碳酸钙促进丙酮酸发酵过程中α-酮戊二酸的形成

在多重维生素营养缺陷型菌株光滑球拟酵母CCTCCM2 0 2 0 19发酵生产丙酮酸的摇瓶和发酵罐实验中发现 ,CaCO3的添加对发酵液中α 酮戊二酸 (α KG)的积累有重要影响。在维生素浓度不变且供氧充分的前提下 ,延迟CaCO3添加时间可明显抑制α KG的产生 ,并提高丙酮酸与α KG的碳摩尔比 (CPYR Cα KG) ;而增加培养基中的CaCO3浓度会导致α KG积累的增加。用不同物质调节发酵液中pH的实验证实 :在丙酮酸发酵过程中 ,Ca2 + 对α KG的积累起主要作用 ,CO32 - 起辅助作用 ,两者对α KG的积累具有协同效应。维持培养基中CaCO3浓度不变 ,改变培养基中硫胺素的浓度 ,对α KG的积累 ,特别是对CPYR Cα KG值没有影响 ;而增加培养基中生物素的浓度 ,则导致α KG的浓度不断上升且CPYR Cα KG 值不断下降。当有Ca2 + 存在时 ,胞内丙酮酸羧化酶的活性最高可提高 4 0 % ,而丙酮酸脱氢酶系的活性没有明显变化。结果表明 ,丙酮酸发酵过程中α KG的形成是由于CaCO3促进了丙酮酸羧化反应 ,其中Ca2 + 可显著提高丙酮酸羧化酶的活性 ,而CO32 - 则有可能作为丙酮酸羧化反应的底物。

富铬酵母的理化性质和氨基酸分析

用２００～３００ｎｍ的波长范围对富铬酵母及普通酵母的溶液进行紫外扫描，发现在λ_(２６０ｎｍ)处有一特征紫外吸收峰，富铬酵母细胞的铬含量与其吸收峰的光密度呈线性关系；在不同的温度和ｐＨ值条件下，通过紫外吸收峰的测定，富铬酵母溶液在酸性条件下稳定，在碱性条件下不稳定。溶液的λ_(２６０ｎｍ)紫外吸收峰随着温度的上升而升高。从氨基酸含量分析结果看，富铬酵母的谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、丙氨酸和赖氨酸含量高于普通酵母，但其他氨基酸含量比普通酵母低。

致病酵母菌基因组多态性及亲缘关系的研究

致病酵母是条件致病菌感染中最常见的菌群。其属间、种间及种内的分型具有重要的流行病学及临床意义。以随机扩增多态性(Randomly Amplified Polymorphism DNA markers,RAPD)的方法对48株临床上常见的酵母菌属间、种间及种内基因组型的多态性进行了研究,并以多种引物扩增带型的相似性系数的高低来评价酵母菌之间的亲缘关系。结果表明:RAPD带型可清楚的显示出假丝酵母(Candida)及相关酵母属间、种间及种内的差异,亲缘关系的研究表明假丝酵母属与隐球菌属(Cryptococcus)、丝孢酵母属(Trichosporon)的相似性系数为80％,除季也蒙假丝酵母(C. guilliermondii)外,假丝酵母属中不同种间的相似性系数为82％～87％,同种不同株间的相似性系数>90％。大多数属、种基因组分型的结果和形态学分类结果相符。

从酵母中提取谷胱甘肽的初步研究

考察了不同提取方法对从酵母中提取谷胱甘肽（GSH）的影响，热水抽提由于其提取收率高（90％）、耗时短（10min）、经济性强而明显优于其它提取方法。对732阳离子交换树脂纯化GSH进行了初步研究，主要研究了树脂颗粒大小对提纯GSH的影响。采用60～80目的树脂，GSH收率为576％，虽然比80目以上的树脂低10％，但前者操作所需时间只有后者的1／3。

富铬酵母中14种元素的ICP-AES测定

本文用ＩＣＰ－ＡＥＳ法同时测定富铬酵母中Ｋ、Ｆｅ、Ｐ、Ｚｎ、Ｃｒ、Ｃｕ、Ｍｎ、Ｃｏ、Ｂａ、Ｓｒ、Ｖ、Ｎａ、Ｍｇ、Ｃａ１４种元素的含量。结果表明，富铬酵母中的铬对其他元素的浓度有一定影响，并且，Ｋ、Ｍｎ、Ｐ、Ｖ、Ｍｇ、Ｃａ的浓度明显低于普通酵母。

