菌株占比均在63%以上;对氨基糖苷类的链霉素和卡那霉素耐药的菌株占比高于50%,对氨基糖苷类的新霉素和四环素类的四环素耐药的菌株分别占49.40%(41/83)和46.99%(39/83)。耐药基因的检测结果显示,分离菌检出耐药基因qnrB、sul3、blaTEM、aadA1、aph(3’)Ila、ereD、ermF、tetM、floR,检出率分别为9.63%(8/94)、27.71%(23/83)、28.92%(24/83)、48.19%(40/83)、14.46%(12/83)、49.40%(41/83)、3.61%(3/83)、1.20%(1/83)、32.53%(27/83),未检出耐药基因qnrA、qnrS、sul1、tetX、bla_(CTX-M)、bla_(OXA)。相关性分析结果显示,aadA1基因与Pm对新霉素、链霉素、卡那霉素、大观霉素的耐药性具有极显著的相关性(P<0.001);bla_(CTX-M)基因、floR基因分别与Pm对头孢拉定、氟苯尼考的耐药性具有显著相关性(P<0.05)。上述结果表明,广东地区鹅源Pm主要为A∶L1基因型,对多种药物敏感,耐药基因携带率不高,部分药物的耐药表型与耐药基因具有相关性。本研究为广东地区鹅源Pm病的监测和防治提供参考依据,为Pm耐药机制的研究奠定基础。

3,5-二甲基吡啶的合成及分离技术

采用醛氨法合成吡啶碱,低温结晶熔融法提纯3,5-二甲基吡啶。98.2%的3,5-二甲基吡啶粗品,通过-25℃低温熔融结晶6 h后,缓慢升温,接收-9℃以上的熔融物料作为3,5-二甲基吡啶产品。3,5-二甲基吡啶含量大于99%,收率达到77.8%。

夷陵区柑橘园土壤和叶片养分状况研究

为研究夷陵区柑橘园土壤和叶片营养元素状况及相关性,在柑橘主产区采集了41个土壤和叶片样品进行养分测定分析。结果表明,1)柑橘园土壤pH均值5.5,偏酸性柑橘园占22%。有机质、碱解氮、速效钾和有效硼处于低量缺乏的比例分别为33.1%、68.3%、36.6%和100%,其他土壤养分含量均适宜偏高水平。2)叶片中氮、钾、钙、镁和锌含量缺乏的柑橘园分别占34.1%、87.8%、36.6%、65.9%和95.1%。叶片磷、铁、锰、铜和硼含量在适宜偏高水平。3)土壤碱解氮、交换性钙、交换性镁、有效铁和有效硼的含量与叶片中对应元素存在显著正相关;土壤有效钾和有效铜与叶片对应元素显著负相关;土壤交换性钙与土壤pH极显著正相关;土壤有机质与土壤碱解氮、交换性镁以及叶片镁极显著正相关。因此建议夷陵区柑橘园应有机无机肥配施,增施硼、锌和镁肥,同时可施用适量石灰改良酸性土壤。

HPLC对酸茶中儿茶素及游离氨基酸组分含量的测定

采用高效液相色谱法对腌制型酸茶中的儿茶素组分及游离氨基酸组分进行了研究。结果表明,酸茶中儿茶素单体的相对含量变化与其他发酵类茶产品中的儿茶素单体变化不一样,酸茶中EC、EGC、ECG、EGCG、GCG、GA发酵后最高含量分别为24.29、72.78、15.8、41.04、7.82、25.71 g/kg。经过发酵,酯型儿茶素含量下降,非酯型儿茶素含量上升,GA含量大幅增加。检测结果显示,酸茶中的游离氨基酸组分和含量发生了不同程度的变化,18种氨基酸中绝大部分种类含量增加,7种人体必需氨基酸含量均增加,2种鲜味氨基酸含量也增加。通过对酸茶的部分内含成分进行分析,希望能为酸茶产品的开发提供参考。

石墨炉原子吸收光谱法测定鲜虾中镉含量的不确定度评定

目的评定石墨炉原子吸收光谱法测定鲜虾中镉的不确定度。方法样品经微波消解后稀释,将样品消解液注入原子吸收分光光度计的石墨炉原子化器中。采用标准曲线法定量。分析测定过程中的不确定度来源,对不确定度的组成进行了评定和量化。根据数学模型计算了样品中镉的含量,得到合成标准不确定度和扩展不确定度。结果石墨炉原子吸收光谱法测定鲜虾中镉含量为1.6mg/kg,扩展不确定度为0.2mg/kg(k=2),结果表达为(1.6±0.2)mg/kg,k=2。结论不确定度的主要来源是样品溶液中镉浓度的测定,其次是重复测定和加标回收实验,其他因素引起的不确定度可以忽略。

