佛罗里达文昌鱼哈氏窝组织在性腺发育不同时期的形态结构变化

哈氏窝是文昌鱼生殖内分泌调控轴重要组成部分,为了进一步揭示文昌哈氏窝形态特征与性腺发育的关系,丰富文昌鱼的生物学基础信息,利用组织学切片及HE染色技术观察了佛罗里达文昌鱼在性腺发育不同时期哈氏窝形态变化。结果表明:佛罗里达文昌鱼在性腺刚出现及早期时,哈氏窝位于文昌鱼哈氏窝位于脊索附近,有一层薄膜相隔,呈近似对称的倒“凹”状;在性腺发育和成熟时期,哈氏窝顶部增厚,胞质清晰,两侧向窝内增大,窝内空隙变小,形状呈现矮宽;在性腺排空及退化时期,哈氏窝两侧呈细长状,窝内空间狭窄。

骨质疏松症治疗药唑来膦酸的合成工艺改进

随着我国人口老龄化问题越来越严重,老年人的骨质疏松症问题也越发突显。唑来膦酸可显著抑制破骨细胞的骨吸收作用,用以治疗骨质疏松症所引起的疼痛,是骨修复治疗的首选药物。在经大量文献调研的基础上,优化筛选了一条稳定性高、操作简单且环境友好的唑来膦酸合成路线。以咪唑和氯乙酸乙酯为起始原料,进行了N-烷基化反应,得到咪唑乙酸乙酯;咪唑乙酸乙酯经水解反应得到咪唑乙酸;咪唑乙酸与三氯氧磷进行磷酸化反应,最终生成产物唑来膦酸,并获得了合成中间体咪唑乙酸及产物唑来膦酸的最佳工艺条件,以固体亚磷酸为溶剂,咪唑乙酸和三氯氧磷的投料量为摩尔比1.0∶2.2,反应温度为75℃。总产率为43.55%,HPLC纯度达到99.97%,符合欧洲药典规定的质量标准。

温度、盐度和pH对鲻幼鱼耗氧率、排氨率以及窒息点的影响

采用封闭流水式实验方法,研究了不同温度（12、16、20、24、28、32℃）、盐度（5、10、15、20、25、30）和pH（7.2、7.7、8.2、8.7、9.2、9.7）对体质量（0.21±0.03）g的鲻（Mugil cephalus）幼鱼耗氧率和排氨率的影响.结果表明,温度（X）对鲻幼鱼耗氧率（Yo）和排氨率（YN）的影响显著,其两两间的相关关系可分别用一元二次方程Yo=-0.0256x2＋0.2191X-0.1054（P＜0.05）和YN=-0.0054X2＋0.044 1X-0.0082（P＜0.01）表示.随着温度的升高,鲻的耗氧率和排氨率呈现相同的变化趋势,均为先升高后降低,在24℃时,耗氧率和排氨率都达到最大值.经单因素方差分析得出盐度对鲻幼鱼耗氧率的影响极显著（P＜0.01）,当盐度在5～30时,随着盐度的升高,耗氧率先下降再升高,然后再下降;排氨率则先升高后降低.经方差检验,盐度对鲻幼鱼排氨率的影响差异极显著,两者之间的相关关系式为YN=-0.0013X2＋0.0027X＋0.047（P＜0.01）.pH对鲻幼鱼耗氧率的影响差异极显著,随着pH的升高,耗氧率呈先升高后下降的趋势,两者之间的关系可用一元二次方程Yo=-0.02583X2＋0.198X＋0.0775（P＜0.01）表示;pH对鲻排氨率的影响差异极显著,两者之间的相关关系式为YN=-0.0032X2＋0.0217X＋0.003（P＜0.01）.温度和pH对鲻幼鱼窒息点的影响极显著（P＜0.0）,盐度对鲻幼鱼窒息点的影响显著（P＜0.05）,但对鲻的窒息时间没有显著影响（P＞0.05）.

