iPS细胞向内皮分化过程中Wnt信号对组蛋白去乙酰化酶5的调控

HDAC(histone deacetylase)是一类可对蛋白质进行去乙酰化修饰的表观修饰酶,通过改变细胞核内组蛋白乙酰化状态,调控启动子活化水平,从而影响下游基因的表达水平,但其在内皮分化过程中的表达变化尚不清楚。本研究利用3阶段法诱导hiPSCs向内皮细胞定向分化,利用qRT-PCR检测Ⅰ类HDAC(HDAC 1、2)、Ⅱ类HDAC(HDAC 4、5)基因的表达变化。研究发现,HDAC5分子在内皮分化中有着显著的表达变化,在中胚层分化阶段下调90%(P<0.01),在血管前体阶段上调至3.7倍(P<0.01),继而在内皮晚期分化阶段下调70%(P<0.01)。免疫印迹结果进一步证实,HDAC5蛋白在内皮分化过程中存在阶段性表达变化。机制研究中显示,HDAC5中胚层分化阶段的变化受Wnt信号调控。通过CHIR99021处理以及Wnt3a质粒过表达,激动Wnt信号通路,会引起HDAC5下调。通过IWP-2抑制Wnt信号通路,会促进HDAC5表达恢复。此外研究发现,HDAC5主要定位于细胞核,IWP-2恢复HDAC5表达,但大部分滞留在胞浆。进一步研究显示,中胚层分化阶段HDAC5下调与中胚层分化标志物BraT的表达启动相关。通过HDAC抑制剂BML210处理发现,其可以促进早期中胚层分化,干扰血管前体细胞的内皮分化,增强内皮晚期阶段分化。总体而言,内皮诱导分化过程中,HDAC5有着显著的阶段性表达改变。Wnt信号激活是调控HDAC5在中胚层分化阶段下调的主要机制。

红三叶异黄酮对去卵巢大鼠钙磷代谢及VDR和CaBP-9k mRNA表达的影响

【目的】研究岷山红三叶(Trifolium pratense cv.Minshan)异黄酮(isoflavone,ISO)调节动物钙、磷吸收与代谢的作用。【方法】选择80只SD(Sprague-Dawley)雌性大鼠(50~60日龄),随机分为8组(每组10只),其中1~7组为去卵巢(ovariectomized,OVX)+红三叶异黄酮组,分别按320、160、80、40、20、10和0 mg/(kg·d)的量灌胃红三叶异黄酮,第8组为假手术组,灌服等量生理盐水,试验期60 d。【结果】40~320 mg/(kg·d)的灌服量可提高去卵巢大鼠血清钙含量,大鼠胫骨灰分、胫骨钙含量和钙磷比均随灌服量上升而增高;20~40 mg/(kg·d)灌服量上调大鼠小肠VDR mRNA及CaBP-9K mRNA的表达促进小肠对钙的吸收,160~320 mg/(kg·d)灌服量上调大鼠肾脏VDR mRNA的表达促进肾小管对钙、磷的重吸收。【结论】岷山红三叶异黄酮对去卵巢大鼠小肠钙吸收和肾脏钙重吸收及骨的生长、矿化有一定促进作用。

微RNA在大脑新皮层层次形成中的调控作用

种类多样的神经元有序排列和特异性的连接形成了大脑新皮层的6层组织,从而构成了神经系统高级功能的核心。了解大脑新皮层发育形成的机制将为理解哺乳动物乃至人类的生理与行为提供理论基础,也为神经系统疾病诊疗带来重大影响。本文以微RNA(microRNAs,miRNAs)为对象,结合笔者实验室工作,总结近年来所发现的miRNAs在大脑皮层层次形成过程中的研究进展,特别是在神经干细胞时序性命运决定、投射神经元多样性的形成、神经元放射状迁移,以及分裂后神经元进一步命运特化等方面的进展,为大脑皮层的发育机制研究提供新的思路。

