日粮添加精油对感染艾美尔球虫肉鸡肠道形态、炎症水平和肠道菌群的影响

旨在利用植物精油修复艾美尔球虫感染造成的肠道损伤并稳定肠道微生物.研究日粮添加植物精油和艾美尔球虫感染对消化器官指数、形态学、炎症水平、微生物多样性和组成的影响.试验共8个处理,由4种日粮(对照组、抗球虫药物组、丁香精油组和牛至精油组)×2攻毒状态(健康组与攻毒组)构成.球虫感染显著增加28日龄空肠、回肠器官指数、Ruminococcus torque相对丰度,并显著降低空肠绒隐比及Clostridia vadin相对丰度(P<0.050).日粮添加抗球虫药物、牛至精油或丁香精油均显著降低空肠损伤评分和Lachnoclostridium相对丰度(P<0.050).添加牛至精油显著增加十二指肠绒毛高度和回肠绒隐比,并显著降低空肠长度(P<0.050).添加丁香精油显著增加十二指肠绒毛高度、回肠绒隐比和Blautia相对丰度,显著降低十二指肠长度,同时显著降低Shannon指数(P<0.050).艾美尔球虫感染破坏肉鸡肠道形态,日粮添加牛至精油或丁香精油可以部分缓解球虫感染造成的肠道损伤,并调节肠道菌群,提高肉鸡肠道健康水平.

番茄红素在雄性生殖领域上的研究进展

番茄红素是普遍存在于瓜果蔬菜中的一种类胡萝卜素,并因其具有抗氧化、抗炎、抗癌、降血脂和增强免疫力等作用而被广泛使用.对番茄红素在前列腺相关疾病、生殖毒性损伤以及精子冻存等雄性生殖方面的研究进展进行概述,为番茄红素在雄性生殖领域的应用提供参考.

小鼠输卵管上皮类器官的构建及表型验证

目的·构建野生型(wild type,WT)小鼠和miR-34b/c^(−/−)且miR-449^(−/−)双敲除(double knockout,dKO)小鼠输卵管上皮类器官的培养体系,并进行表型验证。方法·利用酶消化法和差速贴壁法分离纯化WT小鼠和dKO小鼠输卵管上皮细胞,并利用免疫荧光法鉴定得到的输卵管上皮细胞的纯度;通过计数和直径测量比较WT小鼠和dKO小鼠输卵管上皮类器官数量、生长速度和生长大小;利用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,H-E)染色和透射电子显微镜(透射电镜)对输卵管上皮类器官进行形态和结构观察;采用免疫荧光法观察并统计纤毛细胞和分泌细胞在WT小鼠和dKO小鼠输卵管上皮类器官中的比例;采用免疫组织化学法、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting检测分泌细胞、纤毛细胞相关基因在输卵管上皮类器官中的表达。结果·分离纯化得到的输卵管上皮细胞纯度较高。与WT小鼠相比,dKO小鼠输卵管上皮类器官生长更快,体积更大,数量也更多;但dKO小鼠输卵管上皮类器官发育较慢,于培养28 d时才出现上皮内陷,而WT小鼠的类器官于培养16 d时已经出现。H-E染色和透射电镜结果显示输卵管上皮类器官呈现出与在体输卵管类似的结构。免疫荧光检测显示dKO小鼠输卵管上皮类器官的纤毛细胞显著减少而分泌细胞显著增多(均P<0.05)。免疫组织化学法检测结果显示,dKO小鼠输卵管上皮类器官的分子表达模式与在体输卵管组织基本一致,即纤毛细胞标志物乙酰化微管蛋白α(Ac-α-tubulin)、叉头框J1(forkhead box J1,FOXJ1)表达减少,分泌细胞标志物配对盒8(paired box 8,PAX8)表达增加;RT-qPCR结果显示dKO小鼠输卵管上皮类器官中Foxj1和微管蛋白β4A(tubulinβclassⅣa,Tubb4a)的mRNA水平均降低(均P<0.05),而Pax8 mRNA水平升高(P<0.05);Western blotting结果显示,dKO小鼠类器官中FOXJ1的蛋白表达水平显著降低,PAX8表达显著升高(均P<0.05)。结论·研究成功构建WT小鼠和dKO小鼠的输卵管上皮类器官培养体系,该体系可模拟小鼠在体输卵管的表型。