红腹锦鸡肾的组织结构及EGFR、TGF-β、AQP-2在肾脏中的表达

为了解红腹锦鸡肾脏的结构特征,观察表皮生长因子受体(EGFR)、转化生长因子-β(TGF-β)、水通道蛋白-2(AQP-2)在肾脏中的表达情况,应用组织学方法及免疫组织化学方法,观察了5只红腹锦鸡肾脏的组织结构,检测了EGFR、TGF-β(TGF-β1,TGF-β2,TGF-β3)、AQP-2在肾中的表达。结果表明:红腹锦鸡肾脏主要由许多肾单位、集合管和少量结缔组织组成。肾单位是肾脏功能结构的基本单位,它由一个肾小体和一个与其连接的上皮性肾小管构成。血管球由一团迂回盘曲的毛细血管丛构成,结构简单;肾小囊足细胞的突起与毛细血管内皮细胞及基膜紧密相贴,三者构成肾小体的滤过屏障;近端小管由单层立方上皮组成,上皮细胞游离面有许多微绒毛,细胞界限不明显,侧面有许多指状突起彼此交错,质膜内褶较少;远端小管上皮细胞基底面有丰富的质膜内褶;集合管上皮细胞有明细胞和暗细胞两种类型;近端小管上皮细胞呈EGFR、TGF-β免疫反应阳性,集合管上皮细胞呈AQP-2免疫反应阳性。EGFR、TGF-β、AQP-2可能发挥着不同的功能,对肾单位的构筑、肾小管和集合管结构的稳定以及肾脏水的平衡等可能有重要的调节作用。

组织工程中细胞与材料的粘附作用

目的探讨组织工程中细胞与材料粘附作用及其影响因素。方法广泛查阅近期有关细胞与材料粘附作用的文献，综述了组织细胞与材料作用方面的研究工作。结果细胞对材料的粘附特性不仅取决于材料本身，包括材料及其表面性质、表面修饰、表面形态、净电荷、孔隙率及降解速率，而且与细胞表面的分子表达及其材料的相互作用有关。结论定量测定细胞与材料的粘附作用并了解其生物物理机制在组织工程学研究中十分重要。

鲤鱼粘液细胞类型的研究

以阿新蓝 过碘酸雪夫氏染色方法 (AB PAS)观察了鲤鱼粘液细胞的形态和类型。根据AB PAS染色结果将鲤鱼粘液细胞分成四型 :Ⅰ型为红色 ,AB阴性 ,PAS阳性 ,含中性粘多糖 ;Ⅱ型为蓝色 ,AB阳性 ,PAS阴性 ,含酸性粘多糖 ;Ⅲ型为紫红色 ,AB与PAS均为阳性 ,同时含有中性粘多糖和酸性粘多糖 ,但以中性粘多糖为主 ;Ⅳ型为蓝紫色 ,AB与PAS均为阳性 ,同时含中性粘多糖和酸性粘多糖 ,但以酸性粘多糖为主。

猪腹膜间皮细胞的分离培养及初步应用

本研究旨在建立猪原代腹膜间皮细胞(peritoneal mesothelial cell, PMC)的分离和体外培养方法,并将其初步应用于猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis,Mhr)体外感染细胞模型。采用0.1%Ⅰ型胶原酶消化猪大网膜组织分离猪PMC细胞,通过形态学、免疫学方法鉴定细胞。使用Mhr感染PMC细胞,观察细胞形态变化,并利用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)法检测细胞活性损伤情况。结果显示,倒置相差显微镜观察显示,分离培养的细胞早期呈拉网状,5~8 d后生长可达融合状态,细胞大小均一,呈多边形铺路石状;间接免疫荧光试验结果显示,细胞波形蛋白、角蛋白-18抗原呈阳性,第Ⅷ因子相关抗原、白细胞CD45抗原呈阴性;扫描电镜下可见细胞表面微绒毛。结果证实分离培养的细胞为猪PMC细胞,纯度达95%以上。Mhr感染后,光镜下可观察到细胞发生明显皱缩,感染组细胞的LDH释放量较对照组细胞显著升高。本研究成功建立了猪原代PMC细胞的分离培养方法,并初步用于Mhr体外感染,为研究Mhr等引起浆膜炎的病原与宿主的互作机制提供了体外细胞模型。