赖氨酰氧化酶样蛋白4在肝细胞癌中的表达及其预后相关性分析

利用生物信息学分析人赖氨酰氧化酶样蛋白4(1ysyl-oxidase like 4,LOXL4)基因在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及临床意义,为HCC的诊治提供新的思路。基于癌症基因图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库和人类蛋白表达图谱(thehumanproteinatlas,HPA)数据库分析LOXL4在HCC组织和正常肝组织中的表达差异,分析LOXL4与HCC患者临床病理特征的相关性并进行可视化分析;通过GEPIA数据库及构建Cox回归模型分析LOXL4表达与患者预后关系;分析LOXL4与HCC肿瘤标志物基因的相关性;STRING在线数据库构建LOXL4蛋白质相互作用网络;TIMER数据库分析LOXL4基因与肿瘤免疫浸润的关系。数据库分析结果表明LOXL4在HCC中表达水平显著升高,且LOXL4表达与HCC患者的病理分级呈正相关。生存分析和Cox回归分析显示LOXL4高表达提示HCC患者预后较差。HCC中TRPV4、INHBE、ITGB5和BCL7A与LOXL4的表达呈正相关,SOD1、ADI1、HINT2和HAGH与LOXL4的表达呈负相关。LOXL4与HCC肿瘤标志物GPC3和CK19的表达呈正相关,与ARG1和CD10的表达呈负相关。LOXL4与LOX、BMP1、TLL1等10种蛋白质存在相互作用。LOXL4表达与肿瘤细胞纯度及多种免疫细胞浸润具有显著相关性。本研究揭示了LOXL4在HCC中表达上调且与HCC患者预后不良、免疫浸润及多种HCC诊断标志物密切相关,其有望成为HCC的早期筛查、诊断及预后评估的重要生物靶标。

中国结鱼营养成分分析与品质评价

采用规范的生化方法首次测定了体长(21.67±1.53)cm、体质量(265.67±15.04)g的澜沧江水系特有的野生中国结鱼(Tor sinensis)幼鱼和体长(39.23±1.10)cm、体质量(2555.33±50.84)g的成鱼背包肌肉的常规营养成分、氨基酸和脂肪酸组成,评价其营养品质,为其人工养殖生产及饲料研制提供理论依据。结果表明:中国结鱼幼鱼肌肉中蛋白、脂肪、水分含量与成鱼无显著差异(P>0.05),但是,幼鱼肌肉中灰分含量显著高于成鱼(P<0.05)。共检测出17种氨基酸,幼鱼和成鱼的氨基酸总量分别为(70.50±0.63)%和(67.69±0.84)%;依据氨基酸评分和化学评分,中国结鱼第一限制性氨基酸为蛋氨酸和胱氨酸,第二限制性氨基酸为缬氨酸。幼鱼肌肉的氨基酸评分和化学评分高于成鱼,中国结鱼幼鱼和成鱼的必需氨基酸指数分别为80.11和78.49。在中国结鱼幼鱼和成鱼的肌肉中检测出30种脂肪酸,幼鱼肌肉中单不饱和脂肪酸总量显著低于成鱼阶段(P<0.05),幼鱼和成鱼肌肉中的饱和脂肪酸总量、多不饱和脂肪酸总量、不饱和脂肪酸总量无显著性差异(P>0.05)。中国结鱼富含蛋白质和丰富的多不饱和脂肪酸,是具有食用价值和开发前景的鱼类。