可的松慢性暴露对雌性斑马鱼的生殖毒性

为了评估可的松暴露对成年雌性斑马鱼的生殖毒性作用以及跨代效应,将成年雌性斑马鱼暴露于5、50和500 ng/L的可的松环境中,以未添加可的松的溶剂处理为对照,从形态学、病理组织学、行为学等方面评估糖皮质激素可的松对成年雌性斑马鱼以及子一代胚胎的毒理风险。结果表明:高浓度(500ng/L)暴露下的成年雌鱼性腺中卵泡发育明显被抑制,且此浓度下的成年雌鱼无法产卵;中浓度(50 ng/L)下的成年雌鱼产卵量以及胚胎孵化率都极显著低于对照,但从形态学上看,5~50 ng/L可的松处理对孵化出的子一代无明显的畸变现象。

克氏原螯虾受精卵发育的温度因子数学模型分析

设置不同的温度对克氏原螯虾受精卵进行了孵化试验 ,研究了克氏原螯虾胚胎发育速度与温度之间的关系 ,引用了王如松创立的数学模型 :V(T) =(k·T +c)·(1 -exp(- (T -TH) /rH) ) ;并以此模型求算了该种群受精卵发育的最适温度和最高临界温度分别为 30 .3℃和40 .3℃ ;利用莱奥姆法则 (Reaumur’sLaw)求得最低临界温度及平均临界温度分别为 4 .7℃和5.6℃ ;最低有效积温和平均有效积温分别为 731 (℃·d)和 765 (℃·d) ;还就最适温度、耐温上限比较了高能卵与均能卵在适温能力上的差异 。

多氯联苯对鸡胚卵巢发育和配子分化的影响

禽类的肉和蛋产品含有大量的脂肪 ,可蓄积高浓度的多氯联苯 ( PCB)和其他环境污染物从而影响动物和人类健康。试验选用鸡作为实验动物研究了 PCB对胚胎期卵巢发育和生殖细胞分化的影响 ,在入孵前将Aroclor12 54注入海兰种蛋的卵黄内 ,剂量分别为 0 ,1,10和 10 0 μg/枚。取出新出壳雏鸡的卵巢进行组织学研究。结果表明 :PCB处理后 ,鸡胚的孵化率与对照组相比明显下降 ,而且死胚都发生了不同程度的水肿 ;雌性雏鸡左侧卵巢横截面积、皮质厚度和皮质内的卵母细胞数均比对照组明显增加 ;只有个别的卵母细胞发生了核固缩和胞质空泡化。本研究表明 PCB干扰鸡胚卵巢的发育 ,首次揭示了

中国石龙子雌体繁殖特征和卵孵化的地理变异

浙江丽水和广东韶关中国石龙子均年产单窝卵 ,窝卵数、窝卵重和卵重均与雌体SVL呈正相关 ,雌体头部形态、繁殖特征、产卵起始时间和卵孵化的热依赖性等有显著的地理变异 .韶关石龙子产卵起始时间为 5月中旬 ,比丽水石龙子约早两周 .韶关石龙子窝卵数较大、卵较小 ,窝卵重与丽水石龙子无显著差异 .韶关石龙子特定SVL的窝卵数比丽水石龙子多 2 .8枚卵 .中国石龙子卵数量和大小之间有种群间权衡 ,无种群内权衡 ,同一种群内卵数量与卵大小无关 .孵化温度影响石龙子孵出幼体的一些特征 ,2 4℃孵出幼体比 32℃孵出幼体大、躯干发育好、剩余卵黄少 .韶关 2 4℃孵出幼体的体重、躯干干重小于丽水幼体 ,韶关 32℃孵出幼体的SVL小于丽水幼体、剩余卵黄大于丽水幼体 ,表明适宜卵孵化温度范围有地理变异 .丽水石龙子卵对极端高温和低温的耐受性较强 。

生殖周期中小鼠子宫巨噬细胞的分布

为了认识生殖周期中子宫巨噬细胞的分布，用Ｆ４／８０单克隆抗体，对小鼠子宫巨噬细胞进行了免疫组织化学标记。结果显示，间情期子宫内膜中有大量巨噬细胞，动情前期数量略有减少，但子宫系膜三角区出现较多巨噬细胞。动情期子宫内膜中有少量巨噬细胞，动情后期显著减少。在动情期和动情后期，子宫系膜三角区中均有较多巨噬细胞，妊娠１ｄ的子宫内膜中巨噬细胞数量很少，妊娠７ｄ的子宫蜕膜中则消失。妊娠１４ｄ子宫的壁蜕膜组织中有少量巨噬细胞，在子宫肌间偶见，基蜕膜与子宫腺区中未见巨噬细胞。妊娠１８ｄ子宫中，壁蜕膜中巨噬细胞明显增多，子宫腺区也有少量，同时子宫系膜基部可见许多，但基蜕膜中未见巨噬细胞。产后１ｄ子宫中，巨噬细胞在内膜中数量极多，子宫肌间可见成簇分布。产后３ｄ子宫内膜结构基本恢复正常，其内仍有许多巨噬细胞。实验结果提示：子宫巨噬细胞在妊娠早期数量减少可能与胚泡着床有关；