砂梨脂氧合酶cDNA片段克隆与RNAi载体构建

以砂梨‘若光’的成熟果实为材料,根据脂氧合酶氨基酸保守区设计1对简并引物,采用RT-PCR克隆到1段长827 bp的序列,经Blast比对和DNAstar软件聚类分析,结果表明由该序列推导出的氨基酸序列含有脂氧合酶氨基酸保守结构域,与马铃薯脂氧合酶基因的氨基酸序列相似性达到77.5%,判断其为砂梨脂氧合酶基因片段,命名为LOX1,并将序列登录到GenBank,登录号为EF215448。根据RNAi载体的构建原则,选择LOX1一开放阅读框设计携带酶切位点的特异引物,通过PCR扩增正、反向基因片段,再与YYT间隔区串连,插入植物表达载体pYF7713中的相应位置,成功地构建了干扰LOX基因表达的RNAi的植物双元表达载体pYL028,为深入研究该基因在砂梨果实成熟过程中的功能及耐贮藏基因工程育种奠定了基础。

基因工程菌Pichia pastoris连续培养的生长及抑制动力学

在同一稀释率μ(μ=0 .1 4h-1)下用不同浓度的甘油流加进行连续培养 ,研究甘油浓度对基因工程菌毕赤酵母 ( Pichia pastori)生长的影响。结果表明甘油浓度对细胞生物量 ( DCW和WCW)、底物得率系数 ( YX/ S)、底物比消耗速率 ( qs)、呼吸熵 ( RQ)与二氧化碳释放率 ( CER)都有影响 ,在低甘油残留浓度 ( <63.3g/L)下 ,甘油是激活剂 ,菌体生长符合 Monod方程 ,Ks=1 9.62 g/L,甘油激活常数 Ka=1 9.45 g/L;而在高甘油残留浓度 ( >63.3g/L )下甘油是抑制剂 ,菌体生长特征符合 Haldance方程 ,Ks=0 .0 1 4g/L,KI=1 5 6.67g/L。毕赤酵母生长的甘油抑制浓度为 5 5 .42

产脂肪酶假丝酵母的筛选及其研究

从武汉油污样中分离获得一株高产脂肪酶的假丝酵母R 2 .发酵研究表明 ,最适培养基为蛋白胨2 0 g/L,蔗糖 10 g/L ,橄榄油 5 g/L ,(NH4 ) 2 SO4 1g/L ,MgSO4 ·7H2 O 1g/L ,K2 HPO4 1g/L和吐温 80 1g/L ;最适产酶条件为 30℃ ,初始 pH7.0 ,转速 2 0 0r/min ,培养 32h .最高产酶活力达到 1437u/mL ,酶作用最适温度40℃ ,最适 pH7.5 .

乳酸酵母菌的研究现状及其在饲料添加剂中的功能

随着科学技术的不断进步与生活质量的逐渐提高,消费者对于动物源性食品的质量、安全性及环保性的要求越来越高。采用饲料添加剂的目的不仅仅是为提高动物源性食品的产量,更主要的是降低动物源性食品携带人类病原菌的风险以及减少有毒物质的释放,如毒性胺、甲烷等。文中论述了国内外有关乳酸酵母菌(一种新型微生物饲料添加剂)的研究现状,及其在微生物饲料添加剂中的功能和应用前景。

中国海红酵母属 (Rhodotorula Harrison)的种类

我国黄、渤海沿岸不同基物上红酵母的种类,按G.C.Fell等的方法进行常规鉴定,共鉴定216株,分属于4个种,即深红酵母(Rh.rubra)153株,粘红酵母(Rh.glutinis)39株,小红酵母(Rh.minuta)15株,牧草红酵母(Rh.graminis)9株.调查结果表明。

酿酒酵母和粟酒裂殖酵母细胞增殖对Ca^(2+)依赖性的比较研究

同样实验条件下Ca^(2+)对S.cerevisiae的增殖没有影响,但能明显促进S.pombe的增殖;Ca^(2+)螯合剂EGTA对S.cerevisiae的增殖没有明显抑制作用,但对S.pombe的增殖有显著的抑制作用,回加Ca^(2+)能够有效消除EGTA的抑制作用;而非特异性螯合剂EDTA虽然对两类酵母细胞的增殖都有抑制作用,但Ca^(2+)却不能消除EDTA的抑制作用,这样就直接指明了两类酵母对胞外Ca^(2+)的依赖性是不一样的。由于S.cerevisiae细胞的增殖速率比S.pombe细胞要快近3倍,且与转化细胞或肿瘤细胞具有类似的细胞增殖不依赖于胞外Ca^(2+)的特性,说明研究胞外Ca^(2+)对这两类酵母细胞增殖不同作用效应的机制,对搞清细胞周期失控与细胞转化之间的关系有重要的意义。

超临界CO_2对面包酵母活性影响的研究

超临界CO2 下面包酵母菌株的存活率 ,随菌体含水量的增加、在超临界CO2 流体中停留时间的延长和压力的增大而逐渐降低 ;当CO2 的降压速率为 0 2 5MPa min时 ,酵母菌的存活率最高。结果表明 ,在超临界CO2 条件下导致酵母菌死亡的主要原因是压力的快速变化与低pH值。