缺氧诱导因子1α调控wnt/β-catenin信号通路对常氧条件下大鼠髓核细胞衰老的作用及机制

目的:探究缺氧诱导因子1α(HIF-1α)调控wnt/β-catenin信号通路对常氧培养下大鼠髓核细胞衰老的影响及作用机制.方法:取5只4周龄雌性SD大鼠,提取鼠尾髓核原代细胞进行研究.(1)将髓核细胞分为5组:转染对照组[用磷酸盐缓冲盐水(PBS)处理髓核细胞]、空载腺病毒组(用空载腺病毒处理髓核细胞)、过表达HIF-1α组(用载过表达HIF-1α质粒的腺病毒处理髓核细胞)、空载siRNA组(用空载siRNA处理髓核细胞)、敲减HIF-1α组(用siRNA敲减HIF-1α处理髓核细胞),在常氧下培养48h后,免疫蛋白印迹(western blot,WB)检测HIF-1α和衰老相关基因p53、p21、p16,β-gal染色检测细胞衰老,评估常氧条件下HIF-1α对于髓核细胞衰老的影响.(2)取髓核细胞,分为空载腺病毒组、过表达HIF-1α组、空载siRNA组、敲减HIF-1α组,处理方式同前,在常氧下培养48h后,WB检测HIF-1α、GSK-3β和β-catenin通路的表达.取髓核细胞,分为对照组(用PBS处理髓核细胞)、过表达HIF-1α组(用载过表达HIF-1α质粒的腺病毒处理髓核细胞)、XAV-939组(用XAV-939处理髓核细胞)、XAV-939+过表达HIF-1α组(用XAV-939+载过表达HIF-1α质粒的腺病毒处理髓核细胞),WB检测HIF-1α、p53、p21、p16和wnt/β-catenin的表达,β-gal染色检测细胞衰老,以检测HIF-1α与wnt/β-catenin信号通路的关系以及对髓核细胞衰老的影响.结果:(1)腺病毒转染HIF-1α后,与转染对照组和空载腺病毒组相比,过表达HIF-1α组HIF-1α表达增加(P<0.05).小干扰RNA转染HIF-1α后,与转染对照组和空载siRNA组相比敲减HIF-1α组HIF-1α表达降低(P<0.05).WB结果显示,与空载腺病毒组相比过表达HIF-1α组HIF-1α表达增加(P<0.05),而p53、p21和p16表达降低(P<0.05),与空载siRNA组相比敲减HIF-1α组HIF-1α表达降低(P<0.05),而p53和p16表达增加(P<0.05).β-gal染色显示,在常氧条件下培养48h,与空载腺病毒组相比,过表达HIF-1α组衰老细胞降低(P<0.05),与空载siRNA组相比,敲减HIF-1α组衰老细胞数量则增加(P<0.001).(2)与空载腺病毒组相比,过表达HIF-1α组β-catenin表达升高(P<0.01),同时GSK-3β表达降低(P<0.05).与空载siRNA组相比敲减HIF-1α组β-catenin表达降低(P<0.0001),同时GSK-3β表达升高(P<0.05).与对照组相比,XAV-939组β-catenin表达降低(P<0.001),p53、p21和p16的表达升高,XAV-939+过表达HIF-1α组β-catenin表达降低(P<0.05),p21表达升高(P<0.05).与过表达HIF-1α组相比XAV-939+过表达HIF-1α组衰老细胞数增加(P<0.001),与对照组相比过表达HIF-1α组的细胞核内β-catenin表达更多,而XAV-939组和XAV-939+过表达HIF-1α组则相对较少(P<0.05).结论:HIF-1α通过激活wnt/β-catenin信号通路抑制常氧条件培养下大鼠髓核细胞的衰老.