心理应激雌性大鼠海马NA、5-HT与下丘脑GnRH含量的变化

目的观察心理应激对雌性大鼠海马NA、5HT与下丘脑GnRH含量的影响。方法采用声光电复合刺激引起心理应激获得大鼠卵巢内分泌功能降低模型,用化学荧光法检测模型大鼠海马NA、5HT;用放免法检测下丘脑GnRH含量。结果模型大鼠海马NA水平下降、5HT水平升高,下丘脑GnRH含量降低,但下丘脑GnRH含量与海马NE、5H水平间并无直接相关性。结论心理应激雌性致大鼠海马神经递质NA、5HT紊乱,并且下丘脑GnRH含量下降,但无直接相关性,提示下丘脑GnRH神经元活动受多种因素的调控。

完整分离围着床期小鼠子宫内膜方法的建立

目的 为了获得组织结构完整、功能正常的子宫内膜样本以进行胚胎着床的体外研究。方法 作者比较了剪碎法、刮取法和挤压法取得子宫内膜的效果。结果 挤压法得到的小鼠子宫内膜呈圆形条状 ;子宫内膜组织结构完整 ,具有内膜上皮并包含腺体、血管的基质 ;意外发现子宫系膜侧的子宫内膜缺损。

雌性动物多次交配行为的机制及进化

雌性动物的后代数量不可能超过她的卵子数。在理论上 ,一个生殖季节内 ,一次或几次交配就足够使雌性所有卵子受精 ,最大化其生殖潜能。但与理论预测相反 ,许多物种的雌性经常与同一个或多个雄性发生多次交配。交配通常要付出较高的代价 ,所以很难理解为什么雌性动物要反复进行多次交配。本文综述了解释此行为的一些适应性和非适应性假说。从获得直接收益和间接收益二个角度介绍了适应性假说。直接收益主要包括求偶喂食和“彩礼”、受精保证、亲代抚育、生殖刺激和护卫交配权等 5个方面。还着重介绍了多次交配对雌性后代的间接遗传受益 ,即获得优质基因、提高后代遗传多样性和遗传互补性3个假说。

新生鼠卵巢FOXO3a表达水平与卵母细胞凋亡的相关性初步研究

目的:探讨新生大鼠卵巢中FOXO3a(forkhead box groupO)转录因子表达水平与卵母细胞凋亡的相关性。方法:取出生后2d、3d、8d、15d龄大鼠的卵巢,用免疫组化方法观察FOXO3a、caspase-3在卵巢组织中的定位及表达水平,且用TUNEL技术检测卵巢内卵母细胞的凋亡变化。结果:FOXO3a在新生大鼠部分卵母细胞巢内的卵母细胞核内高表达,而在卵泡发育启动后,FOXO3a则从卵母细胞的核内逐渐转移至胞浆。而在次级和成熟卵泡的卵母细胞内,FOXO3a仅出现在胞浆内。≤8d龄大鼠卵巢的部分卵母细胞核内或胞核、胞浆内可检测到caspase-3表达,2d、3d龄大鼠部分卵母细胞核内高表达。TUNEL染色与caspase-3结果相似,2d龄大鼠卵巢的卵母细胞阳性率最高。结论:生后2d大鼠卵巢的卵母细胞存在一个凋亡高峰期;在原始卵泡形成前,FOXO3a在部分卵母细胞核内高表达,并与卵母细胞的凋亡率呈一致性。

体内抑制一氧化氮合成酶对小鼠卵母细胞成熟和排卵的影响

实验研究了一氧化氮合成酶抑制剂 L - NAME对昆明白小鼠卵母细胞成熟和排卵的影响。初情期前的昆明白小鼠注射 PMSG促进发情 ,注射 h CG促进排卵 ,并在注射 h CG前后各 3h注射 L- NAME。注射h CG后 18h颈椎脱臼处死小鼠 ,取输卵管冲卵。统计排卵数及卵母细胞的减数分裂情况发现 ,注射 L- NAME后排卵数明显减少 ,卵母细胞减数分裂恢复异常 ,大部分排出的卵母细胞处于 MI期 ;PB1的排出率降低 ,形态异常或退化死亡的卵母细胞数增加。结果直接证明 :在体内 ,NO可促进小鼠卵母细胞的减数分裂的恢复 ;NO对于小鼠排卵具有重要的促进作用 ;NO对小鼠卵母细胞质的成熟有重要影响 ;抑制 NO合成后 。