克鲁维酵母Y-85菊粉酶的纯化和性质

克鲁维酵母(Kluyveromyces sp.)Y-85产生的胞内菊粉酶(endocellular inulinase)和胞外菊粉酶(exocellular inulinase)粗酶液分别经PEG6000-磷酸盐缓冲液双水相抽提得部分纯化酶液。前者进一步用硫酸铵分级沉淀、Protein-PAK DEAE离子交换、Protein-PAK200SW凝胶过滤后得到两个菊粉酶组分EⅠ和EⅡ;后者采用DEAE-Sephacel离子交换、Sephadex G150凝胶过滤后得到菊粉酶Eexo。经Waters 650E蛋白纯化系统鉴定,三者均呈单一的对称峰;EⅠ和EⅡ达聚丙烯酰胺盘状凝胶电泳纯。EⅠ、EⅡ和Eexo的分子量分别为42kD、65kD和57kD;三者均为糖蛋白,多糖含量分别为30％、35％和25％;I/S(Inulinaseactivity/Sucrase activity)比值分别为0.086、0.078和0.072;三者均属外切菊粉酶。EⅠ、EⅡ和Eexo酶反应最适pH分别为4.6、4.5和4.6,最适温度分别为52℃、52℃和55℃;Ag^+、Hg^(2+)和PCMB对酶活性有强烈的抑制作用;三者水解菊芋粉糖液的产物均为果糖(86.5％)和葡萄糖(13.5％)。

酵母菌的分离及鉴定

从新疆吐鲁番所采的土样中分离出的３株编号为Ｓｙ９５－００１、Ｓｙ９４－００２、Ｓｙ９４－００３的酵母菌株，通过形态和生理生化试验，初步鉴定为：克洛克酵母属（Ｋｌｏｅｃｋｅａｓｐ．）、假丝酵母属（Ｃａｎｄｉｄａ）的热带假丝酵母（Ｔｒｏｐｉｃａｅｉｓ）、类酵母属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｄｅｓ）的中国类酵母（ｓｉｎｅｎｓｉｓ）

酵母菌属间原生质体融合构建高温酵母菌株

酿酒酵母（Ｓａｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）Ａ００１和克鲁维酵母（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．）Ｙ０３４属间原生质体融合构建高温酵母菌株。对制备高再生活性原生质体及融合子细胞形态、生理化特征、同工酶性质、遗传稳定性和高温发酵等方面进行了研究。结果表明，融合子ＡＹ０２３和ＡＹ６８０遗传性能稳定，表达了双亲优良性状，获得了在４５℃培养条件下产酒率７４％的属间融合菌株，是目前已见文献报道的产酒率最高的高温（４５℃）酵母菌株。

冷冻干燥条件下酿酒酵母细胞脂肪酸组成变化的研究

以气相色谱法测定酿酒酵母(Saccharomyces cereuisiae) F159细胞膜类脂中脂肪酸的组成。结果表明,在低温干燥条件下,酿酒酵母细胞能自身调节脂肪酸的不饱和度,出现C_(16:1)脂肪酸含量增加,C_(16:0)脂肪酸含量略有所增,而C_(18:0)脂肪酸含量却有下降,不饱和直链脂肪酸之和与饱和直链脂肪酸之和的比值增加。说明这些变化使酿酒酵母细胞膜保持流动状态而维持细胞的稳定性和活性。初步探讨了冷冻干燥对酿酒酵母细胞脂肪酸组成的影响,为进一步探索和研究微生物抗冷冻干燥生理生化机制提供了依据。

酵母菌C10产内切型菊粉酶发酵条件研究

在多个单因素实验的基础上 ,采用正交试验方法 ,通过对筛选及诱变选育后得到的产内切型菊粉酶较高酵母菌株C10进行发酵工艺条件实验 ,得到一个比较优化的发酵工艺条件为 :pH5 5 ,温度30℃ ,菊芋干粉 5 % ,NH4 H2 PO4 0 5 %。不同金属离子及不同诱导物对酶合成的影响表明 ,Mn2 +激活作用最显著 ,而Zn2 +、Cu2 +、Fe2 +有抑制作用 ,菊芋干粉为合成菊粉酶的最佳诱导物。

红酵母属RY菌株形成类胡萝卜素的研究

分离的红酵母属（Rhodotorula）RY菌株形成的色素组成简单，石油醚可萃取到较纯的一种主要组分──红色的多烯类类胡萝卜素。该菌的培养条件为：葡萄糖2％，硫酸铵1％，酵母膏0．3％，添加2×10^（－6）mol／L核黄素，初始pH6．0，28℃，160r／min振荡培养72h。添加核黄素可以明显促进该菌类胡萝卜素的形成。