成骨细胞线粒体移植促骨髓间充质干细胞体外增殖、迁移和成骨分化

为探究成骨细胞(OBs)线粒体移植对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨分化的影响,本研究体外人工提取BMSCs线粒体和OBs线粒体,分别移植入受体BMSCs.实验结果发现,接受成骨细胞线粒体的BMSCs表现出显著增强的增殖、迁移、抗凋亡和成骨能力.此外,接受成骨细胞线粒体的BMSCs胞内活性氧水平降低、氧气消耗速率上调、ATP产量增加.以上结果表明,(1)成骨细胞线粒体移植能够增强体外BMSCs功能,促进其向成骨分化;(2)相较于接受骨髓间充质干细胞线粒体,接受成骨细胞线粒体移植的受体BMSCs具有更强的有氧代谢能力以及更强的成骨分化能力,有望为骨生长与骨损伤修复提供一种候选方法 .

科教融合在生物工程专业实验教学中的应用探讨——以人参皂苷CK抗肝癌靶点的虚拟筛选为例

生化分离工程实验在生物工程专业创新性人才培养的过程中起着重要作用。本文以“人参皂苷CK抗肝癌靶点的虚拟筛选”实验为例,探讨了将其作为生化分离工程综合实验教学的可行性。通过将该实验融入生物工程专业实验教学不仅可以增强学生对专业知识的理解,而且可以拓宽学生对前沿科学发展的认知和视野,从而激发学生的学习兴趣和学习动力并在学习过程中培养他们对现代工具的使用能力和创新性思维。

抗体工程化微型机器人清除水中新型冠状病毒的研究

由于严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2型(简称“新型冠状病毒”)(SARS-CoV-2)可在水中保持长时间的稳定性和高度传染性,因此,清除水中的新型冠状病毒成为遏制及阻断其传播的重要途径。该研究采用“点击化学”反应将新型冠状病毒S蛋白的中和抗体P2C-1F11修饰在具有自驱动特性的枯草芽孢杆菌表面,构建了一种抗体工程化微型机器人(antibody functionalized bacteria microrobot,AB-robot)。AB-robot通过P2C-1F11对新型冠状病毒S蛋白的高效靶向作用,对水中新型冠状病毒进行捕获和清除。结果表明,AB-robot在饮用水和自来水等水介质中展示了快速的自驱动能力。以新型冠状病毒假病毒为病毒污染物模型,使用AB-robot后,水介质中病毒清除率高达95%。扫描电镜表征结果显示,AB-robot表面结合了大量的病毒颗粒,进一步表明AB-robot能高效捕获病毒。综上,AB-robot的快速运动和病毒靶向性能促进了其对新型冠状病毒假病毒的即时捕获和高效清除,对防止和阻断水中新型冠状病毒的传播具有重要应用价值。

miR-375靶向MMP13抑制骨肉瘤细胞的迁移和侵袭

目的为了探究miR-375是否通过影响基质金属蛋白酶13(MMP13)的表达来调控骨肉瘤(osteosarcoma,OS)恶性特征。方法用Lipofectamine 3000试剂盒将质粒、miRNA转染至骨肉瘤细胞和HEK293细胞中。实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测OS患者和OS细胞中miR-375和MMP13的表达。蛋白质印迹法(Western blot)分析OS患者和OS细胞中MMP13蛋白的表达。双荧光素酶法分析miR-375与MMP13的靶向关系。伤口愈合和transwell实验分别分析OS细胞的迁移和侵袭。结果OS组织中miR-375的表达低于正常组织。MMP13在OS组织中表达上调。在OS患者中,MMP13的表达与miR-375呈负相关。与转染miRNA对照的OS细胞相比,转染miR-375模拟物OS细胞的迁移和侵袭明显被抑制。MMP13能部分逆转miR-375对OS细胞迁移和侵袭的抑制作用。结论在OS细胞中,过表达miR-375通过调控MMP13的表达抑制细胞的迁移和侵袭。

银杏酸纯化、结构修饰及活性研究进展

银杏酸(ginkgolic acid,GA)是一种酚酸类的小分子有机化合物,是以银杏(Ginkgo biloba L)为主要原料的提取物,主要存在于银杏外种皮中。由于具有明显细胞毒性,因而被规定为制剂的限制性指标成分,但同时也具有极强的研究与应用价值。近些年来,有关于银杏酸的研究报道越来越多,使其已逐渐成为了热点研究之一。现今对近些年银杏酸的纯化以及其衍生物生物活性的相关研究进行综述,并着重介绍了银杏酸其母核结构的几种修饰途径,总结了初步的构效关系,以期为今后银杏酸的科学研究提供参考价值,为今后充分利用我国的银杏资源,为银杏酸的大规模生产提供理论依据。