微波消解-FAAS测定薯片中钠的不确定度评定

建立火焰原子吸收光谱法测定薯片中钠含量的不确定度评定方法。分析测定过程中的不确定度来源,对不确定度的组成进行了评定和量化。根据数学模型计算了样品中钠的含量,得到合成标准不确定度和扩展不确定度。火焰原子吸收光谱法测定薯片中钠的含量为7.32 mg/g,扩展不确定度为0.44 mg/g(k=2)。结果表明,不确定度的主要来源是重复测量和样品加标回收试验,其次是样品溶液中钠浓度的测定,其他因素引起的不确定度可以忽略。

宜昌市夷陵区柑橘产业发展历史回顾

柑橘在宜昌市夷陵区栽培历史悠久,柑橘产业不断发展壮大。本文对夷陵区柑橘产业发展进行了简要回顾,从发展历程、栽培技术、产后处理与营销等方面进行了总结。

广东地区8株鹅源基因Ⅻ型新城疫病毒F蛋白基因遗传进化分析

为了解当前广东地区鹅群新城疫病毒(NDV)遗传进化情况,本研究从广东养殖病死鹅组织样品中分离鉴定获得8株NDV,对分离株的F蛋白基因进行核苷酸及氨基酸序列分析。8株分离病毒之间F蛋白基因同源性较高,为96.3%-99.9%,但与当前国内NDV优势流行株及疫苗株同源性均较低。遗传进化分析结果显示所有新分离株均属于Ⅻ型NDVⅫb亚型分支,而当前国内NDV的优势流行株及常用疫苗株均属于Ⅶd亚型分支。氨基酸序列分析结果显示,本研究分离株F蛋白裂解位点氨基酸序列均为112K/RRQKR/F117,符合强毒株分子特征;与基因Ⅶ型代表株NDV/ZJ1相比,新分离株F蛋白B细胞中和抗原表位均出现D170N变异;而与2010年~2011年报道的广东Ⅻb亚型分离株相比,新分离株F蛋白疏水区、七肽重复序列等区域均出现氨基酸的变异。综上所述,本研究分离鉴定的8株鹅源NDV的F基因均属于Ⅻb亚型,与Ⅶd亚型流行株及常用疫苗株F基因同源性较低,且其多个氨基酸关键位点存在变异。本研究在国内首次从病死鹅体内分离到基因Ⅻ型NDV,为进一步了解基因Ⅻ型NDV在广东地区水禽中的流行、病原进化以及疫苗株更新提供参考。

两种辨证治疗虚劳病的组方用药规律对比

目的:探究《中医方剂大辞典》中分别运用气血阴阳辨证和脏腑辨证治疗虚劳病的方剂在谴方用药方面的异同,为临床合理组方提供依据。方法:根据《中医方剂大辞典》治疗虚劳有效方剂的主治证型,确定其辨证方式。利用R语言数据挖掘软件对气血阴阳辨证和脏腑辨证类方剂药物信息分别进行频数统计、关联规则分析与聚类分析。结果:分别得到运用气血阴阳辨证和脏腑辨证时各自使用频率较高的药物15味,用药主要涉及的12个药类;运算得到两种辨证各自20个药物关联规则与各自6个聚类新方。结论:虚劳病的治疗中,气血阴阳辨证针对气血阴阳虚损的单一病机为主论治,注重调神且结合补益肝肾,直接补肾精;脏腑辨证运用疏解气机、温阳利水、理气化痰清热等祛邪治法,兼顾脏腑阴阳组方原则。

微波消解-ICP-AES和ICP-MS测定棠梨中29种元素的含量

建立微波消解-电感耦合等离子发射光谱(ICP-AES)和电感耦合等离子质谱(ICP-MS)测定棠梨中29种元素的方法。样品经微波消解,以ICP-AES测定K、Na、Ca、Mg、P含量,ICP-MS测定B、Al、Fe、Mn、Zn、Cu、Pb、Cd、As、Cr、Ni、Li、Be、Ti、V、Co、Tl、Se、Sr、Mo、Ag、Sn、Sb、Ba含量。结果表明:ICP-AES检出限范围在0.159~2.79μg/L,ICP-MS检出限范围在0.00177~0.297μg/L。此方法精密度(RSD)处于0.32%~4.2%之间,回收率介于86.8%~101.7%之间。国家标准物质大米的检测结果与参考值基本相符。测定结果表明,棠梨中含有丰富的微量元素,其中含量在10μg/g以上的有K、P、Ca、Mg、Fe、B、Sr,其中K、P、Ca元素含量较高,同时也含有一定量的重金属危害元素Co、Al、Ba。该方法污染小、简便、高效、准确度高,适用于棠梨等植物类样品中多种化学元素的测定。

