卵母细胞携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达

背景与目的:研究卵母细胞携带的乙肝病毒(HepatitisBvirus,HBV)DNA能否在小鼠早期胚胎中复制与表达,为HBV经卵垂直传播提供科学证据。材料与方法:手术暴露昆明小鼠卵巢,将pBR322_HBV重组质粒DNA注射到昆明小鼠卵巢内,1个动情周期(4d)后进行超排卵并与正常雄性小鼠合笼,收集二细胞胚,用荧光原位杂交(Fluorescenceinsituhybridization,FISH)检测HBV在早期胚胎内的整合和复制;用逆转录聚含酶链反应(Reversetranscriptase_polymerasechainreaction,RT_PCR)和免疫荧光试验检测HBV基因在早期胚胎的表达。结果:FISH在小鼠二细胞胚细胞核上检测到HBVDNA阳性杂交信号,RT_PCR和免疫荧光试验在二细胞胚内检测到HBxmRNA和HBsAg。结论:HBVDNA进入雌性生殖细胞后,可以整合到宿主基因组内,通过自然受精随卵母细胞进入胚胎,并能在胚胎中复制与表达。提示HBV有可能通过雌性生殖细胞进行垂直传递。

不同剂量X射线照射对小鼠巨噬细胞表达CD80和CD86的影响

采用免疫组织化学法观察了X射线全身照射对小鼠腹腔巨噬细胞及体外照射对培养的小鼠巨噬细胞株J774A .1细胞表达CD80和CD86的影响。结果表明 ;全身照射和体外照射时 2GyX射线诱导CD80表达增高均较 0 .0 75Gy为早 ,而CD86对两种剂量的反应无明显区别。剂量效应关系的研究表明 ,CD80和CD86的表达无论全身照射或体外照射时均在 0 .0 75Gy剂量点出现峰值 ,而在较大剂量照射时出现第二个峰值的剂量则全身照射高于体外照射。实验结果显示 。

精子携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达

背景与目的:研究乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus,HBV)DNA在早期胚胎中能否复制与表达,探讨HBV经雄性生殖细胞垂直传递的可能性。材料与方法:成熟雄鼠麻醉后双侧睾丸注射经脂质体DOSPER包裹的HBV质粒,手术后雄鼠与超排雌鼠合笼交配,用荧光原位杂变(Fluorescenceinsituhybridization,FISH)分别检测单细胞胚和二细胞胚间期核中HBVDNA的存在与复制,用逆转录聚含酶链反应(Reversetranscriptase_polymerasechainreaction,RT_PCR)和免疫荧光方法检测HBV基因在二细胞胚胎中的表达。结果:在单细胞胚和二细胞胚间期核内发现HBVDNA阳性杂交信号,RT_PCR可以扩增出HBx基因的特异条带,免疫荧光也可见到HBsAg阳性信号。结论:HBVDNA进入雄性生殖细胞后,可以整合到宿主基因组内,通过自然受精随精子进入卵母细胞,并在早期胚胎中复制与表达。提示HBV有可能通过雄性生殖细胞进行垂直传递。

低强度微波辐射对人细胞非热生物效应的研究

选用频率２４５０ＭＨｚ分别在１，３，５，７ｍＷ／ｃｍ２的功率密度下使用新型宽带横电磁传输室辐照人外周淋巴细胞和红细胞以及Ｈｅｌａ细胞。采用细胞遗传学实验技术，测定外周血淋巴细胞的微核发生率、染色体畸变率、ＳＣＥ值及有丝分裂指数；通过聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析辐照后细胞膜骨架蛋白的变化；运用软琼脂细胞克隆形成法测定微波辐射对Ｈｅｌａ细胞克隆形成能力的影响。结果表明在５ｍＷ／ｃｍ２和７ｍＷ／ｃｍ２的功率密度下能使淋巴细胞微核发生率、染色体畸变率、ＳＣＥ值显著升高，使人红细胞膜骨架蛋白发生部份解离，对Ｈｅｌａ细胞克隆形成能力有明显的抑制作用。在７ｍＷ／ｃｍ２功率密度下，辐射使人淋巴细胞有丝分裂指数显著降低，染色体发生明显的解螺旋现象。最后对细胞的非热效应进行了初步的探讨。