Downregulation of MUC1 Inhibits Proliferation and Promotes Apoptosis by Inactivating NF-κB Signaling Pathway in Human Nasopharyngeal Carcinoma

Objective To investigate the effect of mucin 1(MUC1)on the proliferation and apoptosis of nasopharyngeal carcinoma(NPC)and its regulatory mechanism.Methods The 60 NPC and paired para-cancer normal tissues were collected from October 2020 to July 2021 in Quanzhou First Hospital.The expression of MUC1 was measured by real-time quantitative PCR(qPCR)in the patients with PNC.The 5-8F and HNE1 cells were transfected with siRNA control(si-control)or siRNA targeting MUC1(si-MUC1).Cell proliferation was analyzed by cell counting kit-8 and colony formation assay,and apoptosis was analyzed by flow cytometry analysis in the 5-8F and HNE1 cells.The qPCR and ELISA were executed to analyze the levels of TNF-αand IL-6.Western blot was performed to measure the expression of MUC1,NFкB and apoptosis-related proteins(Bax and Bcl-2).Results The expression of MUC1 was up-regulated in the NPC tissues,and NPC patients with the high MUC1 expression were inclined to EBV infection,growth and metastasis of NPC.Loss of MUC1 restrained malignant features,including the proliferation and apoptosis,downregulated the expression of p-IкB、p-P65 and Bcl-2 and upregulated the expression of Bax in the NPC cells.Conclusion Downregulation of MUC1 restrained biological characteristics of malignancy,including cell proliferation and apoptosis,by inactivating NF-κB signaling pathway in NPC.

结直肠癌的免疫治疗

改善结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者的预后具有重要的临床和社会意义。免疫治疗是一种新兴的肿瘤治疗方式,免疫检查点抑制剂已在DNA错配修复缺陷/高微卫星不稳定型CRC的治疗中实现了良好的临床转化,占绝大多数的DNA错配修复完整/微卫星稳定型CRC患者却很难在该疗法中获益。免疫疫苗、过继性细胞疗法等其他免疫疗法的临床研究也在积极推进中,虽然展示了一定的良性结果,但仍面临着难以有效突破肿瘤抑制性微环境等诸多问题而未能获得实质性进展。本文以各种免疫治疗方案相关的临床试验为主线进行综述,以期明确CRC免疫治疗的进展,为更优治疗方案的探索提供依据。

咔咯类化合物的合成及其抗肿瘤研究进展

目前肿瘤的发病率和致死率越来越高,传统的肿瘤诊疗手段存在着诸多限制,而光动力治疗(photodynamic therapy,PDT)作为一种新兴的肿瘤治疗方法,以其特有的优势引起了越来越多的关注。PDT依赖于光敏剂在特定波长的光照射下的光物理和光化学作用,产生一系列活性氧类(reactive oxygen species,ROS)诱导肿瘤细胞死亡。咔咯因其独特的光学特性和对肿瘤组织的选择性,以及丰富的化学修饰潜力、良好的生物相容性,在PDT中具有广泛的应用前景。本文系统性综述咔咯类化合物的合成及其在治疗肿瘤中的应用进展。

恙虫病东方体混合重组抗原应用于胶体金免疫层析试纸条的制备及效价检测

胶体金免疫层析试纸条具有携带方便、操作简单且敏感性、特异性高等特点,近年来开始广泛应用于疾病的诊断。为了实现对恙虫病的快速检测,笔者利用双抗原夹心法,以胶体金标记恙虫病东方体56 kDa混合重组蛋白,56 kDa混合重组蛋白和兔抗恙虫病东方体多克隆抗体分别喷在检测线及质控线上,制备了用于检测恙虫病东方体抗体的胶体金免疫层析试纸条。本研究制备的胶体金试纸条检测限为61 ng/mL,和疟疾、伤寒、血吸虫、出血热以及斑点热等阳性血清无交叉反应,特异性达90%(54/60),检测的敏感性为91.96%(103/112),在4℃下可稳定保存6个月。本试纸条能够应用于人体血清中恙虫病东方体总抗体的检测。