Pri-miRNA21/23a重组病毒载体的构建及其在肝细胞中的表达鉴定

目的:构建Pri-miRNA-21/23A基因的重组病毒载体,并在L-02肝细胞中获得表达。方法:设计并合成Pri-miRNA-21/23a的基因产物,插入含绿色荧光蛋白Zsgreen基因的真核表达载体pCI Mamma Lian中,以重组质粒为模板,设计扩增含Zsgreen基因的Pri-miRNA序列产物,并将其与pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro病毒载体连接,将Pri-miRNA重组病毒载体转染293T细胞后进行病毒包装,病毒上清转染L-02肝细胞后用荧光显微镜及实时荧光定量PCR确认转染效果。结果:荧光定量PCR结果显示重组病毒上清转染L-02肝细胞感染效果良好,经荧光显微镜观察,证实重组病毒载体能在细胞中表达蛋白。结论:构建了Pri-miRNA21/23a重组病毒表达载体并在L-02肝细胞中表达,奠定了miRNA进一步功能研究的基础。

基于生物学信息技术分析GAS2L3在胶质瘤中的表达及意义

目的通过对癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)和GTEx数据库中胶质瘤和正常脑组织的基因测序数据进行挖掘,探讨GAS2L3在正常脑组织和不同等级的胶质瘤中差异及其可能对胶质瘤细胞的影响,以期建立胶质瘤治疗的新靶点。方法通过基因表达谱交互分析(GEPIA)网站分析TCGA和GTEx数据库中GAS2L3在高级别胶质瘤和低级别胶质瘤与正常脑组织中的表达差异。从TCGA数据库中获取702例胶质瘤组织的RNA测序数据与临床信息,首先分析GAS2L3与胶质瘤的等级与预后的相关性;其次通过单因素与多因素的回归分析分析GAS2L3的风险比;最后通过相关性分析计算GAS2L3与增殖、侵袭、凋亡和血管形成的相关性。在以上数据中,按照log FC>1且P<0.05的标准筛选GAS2L3高表达与GAS2L3低表达胶质瘤中的差异表达基因,并通过基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析其在胶质瘤中的调控方式,基因集富集分析(GSEA)其对细胞信号通路的影响。结果通过GEPIA网站分析发现GAS2L3表达量在低级别胶质瘤与正常脑组织无明显差异,但高表达于胶质母细胞瘤中。GAS2L3在TCGA胶质瘤数据中与胶质瘤的等级正相关,与胶质瘤的预后负相关。单因素与多因素的回归分析发现GAS2L3是胶质瘤预后的不良因素。相关性分析显示GAS2L3与胶质瘤的增殖明显相关。在GAS2L3高表达与低表达胶质瘤中发现2887个差异基因,GO和KEGG富集其影响的信号通路,GSEA分析发现GAS2L3激活细胞周期信号通路。结论GAS2L3基因可能在胶质瘤的诊断和临床治疗中有重要的意义。

树冠简易覆膜对早熟温州蜜柑延迟采收的影响

为有效延长早熟温州蜜柑上市周期,通过开展树冠简易覆膜对早熟温州蜜柑的影响试验,证明树冠简易覆膜能提升早熟温州蜜柑的品质,减少冬季异常落果,还可以增加经济效益。适宜在冬季有低温的温州蜜柑产区推广应用。

Laser Cooling Using Anti-Stokes Fluorescence in Yb^(3+)-Doped Fluorozirconate Glasses

The fluorozirconate glasses ZBLANP( ZrF\-4-BaF\-2-LaF\-3-AlF\-3-NaF-PbF\-2) doped with different Yb\+ 3+ concentration were prepared. The Raman spectra and absorption spectra are measured to substantiate the existence of phonon-assisted emission. After analyzing the normalized absorption spectra of samples with different Yb\+ 3+-doped concentration, we calculated the maximum cooling effect in the 3 wt% Yb\+ 3+-doped sample pumped at 1 012.5 nm. The corresponding cooling capability is about -4.09 ℃/W and the cooling efficiency reaches 1.76%.

三种不同春季高接换种方法在温州蜜柑上的比较试验

研究3种不同春季高接换种方法对接芽成活率、枝稍萌发数量、新梢生长量、树冠及产量的影响。结果表明,3种不同高接方法对接芽成活率无明显影响,但对枝稍萌发数量、新梢生长量、树冠及产量有差异。锯头高接换种能明显增加树冠高度和冠幅,提早结果。锯头双芽切接与锯头单芽腹接相比,产量差异显著。