一种牛精子膜蛋白的纯化及在生殖中的作用

牛精子经 φ =0 .5%的NP 4 0洗脱后 ,先经伴刀豆凝集素ConA(ConcanavalinA)亲和层析分离 ,经SDS PAGE电泳 ,得到相对分子质量Mr 分别为 32× 10 3,2 6× 10 3,2 0× 10 3的 3种与ConA结合的糖蛋白CBG(ConAbindingglycoprotein) .再将亲和层析分离所得蛋白成分经葡聚糖凝胶 (SephadexG 10 0 )层析柱进一步纯化 ,得到Mr 为 2 6× 10 3的单一成分 .将 2 6× 10 3CBG免疫兔后制得抗血清 ,经PAP免疫组织化学染色发现 :2 6× 10 3的CBG抗原主要分布于牛精子的顶体区 ,同时鼠精子表面也有同样分布 ,说明 2 6× 10 3的CBG抗原具有种间保守性 .后将 2 6× 10 3的CBG免疫雌鼠 ,发现其产仔率由对照组的 (8.5± 2 .6 )只 (n =12 )减少到 (4 .3± 1.8)只 (n =2 4 ) ,经t检验 (不配对 ,单尾 ) ,二者间差异极显著 (p <0 .0 0 1) .本实验结果表明 :2 6× 10 3的CBG在精卵结合中可能发挥重要作用 ,并有可能开发为人工避孕疫苗 .

裂变产物^(147)Pm的体内滞留诱发生殖细胞的放射遗传毒理效应

实验研究观察了当机体摄入重核裂变产物^(147)Pm后在不同时间间隔的体内蓄积过程,尤其是在生殖系统睾丸中的滞留对生殖细胞染色体畸变和精子畸形的诱发效应。研究结果表明,^(147)Pm由静脉摄入机体后在持续50d的观察过程,拟合了在睾丸内的滞留方程为: R(t)=0.1872×e^(-0.0066t)可见随着受^(147)Pm内污染时间的延长,其在睾丸内的累积吸收剂量亦随之增升。而且发现^(147)Pm可诱发精原细胞染色体结构畸变:包括裂隙、染色单体断裂、染色体断片和易位;以及染色体数目畸变的多倍体精原细胞。并随着睾丸内累积吸收剂量的增高,染色体畸变率和多倍体细胞也有所增加。同时,^(147)Pm也可诱发初级精母细胞产生染色体断片和易位,形成多价体。染色体断片率可随^(147)Pm辐照时间的延长而升高,而多价体只在内污染10d后的实验组中出现。^(147)Pm所诱发的精子畸形主要是无钩精子,且畸形率亦随吸收剂量加大而增高。

增强UV-B辐射对蚕豆叶片微粒体膜一些性质的影响

温室条件下，用0（Control）、8．65kJm－2d－1（TI）及11．2KJm－2d－1（t2）不同剂量的UV－B辐射处理蚕豆幼苗。Ca2+．ATPase及Mg2+－ATPase的活性在辐射处理期间下降。在处理21d，T1和T2微粒体膜的MDA含量明显高于对照，同时IUFA急剧下降，且呈明显的剂量效应。14及21d时，膜磷脂的含量也明显下降。脂氧合酶（Lox）活性在第7及14天与对照相比都显著升高，而21d后迅速下降。结果表明，增强UV－B对微粒体膜的伤害可能是一方面导致正常酶合成与分解之间的平衡失调，另一方面导致了膜脂过氧化作用。

射线诱导在体造血细胞凋亡的量时效关系的研究

以4—10Gy射线在体损伤的小鼠为模型,应用DNA电泳和流式细胞术等方法证实细胞凋亡是射线损伤在体骨髓造血细胞的途径之一,发现射线诱导的造血细胞凋亡有明显的量效和时效关系。4、6、8和10Gy照射后,细胞凋亡发生率均表现为升高-降低过程,各剂量诱导的凋亡发生率峰值分别出现在照后12、8、4和4h,6和8Gy诱导的凋亡发生率已达最高水平,约为30％,10Gy诱导的凋亡反而要低。上述结果表明,诱导细胞凋亡是射线损伤骨髓造血细胞的一个重要途径,而且凋亡的发生率受照射剂量和照后时间的影响。因此,深入研究射线诱导的细胞凋亡,将有助于揭示射线损伤造血功能的机理。

旋转强磁场对大鼠生殖毒性的探索

背景与目的:研究旋转强磁场对大鼠生殖及对其后代细胞遗传毒性,从而验证强度为0.4T的旋转强磁场对生物体的安全性。材料与方法:大鼠采用曝磁0.5、1、2h/d3个剂量组、一个阴性对照组和一个阳性对照组,对各组大鼠进行精子畸形实验、传统致畸实验和微核及核型实验,分别观察大鼠精子形态、后代的生长发育情况、微核千分率及对比染色体G带显色带型的变化。结果:0.4T旋转强磁场对大鼠精子无影响;对孕鼠的体重和妊娠未见影响,亦无其它发育毒性;对大鼠骨髓无抑制作用,微核实验为阴性结果;染色体G带显色带型无差别。结论:在0.4T旋转强磁场中,曝磁2h/d对大鼠无生殖毒性,对其后代无遗传毒性。