白肉灵芝水提物对新生大鼠胆红素脑病的影响

为了研究白肉灵芝水提物(ganoderma leucocontextum aqueous extracts,GLAE)对新生大鼠胆红素脑病的改善作用。腹腔注射胆红素建立高胆红素血症大鼠模型,将新生大鼠分成对照组、模型组、GLAE低剂量组、GLAE中剂量组和GLAE高剂量组,分别给予不同剂量的(0、50、100、200 mg/kg)GLAE处理。利用试剂盒检测血液样本和大脑组织中总胆红素水平,比色法检测大脑组织ATP酶、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、神经特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)和中枢神经特异性蛋白(central nerve specific protein,S100β)的含量,实时荧光定量PCR和western blot检测大脑组织B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteine aspartate protease 3,Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2相关X(Bcl-2 assaciated X,Bax)、脑源性神经生长因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)mRNA水平和蛋白含量。结果显示,与模型组相比,经GLAE干预后,大鼠血清及大脑组织胆红素浓度明显降低(P<0.05,P<0.01);大脑组织SOD、CAT、GSH-Px、Na+-K+-ATP和Ca2+-ATP酶活性显著升高(P<0.05,P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.05,P<0.01);血清TNF-α、IL-1β、NSE、S100β含量显著降低(P<0.05,P<0.01);大脑组织Caspase-3、Bax mRNA水平和蛋白含量明显降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2、BDNF、NGF mRNA水平和蛋白含量明显升高(P<0.05,P<0.01)。以上结果表明GLAE能减轻过量胆红素对新生大鼠的大脑损伤,其作用机制可能通过改善新生大鼠大脑能量代谢,提高大脑抗氧化能力,增加神经营养因子含量,抑制炎症反应及凋亡基因的表达来发挥作用。

维生素C多聚磷酸酯对小鼠肝脏脂质过氧化物和抗氧化物酶的影响

为研究维生素C多聚磷酸酯对小鼠肝脏脂质过氧化物和抗氧化物酶的影响 ,我们设置了 4个实验组 ,采用 2 4只小鼠 ,饵料中 35 %维生素C多聚磷酸酯的添加量依次为 0、 5 0 0、 2 5 0 0和 5 0 0 0mg/kg ,喂食 4周后取其肝脏 ,用硫代巴比妥酸分光光度测脂质过氧化物的含量 ,用亚硝酸盐形成法测定超氧化物歧化酶的活性 ,用分光光度法测过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性。结果表明 ,维生素C多聚磷酸酯对小鼠肝脏脂质过氧化物没有明显影响 ,但随着维生素C多聚磷酸酯添加量的增加 ,脂质过氧化物有减少的趋势。维生素C多聚磷酸酯添加量为 2 5 0 0和 5 0 0 0mg/kg的两组 ,其超氧化物歧化酶的活性明显高于对照组和维生素C多聚磷酸酯添加量为 5 0 0mg/kg组 ;过氧化氢酶的活性明显高于对照组。维生素C多聚磷酸酯添加量为5 0 0 0mg/kg组 ,其谷胱甘肽过氧化物酶的活性明显高于其它三组。表明高剂量的维生素C多聚磷酸酯能促进小鼠抗氧化物酶的活性 。

同型半胱氨酸诱发鸡胚神经管畸形及叶酸的保护作用

为了揭示同型半胱氨酸（ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，ＨＣＹ）是否能导致胚胎发生神经管畸形（ＮＴＤｓ）和可能的致畸机制及验证叶酸和ＶＢ１２的干预效果，本研究应用鸡胚致畸试验、扫描电镜观察、尼罗兰盐活体染色、原位ＤＮＡ片段末端标记、甲基绿—派若宁染色显示核酸法、叶酸和Ｂ１２干预实验等方法检测了用ＨＣＹ（０～１６μｍｏｌ／胚胎）的不同胚龄胚胎１２７４只。结果显示ＨＣＹ对神经胚形成期和器官形成期的胚胎均有显著的致畸性并呈剂量－反应关系（Ｐ＜０．０００１），鸡胚发生ＮＴＤｓ的主要表现是露脑，裂脑和脊柱裂。首次发现ＨＣＹ能诱发神经系统细胞凋亡过度，其部位与ＮＴＤｓ发生部位相吻合。ＨＣＹ能抑制卵黄囊血管分化；损伤羊膜组织及细胞超微结构，如微绒毛变短，胞膜上出现空洞样变等。注射５μｇ叶酸明显拮抗ＨＣＹ（８μｍｏｌ／胚胎）的致畸性，ＮＴＤｓ发生率由４３．５％降至０（Ｐ＜０．０５）；注射１μｇＶＢ１２不能明显保护胚胎（Ｐ＞０．０５）。本研究结果说明ＨＣＹ能诱导胚胎发生ＮＴＤｓ；细胞凋亡在ＮＴＤｓ发生过程中起重要作用；叶酸能有效地预防ＮＴＤｓ；