鲔鲂F_1、F_2及其亲本肌间骨的比较分析

为研究新型鲐鲂杂交鱼的肌间骨,采用常规测量和解剖法对鲌鲂F_1(female Culter alburnus Basilewsky×male Megalobrama amblycephala Yih)、鲌鲂F_2(self-crossing of F_1 hybrid offemale C.alburnus×male M.amblycephala)及其母本翘嘴鲌(C.alburnus)、父本团头鲂(M.amblycephala)肌间骨的数目、形态和分布进行统计分析,结果表明,翘嘴鲌肌间骨数目为134—139,平均为136.8根;团头鲂的肌间骨数目为121—129,平均为124.2根;鲌鲂F_1肌间骨数目为129—134,平均为131.6根;鲌鲂F_2肌间骨数目为127—134,平均为130.1根;鲐鲂F_1、F_2与翘嘴鲌、团头鲂之间肌间骨数目差异显著(P<0.05);鲌鲂F_1每一肌节所含肌间骨数目最多,为0.8024;鲌鲂F_2最少,为0.7744;翘嘴鲐和团头鲂介于鲐鲂F_1和F_2之间,分别为0.7953和0.7763。4种鱼均含有"I"形、"卜"形、"Y"形、一端多叉形、两端两分叉形、两端多叉形和树枝形7种类型肌间骨,髓弓小骨比脉弓小骨多且复杂;鱼体左右两侧肌问骨的数目不完全相等,形态也不完全对称,但较为接近,且肌间骨越靠前端,形态越复杂;研究获得的鲌鲂F_1和F_2在肌间骨总数、复杂型肌间骨数目和躯体轴下肌肌间骨数目均较母本有所减少,鲌鲂F_2较F_1还呈下降的趋势,且每一肌节所含肌间骨最少,表现出一种有利于提高食用品质和精深加工的优势。研究结果为鲐鲂属间远缘杂交培育少肌间骨新品种提供了基础资料。

白条草蜥消化道内分泌细胞的免疫组织化学

应用6种胃肠激素抗血清和免疫组织化学ABC法(avidin-biotin complex method),对白条草蜥(Takydromus wolteri)消化道内分泌细胞进行了免疫组织化学定位研究和形态学观察。结果表明,5-羟色胺细胞较其他5种内分泌细胞的分布更为广泛,整个消化道中(即从食管到直肠)均有分布,其分布密度高峰位于幽门。食管、回肠和直肠未检测到生长抑素细胞,生长抑素细胞在幽门部分布密度最高,总体来说生长抑素细胞的分布在胃部较高而在小肠部较低。胃泌素细胞和胰多肽细胞分布在小肠,均在十二指肠分布密度最高。胰高血糖素细胞在胃幽门部分布密度最高,十二指肠、空肠次之,回肠分布密度最低。P-物质细胞仅分布于幽门部。6种内分泌细胞以圆形和锥体形为主,它们广泛分布于消化道黏膜之间、腺泡上皮细胞之间及上皮细胞基部。内分泌细胞的密度分布与其食性、食物组成和生活环境有关,它们的形态与其内、外分泌功能是相适应的。

中华绒螯蟹鳃的组织及超微结构

中华绒螯蟹鳃详细的组织和超微结构研究结果显示 ,每条鳃由一扁平的鳃轴及其向两边发出片状鳃叶组成 ,鳃壁由角质层、上皮细胞和基膜构成 .上皮细胞向角质层伸出指状突起以扩大表面积 .上皮细胞向鳃腔突出延伸形成鳃腔隔 .鳃腔内的膨大细胞实际上是上皮细胞向鳃腔内分裂形成突起 ,然后生长膨大而成 .膨大细胞将鳃腔隔成迂回的通道 。

中国林蛙消化道4种内分泌细胞的免疫组织化学定位

目的:研究中国林蛙(Rana chensinensis)消化道内5-羟色胺(5-HT)、生长抑素(SS)、胃泌素(GAS)和P物质(SP)4种内分泌细胞免疫组织化学的定位。方法:用免疫组织化学ABC法。结果:5-HT细胞在中国林蛙消化道内均有分布,其中以胃贲门部分布密度为最高,胃体次之,空肠为最低;SS细胞从食管到回肠可见其分布,直肠部未见,其中胃体分布密度为最高,回肠部最低;GAS细胞只在十二指肠和空肠两个部位检测到;而SP细胞在整个消化道内未见其分布。结论:中国林蛙消化道这4种内分泌细胞的分布有其自身的特点,不仅与哺乳类和爬行类动物不同,而且在两栖类各品种间也表现出了某种程度的差异性。