生物标记法剖析传统酿造用大曲微生物群落结构

建立一种基于生物标记物表征大曲类固态发酵体系微生物群落结构的生物化学方法。以微生物细胞膜的特征组分磷脂脂肪酸(PLFAs)组成信息为指标,描述大曲微生物群落结构特征;采用麦角甾醇标记物含量估算出样品真菌生物量。结果显示:5种不同生产工艺的大曲样品中共计检出18种磷脂脂肪酸,优势PLFAs是16:0、18:2ω6,9和18:1ω9,占总PLFAs物质的量的90%以上。从PLFAs组成特征判断5类大曲中优势菌群均为真菌。基于麦角甾醇含量与真菌生物量的关联性,估算出绝干大曲中的真菌生物量分布在(110.45±4.60)～(218.47±11.19)μg/mg。

骨碎补与续断配伍提取物对大鼠骨折修复研究

对骨折大鼠进行血钙浓度、血磷浓度、血清碱性磷酸酶(ALP)活性检测、X线片观测及生物力学测试,观察骨碎补总黄酮与续断总皂苷配伍用药对大鼠骨折愈合的作用.结果表明:该配伍用药促进了骨折部位钙盐的重新沉积,提高了血清ALP活性,与模型组相比,1周时复方高剂量组血钙浓度及血清ALP活性升高,达极显著(p<0.01),分别为3.48 mmol/L与34.17×10-2U/mL;促进骨痂的生成,增强骨强度;复方高剂量组在3周时,骨折断端开始消失,弯曲破坏载荷达6.877 N.说明骨碎补总黄酮与续断总皂苷配伍用药能显著促进骨折的愈合.

聚乳酸微球的制备

利用聚乙烯醇和阿拉伯胶作为修饰剂,采用溶剂挥发法制备聚乳酸微球,通过正交实验设计研究了不同的修饰剂、有机溶剂、聚乳酸浓度、 表面活性剂、搅拌速度等因素对微球粒径的影响,并对制备的微球粉体学性质进行了初步研究.结果表明,在本文的工艺流程下制备的微球具有较均一的粒径,平均粒径为2.0～3.0μm,微球表面平滑,呈球形.

枸杞子提取液抗氧化活性的研究

用Folin-Ciocalteu法、DPPH法和Fenton法分别对脱脂及未脱脂枸杞子的水和50%、80%、95%乙醇提取液的抗氧化活性进行测定。结果显示:3种方法所得结果具有一致的规律,相同提取条件下,未脱脂枸杞子的抗氧化活性大于脱脂枸杞子;随着乙醇浓度增大,枸杞子提取液的抗氧化活性逐渐减小,即水>50%乙醇>80%乙醇>95%乙醇枸杞子提取液。表明枸杞子中水溶性提取物的抗氧化活性高于脂溶性提取物;不同提取液抗氧化能力的差异说明枸杞子的抗氧化能力是枸杞子中水溶性和脂溶性多种成分协同作用的结果。

羧甲基壳聚糖亚铁配合物的表征及其对CO的吸附研究

利用羧甲基壳聚糖吸附亚铁离子得到亚铁配合物,红外光谱显示羧甲基壳聚糖与Fe2+发生了化学反应,同时利用扫描电镜和差热分析对配合物进行表征,发现反应前后两者的微观结构和热性质发生了显著变化。将亚铁配合物用于吸附CO,结果表明,在反应时间为6 h,温度为40℃左右,颗粒度为80目时吸附量最高,可达1.75 mg·g-1。对比发现,羧甲基壳聚糖亚铁配合物较羧甲基壳聚糖吸附CO效果提高4倍以上,且羧甲基壳聚糖亚铁配合物对CO的吸附量高于壳聚糖亚铁配合物。

诃子中总多酚含量的测定及其超声提取工艺的研究

目的:利用超声波辅助法提取诃子中总多酚。方法:考察了超声波的提取时间、乙醇浓度、料液比三个单因素对多酚提取率的影响,并在单因素实验基础上进行正交实验。结果:确立了诃子中总多酚的最佳工艺条件为:60%乙醇;料液比为1:20;超声提取60min。总多酚得率为13.27%。结论:此提取方法能够避免多酚在高温下的分解,极大地缩短了提取时间。