鱼鳞中羟基磷灰石的提取及其显微结构的研究

本文研究了鱼鳞经不同处理后的相组成及显微结构的变化。结果表明鲢鱼鱼鳞为蛋白质纤维和HAP纳米无机颗粒组成的层状复合体。通过水煮及煅烧处理可以获得由粒径小于 2 0 0nm的羟基磷灰石与 β磷酸三钙颗粒构成的片状结构。

血管内皮生长因子促血管形成作用及其调控

血管内皮生长因子是一种具有促血管生成活性的功能性蛋白 ,它通过与特异性受体的结合 ,发挥生理功能 :(1 )促血管内皮细胞分裂从而促进新生血管形成 ;(2 )增强血管通透性的功能。其活性的发挥受到多因素、多水平的调节 ,如 :缺氧、癌基因、细胞因子、细胞间质成分等。

黑眶蟾蜍和黑斑蛙消化道5-羟色胺免疫活性细胞的免疫组织化学

对黑眶蟾蜍(Bufomelanostictus)和黑斑蛙(Rananigromaculata)消化道5-羟色胺免疫活性细胞的形态、分布进行了免疫组织化学定位。5-羟色胺免疫活性细胞在黑眶蟾蜍和黑斑蛙消化道各段中均有分布,分布密度均呈升-降-升-降的波浪式分布特点,二者在幽门部和回肠都有个分布的高峰值。黑眶蟾蜍回肠最高,空肠、幽门部次之,十二指肠、直肠最低;黑斑蛙幽门部最高,回肠、空肠次之,食道、贲门部、直肠最低。5-羟色胺免疫活性细胞位于胃的胃腺上皮、食道及肠的粘膜上皮,有圆形、椭圆形、梭形、楔形等,有的有胞突。文中讨论了5-羟色胺免疫活性细胞分布型的原因及形态与功能的关系。

猕猴发育过程中肠肝组织生长抑素及其受体表达演变规律

探讨在猕猴发育过程中生长抑素(somatostatin,SST)及其受体在肠肝组织的演变规律。通过手术途径获得胚胎6月、新生2 d、新生45 d和成年猕猴的回肠、肝脏、门静脉和外周血等标本。应用放射免疫分析法测定各标本中的SST含量; 通过免疫组化方法观察SST在肠、肝组织内的分布;利用原位杂交检测SST受体2(somatostatin receptor 2,SSTR2)的表达。结果显示:(1)胚胎6月的猕猴,小肠内SST含量为(27．3±16．6)ng／mg蛋白;黏膜隐窝处SST呈弱阳性染色,肌层 SST染色阴性。在发育过程中,小肠内SST含量逐渐增加,成年期时达最高水平(120．1±35．3)ng／mg蛋白,较胚胎6月显著增加(P<0．01)。(2)成年小肠黏膜隐窝处及肌间神经丛SST呈强阳性染色。(3)胚胎6月,小肠粘膜上皮可见大量SSTR2 表达,成年时SSTR2表达下调,且主要定位于腺上皮隐窝处;胚胎及新生期肌层SSTR2染色阴性,成年时小肠肌间神经丛则可见阳性SSTR2染色。(4)肝脏在发育过程中SST及SSTR2含量逐渐降低;发育的各个时期,小肠组织的SST含量均明显高于肝脏组织含量,门静脉SST水平也始终高于外周血。总之,位于小肠黏膜隐窝处的SST和SSTR2随着发育逐渐增加,来自肠道的SST进入门静脉后迅速被降解。SST阳性的肠肌间神经丛仅在发育成熟后才出现。