哲罗鱼消化系统器官发生发育的组织学观察

采用形态观察与连续组织切片技术，对哲罗鱼（Hucho taimen）胚胎期（水温7～8℃）和胚后期（水温3～14℃）消化系统的发生发育进行观察和研究。结果表明，哲罗鱼受精11d形成原始的消化管。受精18d肝原基出现，U型胃雏型形成。受精30d鱼体破膜，口能自由闭合。破膜8d后，齿形成，肛门与外界相通，消化道初步形成口咽腔、食道、U型胃、肠和肛门。破膜16d，胰及瓣囊出现，仔鱼消化系统初步具备了摄食和消化外源性食物的能力。破膜24d后，鱼体开始上浮，主动摄食，由内源性营养转向混合性营养。破膜30d后，卵黄囊完全被吸收，各消化器官功能和结构逐步发育完善，鱼体由混合性营养进入外源性营养阶段。此后随着鱼体的生长消化器官逐步发育成熟，舌齿和下颌齿分别为双排，胃腺发达，形成网状结构，幽门盲囊较多，肠为直行，肝和胰为相互分开的独立器官。

南方鲇两种生长激素受体的结构分析及其组织分布和激素调节

采用生物信息学方法,从东方(Fugurubripes)基因组中分离出两种不同基因编码的GHR1(fGHR1)和GHR2(fGHR2)。随后设计引物,采用RT-PCR和SmartTMRace相结合的方法从南方鲇(Silurusmeridionalis)肝脏中克隆出两种不同基因编码的生长激素受体,即GHR1(scGHR1)和GHR2(scGHR2)cD-NA,其全长分别为1985bp(编码602个氨基酸)和2300bp(编码553个氨基酸)。这两种受体都含有生长激素受体典型的标志性基序FGDFS,以及细胞内属于细胞因子受体家族共有的Box1和Box2序列框。同时两者又存在差异,表现在胞外半胱氨酸残基和胞内酪氨酸残基数目的不同。采用半定量RT-PCR方法研究了scGHR1和scGHR2在南方鲇各组织中表达量的差异,结果表明:scGHR1和scGHR2有广泛的组织分布,在肝脏中两者的表达量最高。用17β-雌二醇(E2)、17α-甲基睾酮(MT)和可的松(cortisol)对南方鲇进行药物处理,结果表明E2能够下调肝脏scGHR1和scGHR2mRNA水平,而MT上调scGHR1和scGHR2mRNA水平。同时,经cortisol处理后scGHR1mRNA表达水平上升,而scGHR2mRNA表达水平不变。

仿刺参体腔细胞和血细胞类型及体腔细胞数量研究

本文应用光镜、电镜技术研究了仿刺参(Apostichopus japonicus)体腔细胞和血窦中血细胞的形态、结构、周年体腔细胞总数及主要类型的细胞数量。研究结果表明,仿刺参体腔细胞和血细胞形态结构相同,作者将体腔细胞分为淋巴样细胞、球形细胞、变形细胞、透明细胞、纺锤细胞和结晶细胞,其中球形细胞又分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型。血窦中血细胞除未见结晶细胞外,其余与体腔细胞相同。体腔细胞和血细胞均以淋巴样细胞、变形细胞、球形细胞为主,透明细胞、纺锤细胞次之,结晶细胞数量最少。从形态和结构分析,作者认为仿刺参体腔细胞和血细胞来源可能相同。周年平均的体腔细胞总数为(3.85±0.21)×106个/mL,淋巴样细胞为(1.58±0.11)×106个/mL,占细胞总数的(41±1.47)%;球形细胞为(1.16±0.13)×106个/mL,占细胞总数的(30±0.89)%;变形细胞为(0.99±0.07)×106个/mL,占总细胞数的(25±0.98)%,三种主要类型细胞占细胞总数的(96±1.53)%。

大鼠海马神经元neurobasal无血清的原代培养方法

目的：建立纯度和活力较高的无血清原代培养海马神经元的方法。方法：新生SD大鼠海马，用neurobasal培养基培养，免疫荧光鉴定神经元纯度，MTT法检测其活力。结果：神经元接种12～24h后贴壁，并长出细小突起，3d具有典型神经元形态特征，4d突起形成稀疏的神经纤维网络，8d后神经元5～10个聚集成团，突起密集，生长稳定，12d后出现细胞碎片。Tubulin荧光染色显示清晰的神经元，突起绵长且相互交织，占细胞总数的66．7％；GFAP荧光染色的细胞数量少，突起短粗，占33．7％。培养1～5d MTT代谢率逐渐上升，6～11d处于平台期，11d后下降。结论：neurobasal无血清培养获得的神经元纯度大于60％，6～11d的细胞适于细胞学实验。