射频辐射致畸效应的研究

在科技发展的今天,微波应用范围逐渐扩大,军事、工农业、商业、医疗甚至进入家庭日常生活,从而接触辐射的人数和空间辐射强度也逐渐增加。因此。

裂变产物^(152)Eu在体内的积聚及其对骨髓细胞的致畸作用

本文研究了^(152)Eu在体内选择性蓄积部位所诱发的染色体畸变效应。发现无论摄入低或高放射性活度的^(152)后,均以在骨组织中的滞留量为最高,其后依次为肾、肝、肺和血液。呈高度选择性蓄积于骨组织中的^(152)Eu,可诱发骨髓细胞染色体畸变,其畸变率随着摄入^(152)Eu放射性活度的加大而相应增升。观察到在一个骨髓细胞中同时有两个以上畸变发生,^(152)Eu可诱发的染色体结构异常为染色单体型畸变,其中主要为染色单体断裂。

激光显微照射金鱼受精卵对其胚胎发育的影响

2-细胞期胚胎经激光显微照射(功率为90毫瓦)其中一个卵裂球时能产生明显的损伤光斑,受照射的卵裂球立即停止发育。另一未受照射的卵裂球仍能正常卵裂直至孵化幼鱼,所获得的幼鱼在形态上与正常幼鱼相同。8-细胞或囊胚期胚胎经激光显微照射(功率为372毫瓦)时,则可在受照射的卵裂球上产生明显伤斑,并在照射部位溢出部分细胞内含物,绝大部分胚胎发育成不正常的胚体和各种畸形幼鱼。

小鼠脾细胞中低剂量辐射诱导产物及其生物学活性

采用不同的低剂量辐射 (LDR)剂量、LDR诱导产物用量、照射方式、照射后蛋白提取时间为处理因素 ,观测诱导产物生物学活性的变化。结果表明 ,用此提取液刺激后 ,小鼠脾脏细胞转化明显增高。经不同处理因素作用后同位素掺入游离小鼠脾细胞的每分钟衰变数 (DPM )值有明显改变。实验证实 ,经 5- 15cGyLDR后 2 - 16h都可从小鼠脾脏细胞中提取得到LDR诱导产物 ,诱导产物具有生物学活性 ,可刺激脾脏细胞转化 ,但是 ,其活性受到多种因素的影响。进一步的分析表明 。

A-NK细胞联合IL-2,IL-12在肿瘤免疫治疗中的作用

本文对A-NK细胞联合IL-2和IL-12在抗肿瘤免疫治疗中的作用进行了论述。强调联合应用可高效激活A-NK细胞,提高对肿瘤细胞的杀伤活性。减少IL-2和IL-12的用量及副作用,提高疗效。

电离辐射对淋巴细胞的效应

简要概述了电离辐射对淋巴细胞在存活、形态、功能及代谢等方面的效应,并对淋巴细胞不同群体的辐射敏感性进行了比较.

转化的大鼠胚胎成纤维细胞系与p53^(val135)功能关系的研究

A1-5是一株典型的温度敏感的p53val135细胞系,许多实验室用它来研究p53的功能。我们首次报道了A1-5细胞表现出非常强的抗辐射性并伴随不同寻常强的G2延迟效应。B4是另一株温度敏感的p53val135细胞系,A1-5与B4细胞都是来源于同样的原代转化的大鼠胚胎成纤维细胞系,只是来自不同的转染实验。本文阐明了A1-5细胞非常强的抗辐射性及不同寻常强的G2停滞效应与p53val135的功能无关。A1-5细胞系具有的特殊表型是研究放射敏感性新性质的独特的模型。

辐射剂量－细胞存活率曲线的数学模型及其应用

本文介绍了描述辐射剂量对细胞损伤存活率曲线的几种数学模型，并在微机上设计了计算机曲线拟合程序，应用实验数据对数学模型的拟合参数进行了比较。本文所介绍的数学模型计算机程序，可供从事辐射细胞生物学研究的科技人员选用。

^（147）Pm低剂量内照射对中枢和外周免疫细胞刺激效应

本文探讨了荧光涂料激发能源￣（１４７）Ｐｍ低剂量内照射时，引起中枢和外周免疫细胞的刺激增殖效应。当机体摄入￣（１４７）Ｐｍ其吸收剂量为０．２２３～０．８８２ｃＧｙ时。观察到可使中枢免疫器官骨髓和胸腺细胞的￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入率显著增升，表现对ＤＮＡ合成能力增高；而在摄入￣（１４７）Ｐｍ其吸收剂量为０．２２３ｃＧｙ时，又可刺激外周免疫器官脾Ｔ、Ｂ淋巴细胞的转化过程，增强细胞增殖能力。表明￣（１４７）Ｐｍ低剂量内照射可对中枢和外周免疫细胞呈现明显的刺激增殖作用。