褪黑激素对雌性动物生殖系统调节作用的研究进展

褪黑激素的分泌具有日节律和季节性节律,对季节性繁殖动物的生殖功能具有重要的调节作用。大量研究表明,褪黑激素对生殖系统的影响因动物种类、生理状况的不同而表现出多重性,具有促进、抑制作用或无作用。褪黑激素对于牛、鼠类、禽类、人等均具有抑制生殖作用,对于绵羊、鹿等动物均具有促进生殖作用,而对光不敏感的动物无作用。光照对生殖机能的调节依靠褪黑激素介导传递到下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴。褪黑激素调节下丘脑分泌促性腺激素释放激素(GnRH),而GnRH调控LH和FSH的分泌,进而调节性腺水平的生殖功能。近年来的研究表明,褪黑激素也可直接作用于卵巢,调控雌性动物的生殖系统及功能。

微刺激方案与常规促排卵方案在高龄卵巢低反应不育女性中的前后周期比较

目的探讨36岁以上高龄、卵巢低反应（POR）不育患者最适宜的体外受精-胚胎移植（IVF-ET）促排卵方案。方法回顾性分析34例36～45岁POR患者接受IVF-ET助孕治疗的临床结局,根据患者前后促排卵方案的不同分为常规促排卵方案34个周期和灵活微刺激方案34个周期。比较前后两种不同方案患者的临床资料及助孕结局。结果 （1）微刺激周期、常规促排卵周期人绒毛膜促性腺激素（HCG）日的雌二醇（E2）水平、获卵数、MⅡ数、优胚率比较无显著性差异（P〉0.05）;（2）微刺激周期的基础卵泡刺激素（FSH）水平高于常规促排卵周期,窦卵泡数则少于常规促排卵周期,差异均有统计学意义（P〈0.05）;（3）常规促排卵周期的促性腺激素（Gn）天数、Gn总量大于微刺激周期,差异有统计学意义（P〈0.05）;（4）微刺激周期的受精数、可利用胚胎数、优胚数、冻存胚胎数、MⅡ率及正常受精率均高于常规促排卵周期,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论对于高龄POR妇女,微刺激方案与常规促排卵方案相比,可以获得较多的受精数、可利用胚胎数、优胚数和冻存胚胎数,MⅡ率和正常受精率也有提高,且微刺激方式更加温和,既减轻了患者的痛苦,又减少了Gn的用量和医疗费用,提示对于高龄POR不育症患者可能更宜用微刺激促排卵方案。

内皮素-1 对大鼠排卵前卵泡颗粒细胞产生孕酮的影响

本文用离体细胞体外孵育法研究了内皮素－１（ＥＴ）对大鼠排卵前卵泡颗粒细胞孕酮生成的影响及其作用机理。结果发现，ＥＴ能显著抑制ｈＣＧ刺激下的孕酮产生，抑制作用在浓度为１０－８ｍｏｌ／Ｌ时，即有显著意义（Ｐ＜０．０５，ｎ＝６），至１０－７ｍｏｌ／Ｌ时则有非常显著的意义（Ｐ＜０．０１，ｎ＝６）；不同浓度ＥＴ（１０－７—１０－７ｍｏｌ／Ｌ），对颗粒细胞基础孕酮的产生无明显影响。进一步研究表明，ＥＴ对ｈＣＧ刺激下孕酮生成的抑制作用，在用免抗人内皮素抗血清（ＥＴ－Ａ）１：１０００及ｃＡＭＰ后能明显被逆转。实验中还观察到，ＥＴ使颗粒细胞ＬＨ／ｈＣＧ受体数下降，亲和力降低。本文结果提示，ＥＴ可能为卵巢内的一种局部调节肽，通过作用于ＥＴ受体，干扰ＬＨ／ｈＣＧ受体功能和ｃＡＭＰ生成而抑制颗粒细胞孕酮的产生。