香菇多糖口服液缓解小鼠体力疲劳的功能检测

目的:检测香菇多糖口服液是否有缓解小鼠体力疲劳的功能.方法:通过热水抽提、乙醇沉淀等方法制备香菇多糖,用18%橙汁、4%砂糖、0.2%柠檬酸、0.15%稳定剂CMC溶剂配制不同计量口服液,给小鼠灌胃,对照组为生理盐水.30 d后比较各组小鼠体质量、负重游泳时间、血清尿素氮、血乳酸浓度及肝糖原水平的变化.结果:与对照组相比,2.25 g/kgBW剂量组香菇多糖口服液能显著延长小鼠的负重游泳时间(P<0.01),增加肝糖原的储备量(P<0.01),降低血乳酸水平(P<0.01),降低运动后血清尿素氮的增量(P<0.05),1.13 g/kg BW剂量组香菇多糖口服液能延长小鼠的负重游泳时间(P<0.05),降低血乳酸水平(P<0.05),降低运动后血尿素氮的增量(P<0.05).结论:香菇多糖口服液具有抗疲劳生理活性.

油松和虎榛子不同林型根系分泌物组分及化感效应

采用气质联用(GC/MS)技术,分别对油松Piuns tabulaeformis纯林和虎榛子Ostryopsis davidiana纯林及两者混交林根际土壤中根系分泌物组分进行分析。在此基础上,应用外源法选择邻苯二甲酸、ρ-香豆酸对油松盆栽幼苗进行了化感效应测试。结果表明:根际中检测到的化合物包括有机酸类、酯类和酚酸类。其中有机酸是数量最多且比例最大的一类化合物,在油松纯林、虎榛子纯林及混交林中有机酸所占比例分别为63.82%,71.05%和69.12%;酯类分别占8.38%,12.65%和14.42%;酚酸类分别占整个组分的27.80%,16.30%和16.46%;酚酸类化合物检测到7种,包括羟基肉桂酸、ρ-羟基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、邻苯二甲酸、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸和ρ-香豆酸,混交林中没有检测到羟基肉桂酸。油松纯林中,7种酚酸的含量显著高于另外2种林型,除3,4-二羟基苯甲酸外,其余酚酸含量均为混交林的2.5倍以上,ρ-香豆酸达到8倍;与对照相比,应用外源ρ-香豆酸和邻苯二甲酸在质量浓度2.5 mg·L-1时对油松苗高和生物量均具有促进作用,化感响应指数为正值。随着2种化合物质量浓度的增大,抑制作用加强,但ρ-香豆酸的抑制作用小于邻苯二甲酸。因此,混交林根际根系酚酸含量的降低可能是其生长优于纯林的重要原因之一。

β-葡萄糖苷酶在工农医领域的应用

β-葡萄糖苷酶能够水解多种β葡萄糖苷。它与其他纤维素酶共同作用,可以将自然界中含量丰富的纤维素水解成人类可以直接利用的能源物质———葡萄糖;β葡萄糖苷酶在医学上也有重要的应用,它可用于一些肿瘤疾病的诊断和治疗。人缺乏β-葡萄糖苷酶,可以引起葡萄糖苷N脂酰鞘氨醇在巨噬细胞溶酶体内积累,引发戈谢病(Gau cherdisease)。

茜草多糖对衰老模型小鼠心肌线粒体酶活性影响的实验研究

目的探讨茜草多糖对衰老小鼠心肌线粒体酶活性的影响。方法通过建立D半乳糖人工致衰小鼠模型,测定心肌线粒体超氧化物歧化酶(SOD),Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶的活性。结果衰老模型组SOD、Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶的活性均明显降低;茜草多糖可升高衰老模型组SOD、Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶活性(P<0.05,P<0.01)。结论茜草多糖对衰老模型小鼠心肌线粒体有保护作用。

恩诺沙星对鲤酯酶同工酶和血清生理生化指标的影响

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和试剂盒等方法, 对投喂不同剂量恩诺沙星和氯霉素的鲤Cyprinuscarpio酯酶同工酶进行了电泳分析, 同时对一些血清生理生化指标进行了测定。结果表明: 恩诺沙星可使鲤酯酶同工酶的活性升高; 所有投喂药饵的鱼血清总蛋白、白蛋白、白蛋白与球蛋白之比均下降, 谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、无机磷、非蛋白氮、肌酐呈上升趋势; 高浓度药物对鲤的器官生理功能均有不同程度的影响, 其中对肝胰脏、肾脏的影响较为明显。