金雕肺的组织结构及KGF、c-Fos和Bax的表达

为了解金雕(Aguila chrysaetos)肺的组织结构特征,观察角质细胞生长因子(KGF)、c-Fos蛋白和Bax蛋白在肺中的表达情况,应用生物显微技术和免疫组织化学方法观察了金雕肺的组织结构,检测KGF、c-Fos和Bax蛋白在肺中的表达。结果表明,金雕的肺由各级支气管及其周围的呼吸毛细管组成,肺房呈辐射状开口于三级支气管周围,呼吸毛细管相互吻合成网状,周围有丰富的毛细血管网。KGF、c-Fos和Bax在三级支气管、肺房和呼吸毛细管的上皮细胞中呈免疫反应阳性,三者的表达强度有差异。KGF、c-Fos和Bax可能发挥不同的功能,它们的协同表达可能调控鸟肺细胞的生长、发育及成熟。

野生与池塘、工厂化养殖牙鲆肌肉理化品质及质构特性比较研究

实验以牙鲆为研究对象,测定野生与池塘、工厂化养殖牙鲆肌肉的持水性、胶原蛋白含量、肌纤维直径和质构特性,以了解3种生长方式下牙鲆肌肉理化品质及质构特性的差异。结果表明:(1)3种生长方式牙鲆有眼侧及无眼侧肌肉的滴水损失均呈野生组>池塘组>工厂化组(P<0.01);工厂化组失水率显著小于野生组及池塘组(P<0.01),而野生组与池塘组无显著差异(P>0.05)。(2)3种生长方式牙鲆有眼侧及无眼侧肌肉胶原蛋白含量和纤维直径差异均不显著(P>0.05)。(3)通过主成分分析,发现黏附性和胶黏性是反映牙鲆肌肉质构特性的主要因素。工厂化养殖牙鲆肌肉具有较好的持水能力,池塘养殖牙鲆肌肉的理化品质和质构特性与野生牙鲆相近。野生牙鲆并没有在理化特性上表现出明显优势。

鲻脾脏和头肾的形态学与组织学研究

通过光镜技术对野生鲻(Mugil cephalus)的脾脏和头肾进行研究发现:脾脏外有薄层结缔组织纤维被膜覆盖,被膜向内延伸将脾脏分成不规则小叶,无明显小梁,含大量淋巴细胞、血细胞、粒细胞,黑色素巨噬细胞中心较多,脾脏中可见较多并行排列的动脉、静脉和神经束,有椭圆体;头肾与肾脏分离,分左右2叶。头肾为网状淋巴样组织,外被膜极薄,无明显的小梁,无肾单位,分为红血细胞聚集区和白细胞聚集区,有黑色素巨噬细胞中心,相对于脾脏,头肾中的动脉和静脉的数量较少。研究结果表明:头肾和脾脏组织是鲻的重要造血器官和免疫器官。

小熊猫耳部成纤维细胞的培养和冷冻保存

小熊猫(Ailurus fulgens)是生活在陆地上的活化石,在类熊类哺乳动物的进化史中具有关键的作用,但近年来数量急剧下降,因此小熊猫的品种保护逐渐受到人们的重视。细胞的培养和冷冻保存已经成为种质资源保护的重要方法。本试验采取小熊猫的耳部组织,用组织培养法对小熊猫组织进行原代、继代培养并成功进行了冷冻和解冻处理,建立了耳部成纤维细胞系。并对培养的细胞进行了形态学观察,该细胞系的建立填补了小熊猫体细胞培养的空白,使得小熊猫种质资源在细胞水平上得到了保存。

红腹锦鸡肺的组织结构与微血管构筑

为了了解红腹锦鸡（Chroysolophus pictus）肺的微细结构和微血管构筑特征，为呼吸生物学研究提供形态学依据，用组织学方法和微血管铸型技术在光镜和扫描电镜下观察研究了红腹锦鸡肺的组织结构与微血管构筑情况。结果表明，红腹锦鸡肺主要由各级支气管构成，从三级支气管上呈辅射状分出许多呼吸毛细管（微气管），并相互吻合成网状，呼吸毛细管外面包围有丰富的毛细血管；红腹锦鸡肺毛细血管垂直围绕在各微气管外，并相互吻合成密集的立体微血管网；毛细血管管径4．5～7．0μm，微气管直径11～50μm。并对肺微血管构筑情况与呼吸效率的关系作了探讨。