PM_(2.5)对小鼠肺急性损伤的试验研究

目的 研究PM2 5的急性毒效应 ,探讨免疫损伤和氧化损伤在PM2 5对肺损伤过程中的作用。方法 以昆明小鼠为试验对象 ,随机分成空白对照组 ,生理盐水对照组和低剂量、中剂量、高剂量PM2 5组共 5组 ,除空白对照组外 ,其他各组气管滴注染毒 2 4小时后 ,分析支气管肺灌洗液中乳酸脱氢酶 (LDH)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶 (ACP)、白蛋白 (ALB)、一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)、丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)等含量和细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF α)、白细胞介素 1(IL - 1)活性 ,以及测定肺巨噬细胞的吞噬功能 ,并观察肺组织病理学改变。结果 空白对照组和生理盐水对照组比较 ,各指标未见明显差异 ;试验组和生理盐水对照组比较 ,肺灌洗液中LDH、AKP、ACP、ALB、NO、NOS、MDA等含量和TNF α、IL 1活性有显著性增高 (P <0 0 5 ) ,SOD含量和肺巨嗜细胞的吞噬功能明显下降 (P <0 0 5 ) ,均呈现出剂量依赖性关系。结论 PM2 5的吸入引起机体的免疫反应和氧化应激反应 ,从而造成对小鼠肺实质细胞和膜性组织的毒作用。

嘉陵江8种鱼类不同组织微量元素含量分析

测定了黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)、中华倒刺(Spinibarbus sinensis)、大鳍(Mystus macropterus)、长吻(Leiocassis longirostris)、大眼鳜(Siniperca kneri)、小口鲇(Silurus asotus)、岩原鲤(Procypris rabaudi)和圆口铜鱼(Coreius guichenoti)8种嘉陵江名贵鱼不同组织微量元素含量及肌肉和脑中Ca、P含量,结果表明,鱼脑中各类矿物质元素显著高于肌肉;肌肉5种微量元素总量由低到高依次为:圆口铜鱼、中华倒刺、长吻、大鳍、黄颡鱼、大眼鳜、岩原鲤、小口鲇;而脑由低到高依次为:大眼鳜、岩原鲤、小口鲇、圆口铜鱼、大鳍、中华倒刺、长吻、黄颡鱼。微量元素在各内脏器官的分布:铁和铜以肝(胰)脏最高,肾脏其次,胃肠最低;锰和锌的含量肾脏>肝(胰)脏>胃肠;镁的分布各种鱼差异较大。

丹参水提取物对去卵巢大鼠血脂和肝脏的影响

为研究丹参的雌激素样作用,将32只6月龄SD大鼠随机分成假手术组(Sham)、去卵巢手术组(OVX)、阳性对照17β-雌二醇治疗组(E2,1mg.kg-1.d-1,灌胃)和丹参治疗组(SM,600 mg.kg-1.d-1,灌胃),治疗12周后,检测大鼠体重的增加情况、子宫指数、血脂水平、血清转氨酶活性及抗氧化情况,并进行肝脏的组织学检测.结果显示,丹参水提取物治疗12周能明显抑制去卵巢诱导的大鼠体重的增加,刺激萎缩的子宫生长,改善血脂水平,降低丙氨酸氨基转氨酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)的活性,减轻肝脏的脂肪变性.丹参水提取物的这些保护作用,可能与其能降低氧化剂丙二醛(MDA)水平,增加超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性有关.