上海绝经女性生殖健康状况调查

目的通过对上海地区绝经女性生殖健康状况的调查,探讨对绝经女性的健康保健措施。方法 2012年9月至2013年1月,采用随机抽样的方法对来自全市多个社区企事业的员工并在上海交通大学附属第六人民医院健康体检的绝经妇女,以问卷方式调查绝经女性的人口学特征、自然绝经年龄及其相关影响因素,并采用改良Kupperman评分对绝经相关症状进行评估。资料采用SPSS20.0软件进行统计分析。结果 1 065例绝经妇女纳入研究,平均绝经年龄为50.76岁,平均生育年限为35.71年。〈60岁、60～65岁和〉65岁3个年龄组的平均绝经年龄分别为（51.17±3.26）岁、（51.02±3.55）岁及（50.54±2.98）岁。初潮年龄早、未生育、患慢性疾病者的自然绝经年龄较早（P〈0.05）。绝经相关症状发生频率最高的前5位依次为疲乏（71.50%）、骨关节痛（64.75%）、失眠（55.84%）、潮热出汗（48.79%）、以及易激动（43.96%）,早期主要以潮热、失眠为主,晚期主要以骨关节痛、泌尿生殖道症状为主。结论上海地区妇女平均绝经年龄呈逐渐推迟趋势,且初潮年龄早、未生育、患有慢性疾病与绝经年龄提前相关。但尚需进一步验证。绝经早晚期主要症状不同,临床治疗方法应有所差异。

母猪卵巢颗粒细胞的分离培养及鉴定

颗粒细胞是卵巢卵泡重要的结构组分,其形态、功能伴随原始卵泡的生长启动、增殖、分化、闭锁、排卵以及黄体形成等生理过程发生各种变化。颗粒细胞是研究细胞增殖、分化和细胞相互作用、信号转导通路的理想细胞模型。利用注射器吸取有腔卵泡卵泡液,成功分离培养了猪有腔卵泡的颗粒细胞,并进行了FSHR免疫荧光检测以及原代猪卵巢颗粒细胞生长活力检测,结果表明:该细胞对FSHR的免疫荧光呈阳性。流式细胞仪检测发现该细胞的细胞周期为24 h,但在培养4 d时细胞的活力最强。该研究结果为进一步研究母猪卵巢卵泡功能奠定了基础。

表皮生长因子对胎鼠卵巢卵泡体外发育和类固醇激素分泌的影响

表皮生长因子 (EGF)是参与卵巢功能调节的一个重要肽类因子。关于 EGF对小鼠胚胎期卵巢卵泡发育和类固醇激素发生的作用至今未见报道。本研究以单个卵巢的总卵泡数、生长卵泡数和 5个最大卵母细胞的平均直径为卵泡发育优劣的衡量指标 ,利用我们早期研究建立的无血清培养体系研究了 EGF对胎鼠卵巢卵泡发育和类固醇激素分泌的作用。结果发现 :1EGF处理组胎鼠卵巢总卵泡数、生长卵泡数和卵巢内 5个最大卵母细胞平均直径从培养第 7天起即显著高于 ITS对照组直至培养结束 ;2 EGF在培养后期显著促进胎鼠卵巢分泌睾酮 ,但对雌二醇的基础分泌无影响 ;3EGF处理组胎鼠卵巢在培养过程的后期引起贴壁的卵巢边缘脱离培养板底壁发生卷边现象 ,丧失卵母细胞皮质 -髓质生长模式。结果提示 :EGF在胎鼠卵巢原始卵泡生长起始中起重要作用 ;同时 EGF促进胎鼠卵巢小腔前卵泡 /卵母细胞进一步生长、发育和体外存活 ;

雄烯二酮和甲基睾酮诱导雌性日本鳗鲡性腺发育的反馈调节作用

采用间隔 15d多次埋植雄激素雄烯二酮 (4 androstene 3 ,17 dine ,ADSD)或甲基睾酮 (17α methyl testosterone ,MT)诱导雌性日本鳗鲡 (Anguillajaponica)性腺发育成熟 ;并着重研究埋植雄激素后 ,雌鳗血清中促性腺激素 (GtH)及脑和垂体中哺乳类促性腺激素释放激素 (mGnRH)含量的动态变化。一次或多次埋植ADSD后 ,1～ 5d的血清GtH含量上升 ,然后下降 ;并且 ,血清GtH含量上升的幅度随埋植次数的增加而增加 ;对于MT处理组 ,只在埋植 7次后第 15天测得血清GtH水平显著高于对照组 ,但仍显著低于ADSD处理组。这表明埋植ADSD和MT可促进GtH的分泌 ,但两者促进GtH分泌的作用存在显著差异。埋植ADSD 1d后 ,脑和垂体中mGnRH含量明显增加 ,第 2天后和对照组无明显差别 ,表明ADSD促进了mGnRH的合成 ,并可能有一定程度的释放。