腰椎小关节退变致腰腿痛机制的实验研究

目的:探讨退变腰椎小关节病变和腰腿疼的关系及其可能的作用机制。方法:收集我院骨科临床手术中切除的腰椎小关节标本,利用组织病理学和影像学检查对比研究正常和退变腰椎小关节的病变特点,免疫组织化学方法观察P物质(substanceP,SP)、降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP)能神经纤维在小关节中的分布,酶联免疫吸附剂测定法(enzyme-linkedimmunosobnentassay,ELISA)测定腰椎小关节中细胞因子IL-1β的含量。结果:退变腰椎小关节的X线和CT表现为关节间隙有不同程度的变窄或消失、关节面骨质增生、硬化,HE染色软骨表面不平整、细胞排列紊乱;白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平升高。在两组小关节中都发现了SP、CGRP能神经纤维的存在。结论:腰椎小关节退变后发生了不同程度的病理变化,机械摩擦和细胞因子刺激小关节中的神经纤维可能是小关节病变引起腰腿疼的原因之一。

邻苯二甲醛柱前衍生化高效液相色谱法测定组织中肌肽含量

目的建立测定小鼠各组织肌肽含量的高效液相色谱法。方法采用c18色谱柱，以甲醇和0．05mol／L磷酸盐缓冲液（pH3．5）为流动相，用邻苯二甲醛为柱前衍生剂，在柱温38℃下采用二元梯度洗脱，对小鼠各组织中的肌肽含量进行了测定。结果肌肽在0．63—10．00μg／mL时峰面积与进样质量浓度有良好的线性关系，其相关系数为0．9996。回收率在98．2％～99．7％之间。检测限为0．05pg／mL（S／N=10）。结论该法灵敏可靠、专属性强、重现性好。小鼠心脏、肝脏、肾脏、大脑皮层和海马中肌肽含量分别为123．67，22．86，158．86，76．57，81．86mg／g。

心钠素对内皮素某些生物学效应的拮抗作用

为了探讨心钠素（ＡＮＦ）对内皮素（ＥＴ）生物学效应的拮抗作用，我们进行了下述实验。在ＥＴ致小鼠死亡实验中，观察到大剂量ＡＮＦ可显著延长小鼠存活时间；在ＥＴ致大鼠升压实验中，观察到ＡＮＦ明显拮抗ＥＴ的升压作用；在大鼠离体胸主动脉环灌流实验中，观察到ＡＮＦ对ＥＴ引起的血管收缩呈浓度依赖的舒张作用；在培养的血管平滑肌细胞中，观察到ＡＮＦ显著抑制ＥＴ的促血管平滑肌细胞钙内流作用。结果表明：ＡＮＦ对ＥＴ生物学效应具有部分拮抗作用，ＡＮＦ在治疗与ＥＴ有关的疾病上，可能具有潜在临床意义。

微囊藻毒素-LR致小鼠肝、肾和睾丸细胞DNA-蛋白质交联的研究

目的探讨微囊藻毒素-LR所致小鼠肝、肾、睾丸细胞DNA-蛋白质交联(DPC)作用。方法以昆明种雄性小鼠为实验对象,腹腔注射染毒,采用KCl-SDS沉淀法检测小鼠肝、肾、睾丸细胞中交联DNA和游离DNA的量,计算其DPC系数,DPC系数=交联DNA/(交联DNA+游离DNA),判断DNA与蛋白质的交联程度。结果在小鼠肝细胞中,微囊藻毒素-LR各染毒组DPC数量均有显著增加,其DPC系数与对照组相比差异均有显著性(P<0.05)。在小鼠肾细胞中,微囊藻毒素-LR染毒剂量为3μg/kgbw和6μg/kgbw时,DPC数量显著增加,其DPC系数与对照组相比差异有显著性(P<0.05);染毒剂量为12μg/kgbw时,DPC数量未增加,其DPC系数与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。在小鼠睾丸细胞中,染毒剂量为3μg/kgbw时,DPC数量未增加,其DPC系数与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。染毒剂量为6μg/kgbw和12μg/kgbw时,DPC数量显著增加,其DPC系数与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。结论在一定的染毒剂量下,微囊藻毒素-LR可以引起小鼠肝、肾、睾丸细胞DNA-蛋白质交联。